Strategies  for  cloning  How  to  find  the  clone  for  a  specific  gene?  

Terms:  •  Direct  selec:on  •  Different  types  of  DNA  library  •  Iden:fica:on  from  gene  library  •  Iden:fica:on  of  a  clone  

Selec:on  problem!!  

Sid  127  

Different  strategies  for  selec:on  

Sid  128  

Direct  selec:on  

Sid  129  

Direct  selec:on  for  TrpA  gene  

Sid  130  

Gene  library  in  a  cosmid  

Sid  132  

Expression  of    genes  

Sid  132  

Sid  134  

Nucleic  acid  hybridiza:on  

Sid  135  

Sid  135  

32P-­‐dATP  

Sid  136  

Labelling  different  techniques  

Sid  136  

Sid  138  

Iden:fica:on  of  high  abundance  clones  

Sid  139  

Sid  139  

Sid  140  

Sid  141  

Heterologous  probing  

Sid  142  

Sid  143  

Southern  hybridiza:on  

Sid  143  

Sid  144  

Immuno  screening  

Sid  145