8/16/2019 Determinacion de Surfamerazina de Plata Por Hplc

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VALIDACIÓN DE UNA METODOLOGÍA ANALÍTICA PORVALIDACIÓN DE UNA METODOLOGÍA ANALÍTICA POR

HPLC PARA LA CUANTIFICACIÓN DE SULFADIAZINA DEHPLC PARA LA CUANTIFICACIÓN DE SULFADIAZINA DEPLATA EN CREMAPLATA EN CREMA

Realizado por: Jeinny Ortega

Camila Vasquez

Janeth Galeano

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INTRODUCCION• La sulfadiazina de plata (SDP) pertenece al

grupo de las sulfas y se usa terapéuticamenteen humanos mediante administración por víatópica.

• destruye a la acteria por interferencia con lapared celular.

• Se formula principalmente como crema

hidrosolule lanca para ser usada comoantiséptico en el tratamiento inmediato deemergencia en !uemaduras térmicas y!uímicas" y en el desridamiento de!uemaduras.

• #l presente traa$o consiste en laestandarización y validación de una

metodología %PL& con ase en el método de la'SP (*) para la cuanti+cación de lasulfadiazina de plata en una formulación encrema al ,-" !ue emplea como estndarinterno la sulfamerazina (S/0). La intención deltraa$o es emplear este método para evaluar elcontenido de principio activo en la prcticaregular del control de calidad del producto.

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PARTE EXPERIMENTALPARTE EXPERIMENTAL

Equipos

• &romatógrafo %itachi /erc1"#lite La &hrom" e!uipado conoma L2*,"automuestreador L2**"horno para columna l2* ydetector de arreglo de diodosL2*34. &olumna para %PL&0P2,5. *4 6 3. mm 4 7m"precolumna 0P2,5 (4 7m).

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PARTE EXPERIMENTALPARTE EXPERIMENTAL

Reactivos

• Sulfadiazina de plata (estndar primario 'SP)"

• sulfamerazina (0.8. Sigma" estndar primario 'SP)

• acetonitrilo (grado %PL&" 9.:. ;a1er)

• cido fosfórico al 54- (calidad 0.8. /

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RESULTADOS Y DISCUSIONRESULTADOS Y DISCUSIONCOMATOGRAFIA

8l realizar el anlisiscromatogr+co a la mezcla desulfadiazina de plata ysulfamerazina" seg=n lascondiciones estalecidas" se

oserva•la resolución entre picos es 4"*,

•la asimetría para el pico de SDPes ,",> y para S/0 ,"*,

•el factor de capacidad para SDPes *"> y para S/0 "*3

•el n=mero de platos teóricos es?5, para SDP y @4 para S/0

'SP

• La repetiilidad son 5.* scon SA .,*, y ,.,3 s con SA. para la SDP y S/0"respectivamente.

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RESULTADOS Y DISCUSIONRESULTADOS Y DISCUSION

ESTANDARIZACIÓN DEL MÉTODO PARA LA EXTRACCIÓN DE LA MUESTRAQUE SE VA A ANALIZAR

• :ransferir ," g de placeo enri!uecido de sulfadiazina de plata al ,- (e!uivalente a , mg de sulfadiazina de plata) a un tuode centrífuga.

•8gregar apro6imadamente ,* mL de metanol

•Sellar el tuo herméticamente y mezclar con un mezclador de vórtice durante ,4 segundos.

•&entrifugar durante ,4 minutos y desechar el metanol

•8gregar , mL de etanol" sellar el tuo y mezclar.

•&alentar en aBo de agua a >C&" mezclando periódicamente durante ,4 minutos para fundir y dispersar la crema.

•&uando la mezcla esté a=n caliente" transferir el contenido a un alón aforado de 4 mL !ue contiene , mL de hidró6ido deamonio al ,- y 4 mL de solución de estndar interno de * mgmL.

•/ezclar" lavar varias veces el tuo con etanol. &uando la solución esté a temperatura amiente" completar a volumen.

• :ransferir *" mL de esta solución" medidos con pipeta aforada" a un alón aforado de *4 mLE llevar a volumen con fase móvil"mezclar y filtrar" para una concentración final de ,> FgmL de sulfadiazina de plata y de estndar interno

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RESULTADOS Y DISCUSIONRESULTADOS Y DISCUSION

SELECTIVIDAD

Se determinó por medio de la comparación de muestras !ue contenían

está!a" !e su#$a!ia%ia !e p#ata !e &''( )&* +,-.L/0 p#ace1o so#o 2p#ace1o ca",a!o a# &''( co está!a" !e su#$a!ia%ia !e p#ata3 :amién se sometieron las muestras de sulfadiazina de plata y placeoenri!uecido a condiciones e6tremas de degradación" como hidrólisis cida"sica" o6idación con peró6ido de hidrógeno y e6posición a la luz 'G" con el +nde estalecer si se presentaan interferencias provocadas por productos dedegradación !ue se podrían presentar por manipulación de la muestra durante

la determinación del analito.

Los componentes de la matriz ni los suproductos de degradación causaninterferencia en la determinación del analito

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RESULTADOS Y DISCUSIONRESULTADOS Y DISCUSION

LINEALIDAD DEL M4TODO

#n esta curva de caliración sepresentaron dos puntos conresiduales ms grandes !ue lospermitidos para unaproailidad de error del 4-. Lomismo se oservó aldeterminar el valor de lapendiente para cada punto y alde+nir límites de con+anza.#stos criterios se tuvieron en

cuenta para considerar estosdatos como anómalos.

 

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RESULTADOS Y DISCUSIONRESULTADOS Y DISCUSION

EXACTITUD DE LA METODOLOGIA

La evaluación de este parmetro se llevó a cao mediante la determinacióndel porcenta$e de recuperación del principio activo. Se estudiaron tres nivelesde concentración correspondientes al ?4-" ,- y ,*4-" cada uno de elloscon tres réplicas.

Los valores encontrados para la sulfadiazina de plata indican !ue larecuperación promedio es del 5?"3-" lo cual es ocasionado principalmente porel hecho de tener !ue realizar pasos sucesivos en la e6tracción de lasulfadiazina de la muestra.

#l coe+ciente de variación medio en los tres niveles de concentraciónestudiados fue de ,.?@4 y la pruea de &ochran indica !ue el nivel deconcentración no afecta los resultados.

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RESULTADOS Y DISCUSIONRESULTADOS Y DISCUSION

RO5USTE6#l método no se afecta por los camios realizados" ya !ue en todos los casosel valor otenido al calcular el efecto es menor a la e6presión sH*" donde s esla desviación estndar otenida del ensayo de repetiilidad del método.

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CONCLUSIONESCONCLUSIONES

• ;a$o las condiciones de validación" el sistema cromatogr+co cumple con losparmetros de idoneidad

• &on esta validación se determinó !ue el método propuesto es selectivo frenteposiles interferencias !ue puedan estar presentes en la muestra de anlisis"incluidos productos de degradación por hidrólisis cida" sica" o6idación con

peró6ido de hidrógeno y fotólisis.

• #l método presenta repetiilidad y precisión intermedia con coe+cientes devariación menores !ue ,.,-.

• #l promedio del porcenta$e de recuperación del analito es del 5?"5- y deido a

la alta precisión de la metodología

• La metodología analítica es rousta al soportar ciertos camios" tanto en lametodología de preparación de las muestras" como en el sistema cromatogr+co

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5I5LIOGRAFIA5I5LIOGRAFIA

• ,. #. Senz28nduaga" L. Snchez2SaldaBa.  Antibióticos tópicos. #ducaciónmédica contin=a. Dermatología Peruana" *4E Gol. ,4A Io ,. pp.,*2,.

• *. 'SP IJ *4. Jarmacopea de los #stados 'nidos de 8mérica. Golumen" *?.

• . %. Kun1ely" Gogler 8. Photoproperties of silver sulfadiazine. norganic&hemistry &ommunications ," *?" pp. **>2**5.

• 3. Galidación de /étodos 8nalíticos. 8sociación #spaBola de Jarmacéuticosde la ndustria" 8#J" *,.

• 4. &. /. 0iley y :. M. 0osans1e Development and validation of analyticalmethods. 0iley and Jell #ditors. #lsevier Science Ltd." IeN Oor1" ,@@>.

• >. .