MÉTODOS PARA LA

DETERMINACIÓN DEL

EXTRACTO ETÉREO

WILLIAM OVIEDO

ARGUMEDO

ANÁLISIS DE ALIMENTOS

UNIVERSIDAD DE

CÓRDOBA

PROGRAMA DE

INGENIERÍA DE

ALIMENTOS

2011

INTRODUCCION.

El estudio de la composición bromatológica de un alimento es muy importante

como forma de determinar de forma específica, pero a la vez de forma general los

componentes principales de una muestra de alimentos (humedad, cenizas,

extracto etéreo, proteínas).

Se considera grasa al extracto etéreo que se obtiene cuando la muestra es

sometida a extracción con éter etílico. El término extracto etéreo se refiere al

conjunto de las sustancias extraídas que incluyen, además de los ésteres de los

ácidos grasos con el glicerol, a los fosfolípidos, las lecitinas, los esteroles, las

ceras, los ácidos grasos libres, los carotenos, las clorofilas y otros pigmentos.

En el presente documento se pretenderá abarcar de manera resumida los

diferentes tipos de métodos que existen para la determinación de extracto etéreo

así como un enfoque directo al método de extracción con soxhlet en diferentes

tipos de alimentos.

DETERMINACIÓN DEL EXTRACTO ETÉREO.

El extracto etéreo o grasa bruta como también se le conoce como el contenido de

grasa total presente en una muestra de alimento que puede ser extraída por medio

de adición o sin adición de solventes. Los métodos más empleados son los que

hacen uso de solventes, el más común es el método de soxhlet, pero también

existen otros no tan conocidos como extracción por Lotes, continua, ASE

(Accelerated Solvent Extraction), SFE (Supercritical Fluid Extraction).

En cuanto a la preparación de la muestra para este tipo de extracción se debe

tener en cuenta las siguientes recomendaciones:

La muestra debe estar seca, es decir la muestra debe estar libre de

humedad.

Se puede someter a la muestra a un liofilizado para eliminar la humedad y

para aumentar la superficie de la muestra.

La muestra debe estar reducida.

Como este tipo de extracción depende netamente del solvente a utilizar es muy

importante que el solvente cumpla las siguientes especificaciones:

Que sea capaz de romper los enlaces de los compuestos lipidicos, además

de liberar estos y solubilizarlos.

Debe tener una polaridad similar a la del analito.

En cuanto a la extracción del extracto etéreo sin el empleo de solventes, se basan

en el empleo de reactivos para separar los lípidos del resto de constituyentes del

alimento. Generalmente este tito de métodos se emplea para el análisis de

productos lácteos. En esta clasificación encontramos el método de BABCOCK y el

método de GERBER, cuya característica es el empleo de acido sulfúrico en el

método de BABCOCK y una mescla de acido sulfúrico/alcohol en el método de

GERBER, para liberar la grasa de la capa proteica que le rodea. Se mide

directamente la grasa después de centrifugar. También existe en esta categoría el

método del detergente donde se emplea un reactivo que es una mezcla de

tensioactivos, surfactantes o detergentes capaz de romper la capa de globulos de

las grasas.

MÉTODOS PARA LA DETERMINACIÓN DE EXTRACTO ETÉREO.

MÉTODO DE SOXHLET

Es una extracción semicontinua con un disolvente orgánico. En este método el

disolvente se calienta, se volatiliza y condensa goteando sobre la muestra la cual

queda sumergida en el disolvente. Posteriormente éste es sifoneado al matraz de

calentamiento para empezar de nuevo el proceso. El contenido de grasa se

cuantifica por diferencia de peso (Nielsen, 2003).

MÉTODO DE GOLDFISH

Es una extracción continua con un disolvente orgánico. Éste se calienta, volatiliza

para posteriormente condensarse sobre la muestra. El disolvente gotea

continuamente a través de la muestra para extraer la grasa. El contenido de grasa

se cuantifica por diferencia de peso entre la muestra o la grasa removida (Nielsen,

2003)

MÉTODO POR LOTES

Este método hace uso de la solubilidad intrínseca de la sustancia a separar; es

claro que un compuesto no polar es soluble en un disolvente no polar (Hoffman,

1989). La extracción se realiza en frío para evitar el daño del material lipídico y por

lotes para incrementar la eficiencia.

MÉTODO DE BLIGH-DYER

El método de Bligh-Dyer así como su modificación por Hanson y Olley proporciona

un método rápido para la extracción de lípidos de tejidos y productos alimenticios

que contienen una cantidad significativa de agua. El método se basa en la

homogenización de la muestra con cloroformo, metanol y agua en proporciones

tales que se forme una sola fase miscible con el agua de la muestra. Al añadir

alícuotas de cloroformo y agua se logra la separación de fases. El material lipídico

se encuentra en la fase no acuosa, mientras que el material no lipídico se

encuentra en la fase acuosa. Los lípidos se pueden extraer de dos gramos de

muestra seca hasta veinte gramos de muestra húmeda.

El contenido de agua de la muestra se ajusta a dieciséis mililitros para conservar

la proporción de cloroformo, metanol y agua la cual es esencial si se pretende una

separación de fases y una extracción cuantitativa de lípidos. La ventaja de este

procedimiento es que las etapas de filtrado y lavado son eliminadas. Sin embargo

no es un método muy cuantitativo y tiene un elevado margen de error para

muestras secas de cereales (Rossell y Pritchard, 1991)

MÉTODO DE RÖSE-GOTTLIEB.

De acuerdo a este método, la separación de la grasa es lograda por amoniaco y

etanol con un posterior efecto de deshidratación sobre los fosfolípidos. La grasa es

disuelta en éter recién destilado y se añade algo de petróleo de tal suerte que se

separen algunos compuestos no lipídicos que se puedan encontrar en la fase

etérea. Esta mezcla es completamente inmiscible en agua de manera que

mediante una extracción adecuada es simple dejar la grasa en la fase etérea y el

residuo graso es pesado.

Este método es particular para leche fresca que no contiene ácidos grasos libres,

los cuales en disolución alcalina forman sales de amonio y esto es insoluble en

éter. Esta es la razón por la cual esto no se aplica a quesos, los cuales si tienen

ácidos grasos libres.

(Boekenoogen, 1964)

MÉTODO DE GERBER.

Éste, así como los demás métodos volumétricos presentan un carácter un tanto

cuanto empírico ya que varios factores afectan la gravedad específica de la grasa

separada, variaciones propias de la grasa, ácidos grasos presentes, solubilidad de

la grasa en los disolventes, etc. Con estos métodos volumétricos la muestra se

sitúa en un butirómetro y se descompone utilizando ácidos o álcalis de manera

que la grasa es liberada, esta se separa por métodos mecánicos (centrifuga) y se

colecta en el cuello calibrado. (Boekenoogen, 1964)

MÉTODO DE MOJONNIER

La grasa es extraída con una mezcla de éter etílico y éter de petróleo en un

matraz de Mojonnier, la grasa extraída se pone a peso constante y es expresada

en porcentaje de grasa por peso. La prueba de Mojonnier es un ejemplo de

extracción discontinua con disolvente. Esta extracción no requiere remover

previamente la humedad de la muestra.

(Nielsen, 1998)

DETERMINACIÓN DE EXTRACTO ETÉREO PARA ALIMENTOS CÁRNICOS

POR MÉTODO DE SOXHLET.

FUNDAMENTO:

Extracción de la grasa de la muestra previamente hidrolizada y desecada por

medio de hexano o éter de petróleo. Eliminación del disolvente por evaporación,

desecación del residuo y posterior pesada después de enfriar.

MATERIALES Y REACTIVOS:

Erlermeyer de 500 ml

Vidrio de reloj

Plancha

Papel filtro

Embudos

Extractor soxhlet

Estufa eléctrica

Balanza analítica

Horno desecador

Hexano o éter de petróleo

Acido clorhídrico 3 N

PREPARACIÓN DE LA MUESTRA:

Quitar las diferentes capaz del producto, si las tuviera, luego tomar una muestra

representativa de 200 g, trocear esta en rodajas de 1cm o en pequeños cubos,

pasar varias veces por una trituradora hasta conseguir una mezcla bien

homogenizada y luego almacenar en frascos limpios y secos, de forma que

queden llenos, para prevenir la perdida por humedad. Guardar las muestras en

refrigeración de tal forma que sufra algún deterioro o cambios en su estructura

química. Las muestras deben durar en almacenamiento un tiempo no mayor a 24

horas.

PROCEDIMIENTO:

Tomar 2.5 gramos de muestras previamente acondicionada e introducirla en un

erlermeyer de 500 ml. Añadir 100ml de acido clorhídrico 3 N. cubrir la boca del

erlermeyer con un vidrio de reloj y someter la muestra a ebullición suave en la

estufa calefactora durante una hora. Enfriar y filtrar sobre doble papel filtro

evitando cualquier paso de materia grasa al filtrado. Lavar el residuo con agua fría

para eliminar el exceso de acido en la muestra. Colocar los papeles filtros donde

están contenidos los residuos sobre un vidrio de reloj y desecar en horno a 98°C

durante hora y media. Una vez eliminada la muestra colocar sobre el cartucho de

extracción, extrayendo con eter de petróleo etílico o hexano durante 6 horas

regulando la temperatura. Eliminar el disolvente en el rotavapor y eliminar el resto

de disolvente en la estufa durante hora y media a 75 °C. Enfriar el matraz con la

grasa en desecador, y pesar cuando alcance la temperatura ambiente.

CÁLCULOS:

Expresar el resultado en porcentaje de peso:

% de grasa= ((p’-p)/ p’’)*100

P: peso en gramo del matraz

P’: peso en gramo del matraz con la grasa

P’’: peso en gramo de la muestra

PARÁMETROS OPERACIONALES:

La temperatura del disolvente a utilizar debe ser menor a 40-60°C para una

fácil destilación y separación del solvente de la muestra o la grasa.

Es importante el procedimiento preliminar con acido ya que ayuda a

eliminar interferencias como proteínas y carbohidratos presentes en la

muestra.

REFERENCIA DEL MÉTODO:

Norma ISO 1443.

DETERMINACIÓN DE EXTRACTO ETÉREO PARA CEREALES Y SUS

DERIVADOS POR MÉTODO DE SOXHLET.

Fundamento:

El contenido en grasa bruta de un producto se define convencionalmente como la

parte del mismo extraíble por éter etílico en condiciones determinadas. Incluye

además de la grasa, otras muchas sustancias solubles en éter etílico, como son

ceras, pigmentos, vitaminas, etc.

Este método es aplicable a granos, harinas y cualquier derivado de los cereales.

MATERIALES Y REACTIVOS:

Extractor tipo soxhlet

Balanza analítica

Estufa de desecación

Desecador de silicagel

Matraces de 100 a 150 ml

Éter etílico

Éter etílico, de petróleo, hexano

PROCEDIMIENTO:

Pesar de 5 a 10 gramos de muestra, molida, de tal forma que pase por un tamiz

de 500 y previamente desecada a 100 °C, e introducirlo en un cartucho de

extracción. Tarar el matraz, desecado en la estufa y enfriado en el desecador.

Introducir el cartucho en el extractor, añadir alguno de los solventes ya

mencionados y proceder con la extracción, de forma continua hasta que el

solvente sea incoloro (aproximadamente 4 horas) a una velocidad de destilación

de 4 a 5 gotas/s.

Sacar el cartucho del extractor y recuperar el solvente. Llevar el matraz con el

extracto y el resto del disolvente a la estufa de desecación a 100°C y tenerlo

media hora. Dejar el matraz en el desecador, y en cuanto alcance la temperatura

ambiente (aproximadamente unos 20 minutos) pesarlo.

CÁLCULOS:

Expresar el resultado en porcentaje de peso:

% de grasa= ((p’-p)/ p’’)*100

P: peso en gramo del matraz

P’: peso en gramo del matraz con la grasa

P’’: peso en gramo de la muestra

PARÁMETROS OPERACIONALES:

La temperatura del disolvente a utilizar debe ser menor a 40-60°C para una

fácil destilación y separación del solvente de la muestra o la grasa.

REFERENCIA DEL MÉTODO:

American association of cereal chemist. Cereal laboratory methods 1967.

DETERMINACIÓN DE EXTRACTO ETÉREO PARA PASTAS ALIMENTICIAS

POR MÉTODO DE SOXHLET.

Fundamento:

El producto es hidrolizado con acido clorhídrico diluido, de la masa seca resultante

las materias grasas son extraídas con solventes ya sea éter de petróleo o éter

etílico, el solvente es evaporado y el residuo pesado.

MATERIALES Y REACTIVOS:

Extractor tipo soxhlet

Estufa de desecación

Balanza analítica

Desecador silicagel

Matraz 250-300 ml

Acido clorhídrico 3N

Éter etílico, de petróleo o hexano

Solución de nitrato de plata

Procedimiento:

Tomar aproximadamente 10 gramos de muestra previamente triturada en un

matraz de 250 a 300ml.

Agitando continuamente adicionar 100 ml de acido clorhídrico y cerrar el matraz

con un vidrio de reloj. Hervir unos 60 minutos, agitando de manera descontinúa,

luego dejar enfriar y filtrar. Lavar el precipitado con agua destilada hasta que el

filtrado no de precipitado con nitrato de plata o no de la reacción acida con papel

tornasol.

Poner el filtro en un horno de secado a100 °C por una hora.

El extracto ya seco se coloca en un cartucho para extracción de tipo soxhlet. Se

añade el solvente al montaje y se procede con la extracción durante 8 horas.

El matraz receptor debe estar secado y tarado.

Evaporar el solvente, secar en estufa y pesar.

CÁLCULOS:

Expresar el resultado en porcentaje de peso:

% de grasa= ((p’-p)/ p’’)*100

P: peso en gramo del matraz

P’: peso en gramo del matraz con la grasa

P’’: peso en gramo de la muestra

Para una muestra previamente seca el contenido de grasa viene dada por:

%grasa= (G*100)/100-H

Donde:

G: porcentaje de grasa anterior

H: humedad

PARÁMETROS OPERACIONALES:

La temperatura del disolvente a utilizar debe ser menor a 40-60°C para una

fácil destilación y separación del solvente de la muestra o la grasa.

Es importante el procedimiento preliminar con acido ya que ayuda a

eliminar interferencias como los carbohidratos presentes en la muestra.

REFERENCIA DEL MÉTODO:

ADAC, edición 1980, 14.059.

DETERMINACIÓN DE EXTRACTO ETÉREO PARA ESPECIAS ALIMENTICIAS

POR MÉTODO DE SOXHLET.

FUNDAMENTO:

El contenido en grasa bruta de un producto se define convencionalmente como la

parte del mismo extraíble por éter etílico en condiciones determinadas. Incluye

además de la grasa, otras muchas sustancias solubles en éter etílico, como son

ceras, pigmentos, vitaminas, etc.

MATERIALES Y REACTIVOS:

Extractor tipo soxhlet

Balanza analítica

Estufa de desecación

Desecador de silicagel

Matraces de 100 a 150 ml

Éter etílico

Éter etílico, de petróleo, hexano

sulfato sódico anhídrido

PROCEDIMIENTO:

Pesar aproximadamente 5 gramos de muestra previamente triturada y

homogenizada en un cartucho de extracción. Añadir 1 gramo de sulfato sodico

anhídrido que actúa como desecante y taponar el catucho con algodón

desengrasado. Poner el cartucho en el extractor y dejar extyraer por un minimo de

8 horas con alguno de los solventes ya mencionados. El matraz receptor debe

estar previamente secado y tarado. Recoger todo el extacto graso en el matraz y

evaporar el solvente por destilación. Terminar de evaporar en la estufa con

aireación a 100 °C y pasar a un desecador hasta que se enfrie a temperatura

ambiente. Luego se procede a pesar.

CÁLCULOS:

Expresar el resultado en porcentaje de peso:

% de grasa= ((p’-p)/ p’’)*100

P: peso en gramo del matraz

P’: peso en gramo del matraz con la grasa

P’’: peso en gramo de la muestra

PARÁMETROS OPERACIONALES:

La temperatura del disolvente a utilizar debe ser menor a 40-60°C para una

fácil destilación y separación del solvente de la muestra o la grasa.

A la muestra no se le realiza un secado previo debido a aquí las especias

contienen un contenido bajo de humedad.

Es fundamental la adición del sulfato sódico anhídrido a la muestra antes de

la extracción ya que al actuar como desecante ayuda a eliminar el bajo

contenido de humedad en la muestra.

BIBLIOGRAFÍA.

Métodos oficiales de análisis de los alimentos. 1994 madrid Vicente

ediciones.

http://books.google.com/books?id=8VpJ8foyDiIC&pg=PA131&dq=extracto+

etereo&hl=es&ei=7_P3Tblcg7m2B6uSwOEK&sa=X&oi=book_result&ct=res

ult&resnum=6&ved=0CEAQ6AEwBQ#v=onepage&q&f=false.

Análisis de los alimentos. Reinhard matissek, gabriel steiner. Acribia s.a.

Zaragoza españa.

http://www.utp.edu.co/php/revistas/ScientiaEtTechnica/docsFTP/10193123-

26.pdf.

Manual y técnicas de análisis de alimentos. Pdf.