Universidad El Bosque.Biología del Movimiento Oral.
Dra. María Clara Rangel.Dr. Juan Carlos Munévar.
Dra. Patricia González.Dra. María Gabriela Vielma.R1 Postgrado Ortodoncia.
Bogotá, octubre de 2010.
Osteoprotegerin and Osteoclast
Differentiation Factor in Tooth
Eruption.
G.E Wise, S.J Lumpkin, H. Huang y Q. Zhang.
Journal Dental Research 79 (12): 1937-1942,
2000.
Objetivo.
Analizar la regulación molecular de la formación y Analizar la regulación molecular de la formación y activación de osteoclastos mediante la expresión activación de osteoclastos mediante la expresión de la OPG y ODF durante la formación de a vía de de la OPG y ODF durante la formación de a vía de
la erupción dental.la erupción dental.
Materiales y Métodos.
Cultivo de células y modelos animales.• El protocolo para uso de animales fue establecido por el ComitEl protocolo para uso de animales fue establecido por el Comité del é del
Instituto de Cuidado y Uso Animal de la Universidad de Louisiana.Instituto de Cuidado y Uso Animal de la Universidad de Louisiana.
• Primer y segundo molar mandibular fueron extraídos quirúrgicamente en Primer y segundo molar mandibular fueron extraídos quirúrgicamente en las ratas entre los 6 y 7 días de nacidas, y en los ratones entre los 3 y 4 las ratas entre los 6 y 7 días de nacidas, y en los ratones entre los 3 y 4 días de nacidos.días de nacidos.
• El folículo dental y el órgano del esmalte fueron microdisecados segudios El folículo dental y el órgano del esmalte fueron microdisecados segudios de un proceso de tripsinización.de un proceso de tripsinización.
• LLas células del folículo dental fueron cultivadas y se usaron las del quinto as células del folículo dental fueron cultivadas y se usaron las del quinto pasaje, y fueron tratadas con MEM (Minimun Essential Medium).pasaje, y fueron tratadas con MEM (Minimun Essential Medium).
Experimentos In vitro y In vivo.
Las células del quinto pasaje de ratas o Las células del quinto pasaje de ratas o ratones fueron tratadas con PTHrP ratones fueron tratadas con PTHrP
(péptido relacionado con el gen de la (péptido relacionado con el gen de la paratohormanona) humano o paratohormanona) humano o
CSF-1(factor estimulante de colonias CSF-1(factor estimulante de colonias 1) humano.1) humano.
Experimentos In Vitro.
Experimentos depedientes del tiempo PTHrP
La células fueron encubadas con 10 ng/mL de PTHrP por 5 minutos, 30 minutos , 1 hora y
3 horas.
Experimentos dependientes del tiempo de CSF-1
Las células fueron encubadas con 10 ng/mL CSF-1 por 5 minutos, 15
minutos, 30 minutos, 1 hora, 3 horas, 12 horas, 24 horas y 48
horas.
Experimentos In vitro y In vivo.
Para evaluar los efectos dosis dependientes las células se colocaron en:• 1 ng/mL.• 10 ng/mL.• 25 ng/mL.• 50 ng/mL.• 100 ng/mL.
Por 30 o 24 horas.
Los controles experimentales fueron encubados en un MEM
libre de suero.PTHrP
Experimentos In vitro y In vivo.
EEl folículo dental fue removido en las l folículo dental fue removido en las ratas y ratones recién nacidas, y ratas y ratones recién nacidas, y
estas fueron sacrificados los días estas fueron sacrificados los días 1, 3,5,7 y 10 1, 3,5,7 y 10
Experimentos In Vivo.
Estos experimentos In Vivo se realizaron tres veces para cada
una de las ratas y ratones.Seis folículos de cada edad se
usaron para poder obtener suficiente ARN para el análisis de la
expresión de OPG.
Aislamiento de ARN y la transcripción reversa/PCR
Para examinar la expresión del ARNm del OPG de las ratas y ratones se
seleccionaron primers específicos
Para las ratas el primer de 5´ fue 461-480, para el 3´ el primer
fue 1020-1001.
Para los ratones el primer de 5´ fue 428-447, para el 3´ el primer
fue 1242-1223.
Aislamiento de ARN y la transcripción reversa/PCR• EEl ADNc fue amplificado a través de PCR.l ADNc fue amplificado a través de PCR.
• Los productos del PCR fueron sujetos a electroforésis en un gel de Los productos del PCR fueron sujetos a electroforésis en un gel de agarosa al 1% y fueron visualizados con una tinción de bromuro de agarosa al 1% y fueron visualizados con una tinción de bromuro de etidio.etidio.
• Para la obtención de los perfiles semicuantitavos del PCR se Para la obtención de los perfiles semicuantitavos del PCR se determinó la intensidad de las bandas usando 1D Image Aanalysis determinó la intensidad de las bandas usando 1D Image Aanalysis Software.Software.
Inmunolocalización de ODF.• LLas ratas con edades entre 1 día y 10 días fueron sacrificadas y sus as ratas con edades entre 1 día y 10 días fueron sacrificadas y sus
mandíbulas fueron removidas quirúrgicamente .mandíbulas fueron removidas quirúrgicamente .
• LLas mandíbulas fueron fijadas en una tapón de formalina neutra al 10% as mandíbulas fueron fijadas en una tapón de formalina neutra al 10% durante 48 horas a 4 C.durante 48 horas a 4 C.
• SSe enguajaron en 10 mM PBS.e enguajaron en 10 mM PBS.
• SSe descalcificaron en 5% de ácido fórmico durante 7 días.e descalcificaron en 5% de ácido fórmico durante 7 días.
• LLas mandibulas fueron deshidratadas en varios grados de alcohol, as mandibulas fueron deshidratadas en varios grados de alcohol, embebidas en parafina y cortadas en secciones de 8 micrometros.embebidas en parafina y cortadas en secciones de 8 micrometros.
Resultados.EEl gen del OPG l gen del OPG in vivoin vivo en el fóliculo dental de las ratas y ratones. Hay una en el fóliculo dental de las ratas y ratones. Hay una relativa caída en su expresión en el día 3 (postnatal) en las ratas, y a los 5 relativa caída en su expresión en el día 3 (postnatal) en las ratas, y a los 5 días (postnatal) en los ratones.días (postnatal) en los ratones.
EEn los estudios n los estudios in vitro in vitro la expresión de OPG en el folículo dental de la rata la expresión de OPG en el folículo dental de la rata fue inhibida en las células tratadas con PTHrP en una concentración fue inhibida en las células tratadas con PTHrP en una concentración dependiente del tiempo. La máxima inhibición fue con una concentaración dependiente del tiempo. La máxima inhibición fue con una concentaración de 25 ng/mL.de 25 ng/mL.
El tratamiento de las células del folículo dental con CSF-1 inhibe la El tratamiento de las células del folículo dental con CSF-1 inhibe la expreisión de la OPG.expreisión de la OPG.
El MCP-1 y la IL 1ALFA no inhiben el gen del OEl MCP-1 y la IL 1ALFA no inhiben el gen del OPG en cultivo de las células PG en cultivo de las células del folículo dental.del folículo dental.
Discusión.
Los resultados de este estudio sugieren que existe una inhibición transitoria Los resultados de este estudio sugieren que existe una inhibición transitoria in vivo in vivo de la expresión del gen del OPG en el folículo dental a los 3 días de la expresión del gen del OPG en el folículo dental a los 3 días
en las ratas y a los 5 días en los ratones.en las ratas y a los 5 días en los ratones.
EEn ese momento es cuando se observa un mayor número de osteoclastos n ese momento es cuando se observa un mayor número de osteoclastos alrededor del hueso alveolar del primer molar de ratas y ratones. alrededor del hueso alveolar del primer molar de ratas y ratones.
Discusión.
Simonet (1997), Yasuda (1998, 1999) Simonet (1997), Yasuda (1998, 1999) la OPG inhibe la formación y la OPG inhibe la formación y activación de osteoclastos, una reducción en su expresión permite la activación de osteoclastos, una reducción en su expresión permite la
formación de osteoclastos.formación de osteoclastos.
Yasuda (1998) Yasuda (1998) dijo que la activación de los osteoclastos es inducida por la dijo que la activación de los osteoclastos es inducida por la ODF, y que la reducción de la expresión de OPG puede proveer un ODF, y que la reducción de la expresión de OPG puede proveer un
período de tiempo para que se inicie la reabsorción del hueso alveolar por período de tiempo para que se inicie la reabsorción del hueso alveolar por la activación de osteoclastos formando la vía de erupción.la activación de osteoclastos formando la vía de erupción.
Discusión.
Wise y Fan (1989), Cielinski (1994) Wise y Fan (1989), Cielinski (1994) dijeron que el tiempo de reducción de la dijeron que el tiempo de reducción de la expresión de OPG es el tiempo de mayor formación de oteoclastos.expresión de OPG es el tiempo de mayor formación de oteoclastos.
Lee y Lorenzo (1999) Lee y Lorenzo (1999) demostró que la hormona parotoidea inhibe la demostró que la hormona parotoidea inhibe la expresión de OPG en células de la médula ósea de ratones.expresión de OPG en células de la médula ósea de ratones.
Discusión.
Sakata (1999) Sakata (1999) el gen de la OPG es expresado en células el gen de la OPG es expresado en células mesenquimáticas dentales humanas, recientes estudios muestran la mesenquimáticas dentales humanas, recientes estudios muestran la transcripción de OPG presente en fibroblastos gingivales, células del transcripción de OPG presente en fibroblastos gingivales, células del
LP y células pulpares.LP y células pulpares.
LLa ausencia de la expresión de ODF en el folículo dental del ratón y la a ausencia de la expresión de ODF en el folículo dental del ratón y la rata sugieren que las señales de ODF para la formación de rata sugieren que las señales de ODF para la formación de
osteoclastos provienen del hueso alveolar adyacente al folículo.osteoclastos provienen del hueso alveolar adyacente al folículo.
Liu D, Yao S, Wise G.E
Euopean Journal of Oral Sciences 118: 333-341, 2010.
MyD88 expression in the rat dental follicle:
implications for osteoclastogenesis and tooth
eruption.
Objetivo.
DDeterminar la expresión cronológica en eterminar la expresión cronológica en in vivoin vivo de de MyD88 así como su posible papel en la MyD88 así como su posible papel en la osteoclastogénesis y la erupción dental.osteoclastogénesis y la erupción dental.
Materiales y Métodos.
Aislamiento de FD y cultivo de células FD.• Los folículos dentales de los primero molares mandibulares de ratas fueron Los folículos dentales de los primero molares mandibulares de ratas fueron
aisladas quirúgicamente en los días 1,3,5,7,9, y 11 (postnatal), para aisladas quirúgicamente en los días 1,3,5,7,9, y 11 (postnatal), para finalmente aislar ARN.finalmente aislar ARN.
• El protocolo para uso de animales fue establecido por el ComitEl protocolo para uso de animales fue establecido por el Comité del Instituto é del Instituto de Cuidado y Uso Animal de la Universidad de Louisiana.de Cuidado y Uso Animal de la Universidad de Louisiana.
• Los folículos dentales de los primeros molares de ratas de 5 y 6 días de Los folículos dentales de los primeros molares de ratas de 5 y 6 días de nacidas fueron cultivadas en MEM después de haberse realizado nacidas fueron cultivadas en MEM después de haberse realizado triptinización.triptinización.
• Las células del folículo dental del 6-9 pasaje fueron usadas para este estudio.Las células del folículo dental del 6-9 pasaje fueron usadas para este estudio.
Aislamiento de ARN.
• El ARN total fue aislado del folículo dental, posteriormente tratado El ARN total fue aislado del folículo dental, posteriormente tratado DDnnasa I a 37 C por 1 hora para remover la posible contaminación de asa I a 37 C por 1 hora para remover la posible contaminación de ADN.ADN.
• EEl ARN total fue cuantificado a una absorbancia de 260nm usando un l ARN total fue cuantificado a una absorbancia de 260nm usando un espectofotometro.espectofotometro.
Análisis de la microselección del ADN. • La miscroselección fue realizada con el fin de determinar la expresión La miscroselección fue realizada con el fin de determinar la expresión
del MyD88.del MyD88.
• MMediante el uso del Kit TrueLabeling-AMP 2.0 fue generado ARN ediante el uso del Kit TrueLabeling-AMP 2.0 fue generado ARN complementario (ARNc) a partir del ARN total del folículo dental de complementario (ARNc) a partir del ARN total del folículo dental de ratos de 1 a 11 días de nacidas.ratos de 1 a 11 días de nacidas.
• PPosteriormente se realizo una hibridación, y luego la selección fue osteriormente se realizo una hibridación, y luego la selección fue bloqueada en un buffer del bloqueo a una temperatura ambiente bloqueada en un buffer del bloqueo a una temperatura ambiente durante 40 minutos.durante 40 minutos.
Análisis de la microselección del ADN. • FFue incubada con fosfatasa alcalina conjugada por 10 minutos, y ue incubada con fosfatasa alcalina conjugada por 10 minutos, y
lavadas 4 veces, 5 minutos cada lavado.lavadas 4 veces, 5 minutos cada lavado.
• SSe obtuvo una imagen a través del sistema de imagen FluoChem e obtuvo una imagen a través del sistema de imagen FluoChem 8800.8800.
• LLa información del gen expresado fue analizado usando un Software, y a información del gen expresado fue analizado usando un Software, y la expresión del gen fue expresado como el radio del gen MyD88.la expresión del gen fue expresado como el radio del gen MyD88.
RT-PCR a tiempo real.
• SSe transcribieron 2 microgramos del ARN total utilizando transcriptasa e transcribieron 2 microgramos del ARN total utilizando transcriptasa reversa del virus de la leucemia para poder sintetizar ADN reversa del virus de la leucemia para poder sintetizar ADN complementario.complementario.
• LLa PCR en tiempo real fue usada para analizar la expresión de a PCR en tiempo real fue usada para analizar la expresión de MyD88, NF-kB-1, MCP-1 y RANKL de las células del folículo dental.MyD88, NF-kB-1, MCP-1 y RANKL de las células del folículo dental.
Transfección in vitro de células FD con un
pequeño ARN de interferencia.
• PPara la transfección las células del folículos dental fueron cultivadas 1 ara la transfección las células del folículos dental fueron cultivadas 1 día antes en frascos T-25 que contenían en MEM.día antes en frascos T-25 que contenían en MEM.
• LLa transfección fue llevada a cabo usando Lipofectamina RNAiMAX.a transfección fue llevada a cabo usando Lipofectamina RNAiMAX.
• AA períodos de tiempos designados después de la transfección las períodos de tiempos designados después de la transfección las células fueron recolectadas para la determinación de la expresión de células fueron recolectadas para la determinación de la expresión de genes usando RT-PCR a tiempo real. genes usando RT-PCR a tiempo real.
Inmunotinción.
• LLas mandíbulas de ratas de 5 días (postnatal), fueron fijadas en 10% as mandíbulas de ratas de 5 días (postnatal), fueron fijadas en 10% tanpón de formalina neutral, fueron descalcificadas, deshidratadas, tanpón de formalina neutral, fueron descalcificadas, deshidratadas, embebidas en parafina y seccionadas a 5 micrometros de grosor.embebidas en parafina y seccionadas a 5 micrometros de grosor.
• LLas secciones fueron lavadas tres veces con solución salina TBS, y as secciones fueron lavadas tres veces con solución salina TBS, y posteriormente bloqueadas a temperatura ambiente.posteriormente bloqueadas a temperatura ambiente.
• FFueron incubadas con un anticuerpo primario MyD88 antihumano ueron incubadas con un anticuerpo primario MyD88 antihumano policlonal de cabra. policlonal de cabra. LLa incubación se realizo durante 1 noche.a incubación se realizo durante 1 noche.
Inmunotinción.
• PPara detectar la expresión de MCP-1 en las células del folículo dental ara detectar la expresión de MCP-1 en las células del folículo dental fueron transfectadas siARN o siARN de MyD88.fueron transfectadas siARN o siARN de MyD88.
• Posteriormente fueron fijadas con metanol y secadas con aire.Posteriormente fueron fijadas con metanol y secadas con aire.
• LLuego las células fueron incubadas con un anticuerpo primario MCP-1 uego las células fueron incubadas con un anticuerpo primario MCP-1 antirata de conejo.antirata de conejo.
Tratamientos con IL-1ALFA.
• LLaas células del folículo dental fueron tratadas con IL-1ALFA a una s células del folículo dental fueron tratadas con IL-1ALFA a una concentración de 5 ng/mL -1 por 1, 3, 6 y 12 horas.concentración de 5 ng/mL -1 por 1, 3, 6 y 12 horas.
• SSe realizo el aislamiento de ARN seguido por RT/PCR a tiempo real.e realizo el aislamiento de ARN seguido por RT/PCR a tiempo real.
• LLas células del folículo dental con expresión de MyD88 fuero as células del folículo dental con expresión de MyD88 fuero transfectadas con siRNA coficado, después de 48 horas las cálulas transfectadas con siRNA coficado, después de 48 horas las cálulas fueron tratadas con IL-1ALFA por 1-2 horas y la expresión de NF-kB-1, fueron tratadas con IL-1ALFA por 1-2 horas y la expresión de NF-kB-1, MCP-1 y RANKL, usando RT/PCR a tiempo real.MCP-1 y RANKL, usando RT/PCR a tiempo real.
Ensayo de quimiotaxis y osteoclastogénesis in vitro.• PPara determinar la capacidad osteoclastogénica de las células ara determinar la capacidad osteoclastogénica de las células
mononucleares atraídas por CM de las células del folículo dental, se mononucleares atraídas por CM de las células del folículo dental, se realizaron ensayos de quiomataxis y las células atraídas en la cámara realizaron ensayos de quiomataxis y las células atraídas en la cámara inferior fueron mantenidas en el mismo CM complementado con CSF-1 inferior fueron mantenidas en el mismo CM complementado con CSF-1 humano.humano.
• DDespués de un día de cultivo el CM fue reemplazado con medio de espués de un día de cultivo el CM fue reemplazado con medio de diferenciación de oteoclastogénesis más la mismas concentraciones de diferenciación de oteoclastogénesis más la mismas concentraciones de CSF-1 y RANKL.CSF-1 y RANKL.
• EEl cultivo fue teñido mediante la actividad de un marcador de osteoclasto l cultivo fue teñido mediante la actividad de un marcador de osteoclasto (TRAP). (TRAP). EEl número de osteoclastosmultinucleados positivos para TRAP en l número de osteoclastosmultinucleados positivos para TRAP en cada pozo fue determinado mediante el uso de un microscopio.cada pozo fue determinado mediante el uso de un microscopio.
Análisis Estadístico.
Programa SAS
Los datos de microselección de ADN, los ensayos de
quiomataxis y a osteoclastogénesis in vitro.
ANOVA.
Fue empleado para evaluar la expresión
del gen.
Los datos de otros experimentos fueron analizados usando pruebas T-TEST pareado con valor de p igual o menor a 0.05
Resultados.
Expresión de MyD88 en FD.
El MyD88 fue expresado en el folículo dental del día 1 al día 11 (postnatal) siendo mayor
su expresión en el día 3.
Sobreregulación de la expresión de MyD88 en las
células del FD mediante IL-1ALFA.
La expresión de MyD88 estaba incrementada en las células del
folículo dental después de 3 horas de tratamiento con IL-1ALFA,
alcanzado su máxima expresión posterior a 6 horas de tratamiento.
Resultados.
Reducción de la expresión de NF-kB-1 y MCP-1 en las
células del FD con disminución de MyD88.
La expresión de NF-kB-1 fue significantemente reducida de
24 a 72 horas después de la transfección siRNA. La expresión de MCP-1 fue
significantemente reducida a las 48 horas y 72 horas después de
la transfección
Resultados.
Requerimiento del MyD88 para una expresión mejorada de IL-1ALFA de NF-kB-1, MCP-1 y RANKL.
La IL-1aALFA mejoró la expresión de NFKB1, MCP-1 y RANKL. Después que MyD88 fue disminuido, la IL-1ALFA no
tuvo efecto sobre la expresión de NFKB1 y MCP-1
Resultados.
Reducción de la actividad quimiotáctica y la osteoclastogénesis in vitro mediante CM de las células del FD con
disminución del MyD88.
El CM de las células FD transfectadas con siRNA control tenían una actividad quimiotáctica fuerte con un índice de
migración de 2.53, mientras CM de siMyD88 tenía un índice de migración de 1.66, representando una reducción
de aproximadamente el 34% en la actividad quimiotáctica.
Resultados.
El CM de siMyD88 dio una reducción del 46% en el número de osteoclastos por pozo comparado con CM siControl. Para el siControl
+ CM de IL-1alfa, mostró un incremento del 41% en el número
de osteoclastos por pozo sobre CM de siControl. Estos resultados
sugieren que MyD88 contribuye a osteoclastogénesis y su
mejoramiento mediante IL-1alfa.
Reducción de la actividad quimiotáctica y la osteoclastogénesis in vitro mediante CM de las células del FD con
disminución del MyD88.
Discusión.
O´Neil (2007), Lord K (1990) y Burns (1998)O´Neil (2007), Lord K (1990) y Burns (1998) el MyD88 es una molécula el MyD88 es una molécula adaptadora en la señalización de IL-1/IL-18/TLR y está presente en adaptadora en la señalización de IL-1/IL-18/TLR y está presente en
muchos tipos de células y tejidos. muchos tipos de células y tejidos.
Liu D (2007)Liu D (2007) encontraron que el MyD88 fue expresado en células FD encontraron que el MyD88 fue expresado en células FD in in vivo.vivo.
Wise (1989) y Cielinski (1994Wise (1989) y Cielinski (1994) ) la expresión máxima de MyD88 se la expresión máxima de MyD88 se observo en ratas al tercer día (postnatal), lo cual se correlaciona con observo en ratas al tercer día (postnatal), lo cual se correlaciona con
el aumento de células mononucleares en el FD. el aumento de células mononucleares en el FD.
Discusión.
Que B.G (1997) y Liu D (2005) Que B.G (1997) y Liu D (2005) dijeron que la osteoclastogénesis requiere dijeron que la osteoclastogénesis requiere el reclutamiento de precursores de osteoclastos, y en el FD este el reclutamiento de precursores de osteoclastos, y en el FD este
reclutamiento es regulado mediante moléculas quimio-atrayentes tales reclutamiento es regulado mediante moléculas quimio-atrayentes tales como CSF-1, MCP-1 y EMAP-IIcomo CSF-1, MCP-1 y EMAP-II
En este estudio, se encontró que la expresión de MyD88 fue máxima En este estudio, se encontró que la expresión de MyD88 fue máxima in in vivo vivo y que la IL-1ALFA reguló su expresión y que la IL-1ALFA reguló su expresión in vitroin vitro. Por lo tanto, es . Por lo tanto, es
posible que la IL-1ALFA contribuye al aumento de MyD88 en el día 3. posible que la IL-1ALFA contribuye al aumento de MyD88 en el día 3.
Discusión.
Los ensayos quimiotácticos presentados en este estudio confirman que el Los ensayos quimiotácticos presentados en este estudio confirman que el MyD88 promueve el reclutamiento de precursores de osteoclastos MyD88 promueve el reclutamiento de precursores de osteoclastos
(células mononucleares) mediante las células FD(células mononucleares) mediante las células FD..
SSe demostró e demostró in vitroin vitro hubo reducción de la expresión de MyD88 en las hubo reducción de la expresión de MyD88 en las células del FD que resulta en un CM con actividad quimiotáctica células del FD que resulta en un CM con actividad quimiotáctica
disminuida y por lo tanto una reducción en la formación de disminuida y por lo tanto una reducción en la formación de osteoclastos.osteoclastos.
Discusión.
Yasuda (1998) Yasuda (1998) dijo que después del reclutamiento de precursores de dijo que después del reclutamiento de precursores de osteoclastos, la señalización de fusión celular mediante RANKL es osteoclastos, la señalización de fusión celular mediante RANKL es
esencial en la osteoclastogénesis.esencial en la osteoclastogénesis.
Liu D (2005) Liu D (2005) dijo que el RANKL es expresado en el FD, y es regulado y dijo que el RANKL es expresado en el FD, y es regulado y aumentado aumentado in vitro in vitro mediante IL-1ALFA, el TNF-ALFA y TGF-beta. mediante IL-1ALFA, el TNF-ALFA y TGF-beta.
EEn este estudio se demuestra que la disminución de MyD88 en las células n este estudio se demuestra que la disminución de MyD88 en las células del FD resulta en la expresión disminuida de NF-kB-1 y MCP-1.del FD resulta en la expresión disminuida de NF-kB-1 y MCP-1.
Discusión.
El MyD88 puede también jugar un papel en la salud oral. como un El MyD88 puede también jugar un papel en la salud oral. como un adaptador crucial para respuestas inmunes innatas, el MyD88 está adaptador crucial para respuestas inmunes innatas, el MyD88 está
involucrado en la vía TLR que guía la inmunidad innata contra involucrado en la vía TLR que guía la inmunidad innata contra bacterias, como se muestra por el hallazgo que los ratones con bacterias, como se muestra por el hallazgo que los ratones con
disminución de MyD88 fueron más susceptibles a la invasión bacterial disminución de MyD88 fueron más susceptibles a la invasión bacterial que los ratones deficientes en TLR2.que los ratones deficientes en TLR2.
El MCP-1 y el RANKL promueven la osteoclastogénesis, y el FD regula la El MCP-1 y el RANKL promueven la osteoclastogénesis, y el FD regula la osteoclastogénesis necesaria para la formación de la vía de erupciónosteoclastogénesis necesaria para la formación de la vía de erupción..
