Biol. Carlos Béjar LozanoServi-Med Laboratorios Clínicos

ESPERMATOBIOSCOPIA

EL ESTUDIO FUNCIONAL DEL SEMEN

Esperpatogénesis

Esperpatogénesis

EsperpatogénesisCélulas de Sertoli :

- Constituyen el 85 % del volumen testicular- H. Antimulleriana: Producida en etapa

fetal. Madura de túbulos seminíferos- Inhibina y Activina: Inhibina produce

aumento de FSH para madurar los espermatozoides. Activina baja la producción de FSH.

- Proteína Ligadora de Andrógenos (ABP) Transporta la Testosterona hasta sus receptores y prolonga su vida media.

- Estradiol: Activa espermatogénesis- Factor Neurotrófico Derivado de Cels.

Gliales: Promotor de espermatogonias indiferenciadas (promueve células madre espermaticas)

- Factor de Transcripcion ERM: Mantiene espermatogonias viables en el testículo adulto

EsperpatogénesisCélulas de Leyding:

- Productoras de Testosterona- Patrón diurno, máximo en la mañana- En las células blanco, se convierte en

Dihidrotestosterona (por la α-reductasa) que es como actúa a nivel intracelular

- La H Luteinizante producida en hipófisis estimula estas células para producir la testosterona- Elevados niveles de testosterona

inhiben la producción de LH que actuará disminuyendo el nivel de producción de testosterona

- La Prolactina inhibe la síntesis de HL y baja producción de espermatozoides

Anatomía fisiológica del órgano sexual masculino

• Se forman 120 millones de espermatozoides diariamente• Una pequeña parte se almacena en el epidídimo• La mayoría lo hace en el conducto deferente, donde puede permanecer almacenado por un mes.

•Varicocele (obstrucción o congestionamiento de sistema venoso) como causa de oligospermia o hasta azoosperimia

Anatomía fisiológica del órgano sexual masculino

Vesícula Seminal:Producen el 60 % del volumen seminal, formado por:- Secreción mucoide rico en fructosa- Prostaglandinas- Otras sustancias nutritivas para el esperma

Próstata:- Secreta el PSA, Zn, Mg, espermina,

fosfatasa ácida, fibrinolisina.

PSA, también llamado: - Calicreina III, seminina, semenogelasa. - Su función es la licuefacción del semen

Anatomía fisiológica del órgano sexual masculino

Función de las distintas secciones anatómicas de sistema reproductor

Túbulos seminíferos de los testículos

Espermatogénesis

Epidídimo (conglomerado de túbulos seminiferos)

Maduración de espermatozoides

Conducto deferente Propulsa los espermatozoides a los conductos eyaculadores

Vesículas seminales Proporciona nutrientes a los espermatozoides y liquido

próstata Proporciona proteínas y enzimas para la coagulación y licuefacción del eyaculado

Glándulas bulbo uretrales Agrega moco alcalino para neutralizar la acidez prostática y vaginal.

COMPOSICIÓN DEL SEMEN

espermatozoides 5%

Liquido seminal 60-70%

Liquido prostático 20-30%

Glándulas bulbo uretrales 5%

El espermatozoide

• Cabeza:– Acrosoma; capa enzimatica a base de hialuronidasa y Acrosina para degradar zona pelúcida– Nucleo; contiene los cromosomas (n)

• Flagelo– Segmento intermedio con mitocondrias– Cola o axonema, de 11 microtúbulos – Membrana o vaina que los recubre

El espermatozoide

LA FECUNDACIÓN

Llegada de espermas mas vigorosos, mas viables.

• Corona Radiata:Capa de células que rodean al

óvulo y la zona pelúcida.Protegen al OvuloQuimiocinas que atraen al

espermatozoide

• Zona Pelúcida Capa de proteínas que rodean

al óvulo. Por cambios contráctiles de

despolarización evitan la entrada de dos o más espermas.

Significado de una muestra normal:

Correcta formación anatómica del aparato reproductor masculinoCorrecto funcionamiento fisiológico de cada parte anatómicaCorrecto funcionamiento hormonal

AMPLIAS PROBABILIDADES DE PODER PROCREAR

Video espermatobioscopia normal

Significado de una muestra anormal:

Defecto hormonal, anatómico, fisiológico, infecciones… etc NO PODRA PROCREAR HIJOS.

Video espermatobioscopia normal

• Anormalidades cromosómicas• Probabilidad de sexo• Alteraciones que pudiera

desarrollar el producto (down, labio leporino, polidactilia…)

• Características que pudiera tener un hijo (estatura, color de pelo, de ojos o de piel, inteligencia…)

• Probabilidad de enfermedades de transmisión genética (diabetes, dislipidemia, cáncer o leucemias….)

• Probable origen de paternidad

… Qué NO muestra una espermatobioscopía ??

JUSTIFICACIÓN: Cuando hacer el estudio ?

1. Parejas que han tenido problemas con la concepción después de 6 meses de intentos y sin utilizar métodos anticonceptivos

2. Pacientes bajo tratamiento hormonal o post quimioterapia

3. Control de vasectomía

4. Estudio previo a procedimientos de capacitación espermática

QUIEN DEBE HACER EL ESTUDIO:

1. LABORATORIO CON PERSONAL CON AMPLIA EXPERIENCIA EN LA OBSERVACION DE ESTAS MUESTRAS.

2. APEGADO A NORMAS INTERNACIONALES Y CON TECNICAS VALIDADAS

3. ACREDITADO BAJO CONTROL DE CALIDAD EXTERNO

4. SOLO ESTO GARANTIZA QUE EL RESULTADO SE APEGA A LOS VALORES DEL PACIENTE

Obtención de la muestra

- Con 3 días de abstinencia sexual y no mas de 3 semanas

- Obtenerse sin uso de preservativos ni “coito interruptus” - La muestra debe estar a mas tardar, antes de 1 hr de

obtenida la muestra

Anotar: a) Días de abstinencia sexual b) hora de obtención

- OMS recomienda el análisis de por lo menos DOS O TRES MUESTRAS con 7 días a no mas de 3 meses de diferencia para confirmar cualquier anormalidad.

VARIACION EN LA CUENTA ESPERMATICA EN SUJETOS SANOS

Examen físico o macroscópico

Licuefacción Volumen Viscosida

d

Aspecto pH

1. Volumen

Cantidad normal: > 2.0 mL

Valores inferiores a 1.5 ml hipospermia Valores mayores a 7.0 ml hiperespermia

Hipospermia Hiperespermia

• Obstrucción por infección• Deficiencia de las vesículas

seminales• Eyaculación retrograda (RTU,

malfunción de esfinter)• Alteración congenita de vasos

deferentes

• Varicocele (hiperespermia con hipo o azoospermia)

• Periodos de abstinencia prolongados

2. Viscosidad / Licuefacción

Dificulta la motilidad astenozoospermia

Aspectos clínicosLicuefacción completa antes de 1 hr de obtenidaInflamación crónica de la próstataBaja producción de enzimas prostáticasPersistencia de viscosidad NECESITA CAPACITACION ESPERMÁTICA

3. Aspecto

Normal: Opalescente grisáceo Coagula casi inmediatamente Hiperviscoso por exceso de moco

Colores patológicosRojizo parduzco: sangre

Amarillo verdoso: infección

4. Determinación del pH

Normal: 7.2 a 8.1 Neutraliza el pH ácido vaginal Fructuosa y ácido Cítrico dan

acidez No hay evidencia de que un pH

mayor sea patológico Valores inferiores pueden

indicar infección genital

Examen microscópico

Cantidad o concentración

Movilidad

Vitalidad

Elementos agregados:

CAPACITACION ESPERMÁTICAMicroscopio Olimpus CX31Contraste de Fase y Campo OscuroSist. Computarizado Imagen y Video

1. Recuento Espermático

CAMARA DE MAKLERCuadros de 0.01 mm2 por 10 µm de espesor

- 1 mm = 1000 µm 10 cuadros = 1 µm3

- Espermatozoides contados = millones/mL

Valor normal: > 20 millones de espermatozoides / mL de semen > 40 millones / eyaculado

Oligozoozpermia moderada: entre 10 y 20 millones / mL Oligozoospermia severa: entre 0.1 y 10 millones / mL Criptozoospermia: menos de 0.1 millones / mL Azoospermia: 0 (cero) espermatozoides en la muestra

1. Recuento Espermático

2. Movilidad / VitalidadA Progresivos

rápidosDesplazamiento rápido en trayectoria rectilínea

B Progresivos lentos Desplazamiento recto pero lento

C Pendulares Movimientos pero sin desplazamiento

D Inmóviles Ausencia de movimiento

NORMAL

A : > 25%A+B: > del 75%

ASTENOZOOSPERMIA

2. Movilidad / VitalidadNORMAL

A : > 25%A+B: > del 75%

V I T A L I D A D :

NORMAL VIVOS: ≥ 60 %

NECROZOOSPERMIA: < 60 %

M O R F O L O G I A

Normal: ≥ 30 %

Anormal: < 30 %

A Progresivos rápidos

Desplazamiento rápido en trayectoria rectilínea

B Progresivos lentos Desplazamiento recto pero lento

C Pendulares Movimientos pero sin desplazamiento

D Inmóviles Ausencia de movimiento

Capacitación Espermática

• Conjunto de técnicas mediante las cuales se logra seleccionar los espermatozoides mas vigorosos y concentrarlos en un microvolumen para usarlo en fertilización asistida.

Lavado básico:

o Cuando hay oligospermia moderada o hiperviscosidad

Swim Up:

o Cuando hay oligospermia severa con o sin hiperviscosidad.

Separación por Gradientes:

o Cuando hay oligospermia moderada o severa

Capacitación Espermática

Swim Up:

o Cuando hay oligospermia severa con o sin hiperviscosidad.

Separación por Gradientes:

o Cuando hay oligospermia moderada o severa

Capacitación Espermática

Separación por Gradientes:

o Cuando hay oligospermia moderada o severa

3. Elementos agregados

Células epiteliales• Escasas normalmente• Aumentadas: Procesos congestivos• Manipulación excesiva

Eritrocitos Patológico Proceso maligno Congestión de la uretra o

próstato-vesicular Traumatismos

Aglutinación Aglutinación (vivos) ; Anticuerpos anti esperma, deficit de hialuronidasas Aglutinación (Muertos): deficiencias de espermatogénesis, deficiencias de glándulas accesorias.

Leucocitos o piocitos

3. Elementos agregados

• Procesos infecciosos • Exposición a altas

temperaturas• Tóxicos y fármacos• Trichomonas..??

Patógenos Asociados:

Micoplasma y Ureaplasma

Espermatobioscopía FuncionalPrueba de Simms Hunner

• Después de las relaciones, la paciente debe permanecer 15 min recostada. Posteriormente recolectar muestra de escurrimiento vaginal. Llevar al laboratorio de inmediato.

• Análisis de muestra post-coito:• pH (7-8)• Espermatozoides, millones/mL (> 30 millones)• Movilidad (mas del 50 % A + B)• Vivos

– Escurrimiento vaginal a los 60 / 120 / 180 minutos:• pH (7-8)• Espermatozoides, millones/mL (> 30 millones)• Movilidad (mas del 50 % A + B)• Vivos

Estudio bioquímico del plasma seminal

Acido cítricoFosfatasa ácida

FructuosaHialuronidasas

•Actividad de Vesícula seminal•Viabilidad espermática•Procesos infecciosos o inflamatorios, hipoandrogenismo, pérdida de la primer porción eyaculada

PSAFosfatasa Acida

•Actividad prostática•Procesos Tumorales benignos•Procesos Tumorales malignos

PARÁMETRO VALOR REFERENCIAL ALTERACIÓN

Aspecto Nacarado

Licuefacción Completa en 40 min

Viscosidad Filancia < 2 cm

pH > 7.2

Volumen 1.5 – 5.5 ml AspermiaHipospermiaHiperespermia > ml

Cantidad > 40 millones de espermatozoides

Movilidad Movilidad progresiva (A+B) > 50% o A > 20%

Astenozoospermia

PARÁMETRO VALOR REFERENCIAL ALTERACIÓN

Concentración > 20 millones/ml AzoospermiaOligozoospermiaCriptozoospermia

Vitalidad > 75 % de las formas no teñidas con eosina

Necrozoospermia

Morfología > 30% normal TeratozoospermiaOligoastenoteratozoospermia