ESTAFILOCOCOS

Rolando Soloaga

Estructura bacterianaEstructura bacteriana

Peptidoglicán Peptidoglicán

Acidos teicoicos y lipoteicoicosAcidos teicoicos y lipoteicoicos

Proteína AProteína A

Cápsula difusaCápsula difusa

http://images.google.com.ar/imgres?imgurl=http://www.profos.de/Medien/gfx/304301-%2520S.aureus%2520ATCC%252025923.jpg&imgrefurl=http://www.profos.de/microbiology_oview.php&h=225&w=300&sz=63&tbnid=xkUJPnrZkOImQM:&tbnh=83&tbnw=111&hl=es&start=3&prev=/images%3Fq%3DS.aureus%26svnum%3D10%26hl%3Des%26lr%3D%26sa%3DN

Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus. FACTORES DE VIRULENCIA. FACTORES DE VIRULENCIA

ENZIMASENZIMAS TOXINASTOXINASCatalasa alfa,beta,gama

toxinas

Coagulasa Leucocidina

Hialuronidasa Exfoliatina A y B

Nucleasa SSTT-1

Lipasa Enterotoxinas (A-E)

B-lactamasa

Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus. SUPERANTIGENOS. SUPERANTIGENOS

SSTT1, ENTEROTOXINAS, TOXINAS EXFOLIATIVASSSTT1, ENTEROTOXINAS, TOXINAS EXFOLIATIVAS

ACTIVAN LINFOCITOS T PARA LIBERAR CITOCINASACTIVAN LINFOCITOS T PARA LIBERAR CITOCINAS

EFECTOS SISTEMICOSEFECTOS SISTEMICOSLESIONES CUTANEASLESIONES CUTANEASFIEBRE FIEBRE HIPOTENSIONHIPOTENSIONSHOCKSHOCKFALLA MULTIORGANICAFALLA MULTIORGANICAMUERTEMUERTE

S.aureusS.aureus. PORTACION. PORTACION

NEONATOS: COLONIZACION A TRAVES DE CONGENERES NEONATOS: COLONIZACION A TRAVES DE CONGENERES INMEDIATOS (MUÑON UMBILICAL, ZONA PERINEAL, PIEL, INMEDIATOS (MUÑON UMBILICAL, ZONA PERINEAL, PIEL,

TRACTO GI)TRACTO GI)

NIÑOS Y ADULTOS PRINCIPALMENTE VESTIBULO NASAL NIÑOS Y ADULTOS PRINCIPALMENTE VESTIBULO NASAL ANTERIOR:ANTERIOR:

PORTACION 20-40%PORTACION 20-40%30% PERMANENTE30% PERMANENTE

60% INTERMITENTE60% INTERMITENTE

AUMENTO DE PORTACION ENAUMENTO DE PORTACION ENDIV, HIV, TRANSTORNOS DERMATOLOGICOSDIV, HIV, TRANSTORNOS DERMATOLOGICOSDIABETICOS QUE RECIBEN INSULINADIABETICOS QUE RECIBEN INSULINAHEMODIALIZADOS CRONICOS, CAPDHEMODIALIZADOS CRONICOS, CAPDPERSONAL DE LA SALUDPERSONAL DE LA SALUD

FACTORES PREDISPONENTES

DIABETES MELLITUS

NEUTROPENIA

PRESENCIA DE CUERPOS EXTRAÑOS

ENFERMEDAD GRANULOMATOSA CRONICA

FIBROSIS QUISTICA

ALTERACIONES EN LA INTEGRIDAD DE LA BARRERA MUCOCUTANEA:CATETERESHERIDAS QUIRURGICAS, TRAUMATICAS MORDEDURASQUEMADURASINFECCIONES VIRALES

DEFECTO EN EL QUIMIOTAXISMO EN SINDROMES DE CHEDIAK-HIGASHIWISKOTT-ALDRICHDOWN

ADHERENCIA DE ESTAFILOCOCOS A ADHERENCIA DE ESTAFILOCOCOS A CUERPOS EXTRAÑOSCUERPOS EXTRAÑOS

ADHERENCIA A CELULAS DE MUCOSA ADHERENCIA A CELULAS DE MUCOSA NASALNASAL

ACIDO TEICOICOACIDO TEICOICO ADHERENCIA DE ADHERENCIA DE S.aureuS.aureus s

FACTOR DE AGRUPAMIENTO PARA FACTOR DE AGRUPAMIENTO PARA FIBRINOGENO FIBRINOGENO A FIBRONECTINAA FIBRONECTINA FnBPA y FnBPB OTRAS ADHESINAS ClFA y ClFB (a colágeno) Proteína ligadora de elastina

ADHERENCIA DE SCNADHERENCIA DE SCN PS/A (polisacárido capsular) PIA (adhesinas intercelulares polisacáridas)

Esquema de la formación de biofilms por Esquema de la formación de biofilms por S.epidermidis.S.epidermidis. Modificado de Dune. Clin Microbiol Rev, abril, 2002Modificado de Dune. Clin Microbiol Rev, abril, 2002

S. aureus.S. aureus. INFECCIONES INFECCIONES RELACIONADASRELACIONADAS

ENFERMEDADES ASOCIADAS A ENFERMEDADES ASOCIADAS A TOXINASTOXINAS SINDROME DE PIEL ESCALDADA SINDROME DE PIEL ESCALDADA SINDROME DE SHOCK TOXICOSINDROME DE SHOCK TOXICO

DIARREAS (ENTEROTOXINASDIARREAS (ENTEROTOXINAS))

ENFERMEDADES ASOCIADAS A ENFERMEDADES ASOCIADAS A CAPACIDAD INVASIVACAPACIDAD INVASIVA

ALFA, BETA Y GAMA HEMOLISINASALFA, BETA Y GAMA HEMOLISINASLEUCOCIDINASLEUCOCIDINASHIALURONIDASAHIALURONIDASACATALASACATALASA

S. aureus.S. aureus. INFECCIONES INFECCIONES RELACIONADASRELACIONADAS

INFECCIONES DE PIEL Y PARTES BLANDASINFECCIONES DE PIEL Y PARTES BLANDAS FOLICULITISFOLICULITIS FORUNCULOSFORUNCULOS IMPETIGOIMPETIGO CELULITISCELULITIS MASTITISMASTITIS HIDROADENITISHIDROADENITIS

INFECCIONES NECROTIZANTES DE PIEL Y INFECCIONES NECROTIZANTES DE PIEL Y PARTES BLANDASPARTES BLANDASINFECCION DE INFECCION DE HERIDAS,QUIRURGICAS,TRAUMATICAS, HERIDAS,QUIRURGICAS,TRAUMATICAS, QUEMADURAS Y MORDEDURASQUEMADURAS Y MORDEDURASMIOSITISMIOSITIS

http://images.google.com.ar/imgres?imgurl=http://www.fhalcorcon.org/areamedica/serviciosmedicos/pediatria/cursos/images/sst1.jpg&imgrefurl=http://www.fhalcorcon.org/areamedica/serviciosmedicos/pediatria/cursos/sstssss.htm&h=212&w=292&sz=26&tbnid=5HRN8DJKDhmW1M:&tbnh=80&tbnw=111&hl=es&start=90&prev=/images%3Fq%3DS.aureus%26start%3D80%26svnum%3D10%26hl%3Des%26lr%3D%26sa%3DN

http://images.google.com.ar/imgres?imgurl=http://www.cyto.purdue.edu/flowcyt/educate/photos/cells/pmnbug2.gif&imgrefurl=http://www.cyto.purdue.edu/flowcyt/educate/photos/cells/images.htm&h=309&w=321&sz=58&tbnid=ab6jIZLDAKVb-M:&tbnh=109&tbnw=114&hl=es&start=22&prev=/images%3Fq%3DS.aureus%26start%3D20%26svnum%3D10%26hl%3Des%26lr%3D%26sa%3DN

http://images.google.com.ar/imgres?imgurl=http://www.cyto.purdue.edu/flowcyt/educate/photos/cells/pmnbug2.gif&imgrefurl=http://www.cyto.purdue.edu/flowcyt/educate/photos/cells/images.htm&h=309&w=321&sz=58&tbnid=ab6jIZLDAKVb-M:&tbnh=109&tbnw=114&hl=es&start=22&prev=/images%3Fq%3DS.aureus%26start%3D20%26svnum%3D10%26hl%3Des%26lr%3D%26sa%3DN

SEPSIS POR SEPSIS POR S. aureusS. aureus

Inf de piel y partes blandas.Inf de piel y partes blandas.Fernadez-Caniggia y Col.Fernadez-Caniggia y Col.Curso a distancia De AAMCurso a distancia De AAM

S. aureusS. aureus. INFECCIONES . INFECCIONES RELACIONADASRELACIONADAS

OSTEOMIELITIS AGUDA Y CRONICAOSTEOMIELITIS AGUDA Y CRONICA

ARTRITIS Y BURSITIS SEPTICASARTRITIS Y BURSITIS SEPTICAS

MENINGITIS (2,4% de primarias)MENINGITIS (2,4% de primarias) PACIENTES CON SHUNTSPACIENTES CON SHUNTS TRAUMATISMO DE CRANEOTRAUMATISMO DE CRANEO SECUNDARIA A FOCO A DISTANCIA (endocarditis)SECUNDARIA A FOCO A DISTANCIA (endocarditis) INMUNOCOMPROMETIDOS INMUNOCOMPROMETIDOS

ENDOCARDITIS Y PERICARDITISENDOCARDITIS Y PERICARDITIS


OTITIS MEDIAOTITIS MEDIA

OTITIS EXTERNA LOCALIZADAOTITIS EXTERNA LOCALIZADA

SINUSITISSINUSITIS

NEUMONIANEUMONIA PACIENTES EN ARMPACIENTES EN ARM FIBROQUISTICOSFIBROQUISTICOS POST-INFLUENZA POST-INFLUENZA SECUNDARIA A ENDOCARDITIS DERECHA (DIV)SECUNDARIA A ENDOCARDITIS DERECHA (DIV) HIVHIV SECUNARIA A INFECCIONES POR P.JIROVECIISECUNARIA A INFECCIONES POR P.JIROVECII

EMPIEMA PLEURALEMPIEMA PLEURAL SECUNDARIO A NEUMONIASECUNDARIO A NEUMONIA POST-CIRUGIA TORACICA POST-CIRUGIA TORACICA


INFECCIONES OCULARESINFECCIONES OCULARES CONJUNTIVITISCONJUNTIVITIS BLEFARITISBLEFARITIS DACRIOCISTITIS DACRIOCISTITIS QUERATITISQUERATITIS ENDOFTALMITISENDOFTALMITIS

S. aureus Y S. aureus Y SCN. INFECCIONES SCN. INFECCIONES RELACIONADASRELACIONADAS

INFECCIONES ASOCIADAS A CUERPOS INFECCIONES ASOCIADAS A CUERPOS EXTRAÑOSEXTRAÑOS CATETERESCATETERES VALVULA CARDIACA PROTESICAVALVULA CARDIACA PROTESICA PARCHES VASCULARES PARCHES VASCULARES MARCAPASOSMARCAPASOS SHUNTSSHUNTS SISTEMAS DE HEMODIALISIS Y DIALISIS SISTEMAS DE HEMODIALISIS Y DIALISIS

PERITONEALPERITONEAL PROTESIS OSTEOARTICULARESPROTESIS OSTEOARTICULARES IMPLANTES MAMARIOS Y PENEANOSIMPLANTES MAMARIOS Y PENEANOS LENTES INTRAOCULARESLENTES INTRAOCULARES

S. aureus S. aureus . INFECCIONES . INFECCIONES RELACIONADASRELACIONADAS

INFECCIONINFECCION % POR % POR S.aureusS.aureus

BacteriemiaBacteriemia 15

EndocarditisEndocarditis 30

Herida QuirurgicaHerida Quirurgica 20

OsteomielitisOsteomielitis 50

Artritis séptica, adultosArtritis séptica, adultos 55

Rubin,R. Emerging Infect Dis; 5; 1999.

S. aureus Y S. aureus Y SCN. INFECCIONES SCN. INFECCIONES RELACIONADASRELACIONADAS

ESTAFILOCOS. FOCOS DE BACTERIEMIAS.aureus SCNCATETERES CATETERESENDOCARDITIS ENDOCARDITIS -VALVULA NATIVA VALVULA PROTESICA-VALVULA PROTESICAOSTEOMIELITIS BACTERIEMIA EN NEONATOS YARTRITIS NEUTROPENICOSINFECCIONES DE PIEL MEDIASTINITISY PARTES BLANDAS PARCHES VASCULARESMEDIASTINITISMARCAPASOSPARCHES VASCULARESNEUTROPENICOS Y NEONATOS

S.aureus.S.aureus. SIGNIFICADO CLINICO SIGNIFICADO CLINICO DEL AISLAMIENTODEL AISLAMIENTO

ALTOALTO MODERADO-ALTOMODERADO-ALTO BAJOBAJOHemocultivoHemocultivo Esputo (NAC y FQ)Esputo (NAC y FQ) Hisopado nasalHisopado nasalLCRLCR Hisopado conjuntivalHisopado conjuntival y de oídoy de oídoPunción osteoarticPunción osteoartic Catéteres (<100 y hemo-)Catéteres (<100 y hemo-) Hisopado de Hisopado de Efluentes dial.perit. turbioEfluentes dial.perit. turbio Biopsia de tejido vital (>10Biopsia de tejido vital (>1055 ufc/g) ufc/g) fístulasfístulasPunción piel yPBPunción piel yPB OrinaOrina Esputo (NIH)Esputo (NIH)Humor vítreoHumor vítreo Cables de marcapasoCables de marcapaso Escaras y úlceraEscaras y úlceraBiopsia de pulmónBiopsia de pulmón Sec traqueales (>10Sec traqueales (>1066 ufc/ml) ufc/ml) por decúbitopor decúbito(10(1044 ufc/g) ufc/g) Materia fecalMateria fecalLíquido pleuralLíquido pleural Hisopado de Hisopado de Catéteres (>100ufc/mlCatéteres (>100ufc/ml heridasheridasY hemocult+)Y hemocult+) FaucesFaucesBAL (>10BAL (>1044 o PSB>10 o PSB>1033 ufc/ml) ufc/ml)Punción de oído medio y de Punción de oído medio y de Senos paranasalesSenos paranasalesPunción de bolsillo de Punción de bolsillo de marcapasosmarcapasos

INFECCIONES POR ESTAFILOCOCOS INFECCIONES POR ESTAFILOCOCOS COAGULASA NEGATIVACOAGULASA NEGATIVA

ESPECIES AISLADAS EN HUMANOSESPECIES AISLADAS EN HUMANOS

S.epidermidisS.epidermidisS.saprophyticusS.saprophyticusS.lugdunensisS.lugdunensisS.warneriS.warneriS.haemolyticusS.haemolyticusS.hominisS.hominisS.saccharolyticusS.saccharolyticusS.xylosusS.xylosusS.cohniiS.cohniiS.auricularisS.auricularisS.simulansS.simulansS.schleiferiS.schleiferiS.capraeS.capraeS.pasteuriS.pasteuri

NICHOS ECOLOGICOSNICHOS ECOLOGICOSS.epidermidisS.epidermidis: PREVALENTE Y PERSISTENTE EN PIEL : PREVALENTE Y PERSISTENTE EN PIEL LAMPIÑA Y MUCOSAS (65-90% DE LAS CEPAS)LAMPIÑA Y MUCOSAS (65-90% DE LAS CEPAS)--S.hominisS.hominis ES EL SEGUNDO EN FRECUENCIA. ES EL SEGUNDO EN FRECUENCIA.

-MENOS FRECUENTES COMO FLORA RESIDENTE -MENOS FRECUENTES COMO FLORA RESIDENTE S.haemolyticus, S.warneri, S.saccharolyticusS.haemolyticus, S.warneri, S.saccharolyticus..

-FLORA TRANSITORIA: -FLORA TRANSITORIA: S.xylosus, S.simulans, S.cohnii, S.xylosus, S.simulans, S.cohnii, S.lugdunensisS.lugdunensis..

-NICHOS ESPECIFICOS:-NICHOS ESPECIFICOS:S.capitisS.capitis: cabeza: cabezaS.auricularisS.auricularis: conducto auditivo externo: conducto auditivo externo

-- S.saprophyticusS.saprophyticus: genitourinario: genitourinario


Aumento en la última década debido a: Aumento en la última década debido a:

Aumento en el uso de dispositivos Aumento en el uso de dispositivos intravascularesintravasculares

Otros dispositivos médicosOtros dispositivos médicos

Aumento en la sobrevida de pacientes Aumento en la sobrevida de pacientes neutropénicosneutropénicos

TransplantesTransplantes


DE CURSO INDOLENTEDE CURSO INDOLENTE

LA MAYORIA DE ADQUISICION INTRAHOSPITALARIALA MAYORIA DE ADQUISICION INTRAHOSPITALARIA

APROXIMADAMENTE 80% SE PRODUCEN POR APROXIMADAMENTE 80% SE PRODUCEN POR S.epidermidis.S.epidermidis.

ALTO PORCENTAJE DE CEPAS MULTIRESISTENTES (60-90%)ALTO PORCENTAJE DE CEPAS MULTIRESISTENTES (60-90%)

INFECCIONES DE CUERPOS EXTRAÑOS INFECCIONES DE CUERPOS EXTRAÑOS ADHERENCIA INICIAL POR PS/AADHERENCIA INICIAL POR PS/A PERSISTENCIA RELACIONADA A SLIMEPERSISTENCIA RELACIONADA A SLIME

DIFICULTAD PARA DIFERENCIAR INFECCION DE DIFICULTAD PARA DIFERENCIAR INFECCION DE CONTAMINACION O COLONIZACIONCONTAMINACION O COLONIZACION..


FRECUENTEMENTE INVOLUCRAN: FRECUENTEMENTE INVOLUCRAN: CUERPOS EXTRAÑOSCUERPOS EXTRAÑOS NEONATOS PREMATUROSNEONATOS PREMATUROS NEUTROPENICOSNEUTROPENICOS CIRUGIA PREVIACIRUGIA PREVIA

INFECCIONES URINARIAS AMBULATORIAS EN INFECCIONES URINARIAS AMBULATORIAS EN MUJERES SEXUALMENTE ACTIVAS (MUJERES SEXUALMENTE ACTIVAS (S.saprophyticusS.saprophyticus))

OSTEOMIELITIS ENOSTEOMIELITIS EN SECUNDARIA A INFECCION DE PROTESIS ARTICULARSECUNDARIA A INFECCION DE PROTESIS ARTICULAR ESTERNAL SECUNDARIA A CIRUGIA TORACICAESTERNAL SECUNDARIA A CIRUGIA TORACICA RELACIONADA A INFECCION DE SISTEMAS DE RELACIONADA A INFECCION DE SISTEMAS DE

HEMODIALISISHEMODIALISIS

SCN. INFECCIONES ASOCIADAS SCN. INFECCIONES ASOCIADAS A CUERPOS EXTRAÑOSA CUERPOS EXTRAÑOS

Protesis articularProtesis articular 20-40 20-40Lentes intraocularesLentes intraoculares >50-70>50-70EVPPEVPP 30 30EVPTEVPT 20 20Parches vascularesParches vasculares 6-60 6-60CatéteresCatéteres 40-60 40-60Diálisis peritonealDiálisis peritoneal 17-53 17-53ShuntsShunts 40-60 40-60

BACTERIEMIA ASOCIADA A BACTERIEMIA ASOCIADA A CATETERES. EtiologíaCATETERES. Etiología

Soloaga,R y cols.; ASM 2002

1149

36

114

421

122

456

T

799350 (100)Total

29 7 (2)otros

79 35 (10)Levaduras

35269 (19.7)SCN

4676 (21.7)S. aureus

293163 (46.6)Bacilos Gram (-)

Hc(-)

n

Hc(+)

n (%)

Microorganismo

BACTERIEMIA. ETIOLOGIABACTERIEMIA. ETIOLOGIA

GERMENGERMEN SCOPESCOPE NNIS/CDCNNIS/CDC SIR-98SIR-98

SCNSCN 3131 3131 99

S.aureusS.aureus 1616 1616 2020

K.pneu-K.pneu-

moniaemoniae 5,65,6 1818

E.cloacaeE.cloacae 4,94,9 1111

E.coliE.coli 5,95,9 55 1010

P.aeruginosaP.aeruginosa 4,34,3 33 1010

AcinetobacterAcinetobacter 77

BACTERIEMIA EN PACIENTES BACTERIEMIA EN PACIENTES NEUTROPENICOSNEUTROPENICOS

Elting,L. Clin Inf Dis, 1997. 909 episodios de 10 estudios

diferentes

46

42

13

Gram +

Gram -

Polimic

38

18

28

10

SCNS.aureusS.viridansOtros

HEMOCULTIVOS. IMPORTANCIA HEMOCULTIVOS. IMPORTANCIA RELATIVA DE CONTAMINANTESRELATIVA DE CONTAMINANTES

Weinstein 1983

HNRG 1990-1991

ICYCC 1996-1997

Roberts J Inf Dis. 168. 1993

Mirrett. ASM 1993

SCN P.acnes Micrococcus spp Corynebacterium S.viridans Bacillus spp C.perfrigens Clostridium spp E.faecalis Acinetobacter sp BNF (no PAE)

94 99 97 79 48 99 50 67 13 0 0

96 100 100 100 87 100 - - 0 - 74

78 100 100 89 43 100 - - 5 3,4 50

75 75

Microorganismo NN %%

S. aureusS. aureus 6666 5555

P. aeruginosaP. aeruginosa 1212 1010

E. faecalisE. faecalis 88 77

E. coliE. coli 77 66

K. pneumoniaeK. pneumoniae 44 33

E. cloacaeE. cloacae 33 33

S . epidermidisS . epidermidis 33 33

A. baumanniiA. baumannii 22 22

P. vulgarisP. vulgaris 22 22

S. marcescensS. marcescens 22 22

H. influenzae no bH. influenzae no b 11 11

S. agalactiaeS. agalactiae 11 11

Estreptococo b hemolitico CEstreptococo b hemolitico C 11 11

P. mirabilisP. mirabilis 11 11

M. morganiiM. morganii 11 11

E. faeciumE. faecium 11 11

P. stutzeriP. stutzeri 11 11

S. viridansS. viridans 11 11

Escherichia sppEscherichia spp 11 11

Acinetobacter sppAcinetobacter spp 11 11

AGENTES ETIOLOGICOS DE OSTEOMIELITIS.AGENTES ETIOLOGICOS DE OSTEOMIELITIS.HOSPITAL DE NIÑOS RICARDO GUTIERREZ. 1996-2000HOSPITAL DE NIÑOS RICARDO GUTIERREZ. 1996-2000

ARTRITIS BACTERIANA. ETIOLOGIA.ARTRITIS BACTERIANA. ETIOLOGIA.GOLDENBERG, D. LANCET; 351. 1998GOLDENBERG, D. LANCET; 351. 1998

GERMENGERMEN Inglaterra y GalesInglaterra y Gales FranciaFrancia AustraliaAustralia


Todos los Todos los

estreptococosestreptococos

2828 1010 2121

S.pneumoniaeS.pneumoniae 1010 00 11

S.pyogenesS.pyogenes 88 99 1616

Bacilos gram -Bacilos gram - 1919 1616 44

H.influenzaeH.influenzae 77 00 11

E.coliE.coli 66 99 11

PseudomonasPseudomonas 22 44 11

OtrosOtros 44 33 11

N.gonorrhoeaeN.gonorrhoeae 0,60,6 33 1212

AnaerobiosAnaerobios 1,41,4 22 33

Microorganismo NN %%

S. aureusS. aureus 4646 60

E. cloacaeE. cloacae 3 4

E. faecalisE. faecalis 33 44

H. Influenzae bH. Influenzae b 3 44

Salmonella EnteritidisSalmonella Enteritidis 33 44

N. menigitidis 3 4

Haemophilus influenzae no bHaemophilus influenzae no b 22 33

K. pneumoniaeK. pneumoniae 22 33

S. pyogenes 2 33

S. pneumoniaeS. pneumoniae 22 33

E. agglomeransE. agglomerans 1 1

A. baumanniiA. baumannii 11 11

S. agalactiaeS. agalactiae 11 11

Salmonella Infantis 11 11

Salmonella spp 11 11

S. marcescensS. marcescens 11 11

S. agalactiae 11 11

AGENTES ETIOLOGICOS DE ARTRITIS.AGENTES ETIOLOGICOS DE ARTRITIS.HOSPITAL DE NIÑOS RICARDO GUTIERREZ. 1996-2000HOSPITAL DE NIÑOS RICARDO GUTIERREZ. 1996-2000

INFECCIONES URINARIAS POR S.saprophyticus

->80% SE CORRESPONDEN CON PIURIA Y/O HEMATURIA.

-2ºAGENTE DE IU EN MUJERES JOVENES SEXUALMENTE ACTIVAS (INFRECUENTE EN OTROS GRUPOS).

-CLINICA INDISTINGUIBLE DE E.coli

-ASOCIACION CON SUF

-MAYOR ADHERENCIA A CEL.UROEPITELIALES QUE S.epidermidis

-UREASA COMO IMPORTANTE FACTOR DE VIRULENCIA

-RARAMENTE DOCUMENTADO EN ENDOCARDITIS Y SEPSIS

SCN. CRITERIOS DE JERARQUIZACION EN SCN. CRITERIOS DE JERARQUIZACION EN DISTINTAS MUESTRASDISTINTAS MUESTRAS

X X X X

X X

X X X X

X X X X

X

X X X

Clinica compatible

>100 leucoc/mm3

Visualiz en Gram

Crecim. en mediosólido

Crecim. en multiplesmuestras

Efluente turbio

Rpta inflamatoria

CriterioCriterio Diálisis perit LCR (shunts) Prótesis osteoartic Diálisis perit LCR (shunts) Prótesis osteoartic HQ HQ

SCN. CRITERIOS DE JERARQUIZACION EN SCN. CRITERIOS DE JERARQUIZACION EN HEMOCULTIVOSHEMOCULTIVOS

CLINICA COMPATIBLECLINICA COMPATIBLE

AISLAMIENTO EN MAS DE 1 MUESTRA DE MISMA ESPECIE, AISLAMIENTO EN MAS DE 1 MUESTRA DE MISMA ESPECIE, BIOTIPO Y ANTIBIOTIPO CUANTITATIVOBIOTIPO Y ANTIBIOTIPO CUANTITATIVO

AISLAMIENTO EN UNA MUESTRA REPRESENTATIVAAISLAMIENTO EN UNA MUESTRA REPRESENTATIVA

RECUENTO DE COLONIAS >100 UFC/ml (NEONATOS)RECUENTO DE COLONIAS >100 UFC/ml (NEONATOS)

AISLAMIENTO PRECOZAISLAMIENTO PRECOZ

AUSENCIA DE TRATAMIENTO ANTIBIOTICO UTILAUSENCIA DE TRATAMIENTO ANTIBIOTICO UTIL

CRITERIOS PARA DIFERENCIAR BACTERIEMIA DE CRITERIOS PARA DIFERENCIAR BACTERIEMIA DE CONTAMINACION. UTILIDAD DEL ANTIBIOGRAMA CONTAMINACION. UTILIDAD DEL ANTIBIOGRAMA

POR VITEKPOR VITEK

KHATHIB, R; Y COL. J CLIN MICROBIOL, 33, 1995. 11.092 HEMOCULTIVOS, 896 POSITIVOS Y 369 CON SCN. IDENTIFICACION Y SENSIBILIDAD POR VITEK VS DETERMINACION DE

PLASMIDOS

N(%)

MiSMA CEPA (33) DIFERENTE(44)

N CEPAS CON IGUAL

CIM

10 ATB 33 (100) 7 (15,9)

4 ATB 33 (100) 14 (32,8)

N CEPAS DISCORD 0 37

1 ATB 0 8 (21,6)

2 ATB 0 8 (21,6)

3 ATB 0 21 (56,8)

CRITERIOS PARA DIFERENCIAR CRITERIOS PARA DIFERENCIAR BACTERIEMIA DE CONTAMINACION. BACTERIEMIA DE CONTAMINACION.

UTILIDAD DEL ANTIBIOGRAMA POR VITEKUTILIDAD DEL ANTIBIOGRAMA POR VITEK

KHATHIB, R; Y COL. J CLIN MICROBIOL, 33, 1995. 11.092 HEMOCULTIVOS, 896 POSITIVOS Y 369 CON SCN. IDENTIFICACION Y SENSIBILIDAD POR VITEK VS DETERMINACION DE

PLASMIDOS

S(%) E(%) VP+(%)VP-(%)

2 O MAS HEMOCUL

POSIT EN 24 HS 66,7 38,5 46,7 58,8

FOCO IDENTIF 33 92 78 63

CRECIM EN 24 HS 86 11 44 50

MISMO ATB 100 84 82,5 100

FIEBRE 71 77 71 81

MISMO ATB +

FIEBRE 71 92 88 100

2 o MAS HEMOCULTIVOS POSITIVOS EN 24 HS

FOCO IDENTIF

CRECIM. 24HS

MISMO ATBGRAM

FIEBRE

MISMO ATGRAM +FIEBRE

NUMERO DE HEMOCULTIVOS NUMERO DE HEMOCULTIVOS POSITIVOSPOSITIVOS

A mayor número de hemocultivos positivos mayor A mayor número de hemocultivos positivos mayor probabilidad de bacteriemiaprobabilidad de bacteriemia..

Beekman,S. Control Hosp Epidemiol, 26. 2005 McGregor. Arch Intern Med, 130. 1972 Weinstein,M Rev infect Dis, 5. 1983 Weinstein,M. Clin Infect Dis, 24. 1997 Schifman,R.Arch Pathol Lab Med, 122, 1998. Tokars,J. Clin Infect Dis, 39. 2004 Hall,K. Clin Microbiol Rev, 19. 2006 Herwaldt,L. Clin Infect Dis, 22. 1996 Seo,S . Am J Med, 109. 2000


LimitacionesLimitaciones 2/2 o 3/3 pueden ser 2/2 o 3/3 pueden ser

una sola venopuncion y no estar aclaradouna sola venopuncion y no estar aclaradoen la ordenen la orden

Diferentes cepas (limitación de bio y antibiotipo vs Diferentes cepas (limitación de bio y antibiotipo vs técnicas moleculares)técnicas moleculares)

Recontaminación a partir de la piel del pacienteRecontaminación a partir de la piel del paciente 1/2 o 1/3 puede deberse a:1/2 o 1/3 puede deberse a:

Diferente volumen inoculado en los frascosDiferente volumen inoculado en los frascosDiferente tipo de frasco utilizadoDiferente tipo de frasco utilizadoBacteriemia policlonal por SCNBacteriemia policlonal por SCNBacteriemia transitoriaBacteriemia transitoria


LimitacionesLimitaciones

1/2 o 1/3 puede ser bacteriemia en cerca del 30% de los casos1/2 o 1/3 puede ser bacteriemia en cerca del 30% de los casos

Herwaldt,L. Clin Infect Dis 22, 1996.Herwaldt,L. Clin Infect Dis 22, 1996. Ponce de Leon y Wenzel,R. Am J Med, 77. 1984Ponce de Leon y Wenzel,R. Am J Med, 77. 1984Dominguez de villota,E. Intensive Care Med, 13, 1987 Dominguez de villota,E. Intensive Care Med, 13, 1987

APORTE DEL NUMERO DE MUESTRAS APORTE DEL NUMERO DE MUESTRAS POSITIVAS PARA JERARQUIZAR SCNPOSITIVAS PARA JERARQUIZAR SCN

>1 MUESTRAPOSITIVA

< 2 MUESTRAPOSITIVA

BACTERIEMIA 67% (42/ 63) 33% (21/ 63)

CONTAMINANTE 8% (16/ 194) 92%(178/ 194)

TIEMPO DE POSITIVIZACIONTIEMPO DE POSITIVIZACION

No diferencia significativamente bacteriemia de contaminación cuando se aíslan dentro de las primeras 48 hs.

Cuando se recupera SCN o difteroides o Bacillus spp luego del 3 día casi siempre es contaminación.

– Souvenir,D. J Clin Microbiol, 36. 1998.

– Khatib,R. J Clin Microbiol, 33. 19

– Hall,K. Clin Microbiol Rev, 19. 2006 95

– Evans,M Diagn Microbiol Infect Dis, 14. 1991.

– Han,X. Diagn Microbiol Infect Dis, 33. 1999.

– Hardy,D. J Clin Microbiol, 30. 1992

– Huang,A. Eur J Clin Microbiol Infect Dis, 17. 1998.

– Kurlat,I. J Clin Microbiol, 27. 1989

– Reisner,B. Clin Microbiol Rev, 37. 1999.

– Saito,T. J Infect Chemother, 9. 2003.

– Masterson,K. Am J Clin Pathol, 90. 1988

Cultivo de biopsias de heridas Cultivo de biopsias de heridas quemaduraquemadura

HHtal tal de Quemados.de Quemados. Enero1998- Enero1998- Septiembre 1999Septiembre 1999

Microorganismo 10 5 <105 Neg.

Staphylococcus aureus 39 (37.8) 32 (37.6) Pseudomonas aeruginosa 32 (31.1) 39 (45.8) Acinetobacter baumanii 10 (9.7) 2 (2.3) Proteus spp. 6 (5.8) 6 (7.0) Providencia stuartii 8 (7.8) 4 (4.7) Enterobacter aerogenes 3 (2.9) - Streptococcus pyogenes 2 (1.94) - Rhodococcus equi 1 (0.97) - Staphylococcus

epideepidermidis 1 (0.97) 2 (2.3)

Corynebacterium spp. 1 (0.97) - Totales

103

85

118

ESTUDIO DE NEUMONIA INTRAHOSPITALARIAESTUDIO DE NEUMONIA INTRAHOSPITALARIASoloaga y col. Infect y Microbiol Clin 1999Soloaga y col. Infect y Microbiol Clin 1999

ETIOLOGIAETIOLOGIA

G E R M E N N º %P . a e ru g in o sa 6 0 2 7 ,1K . p n e u m o n ia e 2 8 1 2 ,6S . a u re u s 2 2 9 ,9S . p n e u m o n ia e 1 5 6 ,7H . in flu e n za e 1 5 6 ,7E n te ro b a c te r sp p 1 3 5 ,8S . m a rc e sc e n s 1 1 4 ,9P . m ira b ilis 7 3 ,1M . c a ta rrh a lis 6 2 ,7E . c o li 6 2 ,7S . e p id e rm id is 5 2 ,2P ro v id e n c ia sp p 2 0 ,9S . m a lto p h ilia 2 0 ,9S . sa n g u is 2 0 ,9C . fre u n d ii 1 0 ,4

ETIOLOGIAETIOLOGIAIncidencia documentada por técnicas broncoscópicas. Análisis de 24Incidencia documentada por técnicas broncoscópicas. Análisis de 24

estudios y 1.689 episodios. Chastre-Fagon. estudios y 1.689 episodios. Chastre-Fagon. Am J Respir Crit Care Med, 165. 2002.Am J Respir Crit Care Med, 165. 2002.

MicroorganismoMicroorganismo Frecuencia (%)Frecuencia (%)•P. aeruginosaP. aeruginosa 24,424,4AcinetobacterAcinetobacter spp spp 7,97,9S.maltophiliaS.maltophilia 1,71,7Enterobacterias*Enterobacterias* 14,114,1Haemophilus Haemophilus sppspp 9,89,8S.aureusS.aureus 20,420,4S.pneumoniaeS.pneumoniae 4,14,1StreptococcusStreptococcus spp spp 88SCNSCN 1,41,4Neisseria Neisseria sppspp 2,62,6AnaerobiosAnaerobios 0,90,9HongosHongos 0,90,9Otros (<1% c/u)Otros (<1% c/u) 3,83,8

*E.coli 24%; Proteus spp 22%; Klebsiella spp 15,6%; Enterobacter spp 19%; *E.coli 24%; Proteus spp 22%; Klebsiella spp 15,6%; Enterobacter spp 19%; Citrobacter spp 5%; Serratia spp 12%; H.alvei 2,1%Citrobacter spp 5%; Serratia spp 12%; H.alvei 2,1%

ETIOLOGIAETIOLOGIA

Subcomisión de Antimicrobianos de SADEBACSubcomisión de Antimicrobianos de SADEBAC11, , División de la AAM y Grupo SIRDivisión de la AAM y Grupo SIR22

11Coordinadora: A.Coordinadora: A.FamigliettiFamiglietti. Miembros:. Miembros:BantarBantarC.,C.,CasellasCasellasJ. M.,J. M.,CoutoCoutoE.,E.,FamigliettiFamigliettiA.,A.,GutkindGutkindG.,G.,GoldbergGoldbergM., Galas M.,M., Galas M.,KovenskyKovenskyJ.,J.,NicolaNicolaF.,F.,PasteránPasteránF., Marín M.,F., Marín M.,RadiceRadiceM., Quinteros M.,M., Quinteros M.,SoloagaSoloagaR.R.22Grupo SIR Grupo SIR

Localidad, Centros Participantes (Titulares)Pcia. Buenos Aires, Bahía Blanca, Hosp. Privado del Sur (Paris de Baeza, Ana M.)Pcia. Buenos Aires,BhaíaBlanca, IACA Laboratorios (Perez, Susana)Pcia-Buenos Aires, Avellaneda, SanatorioStoiz(Rodrigo,Monica)Pcia. Buenos Aires, Junín, H.Interz. Agudos -"Dr. A.Piñeyro" (Rustici, Stella)Pcia. Buenos Aires, La Plata, Hosp. Niños Sor Ma.Ludovica(Altschuler, Marta)Pcia. Buenos Aires, La Plata, Hosp. Italiano (Pantozzi,Flavia)Pcia. Buenos Aires, Morón, Clínica Modelo (Bardi, Leticia)Pcia. Buenos Aires, Pergamino, Lab. Dr. Fuentes (SchusterMarcelo)Pcia. Buenos Aires, San Fernando, Sanatorio San Lucas (Casellas,JoseM.)Pcia. Buenos Aires, San Martín, Hosp. Eva Perón (Almuzara,Marisa)Capital Federal, Hosp. de Clínicas J. de San Martín (Famiglietti,Angela)Capital Federal, Lab.DomeqyLafage(Fernandez Canigia, L.)Capital Federal, FundaciónFavaloro(Fernandez,Analia)Capital Federal, SanatorioGreyton(Latorraga, Claudia)Capital Federal, Hosp. Muñiz (Quinteros, M/Couto, E)Capital Federal, Centro de estudiosinfectológicos(Scilingo,Viviana)Capital Federal,CemicS.A. (Smayevsky,Jorgelina)Córdoba, Hosp. Niños de Córdoba (Carvajal,Lydia)Córdoba, Hosp. de Clínicas (Monterisi,Aida)Entre Ríos, Paraná, Hosp. Materno Infantil San Roque (Fernandez,Hector)Entre Ríos, Sanatorio Adventista del Plata (Posse, Graciela)Entre Ríos,Gualeguaychú, Hosp. Centenario (Tanaro,Jose)La Pampa, Santa Rosa, Hosp.Gdor. Centeno (Moreno,Noemi)Mendoza, San Rafael, Hosp. del Sur Mendocino, (Suoni Schichi, N)Misiones, Posadas, SanatorioNosiglia(Vergara, Marta)Neuquén, Hosp.Heller(Pianciola, Luis)Neuquén, PoliclínicoNeuquén(Soriano, Silvia V.)Río Negro,GralRoca, Hosp. FranciscoLopezLima (Durany, Daniela)Río Negro, Bariloche, Hosp. Ramón Carrillo (Rubinstein, Gabriela)Salta, Hosp. San Bernardo (Arias, Cecilia)San Juan, Hosp. Marcial Quiroga (Castro Hugo)San Juan, Hosp. GuillermoRawson(Navarro, Roberto)Santa Fe, Hosp.Iturraspe(Defendi, Marta)Santa Fe,VenadoTuerto, Hosp.Samco"Dr. A.Gutierrez" (PiñeirodeGarcia) Santa Fe, Rosario, Centro Médico y PAM ( (Sutich,Ema)Santa Fe, Rosario, Hosp.Esc. EvaPeron(Castagnaviz, N)

ETIOLOGIAETIOLOGIAIncidencia documentada por técnicas broncoscópicas. Incidencia documentada por técnicas broncoscópicas.

Análisis de 31 centreos. Análisis de 31 centreos. SIR 1996- 2001. SIR 1996- 2001.

Congreso de SADET 2002.Congreso de SADET 2002.

Frecuencia relativa de los microorganismosFrecuencia relativa de los microorganismosaislados de LBA de origen aislados de LBA de origen intrahospitalariosintrahospitalarios

Otras Enterobacterias (42): E. coli (6), P. mirabilis (9), E. cloacae (7),

S. marcescens (6), E. aerogenes (5), K. oxytoca (3), M. morganii (2),

Providencia spp. (3) y C. freundii (1).

S. aureus(26.4%)

Acinetobacter spp(23.9%)

P. aeruginosa(19.3%)

K. pneumoniae(8.5%)

Otras Enterobacterias(10.5%)

S. pneumoniae(4%)

Haemophilus spp (3.3%)

Otros(4.1%)

NEUMONIA EN PACIENTES NEUMONIA EN PACIENTES FIBROQUISTICOS. IMPORTANCIA DE FIBROQUISTICOS. IMPORTANCIA DE

S.aureusS.aureus

HOSPITAL DE NIÑOS RICARDO GUTIERREZHOSPITAL DE NIÑOS RICARDO GUTIERREZ

S.aureus

S.aureus meticilino resistente

1987 1997 2001

45,2 43,9 60,3

5,2 5,6 22,7

INFECCIONES INFECCIONES NOSOCOMIALES. NNISSNOSOCOMIALES. NNISS

GERMENGERMEN IUIU HQHQ NMNNMN

SCNSCN 44 1414 22


E.coliE.coli 2525 88 44

P.aeruginosaP.aeruginosa 1111 88 1616

Enterococcus sppEnterococcus spp 1616 1212 22

Emori y Graves, Clin Microb Rev 1993 (CDC)

Aislamientos de S.aureus de orina debesugerir bacteriemia y focos a distancia

Dentro de los SCN, S.lugdunensis es el de mayorvirulencia y cuando se aísla de caéteresdebe hacerse consideraciones similares

a S.aureus

ESTAFILOCOCOS. CRONOLOGIA ESTAFILOCOCOS. CRONOLOGIA DE LA RESISTENCIADE LA RESISTENCIA

1950’s Resistencia a PenicilinaResistencia a Penicilina 1960’s1960’s Aparición de meticilino resistencia Aparición de meticilino resistencia

clásicaclásica 19751975 MRSA multiresistentesMRSA multiresistentes 1980’s1980’s MRSA comienza a ser endemicaMRSA comienza a ser endemica

en los hospitales universitariosen los hospitales universitarios 19871987 S.haemolyticusS.haemolyticus resistente a resistente a

vancomicina y vancomicina y S.aureusS.aureus resistentes a resistentes a mupirocinamupirocina

1990’s1990’s Se descubren las cepas con Se descubren las cepas con sensibilidad disminuída a sensibilidad disminuída a

glicopéptidos en glicopéptidos en S.aureusS.aureus (GISA (GISA o o VISA) y VISA) y a otros coagulasa negativa a otros coagulasa negativa (GISS o VISS)(GISS o VISS)

2000´S2000´S VAN A EN VAN A EN S.AUREUSS.AUREUS

BACTERIEMIA POR S.aureus. MORTALIDAD HISTORICA

70

28

50

30

0

10

20

30

40

50

60

70

1937 1944 1954 1962

PreATB

Penicilina

Blasa

Mrsa

ESTAFILOCOCOS. ESTAFILOCOCOS. COMPORTAMIENTO FRENTE A LOS COMPORTAMIENTO FRENTE A LOS

BETA LACTAMICOSBETA LACTAMICOS

BETA LACTAMASABETA LACTAMASA METICILINO RESISTENCIA METICILINO RESISTENCIA VERDADERAVERDADERA

ALTERACION DE PLP 1,2, 3ALTERACION DE PLP 1,2, 3

TOLERANCIATOLERANCIA

MECANISMOSMECANISMOS

ESTAFILOCOCOS. COMPORTAMIENTO FRENTE A LOS BETA LACTAMICOS

ATB BLASA- BLSA+ MRSA

PENI G 0,02 >25 >64AMP 0,06 >25 >64PIPER 0,8 25 >64TICAR 1-2 25 >64OXAC 0,2 0,4 64CTN 0,5 0,5-1 >32CFDOL 1 1 8FOX 4-8 4-8 >64CTX 2 2 128CAZ 16 16 128CEFP 0,5 0,5 >32AZT >128 >128 >128IMP 0,006 0,006 2

OXAOXA

SensibleSensible

Resistente Resistente

Verdadera Verdadera ((mecmec A +) A +)

Resistente Resistente

Falsa Falsa ((mec mec A -)A -)

HOMOGENEAHOMOGENEA

HETEROGENEAHETEROGENEA

ß-lasaß-lasa (-(-))

ß-lasaß-lasa ((+) R +) R PENPEN

SS PENPEN

Hiperproducción de Hiperproducción de ß-lasa (AORSA)ß-lasa (AORSA)

PBPs modificadas PBPs modificadas (MODSA)(MODSA)

Staphylococcus y Meticilino ResistenciaStaphylococcus y Meticilino Resistencia

IMPACTO CLINICO DE LA IMPACTO CLINICO DE LA RESISTENCIA A METICILINARESISTENCIA A METICILINA

METICILINO RMETICILINO R

USO DE GLICOPEPTIDOSUSO DE GLICOPEPTIDOS RPTA CLINICA VARIABLERPTA CLINICA VARIABLEPOCAS OPCIONESPOCAS OPCIONES RESERVORRESERVOR

--EMPIRICAEMPIRICA ENDOCARDITISENDOCARDITIS EN INTOLERANCIAEN INTOLERANCIA GENESGENES

--DEFINITIVADEFINITIVA PROTESISPROTESIS A GLICOPEPTA GLICOPEPT DE RDE R

EMERGENCIA DE REMERGENCIA DE R TERAPIA INVASIVATERAPIA INVASIVA DESENSIBILIZACDESENSIBILIZAC TRANSF RTRANSF R

A GLICOPEPTIDOSA GLICOPEPTIDOS LINEZOLIDLINEZOLID

QUINUPRISTINA-QUINUPRISTINA-DALFOPRISITINADALFOPRISITINA

DROGAS EXPERIMENTALESDROGAS EXPERIMENTALES

EMERGENCIA DE CEPAS DE ESTAFILOCOCOSEMERGENCIA DE CEPAS DE ESTAFILOCOCOSCON RESISTENCIA A METICILINACON RESISTENCIA A METICILINA

INTERNACION PROLONGADAINTERNACION PROLONGADAINTERNACION EN UCI O QUEMADOSINTERNACION EN UCI O QUEMADOS

TERAPIA ATB PREVIATERAPIA ATB PREVIAPROXIMIDAD A PCTE INFECTADO O PROXIMIDAD A PCTE INFECTADO O

COLONIZADOCOLONIZADOPRESENCIA DE HERIDA QUIRURGICAPRESENCIA DE HERIDA QUIRURGICA

DIABETICOS INSULINO DEPENDIENTESDIABETICOS INSULINO DEPENDIENTESDIVDIV

HEMODIALIZADOSHEMODIALIZADOS

FACTORESFACTORESASOCIADOSASOCIADOS

RIESGO DE RIESGO DE INFECCIONINFECCION

30-60% DE LOS COLONIZADOS30-60% DE LOS COLONIZADOS

LIMITACIONES DE LA LIMITACIONES DE LA TERAPIA CON VANCOMICINATERAPIA CON VANCOMICINA

CONCENTRACION TISULAR LIMITADACONCENTRACION TISULAR LIMITADA 2,5 ug/ml EN ESPUTO2,5 ug/ml EN ESPUTO 5 ug/ml EN ABSCESOS5 ug/ml EN ABSCESOS

POBRE ACTIVIDAD BACTERICIDA CONTRA POBRE ACTIVIDAD BACTERICIDA CONTRA S.aureusS.aureus EFICACIA CLINICA COMPROMETIDAEFICACIA CLINICA COMPROMETIDA

SNCSNC BIOFILM EN PROTESISBIOFILM EN PROTESIS

NO MEJORA LA SOBREVIDA EN SEPSIS POR MRSANO MEJORA LA SOBREVIDA EN SEPSIS POR MRSA RESISTENCIA CLINICARESISTENCIA CLINICA

S.haemolyticusS.haemolyticus S.epidermidisS.epidermidis GISAGISA

SELECTOR PARA RESISTENCIA A VANCOMICINASELECTOR PARA RESISTENCIA A VANCOMICINA VREVRE GISAGISA

METICILINO-RESISTENCIA

gen mec Agen mec A

PBP 2aPBP 2a

Resistencia a TODOS los BETA-LACTAMICOS

Resistencia a TODOS los BETA-LACTAMICOS

ORIGEN CROMOSOMICOORIGEN CROMOSOMICOORIGEN CROMOSOMICOORIGEN CROMOSOMICO

S a OXAS a OXA R a R a OXAOXA

2a o 2’

11

22

333’3’

44

11

22

333’3’

44

PBPs de Staphylococcus spp.PBPs de Staphylococcus spp.

R a OXA RESISTENTE a Penicilinas, Cefalosporinas, Carbapenems,

Ampicilina/Sulb.

R a OXA Usualmente ligada a RESISTENTE a Tetraciclina, Aminoglucósidos, Cloranfenicol,

Eritromicina

R a OXA RESISTENTE a Penicilinas, Cefalosporinas, Carbapenems,

Ampicilina/Sulb.

R a OXA Usualmente ligada a RESISTENTE a Tetraciclina, Aminoglucósidos, Cloranfenicol,

EritromicinaAntimimicrobianos. Inst. Malbran

GRADOS DE EXPRESION DE METICILINO RESISTENCIA

CIM MET (µg/ml)CIM MET (µg/ml)

HETERORESISTHETERORESIST

Clase 4Clase 4 400 400 HOMORESISTHOMORESIST

Punto corte MET:Punto corte MET: 8 8 16 16 S RS R

Lencastre y col. J. Cl. Micr. Agosto,1995. p.2032-Lencastre y col. J. Cl. Micr. Agosto,1995. p.2032-20352035

Clase 1 Clase 1 Clase 2 Clase 2 Clase 2 – 3 Clase 2 – 3 Clase 3 Clase 3

1.5 - 31.5 - 36 -126 -12

25 -5025 -50100 -200100 -200

METICILINO RESISTENCIA VERDADERAMETICILINO RESISTENCIA VERDADERAMETICILINO RESISTENCIA VERDADERAMETICILINO RESISTENCIA VERDADERA

HOMOGENEAHOMOGENEA HETEROGENEAHETEROGENEA

Toda la población expresa la PLP 2aToda la población expresa la PLP 2a Mayoría de la poblaciónMayoría de la poblacióntiene resistenc. de bajo niveltiene resistenc. de bajo nivel

No inducibleNo inducible Termosensible (37-42ºC)Termosensible (37-42ºC)Expresión favorecida porExpresión favorecida por

Generalmente B lactamasa (-) o Generalmente B lactamasa (-) o HiperosmolaridadHiperosmolaridadbajo cantidadbajo cantidad T de incubaciónT de incubación

(24-48 hs)(24-48 hs)

Grado IGrado I 1/101/107-87-8 Células c/ R de alto nivel Células c/ R de alto nivelGrado IIGrado II 1/101/104-64-6 Células c/ R de alto nivel Células c/ R de alto nivelGrado IIIGrado III 1/101/102-32-3 Células c/ R de alto nivel Células c/ R de alto nivel

CLSI 2010.

METICILINO RESISTENCIA. ANTIBIOGRAMA PORMETICILINO RESISTENCIA. ANTIBIOGRAMA PORDIFUSIONDIFUSION

S.aureus y S.epidermidisS.aureus y S.epidermidis

Pátina o micro-Pátina o micro-Colonias dentroColonias dentroDel halo = RDel halo = R

24 hs de24 hs deincubaciónincubación

METICILINO RESISTENCIA. ANTIBIOGRAMA PORMETICILINO RESISTENCIA. ANTIBIOGRAMA PORDIFUSION. CEFOXITINA 30 ugDIFUSION. CEFOXITINA 30 ug

S.aureus y SCNS.aureus y SCN

22 mm22 mm25 mm25 mm

CLSI, 2010.CLSI, 2010.

Screening Oxa 6µg/mlScreening Oxa 6µg/ml

Sau ATCC 29213 Control (-)

Sau ATCC 43300 Control (+)

Cepa clínica (+)

Cepa clínica (-)

SENSIBILIDAD: 95-100%SENSIBILIDAD: 95-100%ESPECIFICIDAD: 100%ESPECIFICIDAD: 100%

Hospital de Niños Ricardo GutierrezHospital de Niños Ricardo Gutierrez

Test de Screening: Placa de OXA 6µg/mlTest de Screening: Placa de OXA 6µg/ml

S. aureusS. aureus

Medio:Medio: MHA + 4% NaCl MHA + 4% NaCl

66 µg/ml OXAµg/ml OXA

Inóculo:Inóculo: 0.5 Mc.0.5 Mc. Farla Farland.nd.*Vol. de Inóculo: 1 µl (NCCLS 2001)*Vol. de Inóculo: 1 µl (NCCLS 2001)

Incubación:Incubación: 353500CC, , 24 hs24 hs

Resultado:Resultado: > 1 colonia = Resistente> 1 colonia = Resistente

Control de Calidad:Control de Calidad: S. aureusS. aureus ATCC 29213 (control ATCC 29213 (control negativo)negativo),, S. aureusS. aureus ATCC 43300 (control positivo) ATCC 43300 (control positivo)

*J. Clin. Microbiol. 2001.39:3781-3784

NO sirve para SCNNO sirve para SCN

La meticilino resistencia en La meticilino resistencia en StaphylococcusStaphylococcus spp se spp se acompaña frecuentemente de resistencia a otras acompaña frecuentemente de resistencia a otras familias de antibióticosfamilias de antibióticos MacrólidosMacrólidos AminoglucósidosAminoglucósidos QuinolonasQuinolonas TMSTMS CloranfenicolCloranfenicol TetraciclinasTetraciclinas

La multiresistencia puede ser un marcador de La multiresistencia puede ser un marcador de meticilino resistenciameticilino resistencia

J. Clin. Microbiol. 1999. 36 :81-85.J. Clin. Microbiol. 1999. 36 :81-85. J. Clin. Microbiol. 1999. 37 :3452-3457J. Clin. Microbiol. 1999. 37 :3452-3457J. Clin. Microbiol. 2000. 38 :3926-3931. J. Clin. Microbiol. 2000. 38 :3926-3931. J. Clin. Microbiol. 2000. 38 :185-190. J. Clin. Microbiol. 2000. 38 :185-190. J. Clin. Microbiol. J. Clin. Microbiol. 2001.2001. 39 :779-781. 39 :779-781. JAC. 2001. 47 :277-283.JAC. 2001. 47 :277-283.

MRSAMRSA SIN RESISTENCIA SIN RESISTENCIA ACOMPAÑANTEACOMPAÑANTE


FRANCIAFRANCIA Grecia, Australia, UK, Nueva Zelandia, TúnezGrecia, Australia, UK, Nueva Zelandia, Túnez

Serv. Antimicrob. Malbran



PRINCIPALMENTE INFECCIONES DE PIELPRINCIPALMENTE INFECCIONES DE PIELY PARTES BLANDAS.Y PARTES BLANDAS.

DOCUMENTACION DE INFECCIONES DOCUMENTACION DE INFECCIONES INVASIVASINVASIVAS

GENERALMENTE PACIENTES PEDIATRICOSGENERALMENTE PACIENTES PEDIATRICOS

RESISTENCIA BACTERIANA A LOS ANTIBIOTICOS.RESISTENCIA BACTERIANA A LOS ANTIBIOTICOS.PROBLEMAS INHERENTES A DISTINTAS LOCALIZACIONESPROBLEMAS INHERENTES A DISTINTAS LOCALIZACIONES

COMUNIDADCOMUNIDAD

S.aureus S.aureus meticilino meticilino resistenteresistente

PROBLEMA ASOCIADOPROBLEMA ASOCIADO

DROGADICTOS ENDOVENOSOSDROGADICTOS ENDOVENOSOS

HEMODIALIZADOSHEMODIALIZADOS

CAPDCAPD

CATETERES DE LARGA CATETERES DE LARGA PERMANENCIAPERMANENCIA

TRATAMIENTO ANTIBIOTICO TRATAMIENTO ANTIBIOTICO PREVIOPREVIO

PEDIATRICOS, DEPORTES DE PEDIATRICOS, DEPORTES DE CONACTO, CARCELESCONACTO, CARCELES

Detección de Meticilino-Resistencia en Staphylococcus spp.


CLSI 2010CLSI 2010 para para Staphylococcus sppStaphylococcus spp

EspeciesEspecies Disco FOXDisco FOX 30µg 30µg

(mm)(mm)CIM CIM

(µg/ml)(µg/ml)

RR II SS RR SS

S. aureus yS. aureus yS.lugdu-S.lugdu-nensisnensis

<< 21 21----

>> 22 22?? ??

SCNSCN <24<24 ------ >> 25 25?? ??



NCCLSNCCLS 2010 2010 para para Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus

Cepas con CIM a oxacilina Cepas con CIM a oxacilina ≥4ug/ml y mecA negativas ≥4ug/ml y mecA negativas

deben considerarse resistentes.deben considerarse resistentes.Estas cepas podrían dar S con Estas cepas podrían dar S con

cefoxitinacefoxitina

Vitek GPS-105 card y Test de Vitek GPS-105 card y Test de Difusión vs. gen Difusión vs. gen mecmecA para A para S. Coag. S. Coag.

NegativaNegativa

Vitek GPS-105 card y Test de Vitek GPS-105 card y Test de Difusión vs. gen Difusión vs. gen mecmecA para A para S. Coag. S. Coag.

NegativaNegativa COMPARISON OF THE VITEK GRAM-POSITIVE COMPARISON OF THE VITEK GRAM-POSITIVE SUSCEPTIBILITY (GPS) 105 CARD, THE DISK SUSCEPTIBILITY (GPS) 105 CARD, THE DISK DIFFUSION TEST AND DIFFUSION TEST AND MECAMECA ANALYSIS FOR ANALYSIS FOR

DETECTING OXACILLIN RESISTANCE IN CLINICAL DETECTING OXACILLIN RESISTANCE IN CLINICAL ISOLATES OF COAGULASE-NEGATIVE ISOLATES OF COAGULASE-NEGATIVE

STAPHYLOCOCCI.STAPHYLOCOCCI.S. Corbella, A. Corso, D. Faccone, R. Melano, P. Gagetti, M. Iglesias S. Corbella, A. Corso, D. Faccone, R. Melano, P. Gagetti, M. Iglesias

# Abstract presentado en ASM 2002# Abstract presentado en ASM 2002

# 100 # 100 S. Coagulasa NegativaS. Coagulasa Negativa mecmecA positivo: 54A positivo: 54

mecmecA negativo:A negativo: 46 46

Species Number

S epidermidis 49

S. saprophyticus 14

S. hominis 13

S. haemolyticus 7

S. simulans 6

S. auricularis 4

S. capitis 3

S. cohnii 2

S. warneri 2

TOTAL 100

Vitek GPS-105 card y Test de Difusión vs. Vitek GPS-105 card y Test de Difusión vs. gen gen mecmecA para A para S. Coag. NegativaS. Coag. Negativa




PCR mecAdetection

Nº of isolate

s

Nº OF ISOLATES

Vitek GPS 105 card (ug/ml)

Disk diffusion(mm)

0.25 0.5 > 18 17

POSITIVE 54 0 54 1* 53

NEGATIVE 46 30 16* 31 15* NEGATIVE without

S. saprophyticus and S. cohnii

30 29 1* 30 0

TABLE 1. Evaluación de VITEK GPS 105 Card y Test de Difusión para la detección de OXA-resistencia en 100 CoNS.

*Cepas mal categorizadas por los métodos fenotípicos.



Species N mecA PCRVitek GPS 105

card (µg/ml)

Disk difussion

(mm)

S. saprophyticus

13 Negative R* R*

S. cohnii 2 Negative R* R*

S. simulans 1 Negative R* S

S. hominis 1 Positive R S*

TABLE 2. Resumen de resultados discrepantes entre la PCR del gen mecA y el test de difusión o Vitek GPS 105 card.

*Cepas mal categorizadas por los métodos fenotípicos.



VitekGPS 105 card

Disk diffusion

Sensitivity 54/54 (100

%)53/54 (98.1

%)

Specificity withoutS. saprophyticus

and S. cohnii

29/30 (96.7%)

30/30 (100%)

TABLE 3. Sensibilidad y especificidad de Vitek GPS 105 card y el test de difusión.

EXCLUYENDO LOS 14 EXCLUYENDO LOS 14 S. saprophyticus y S. saprophyticus y 22 S. cohnii S. cohniiLA ESPECIFICIDAD SE INCREMENTO A 96.7% y 100% PARA Vitek LA ESPECIFICIDAD SE INCREMENTO A 96.7% y 100% PARA Vitek

y EL TEST DE DIFUSION, RESPECTIVAMENTEy EL TEST DE DIFUSION, RESPECTIVAMENTE.

Staphylococcus aureusDiagrama 1: Diagrama 1: S. aureusS. aureus mecmecA negativoA negativo

mecA negativo S. aureus tiene alta expresión PBP 1, 2, 3, 4 Alta afinidad de unión PBP 1, 2, 3 & 4 y el antibiótico ßlactamico

La síntesis del peptidoglicano se para => S. aureus muere.

PBP2

PBP1

PBP3PBP4

MSSA

mecA negativo

ßlactam

ßlactam

ßlactam

MSSA

mecA negativo

Muerte de MSSA

inner contents released

PBP1

PBP2

PBP3

PBP4ßlactami

co

Tratamient antibiótico

Staphylococcus aureus

PBP2

Ata expresión PBP 2a

baja expresión PBP 1, 2, 3, 4

PBP 2a baja afinidad a ßlactamicos => no unión.

PBP2a continua produciendo peptidoglicano.

Diagrama 2: Diagrama 2: S. aureusS. aureus mecmecA positivoA positivo

PBP1

PBP3

PBP4

MRSA

MecA positivo

PBP2a

PBP2a

MRSA

sobrevive

PBP2a

PBP1

PBP2

PBP3

PBP4ßlactamico

Tto antibiótico

Slidex MRSA Detection kit

Slidex MRSA Detection

Principio :Principio : partículas de látex partículas de látex sseensibilizadas con anticuerpos contra nsibilizadas con anticuerpos contra PBP2a.PBP2a.

50 tests por kit50 tests por kitR1 – Látex sensibilizadoR1 – Látex sensibilizado

R2 - Control látexR2 - Control látexR3 – Reactivo de extracción 1R3 – Reactivo de extracción 1R4 – Reactivo de extracción 2R4 – Reactivo de extracción 2varillasvarillas

tarjetastarjetas

Slidex MRSA Método

Cultivo puroS. aureus

4 gotas R3

R3

Mezclar bien

Emulsionar5-7 colonias

Paso 1 paso 2

Paso 3 Poner el tubo en heating

blockEnfriar

Paso 4R4

1 gota R4 Mezclar bien

3 min a>95°C

Slidex MRSA Método

Centrifugar 1500g/5min Sacar 2 x 50 µl del

sobrenadante

Paso 5Paso 6

Aglutinación :círculo 1 : 50 µl sobrenadante + 1 gota Reactivo 1círculo 2 : 50 µl sobrenadante + 1 gota reactivo 2

Step 7

50 µl

50 µlGirar 3 min

Resultado :Aglutinación positiva = positiva para PBP2a

= meticilino reistencia

Aglutinación

DETECCION DE METICILINO RESISTENCIA EN DETECCION DE METICILINO RESISTENCIA EN S.aureusS.aureusTECNICAS DE AGLUTINACIONTECNICAS DE AGLUTINACIONMETODOMETODO AUTORAUTOR PUBLICPUBLIC NN SS EE COMENT.COMENT.MRSA-SCREENMRSA-SCREEN Louie,LLouie,L JCMJCM 397397 98,598,5 100100 164MSSA,164MSSA,

JunioJunio (100)(100) 197 197 MRSA yMRSA y 37 BORSA37 BORSA

MRSA-SCREENMRSA-SCREEN Sakoula,GSakoula,G JCMJCM 310310 100100 99,199,1 107 MSSA y107 MSSA yNovNov 203 203

MRSAMRSA20012001

MRSA-SCREENMRSA-SCREEN Swenson,JSwenson,J JCMJCM 5555 9090 100100 36 MSSA y 36 MSSA y OctOct 19 MRSA 19 MRSA

(heterog 1 (heterog 1 y 2y 2 100% S a 15’100% S a 15’

SLIDEX MRSA DETECTIONSLIDEX MRSA DETECTION SLIDEX MRSA DETECTIONSLIDEX MRSA DETECTION

EVALUATION OF MRSA-SCREEN LATEX FOR EVALUATION OF MRSA-SCREEN LATEX FOR DETECTION OF METHICILLIN-RESISTANT DETECTION OF METHICILLIN-RESISTANT Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus. ARGENTINEAN . ARGENTINEAN

EXPERIENCE #EXPERIENCE #R. Soloaga, A. Corso, P. Gagetti, D. Faccone, M. Galas R. Soloaga, A. Corso, P. Gagetti, D. Faccone, M. Galas

and “MRSA Argentinean Collaborative Group”. and “MRSA Argentinean Collaborative Group”. # Abstract en “IX Jornadas Argentinas de Microbiología”. 2002# Abstract en “IX Jornadas Argentinas de Microbiología”. 2002

Nro. cepas : 100 Nro. cepas : 100 S. aureusS. aureus

79 mecA 79 mecA positivo positivo

21 mecA 21 mecA negativonegativo

SLIDEX MRSA DETECTIONSLIDEX MRSA DETECTION SLIDEX MRSA DETECTIONSLIDEX MRSA DETECTION

# # S. aureus, S. aureus, nn::100100

Sensibilidad 79/79 (100%)

Especificidad 21/21 (100%)

Concordancia gral. 100/100 (100%)

““SLIDEX” para SLIDEX” para S. Coag. NegativaS. Coag. Negativa ““SLIDEX” para SLIDEX” para S. Coag. NegativaS. Coag. Negativa

EVALUATION OF MRSA-SCREEN LATEX FOR EVALUATION OF MRSA-SCREEN LATEX FOR DETECTION OF OXACILLIN RESISTANCE IN DETECTION OF OXACILLIN RESISTANCE IN COAGULASE-NEGATIVE STAPHYLOCOCCI. #COAGULASE-NEGATIVE STAPHYLOCOCCI. #A. Corso, R. Soloaga, D. Faccone, P. Gagetti, S. Corbella, M. Iglesias and A. Corso, R. Soloaga, D. Faccone, P. Gagetti, S. Corbella, M. Iglesias and M. GalasM. Galas

# Abstract en ICAAC 2002# Abstract en ICAAC 2002

# 100 # 100 S. Coagulasa S. Coagulasa NegativaNegativa

mecmecA positivo: 54A positivo: 54 mecmecA negativo:A negativo: 46 46

““SLIDEX” para SLIDEX” para S. Coag. S. Coag. NegativaNegativa


Species Number

S epidermidis 49

S. saprophyticus 14

S. hominis 13

S. haemolyticus 7

S. simulans 6

S. auricularis 4

S. capitis 3

S. cohnii 2

S. warneri 2

TOTAL 100

# Usando el Protocolo para # Usando el Protocolo para S. aureus, en S. aureus, en 100 SCN:100 SCN:

Inóculo: 3 ansas de 1µlInóculo: 3 ansas de 1µlTpo. de lectura: 3 min.Tpo. de lectura: 3 min.

Sensibilidad 31/54 (57.4%)

Especificidad 46/46 (100%)



# EXCELENTE # EXCELENTE ESPECIFICIDADESPECIFICIDAD# BAJA SENSIBILIDAD# BAJA SENSIBILIDAD

Adaptación de “SLIDEX” para Adaptación de “SLIDEX” para S. Coag. NegativaS. Coag. Negativa

Adaptación de “SLIDEX” para Adaptación de “SLIDEX” para S. Coag. NegativaS. Coag. Negativa

1)1) TPO. DE LECTURA:TPO. DE LECTURA:3 min. vs 6 min. o 15 min.3 min. vs 6 min. o 15 min.

2) TAMAÑO DEL INOCULO:2) TAMAÑO DEL INOCULO:3 ansas (1µl) vs 4, 5 o 6 3 ansas (1µl) vs 4, 5 o 6

ansas ansas

3) INDUCCION CON OXACILINA3) INDUCCION CON OXACILINAsin OXA vs con OXAsin OXA vs con OXA

mecA (n)

No. (%) of correct results

LA without OXA inductionLA with

OXA induction

3 loops 6 loops 3 loops

3 min 6 min 15 min 3 min 3 min

Positive (54)

31 (57) 41(76) 45 (83) 54 (100)

54 (100)

Negative (46)

46 (100)

46 (100)

46 (100)

46 (100)

46 (100)

Adaptación de “SLIDEX” para Adaptación de “SLIDEX” para S. Coagulasa NegativaS. Coagulasa Negativa

Adaptación de “SLIDEX” para Adaptación de “SLIDEX” para S. Coagulasa NegativaS. Coagulasa Negativa

Sensibilidad: c/lectura a los 15 min. c/ 6 ansas (1µl) c/ inducc. OXA

45/54 (83%) 54/54 (100%) 54/54 (100%)

Especificidad: en todos los casos

46/46 (100%)

Adaptación de “SLIDEX” Adaptación de “SLIDEX” para para S. Coag. NegativaS. Coag. Negativa

Adaptación de “SLIDEX” Adaptación de “SLIDEX” para para S. Coag. NegativaS. Coag. Negativa

Perfomance de MRSA IDPerfomance de MRSA ID

N: 998 cepas

Sensibilidad de 96,4% y especificidad de 98,2% a las 24 hs.

Sensibilidad de 98,8% y especificidad de 89,7% a las 48 hs.

Diederen,B. J Clin Microbiol, Feb 2006.

ESTAFILOCOCOS. RESISTENCIA ESTAFILOCOCOS. RESISTENCIA A RIFAMPICINAA RIFAMPICINA

BACTERICIDA; CIM 90 : 0,0125-0,1 ug/ml.BACTERICIDA; CIM 90 : 0,0125-0,1 ug/ml.

RESISTENCIA CROMOSOMICARESISTENCIA CROMOSOMICAALTERACION EN EL SITIO BLANCO ALTERACION EN EL SITIO BLANCO

(SUBFRACCION BETA DE RNA (SUBFRACCION BETA DE RNA POLIMERASA DNA DEPENDIENTE)POLIMERASA DNA DEPENDIENTE)

TASA DE MUTACION: 10TASA DE MUTACION: 10-6-6 -10 -10-7-7

NO UTILIZAR COMO MONOTERAPIANO UTILIZAR COMO MONOTERAPIA

ESTAFILOCOCOS. RESISTENCIA A ESTAFILOCOCOS. RESISTENCIA A AMINOGLUCOSIDOSAMINOGLUCOSIDOS

CIM 90: 0,0125-0,1 ug/mlCIM 90: 0,0125-0,1 ug/ml

PRINCIPAL MECANISMO DE RESISTENCIA:PRINCIPAL MECANISMO DE RESISTENCIA: AAC(6’)I-APH(2”)I: GENTAMICINA, AAC(6’)I-APH(2”)I: GENTAMICINA,

TOBRAMICINA, NETILMICINA, AMIKACINA.TOBRAMICINA, NETILMICINA, AMIKACINA. ANT(4’)I:AMIKACINA, KANAMICINAANT(4’)I:AMIKACINA, KANAMICINA

CEPAS RESISTENTES A GENTAMICINA POR CEPAS RESISTENTES A GENTAMICINA POR DIFUSION O CIMDIFUSION O CIM CEPA SENSIBLE A NETILMICINA: PUEDE O CEPA SENSIBLE A NETILMICINA: PUEDE O

NO HABER SINERGIA CON BETA LACTAMICOSNO HABER SINERGIA CON BETA LACTAMICOS PUEDE HABER SINERGIA CON GENTAMICINA PUEDE HABER SINERGIA CON GENTAMICINA

DEPENDIENDO DE LA CIM A LA MISMADEPENDIENDO DE LA CIM A LA MISMA

ESTAFILOCOCOS. RESISTENCIA A ESTAFILOCOCOS. RESISTENCIA A AMINOGLUCOSIDOS E IMPORTANCIA AMINOGLUCOSIDOS E IMPORTANCIA DE LA SINERGIA CON VANCOMICINADE LA SINERGIA CON VANCOMICINA

Mulazimoglu, L y cols. AAC, Junio de 1996.Mulazimoglu, L y cols. AAC, Junio de 1996. Sinegia vanco-genta con curvas de muerte (punto final Sinegia vanco-genta con curvas de muerte (punto final

a 24 hs)a 24 hs) Concentración de Vanco de 10 ug/ml y Genta 1 ug/ml.Concentración de Vanco de 10 ug/ml y Genta 1 ug/ml.

9 cepas con CIM >500 ug/ml NO MOSTRARON 9 cepas con CIM >500 ug/ml NO MOSTRARON SINERGIASINERGIA

15 cepas con CIM <500 ug/ml15 cepas con CIM <500 ug/ml 6 mostraron sinergismo (CIM de 16 a >128ug/ml; 6 mostraron sinergismo (CIM de 16 a >128ug/ml;

punto de corte=4ug/ml)punto de corte=4ug/ml) 9 fueron indiferentes (CIM 0,5->128 ug/ml)9 fueron indiferentes (CIM 0,5->128 ug/ml)

ESTAFILOCOCOS. ESTAFILOCOCOS. RESISTENCIA A TMSRESISTENCIA A TMS

CIM DE CEPAS SENSIBLES 90: <0,1 ug/mlCIM DE CEPAS SENSIBLES 90: <0,1 ug/ml

MECANISMO DE RESISTENCIAMECANISMO DE RESISTENCIA

ALTERACION EN EL SITIO BLANCO ALTERACION EN EL SITIO BLANCO (DEHIDROFOLATO REDUCTASA, (DEHIDROFOLATO REDUCTASA, PRINCIPALMENTE GEN PRINCIPALMENTE GEN dfrAdfrA))

ESTAFILOCOCOS. RESISTENCIA A ESTAFILOCOCOS. RESISTENCIA A TETRACICLINASTETRACICLINAS

CIM 90: 0,06-0,5 (TETRACICLINA) Y 0,0125-0,25 CIM 90: 0,06-0,5 (TETRACICLINA) Y 0,0125-0,25 (MINOCICLINA)ug/ml(MINOCICLINA)ug/ml

MECANISMO DE RESISTENCIAMECANISMO DE RESISTENCIA PROTECCION RIBOSOMAL PROTECCION RIBOSOMAL

DETERMINANTE DETERMINANTE tetMtetM RESISTENCIA A TETRACICLINA, MINOCICLINA Y RESISTENCIA A TETRACICLINA, MINOCICLINA Y

DOXICICLINADOXICICLINA EFLUJOEFLUJO

DETERMINANTE DETERMINANTE tetKtetKRESISTENCIA A MINOCICLINA, TETRACICLINARESISTENCIA A MINOCICLINA, TETRACICLINADETERMINANTE DETERMINANTE tetLtetLRESISTENCIA A TETRACICLINA PERO SENSIBILIDAD A RESISTENCIA A TETRACICLINA PERO SENSIBILIDAD A

MINOCICLINAMINOCICLINA

RESISTENCIA A RESISTENCIA A TETRACICLINASTETRACICLINAS

PROTECCION PROTECCION RIBOSOMALRIBOSOMAL

TETRACICLINA TETRACICLINA (R) Y (R) Y MINOCICLINA (R)MINOCICLINA (R)

EFLUJOEFLUJO

TETRACICLINA TETRACICLINA (R) Y (R) Y MINOCICLINA (R)MINOCICLINA (R)

TETRACICLINA TETRACICLINA (R) Y (R) Y MINOCICLINA (S)MINOCICLINA (S)

RESISTENCIA A QUINOLONAS RESISTENCIA A QUINOLONAS FLUORADASFLUORADAS

ALTERACION DEL SITIO BLANCOTOPOISOMERASA IVDNA GYRASA

EFLUJONorA


GENOTIPOS DE RESISTENCIA EN 90 AISLAMIENTOS CLINICOS DE S.aureus

GENOTIPOgrlA gyrA gyrB norA N(%)

1 No No No No 30 (33,3)

2 Ser80 aPhe No No No 6 (6,7)

3 Ser80 a Phe Ser84 aLeu No No 48 (53,3)

4 Ser80 a Tyr Ser84 a Leu No No 3 (3,3)

5 Glu84 a Lys Ser84 a Leu No No 3 (3,3)

OBSERVACION: SELECCIÓN REALIZADA CON CIPROFLOXACINA

AL MOMENTO DEL ESTUDIO NO SE HABIAN INTRODUCIDO EN ESPAÑA LAS NUEVAS FQ

Muñoz Bellido,J y col. AAC, abril 1997


ATB GENOTIPO CIM90 RANGO

CIPRO 1 1 0,1-2

2 2 1-2

3 16 8-32

4 16 8-16

5 32 8-32

LEVO 1 0,5 0,03-0,5

2 1 0,2-1

3 8 2-16

4 16 4-16

5 16 8-16

CLINAFL 1 0,06 <0,01-0,1

2 0,06 0,01-0,06

3 0,5 0,06-05

4 0,5 0,5

5 0,2 0,1-0,2

SPARFLOX 1 0,1 0,01-0,1

2 0,1 0,03-0,1

3 8 4-16

4 8 4-8

5 16 4-16

RESISTENCIA A QUINOLONAS RESISTENCIA A QUINOLONAS FLUORADAS. EFLUJOFLUORADAS. EFLUJO

ATB EFLUJO CIM90 RANGO

CIPRO NO 0,2 0,1-0,2

SI 2 1-2

LEVO NO 0,06 0,03-0,06

SI 0,5 0,5

CLINAFL NO 0,03 <0,01-0,06

SI 0,1 0,06-0,1

SPARFLOX NO 0,06 0,01-0,06

SI 0,1 0,06-0,1

GREPAFL NO 0,06 0,03-0,06

SI 0,1 0,06-01

MUÑOZ BELLIDO,J Y COL. AAC ABRIL 1997

ESTAFILOCOCOS. RESISTENCIA ESTAFILOCOCOS. RESISTENCIA A FOSFOMICINAA FOSFOMICINA

BACTERICIDABACTERICIDA

NO DEBE UTILIZARSE SOLO NO DEBE UTILIZARSE SOLO EMERGENCIA DE CEPAS RESISTENTESEMERGENCIA DE CEPAS RESISTENTES

MECANISMO DE RESISTENCIA:MECANISMO DE RESISTENCIA: ALTERACION EN SISTEMAS ALTERACION EN SISTEMAS

TRANSPORTADORES DE LA GLUCOSA TRANSPORTADORES DE LA GLUCOSA 6FOSFATO O DEL GLICEROL FOSFATO6FOSFATO O DEL GLICEROL FOSFATO

INACTIVACION ENZIMATICA POR INACTIVACION ENZIMATICA POR CONJUGACION CON GLUTATIONCONJUGACION CON GLUTATION

S.saprophytiucs: RESISTENCIA NATURALS.saprophytiucs: RESISTENCIA NATURAL

ESTAFILOCOCOS. RESISTENCIA ESTAFILOCOCOS. RESISTENCIA A MACROLIDOSA MACROLIDOS

CIM 90 ERITROMICINA: 0,06-0,25CIM 90 ERITROMICINA: 0,06-0,25

“ “ “ “ CLINDAMICINA: 0,06-0,5CLINDAMICINA: 0,06-0,5

“ “ “ “ QD: 0,03QD: 0,03

MECANISMOS DE RESISTENCIAMECANISMOS DE RESISTENCIA ALTERACION DEL SITIO BLANCOALTERACION DEL SITIO BLANCO EFLUJOEFLUJO INACTIVACION ENZIMATICAINACTIVACION ENZIMATICA

ESTAFILOCOCOS. RESISTENCIA A ESTAFILOCOCOS. RESISTENCIA A MACROLIDOS POR MODIFICACION DE MACROLIDOS POR MODIFICACION DE

SITIO BLANCOSITIO BLANCODIMETILACION DE ADENINA EN 23s (MLSB)DIMETILACION DE ADENINA EN 23s (MLSB)

INDUCIBLE:INDUCIBLE: MACROLIDOS DE 14 Y 15 ATOMOS DE C, NO A MACROLIDOS DE 14 Y 15 ATOMOS DE C, NO A

LOS DE 16 NI A CLINDAMICINA (SE ACHATA LOS DE 16 NI A CLINDAMICINA (SE ACHATA EL HALO)EL HALO)

EL TRATAMIENTO DE ESTAS CEPAS CON EL TRATAMIENTO DE ESTAS CEPAS CON CLINDA SELECCIONA CONSTITUTIVAS.CLINDA SELECCIONA CONSTITUTIVAS.

CONSTITUTIVA:CONSTITUTIVA: MACROLIDOS DE 14,15,16, MACROLIDOS DE 14,15,16,

ESTREPTOGRAMINAS B Y CLINDAMICINAESTREPTOGRAMINAS B Y CLINDAMICINA

GENES MAS FRECUENTES: GENES MAS FRECUENTES: ermAermA (Tn554), (Tn554), ermC ermC (PLASMIDOS)(PLASMIDOS)

SAMRSAMR MLS +

GEN

CLIERI

OXA

Informe

MLS+Eri y Cli: R

ESTAFILOCOCOS. RESISTENCIA ESTAFILOCOCOS. RESISTENCIA A MACROLIDOS POR EFLUJOA MACROLIDOS POR EFLUJO

M: ERITROMICINA PERO NO CLINDAMICINAM: ERITROMICINA PERO NO CLINDAMICINA

GENES MAS FRECUENTES:msrA Y mefA GENES MAS FRECUENTES:msrA Y mefA (ERITROMICINA)(ERITROMICINA)

SA: ESTREPTOGRAMINA ASA: ESTREPTOGRAMINA A

vgaA Y vgaBvgaA Y vgaB

ESTAFILOCOCOS. RESISTENCIA A ESTAFILOCOCOS. RESISTENCIA A MACROLIDOS POR INACTIVACION MACROLIDOS POR INACTIVACION

ENZIMATICAENZIMATICA

HIDROLASAS CODIFICADAS EN vgbA Y vgbB HIDROLASAS CODIFICADAS EN vgbA Y vgbB (ESTREPTOGRAMINAS B):(ESTREPTOGRAMINAS B):

ESTREPTOGRAMINAS B ESTREPTOGRAMINAS B (QUINUPRISTINA)(QUINUPRISTINA)

ACETILASAS: vatA; vatB; vatC: ACETILASAS: vatA; vatB; vatC: ESTRETOGRAMINA A (DALFOPRISTINA)ESTRETOGRAMINA A (DALFOPRISTINA)

NUCLEOTIDIL TRANSFERASAS (GENES lin Ay lin NUCLEOTIDIL TRANSFERASAS (GENES lin Ay lin A’): LINCOMICINAA’): LINCOMICINA

FOSFORILASA (GEN mphc): ERITROMICINAFOSFORILASA (GEN mphc): ERITROMICINA

ESTAFILOCOCOS. FENOTIPOS DE RESISTENCIA A ESTAFILOCOCOS. FENOTIPOS DE RESISTENCIA A MACROLIDOS-LINCOSAMIDAMACROLIDOS-LINCOSAMIDA

MecanismoMecanismo ResistenciaResistencia ObservacionesObservaciones

MLS inducibleMLS inducible EritromicinaEritromicina Sensible a Sensible a clindamicina.clindamicina.

Achatamiento Achatamiento del halodel halo

MLS constitutMLS constitutEritro; SGb, CetolidosEritro; SGb, Cetolidos

y clindamicinay clindamicina

EflujoEflujo Eritro Eritro oo SGA SGA Sensible a Sensible a clindamicina.clindamicina.S/Achatamiento S/Achatamiento

del halodel haloNucleotidil Nucleotidil LincomicinaLincomicina Eritro sensibleEritro sensibleAdenilasaAdenilasa Clinda sensib.dism.Clinda sensib.dism.

AcetilasaAcetilasa SGASGA Sensible eritromic, SGBSensible eritromic, SGB

HidrolasasHidrolasas SGBSGB Sensible eritro, clinda y SGASensible eritro, clinda y SGA

STAPHILOCOCCUS AUREUS. SENSIBILIDAD STAPHILOCOCCUS AUREUS. SENSIBILIDAD DISMINUIDA A GLICOPEPTIDOSDISMINUIDA A GLICOPEPTIDOS

MECANISMO DESCONOCIDOMECANISMO DESCONOCIDO

ALTERACIONES EN EL PEPTIDOGLICAN QUE ALTERACIONES EN EL PEPTIDOGLICAN QUE PRODUCEN ATRAPAMIENTO DE VANCOMICINA?PRODUCEN ATRAPAMIENTO DE VANCOMICINA?

CRECIMIENTO LENTO, LA MAYORIA MRSA.CRECIMIENTO LENTO, LA MAYORIA MRSA.

LOS AISLAMIENTOS PARECEN MIXTOSLOS AISLAMIENTOS PARECEN MIXTOS

AISLADOS DE JAPON, FRANCIA, ESCOCIA,USAAISLADOS DE JAPON, FRANCIA, ESCOCIA,USA

ASOCIADOS CON FRACASO TERAPEUTICO (CIM DE ASOCIADOS CON FRACASO TERAPEUTICO (CIM DE 8 ug/ml, CIM DE 4ug/ml?)8 ug/ml, CIM DE 4ug/ml?)

Síntesis de la pared celular Síntesis de la pared celular bacterianabacteriana

K. Hiramatsu. Vancomycin-resistant Staphylococcus aureus: a new model of antibiotics resistance. Lancet Infect Diseases 2001. 1147-155

Antimic.Malbran



Antimicrob.Malbran


Acción de Vancomicina sobre Acción de Vancomicina sobre StaphylococcusStaphylococcus spp spp


Antimicrob.Malbran

CLSI 2010

STAPHILOCOCCUS AUREUS.STAPHILOCOCCUS AUREUS. SENSIBILIDAD DISMINUIDA A SENSIBILIDAD DISMINUIDA A

GLICOPEPTIDOSGLICOPEPTIDOS

RECOMENDACIONES DEL CDC PARA RECOMENDACIONES DEL CDC PARA CONSIDERAR A UNA CEPA COMO GISA O VISACONSIDERAR A UNA CEPA COMO GISA O VISA

CIM POR MICRODILUCION A VANCOMICINA DE 4-8 ug/mlCIM POR MICRODILUCION A VANCOMICINA DE 4-8 ug/ml E-TEST A VANCOMICINA DE >=6 ug/ml (MH)E-TEST A VANCOMICINA DE >=6 ug/ml (MH) CRECIMIENTO EN PLACAS COMERCIALES DE BHI CON 6 CRECIMIENTO EN PLACAS COMERCIALES DE BHI CON 6

ug/ml DE VANCOMICINA Y SEMBRADAS CON UN ug/ml DE VANCOMICINA Y SEMBRADAS CON UN INOCULO DE 10INOCULO DE 1066 UFC/ML (10 ul) UFC/ML (10 ul)

INCUBAR TODOS LOS METODOS DURANTE 24 INCUBAR TODOS LOS METODOS DURANTE 24 HORASHORAS

Criterios para determinar cepas Criterios para determinar cepas GISAGISA

TécnicaTécnica Resultado Resultado Comentario Comentario

Dilución en CaldoDilución en Caldo 4 a 8 ug/ml 4 a 8 ug/ml MH caldo MH caldo incubación 24 horasincubación 24 horas

BHI agar c/6ug/mlBHI agar c/6ug/ml Crecimiento en 24 h Crecimiento en 24 h Una o más Una o más coloniascoloniasde vancomicina de vancomicina se considera se considera positivo*positivo*ComercialComercial 10 ul10 ul

EtestEtest 6 ug/ml6 ug/ml MH agar MH agar incubación 24 horasincubación 24 horas

Deben dar los tres criterios para considerar un aislamiento Deben dar los tres criterios para considerar un aislamiento GISAGISA

* * S aureusS aureus ATCC 25923 control negativo ATCC 25923 control negativo E. faecalisE. faecalis ATCC ATCC 51299 control positivo51299 control positivo

Lugar y fecha del aislamiento

Edad (años)

Dosis Tiempo de tratamiento

CIM (ug/ ml)

Aspectos clínicos

Japón 1996

0.3

45/ mg/ kg/

d

29 días

8

Inf. herida

Michigan 1997 59 1g/ 72horas 18 semanas 8 DPC

N. J 1997 66 1g/ 24horas 18 semanas 8 DPC

N. York 1997 79 1g/ semana 12 meses 8 Hemodiálisis

France 1995 2 35mg/ kg/ d NC 8 Leucemia

Japan 50 NC 100 días NC Lupus

France1998/ 99 6510 1g/ 24horas NC NC Brote UTI 39

Hong-Kong 97 47.5 NC NC 8-16 Brote

Belgica 1999 NC NC mult. esq. 4-8 Screening

Illinois 1999 63 NC NC 8 Hemodiáliis

Geisel R & cols. Eur. J. Microbiol Infect Dis (2000) 20: 685-697

GISA. SENSIBILIDAD ATBGISA. SENSIBILIDAD ATB

Cepa País P Ox Ctn E G R T TmsCp

Mu50 Japón R R R R R R R SS

Mu3-8RJapon R R R R R R R S R

963smMichig R R R R R S S S S

992 NY R R R R S R S S S

Tenover F, J Clin Microbiol, 1998

Indicaciones para Indicaciones para la búsqueda de la búsqueda de

SAIGSAIGFrente a falla de tratamiento con Frente a falla de tratamiento con glicopéptidos.glicopéptidos.

En pacientes con profilaxis o terapéutica En pacientes con profilaxis o terapéutica con glicopéptidos por largos períodos con glicopéptidos por largos períodos

DPCDPC

HemodializadosHemodializados

HETEROGENICIDAD EN LA HETEROGENICIDAD EN LA RESISTENCIA a RESISTENCIA a GLICOPEPTIDOSGLICOPEPTIDOS

Se considera hetero-GISA a una cepa que posee una subpoblación GISA (CIM 8-16 ug/ml) con una frecuencia de 10-6 o más.

Hiramatsu sostiene que la hetero-GISA es un precursor de la GISA, en la selección intratratamiento.

La hetero-GISA puede causar por si misma falla terapéutica con vancomicina????

OPCIONES TERAPEUTICAS EN LAS OPCIONES TERAPEUTICAS EN LAS INFECCIONES CAUSADAS POR VISAINFECCIONES CAUSADAS POR VISA

Vancomicina+cefpirome

Arbekacina+Ampicilina/sulbactam

Vancomicina+rifampicina

Vancomicina+TMS

RESISTENCIA A VANCOMICINARESISTENCIA A VANCOMICINA

2 CEPAS CON VAN A

INFECCIONES DE PIEL Y PARTES BLANDAS

TRANSFERENCIA IN VIVO DE VAN A A PARTIR DE ENTEROCOCO

Vancomicina: necesidad de revaluar Vancomicina: necesidad de revaluar puntos de corte?puntos de corte?

Categoría CIMVSSA S ≤ 2

hVISA Hetero resist 1-2*

VISA I 4-8

VRSA R ≥ 16

*Incluye subpoblaciones de 1/1.000.000 que pueden crecer con >2 ug/ml vanco

Vancomicina: necesidad de revaluar Vancomicina: necesidad de revaluar puntos de corte?puntos de corte?

56

10

0

10

20

30

40

50

60

0,5 1 a 2

CIM (ug/ml) de Vancomicina

% d

e éx

ito t

erap

éutic

o

52

29

8

0

10

20

30

40

50

60

0,5 21

CIM (ug/ml) de Vancomicina

% d

e éx

ito t

erap

éutic

o

Sakoulas,G. J Clin Microbiol. 42. 2004 Moise-Broder, P. Clin Infect Dis. 38. 2004

CIM (ug/ml) Riesgo de mortalidad (OR (95%CI) p

1 1

1,5 2.86 0.08

2 3.63 <0.001

0,5 1 2 5 10

Relación entre CIM a vancomicina y riesgoRelación entre CIM a vancomicina y riesgo de muertede muerte

Soriano, A. Clin Infect Dis. 46. 2008

Surgical infectionsPoor antibiotic pentration

• Undrained abscess• Devitalised tissue• Phlegmon

High-inoculum infectionsHigh-density “population resistance”

• Endocarditis treated medically• Abscess without drainage• Selection of resistant subpopulations

Foreign-body infectionsPoor antibiotic penetration

• Biofilm sequestration• Attempts to salvage without removal

PharmacodynamicsSuboptimum antibiotic exposure

• Subtherapeutic vancomycin exposure• Subtherapeutic daptomycin dosing

Factors associated with loss of daptomycin susceptibility in Staphylococcus aureus

S.aureus y S.lugdunensis.CLSI 2010

SCN.CLSI 2010

IRC VTK 2C test performance. Comparation with D-test

N: 372

Test N

D-test (+)/IRC (+) 51

D-test (-)/IRC (-) 317

D-test (+)/IRC (-) 0

D-test (-)/IRC (+) 0

CAT AEROBICO OBLIGADO

OXID MOV ClNA BACI

Staphylocccus + -*** -* - + R

Stomatocccus -,+,debil

- + - - S

Micrococcus + + - -** +** SPlanococcus + + ND + + ND

Macrococcus + +/- - - + R

* Hay excepciones^*M.agilis puede ser movil y no desarrollar en ClNa

*** S.hominis es aerobio obligado

MICROCOCOS Y GENEROS RELACIONADOS

M.luteus y M.lylaeKocuria varians y K.kristinae

Kytococcus sedentarius; K.roseaDermacoccus nishinomiysensis

Nesteronkonia halobia

OXIDACION DE

GLUCOSA FRUCTOSA

Micrococcus - -

Kocuria + +

Pruebas clásicas para diferenciar estafilococos de micrococos

Producción de ácido a partir de glucosa, en anerobiosis

Sensibilidad a 200 ug/ml de lisostafina o a 100 ug de furazolidona

Producción de ácido del glicerol en presencia de 0,4 ug/ml de eritromicina

Todas positivas para estafilococos

MICROCOCOS Y GENEROS RELACIONADOS

ClNa 5% p/crecer

NO3 Oxidac glicerol

Oxidac Manosa

Esculina VP ClNa 7,5%

K.rosea +

Micrococcus

- - - - - - +

K.krist-inae

+ + + +

D.nishinomiyaensis

+

N.halo-bia

+

Resistencia a Penicilina

Resistencia a Meticilina

Arginina

Micrococcus S S -

K.sedentarius R R +

ARGININAPOSITIVA NEGATIVA(Todos S a meticil y peni)Kytococcus sedentarius Micrococcus luteus(R a peni y meticilina) Micrococcus lylae Kocuria varians Kocuria kristinae Kocuria rosea

Dermacoccus nishinomiyaensis

ESCULINAPOSITIVA NEGATIVAKocuria kristinae M.luteus y M.lylae K.varians y K.rosea D.nishinomiyaensis

OXIDACION DE FRUCTOSA

POSITIVA NEGATIVAK.varians D.nishinomiyaensis (pigm naranja)

K.rosea M.luteus (pigm crema-amarillo) M.lylae (pigm crema-amarillo)

GELATINAPOSITIVA NEGATIVAK.varians K.rosea

ESTAFILOCOCOS COAGULASA POSITIVAESTAFILOCOCOS COAGULASA POSITIVA

•Staphylococcus aureus (Manitol + en anaerobiosis, diferencia del resto)Staphylococcus aureus (Manitol + en anaerobiosis, diferencia del resto)

•Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus subsp. subsp. anaerobius (anaerobius (Catalasa negativa!!)Catalasa negativa!!)

•Staphylococcus schleiferiStaphylococcus schleiferi subsp. subsp. coagulans (ADH +, Tre -, Malt -)coagulans (ADH +, Tre -, Malt -)

•Staphylococcus lutrae (ADH -, Xyl +)Staphylococcus lutrae (ADH -, Xyl +)

•Staphylococcus intermedius (ADH V, Xyl -, Tre +, S a PolB)Staphylococcus intermedius (ADH V, Xyl -, Tre +, S a PolB)

•Staphylococcus delphini (ADH +, Tre -, Malt+)Staphylococcus delphini (ADH +, Tre -, Malt+)

•Staphylococcus hyicus (ADH +, Tre +, R a Pol B)Staphylococcus hyicus (ADH +, Tre +, R a Pol B)

PROBLEMAS DE LA PROBLEMAS DE LA COAGULASA EN TUBOCOAGULASA EN TUBO

ALGUNAS CEPAS REQUIEREN INCUBACION ALGUNAS CEPAS REQUIEREN INCUBACION DE 24 HSDE 24 HS

-FALSOS NEGATIVOS POR -FALSOS NEGATIVOS POR ESTAFILOQUINASAESTAFILOQUINASA

-FALSOS POSITIVOS POR ACTIVACION DE -FALSOS POSITIVOS POR ACTIVACION DE PROTROMBINA O CONSUMO DE CITRATO PROTROMBINA O CONSUMO DE CITRATO (ESTREPTOCOCOS POR EJ)(ESTREPTOCOCOS POR EJ)

-VARIACIONES CON -VARIACIONES CON TIPO DE PLASMATIPO DE PLASMATIEMPO DE INCUBACION TIEMPO DE INCUBACION GRADO DE COAGULACIONGRADO DE COAGULACION

•

IDENTIFICACION RAPIDA IDENTIFICACION RAPIDA DE DE S.aureusS.aureus

-COAGULASA EN PORTAOBJETO-TEST COMERCIALES:

1ºGENERACION: ERITROCITOS SENSIBILIZADOS CON FIBRINOGENO PARA DETECTAR FACTOR DE CLUMPING.2º GENERACION: PARTICULAS DE LATEX Y/O ERITROCITOS DE CARNERO PARA DETECTAR PROTEINA A Y

FACTOR DE CLUMPINGPROBLEMAS: ALGUNAS CEPAS NO EXPONEN ESTOS AG DEBIDO A GRAN CANTIDAD DE AG CAPSULAR (SEROTIPO 5 EN MRSA)

3ºGENERACION: INCORPORAN AC CONTRA POLISACARIDO CAPSULAR O CONTRA AG ESPECIFICO DE GRUPO DE SUPERFICIE EXTERNA

Prueba de coagulasaPrueba de coagulasa

EQUIPOEQUIPO PROTEINA A F.CLUMPING POLISAC.CAPS. AG.SUPERF PROTEINA A F.CLUMPING POLISAC.CAPS. AG.SUPERFSlidexStaphPlusSlidexStaphPlus xx xx xx(Biomeriuex)(Biomeriuex)

StaphaureusPlusStaphaureusPlus xx xx(MurexDiagnostic)(MurexDiagnostic)

PastorexStaphPluPastorexStaphPlu xx xx x x(Sanofi Diagnostic Pasteur)(Sanofi Diagnostic Pasteur)

COMPARACION DE METODOS DE TERECERA GENERACIONArjanne, Van Griethuysen y col. J Clin Microbiol, Enero 2001N=892; 278 MRSA; 171 MSSA Y 443 SCNGOLD ESTÁNDAR: ACU PROBE

Sensibilidad EspecificidadMS MR MS MR

SlidexStapPlus 98,9 97,1 98,9 98,4StaphaurexPlus 98,2 98,2 96,2 96,2PastorexStaphPlus 98,6 98,8 95,7 95,7

TEST COMERCIALES DE AGLUTINACION

-LOS NUEVOS EQUIPOS INCORPORAN AC CONTRA PROTEINA A, FACTOR DE CLUMPING Y ANTIGENOS DE SUPERFICIE ASOCIADOS

CON METICILINO RESISTENCIAPOLISACARIDO CAPSULAR (TIPO 5 Y 8)AG NO CARATERIZADOS SEROTIPO 18

-SON MAS SENSIBLES QUE LOS QUE TIENEN AC SOLO CONTRA FACTOR DE CLUMPING Y PROTEINA A PERO PUEDEN TENER FALSOS

POSITIVOS CON SCN:ALGUNAS CEPAS DE S.haemolyticus y S.hominis POSEEN AG

CAPSULAR TIPO 8 (FRECUENCIA < 2% EN CEPAS HUMANAS)FACTOR DE CLUMPIMG EN S.schleiferi y S.lugdunensis

ALGUNAS CEPAS DE S.epidermidis QUE NO TENIAN AG CAPSULAR

5 NI 8= AG PROTEINACEO DE SUPERF

ESQUEMA DE KLOOS,W Y SCHLEIFER,KESQUEMA DE KLOOS,W Y SCHLEIFER,K

PRUEBAS MANUALESPRUEBAS MANUALES

SISTEMAS COMERCIALESSISTEMAS COMERCIALESAPIAPIVITEKVITEKMICROSCANMICROSCANPHOENIXPHOENIXSTAPH-ZYMSTAPH-ZYM

IDENTIFICACION DE ESTAFILOCOCOS COAGULASAIDENTIFICACION DE ESTAFILOCOCOS COAGULASA NEGATIVOSNEGATIVOS

VERIFICAR AISLAMIENTO VERIFICAR AISLAMIENTO PURO A LAS 48-72 HSPURO A LAS 48-72 HS

http://images.google.com.ar/imgres?imgurl=http://www.remel.com/images/catalog/101.jpg&imgrefurl=http://www.remel.com/order/ShowItems.cfm%3FItemName%3DNovobiocin%2520Disk%26Section%3DDiagnostic%2520Tests&h=144&w=144&sz=10&tbnid=xwuc3CV14J-dHM:&tbnh=89&tbnw=89&hl=es&start=17&prev=/images%3Fq%3DS.saprophyticus%26svnum%3D10%26hl%3Des%26lr%3D

PRUEBAS GENERALES DE PRUEBAS GENERALES DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA de SCNIDENTIFICACION BIOQUIMICA de SCN

Actividad de: Actividad de: Fosfatasa alcalina (FAL)Fosfatasa alcalina (FAL)Pirrolidonil aril-amidasa (PYR)Pirrolidonil aril-amidasa (PYR)Ornitina decarboxilasaOrnitina decarboxilasaArginina dehidrolasaArginina dehidrolasaUREASAUREASAß-galactosidasa, ß-glucosidasa y ß-glucuronidasaß-galactosidasa, ß-glucosidasa y ß-glucuronidasa

Producción de acetil metil carbinol (VP)Producción de acetil metil carbinol (VP) Reducción de nitratos Reducción de nitratos Hidrólisis de esculinaHidrólisis de esculina Resistencia a: novobiocina ( 5 ug/disco), Resistencia a: novobiocina ( 5 ug/disco),

polimixina B (300 U/disco) y bacitracina (0,04 U/disco)polimixina B (300 U/disco) y bacitracina (0,04 U/disco) Acidez anaeróbica de D-glucosa y D-manitolAcidez anaeróbica de D-glucosa y D-manitol

PRUEBAS GENERALES DE PRUEBAS GENERALES DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA de SCNIDENTIFICACION BIOQUIMICA de SCN

Acidez aeróbica de:Acidez aeróbica de:

.D-trehalosa .Maltosa.D-trehalosa .Maltosa

.D-manitol .Sacarosa.D-manitol .Sacarosa

.D-manosa .Rafinosa.D-manosa .Rafinosa

.D-turanosa .L-arabinosa.D-turanosa .L-arabinosa

.D-xilosa .Lactosa.D-xilosa .Lactosa

.D-celobiosa .N-acetil-glucosamina.D-celobiosa .N-acetil-glucosamina

ESQUEMAS GENERALES DE ESQUEMAS GENERALES DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA de SCN IDENTIFICACION BIOQUIMICA de SCN

NOVO SNOVO S

UREA + MANOSA +UREA + MANOSA +

--S.epidermidisS.epidermidis-S.lugdunensis-S.lugdunensis-S.capitis -S.capitis s s ureolyticusureolyticus-S.caprae-S.caprae-S.simulans-S.simulans-S.felis-S.felis-S.hyicus-S.hyicus-S.chromogenes-S.chromogenes

UREA + MANOSA-UREA + MANOSA-

-S.warneri-S.warneri-S.pasteuri-S.pasteuri-S.hominis s hominis-S.hominis s hominis-S.simulans-S.simulans-S.piscifermentans-S.piscifermentans

UREA - MANOSA+UREA - MANOSA+

-S.lugdunensis-S.lugdunensis-S.schleiferi-S.schleiferi s s schleiferischleiferi-S.capitis -S.capitis s s capitiscapitis-S. carnosus-S. carnosus-S.hyicus-S.hyicus

UREA - MANOSA-UREA - MANOSA-

--S.haemolyticusS.haemolyticus-S.auricularis-S.auricularis-S.muscae-S.muscae

ESQUEMA SIMPLIFICADO DE IDENTIFICACIONESQUEMA SIMPLIFICADO DE IDENTIFICACION

GermenGermen NovobiocinaNovobiocina UreasaUreasa D-manosaD-manosa PYRPYR OrnitinaOrnitinaMás frecuentesMás frecuentesS.lugdunensisS.lugdunensis SS dd ++ ++ ++S.schleiferi S.schleiferi subspsubsp SS -- ++ ++ --schleiferischleiferiGrupo Grupo S.haemolyticusS.haemolyticus SS -- -- ++ --S.epidermidisS.epidermidis SS ++ ++ -- ddS.warneriS.warneri SS ++ -- -- --S.saprophyticusS.saprophyticus RR ++ -- -- --Menos frecuentesMenos frecuentesS.simulansS.simulans SS ++ dd ++ --S.capitisS.capitis ss ss capitiscapitis SS -- ++ -- --S.cohnii S.cohnii ss ss cohniicohnii RR -- dd -- --GrupoGrupo SS.cohnii.cohnii RR ++ ++ dd --

De Paulis,A y cols. J Clin Microbiol, 41, 2003.De Paulis,A y cols. J Clin Microbiol, 41, 2003.


ManitolManitol TrehalosaTrehalosaGrupo Grupo S.epidermidisS.epidermidisS.epidermidisS.epidermidis -- --S.capraeS.caprae -- ++S.capitisS.capitis ss ss ureolyticusureolyticus ++ --

Vogues-ProskauerVogues-Proskauer LactosaLactosaGrupo Grupo S.haemolyticusS.haemolyticusS.haemolyticusS.haemolyticus ++S.auricularisS.auricularis -- --S.casseolyticusS.casseolyticus -- ++

Crecimiento anaeróbicoCrecimiento anaeróbico B-glucosidasaB-glucosidasaGrupo Grupo S.warneriS.warneriS.warneriS.warneri ++ ++S.hominis ss hominisS.hominis ss hominis -- --



TrehalosaTrehalosaGrupo Grupo S.saprophyticusS.saprophyticusS.saprophyticusS.saprophyticus --S.hominis ss novobiosepticusS.hominis ss novobiosepticus ++


XylosaXylosaGrupo Grupo S.cohniiS.cohniiS.xylosusS.xylosus ++S.cohnii ss urealyticumS.cohnii ss urealyticum --

Novobiocina RNovobiocina RUreasaUreasa D-manosaD-manosa

Grupo Grupo S.saprophyticusS.saprophyticus ++ --Grupo S.cohniiGrupo S.cohnii ++ ++S.cohnii ss cohniiS.cohnii ss cohnii -- dd

Grupo: Novobiocina (S) y Urea (+), Grupo: Novobiocina (S) y Urea (+), todos rafinosa, arabinosa y xilosa (-)todos rafinosa, arabinosa y xilosa (-)

Germen Man Manosa Treh Aerob Arg Orn ONPG PYR Coag VP Sac

S.hominis sub hominis

- - V + V - - - +

S.warneri v - + - V - - - +

S.pasteuri d - + - - - - - +

S.piscifermentans d - + - - - d nd d

S.epidermidis - + - - V -/+ - - +

S.lugdunensis - + + - - + - + +

S.capitis sub urealyticus

+ + - - - -- - d +

S.felis + + + - nd nd + nd - d

S.chromogenes d + + - + - - d - +

S.hycus - + + - + - - - d +

S.caprae d + + - - - - d -

S.simulans + v v - + - + + d +

Grupo: Novobiocina (S) y Grupo: Novobiocina (S) y Urea (-)Urea (-)

Germen Manos Treh Arg Sac DNasa

Colonia FAL PYR Man VP

Xy Orn

S.auricularis - + (lenta

)

V V - Pequeña - d - - - -

S.muscae - + - + - + nd - - + -

S.haemolyticus - + + + - Grande - + d + - -

S. schleiferi sub schleiferi

+ V + - + Grande + + - + - -

S.carnosus + d - - - grande + + + + - -

S.capitis subesp capitis

+ - V + - Pequeña - - + d - -

S.hycus + + - + + grande + - - - - -

S.lugdunensis + + - + - Grande - + - + - +

Grupo: Novobiocina (R), oxidasa -Grupo: Novobiocina (R), oxidasa -Germen Urea Saca

rosaTreh Xylosa Manosa

S. saprophyticus + + + - -

S. hominis sub novobiosepticus

+ + - - -

S.xylosus + + - + +

S.cohnii sub urealyticum

+ - + - +

S.cohnii sub cohnii

- - + - d

S.klooosii v v + d -

S.arlettae - + + + +

S.gallinarum + + + + +

S.equorum + + + + +

Grupo: Novobiocina (R) y oxidasa Grupo: Novobiocina (R) y oxidasa (+)(+)

Germen Ure Raf Tre Manit Xylosa Celob Manos

S.lentus - + + + V + +

S. sciuri - - + + v + d

S.caseolyti-cus

- nd d - - - -

S.vitulus - - d + d d -

5)OXIDASA POSITIVA (Todos son arginina -; PYR -; Ureasa -; 5)OXIDASA POSITIVA (Todos son arginina -; PYR -; Ureasa -; Bglucosidasa -;Bglucosidasa -;B glucoronidasa -; galactosidasa-)B glucoronidasa -; galactosidasa-)S.sciuri subesp sciuriS.sciuri subesp sciuriS.sciuri subesp carnaticusS.sciuri subesp carnaticusS.sciuri subesp rodentiumS.sciuri subesp rodentiumS.lentusS.lentus

S.vitulusS.vitulus

RAFINOSARAFINOSAPOSITIVA NEGATIVAPOSITIVA NEGATIVAS.lentus S.sciuriS.lentus S.sciuri S.vitulusS.vitulus Esc Clumping Hemólisis FAL Man Ara Malt Lac SacEsc Clumping Hemólisis FAL Man Ara Malt Lac SacS.sciuri + +/v +/- v +/d d d d +S.sciuri + +/v +/- v +/d d d d +S.vitulus d - - - - - - - + S.vitulus d - - - - - - - +

TIPIFICACION DE ESTAFILOCOCOSDNAsa POSITIVA

S.aureus (coagulasa +,VP+)S.schleiferi sub schleiferi (coagulasa -)S.intermedius (coagulasa +, VP-, PYR y

ONPG +)S.hyicus (coagulasa +, VP-, PYR y

ONPG -)ORNITINA DECARBOXILASA

POSITIVAS.lugdunensis (en 1-8 hs; PYR+)

S.epidermidis (>8 hs; PYR-)

RESISTENCIA A NOVOBIOCINA (<16 mm)RESISTENCIA A NOVOBIOCINA (<16 mm)

S.saprophyticusS.saprophyticusS.hominis subesp novobiosepticusS.hominis subesp novobiosepticusS.xylosusS.xylosus

S.cohniiS.cohnii

S.kloosiiS.kloosiiS.equorumS.equorumS.arlettaeS.arlettaeS.gallinarumS.gallinarum

RESISTENCIA A POLIMIXINA B (300 u): <10mmRESISTENCIA A POLIMIXINA B (300 u): <10mm

S.aureusS.aureusS.epidermidisS.epidermidisS.hycusS.hycusS.chromogenesS.chromogenesAlgunas cepas de Algunas cepas de S.lugdunensisS.lugdunensis

En agar tripticasa soya con 5% de sangre

Hidrólisis de PYR (pirrilidonil arilamidasa):Hidrólisis de PYR (pirrilidonil arilamidasa):

S.haemolyticus (urea -)S.haemolyticus (urea -)S.lugdunensis (ornitina +)S.lugdunensis (ornitina +)S.schleiferi (DNAsa +)S.schleiferi (DNAsa +)S.intermedius (coagulasa +)S.intermedius (coagulasa +)S.simulans (urea +, ONPG+)S.simulans (urea +, ONPG+)S.caseolyticus (urea-)S.caseolyticus (urea-)

Inoculo denso ( no < de 2 de McFarland)Incubación a 35º, 24 hsRojo purpura oscuro es positivo dentro de 2 min

MUCHAS GRACIAS POR SU MUCHAS GRACIAS POR SU ATENCION!!!!!!ATENCION!!!!!!

Date post:	18-Nov-2014
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ESTAFILOCOCOS

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