Fuentes de ATP

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1


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2

Tendencias en Inocuidad Alimentaria

• Inocuidad alimentaria se ha convertido hoy en una de las prioridades

para los consumidores

• 60% de los consumidores hoy se preocupan por la inocuidad de los

alimentos que consumen.

• Menos del 20% confian en las companias

• En un contexto de comercialización de

almientos mas globalizado, se requerirá mas control y seguimiento

de la cadena productiva

Fuente : Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentación


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Food Safety Costos y Beneficios

Costos Beneficios

Recalls Reputación

Cliente Disconforme Cliente Conforme (fiel)

Cierre de la cia Crecimiento de la cia

Perdida de credibilidad Prestigio de la marca

Multas Improved profits

Prision No Prision


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Tendencias de Analisis Microbiologicos

• Como parte de un programa microbiologico se están tomando 2

enfoques

– Prueba de microorganismos indicadores

– Prueba de patógenos especifica en producto o en ambiente.

• Muchos analisis ambientales como programa de reducción

microbiana en producto final.

• Da información dinamica del estado de la planta linea por linea

• Identifica los nichos microbiologicos o Puntos criticos.

• Analisis de tendencia perfeccionaría las condiciones sanitarias y buenas

practicas.

4

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Perspectiva Empresas Alimentos

Existen estudios que sugiere que si un

organismo se encuentra en el ambiente,

existe un 70% de probabilidad que

ingrese en el alimento

IAFP Brasil 2009


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6

Objetivos los Sistemas de Verificación

Identificar las fuentes de contaminación

Determinar contaminación en líneas de producción.

Evita condiciones insalubres en proceso.

Es parte del sistema de aseguramiento de calidad.

Para cumplir con normas y regulaciones.


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7

Pasos de Evaluación de Limpieza

• COMO

• DONDE

• CUANDO

• QUE


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Bacterias Fungi

Aeróbicas Anaeróbicas Levaduras Mohos

Gram - Gram +

Enterobacteriaceae

Coliformes

Coliformes Fecales

E. coli

E. coli O157

Staphylococcus Listeria Bacterias Acido Lacticas

Arbol de Familias de Microorganismos


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9

Trabajando con metodos tradicionales… Riesgo:

Dificultad para estandarizar

Mal estado medio de cultivo

Sacarificación Azucares

Estado agua

Tiempo de esterilización

Enfriamiento medio


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10

3MTM PetrifilmTM componentes


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Placas PetrifilmMR

Hongos y Levaduras

S. aureus Alta Sensibilidad de

Coliformes

Enterobacterias

E.coli/ Coliformes

Mesófilos Aerobios Rápida de Coliformes

Coliformes

Listeria sp.


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Monitoreo Limpieza

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Verificación Superficies

Microbiolgico No-Microbiológico

ATP

Bioluminescence Visual Proteinas

Microscopio Sin-Microscopio

Petrifilm Dip

Slides

Contact

Plates

Diluyente/agar Hisopado en

agar

Medios de cultivo General o

Especializado


Especializado

Hisopos o Esponjas

Indirecto Directo

Petrifilm


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Material: celulosa o poliuretano .

Útil para superficies planas y amplias.

1. Esponjado

Verificación de Superficies

hydrasponge.mpg


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2.1 Placas PetrifilmMR:

Aptas para monitoreo de operarios.

Útiles para superficies planas e

irregulares.

2. Métodos Rápidos Placas por contacto.

1. Prehidratación

2. Muestreo

3. Incubación



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3. Hisopados

Alternativas:

1. Método tradicional: Hisopos medios de transporte se

prepararan por separado.

2. Sistemas Autocontenidos con hisopo y caldo listos para

usarse.


Uso: para superficies de difícil acceso y superficies irregulares o rugosas.


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Vía húmeda:

1. Humedecer el hispoco con el Caldo

Letheen.

2. Muestrear la superficie en dos direcciones.

3. Suspender las bacterias en el medio.

4. Inocular las Placas Petrifilm.

Quick SwabMR Procedimiento de Uso

Incubar y observar resultados


Vía Seca

1. Muestrear la superficie.

2. Humedecer el hisopo con el

caldo de transporte.

3. Inocular las Placas Petrifilm


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20


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Verificación Superficies

Microbiolgico No-Microbiológico

ATP

Bioluminescence Visual Proteinas

Microscopio Sin-Microscopio

Petrifilm Dip

Slides

Contact

Plates

Diluyente/agar Hisopado en

agar


Especializado


Especializado

Hisopos o Esponjas

Indirecto Directo

Petrifilm


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Inspección y análisis visual

• Inspección visual rutinaria.

• Inspecciones o auditorías previas a las operaciones

• Apariencia de la superficie, residuos visibles, acumulación de

residuos, manchas, color, crecimiento biológico, olor.

• Superficie grasosa ó limpia

25


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Sistemas de bioluminiscencia:

Miden Presencia de ATP es indicador de “Limpieza” y

deben ser complementados con análisis microbiológicos.

Usan hisopos asociados a enzimas que al reaccionar

generan luz y son leídas en un luminómetro.

3. Hisopados: Bioluminiscencia


../../../Ken Davenport/Desktop/UniLiteNG2.exe

../../../../Desktop/Videos/Cleantrace.mpg


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¿Qué es ATP?

• Molécula presente en todas las células

vivas

• Molécula Universal de Energía

– Almacenamiento & Transporte de

energía intracelular

Adenosina

Fosfatos


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Fuentes de ATP

Microorganismos Seres humanos!!

• Bacterias

• Hongos & Levaduras

Alimentos

• Lácteos

• Cárnicos

• Vegetales

• etc


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Luciferin/Luciferasa (L/L)

En las células, el ATP pierde uno o más fosfatos para liberar energía.

Luciferasa de las luciérnagas utiliza esta energía para producir LUZ.


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Relación simple

Aumento de microorganismos o restos de

alimentos

Aumento de los niveles de ATP

Aumento de las Unidades

Relativas de Luz (URL)


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Métodos para el Monitoreo de

Higiene

Verificación Visual Tests microbiológicos ATP

Rápidez

Objectividad

Sensibilidad

Detecta restos de

productos

Simplicidad

(se require laboratorio)

X

X

X

X


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Ventajas del ATP

• Los resultados están inmediatamente disponibles (30 segundos)

• ATP está presente en TODAS las células vivas, TODOS los microorganismos

contribuyen a la señal.

• ATP está presente en la mayoría de los residuos de alimentos (incluso biofilms), por lo

tanto el lavado deficiente contribuirá a la señal.

• Optimizar procedimientos de limpieza en equipamientos y en reactivos quimicos

• Un mal lavado deja ATP suficiente como para registar un resultado “NO PASA”.

• Muy fáciles de aplicar.

• Los resultados son cuantitativos y lineales con respecto al ATP.


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1. Hisopar la superficie

2. Ingresar el hisopo en tubo

3. Activar presionando hasta el fondo.

Otros metódos para verificar


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Placas PetrifilmMR: Procedimiento

1. Hidratar placas (1 ml) y Refrigerar al menos 2 h.

2. Exponer:

2.1 Horizontalmente

2.2 Verticalmente

3. Incubar y obtener resultados

Verificación Ambiental: Exposición de Placas

Verificación Ambiental


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DONDE?

• Areas Problemáticas- Sitios con Contaminación

• Drenajes- Pisos- Condensacion-Camaras tubos, superficies de

contacto, etc

“ Superfices fáciles de muestrear son generalmente

superficies fáciles de limpiar”


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Cuando?

Depende de exigencia calidad- Método elegido- Información que

necesite

• Visual antes de la desinfeccion

• Micro biologico despues de la desinfeccion

• ATP dependiendo del estado y programa de validacion


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Dirty Surface C

L

E

A

N

I

N

G

D

I

S

I

N

F

E

C

T

I

O

N

Clean

Sweep / Pre rinse

Rinse

Rinse

Disinfect

Large dirt particles

Dirt stuck to surface

Disinfectant

Detergent

Microorganisms


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Que?

• Definir Acciones Correctivas:

• Buscar y cambiar

• Considear revisar protocolos de limpieza- Equipos, Quimicos, tiempo

de desinfectantes, temperaturas.

“Cuando tengo que tomar acciones correctivas, es por que tengo algo

para mejorar- Evaluar una variable a la vez nos traera mejores

resultados y mas concretos”

Punto de Prueba: BOWL CHOPPER

Plan de M uestra: PIZZA LINE 1

ID del Sitio : Test ID 2

Número de veces que se ha usado el Punto de Prueba = 13

0

50

100

150

200

250

300

350

01/0

1/1

997

12:0

0:0

0

p.m

.

01/0

3/1

997

09:4

5:0

0

a.m

.

01/0

5/1

997

10:1

5:0

0

a.m

.

01/0

7/1

997

06:5

0:0

0

a.m

.

01/0

9/1

997

04:3

0:0

0

a.m

.

01/1

1/1

997

09:4

0:0

0

a.m

.

01/0

1/1

998

08:5

5:0

0

a.m

.

Valor A Valor D Resultado Key


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Puntos a tener en cuenta:

Es importante establecer un Programa de Sanidad con mediciones

periódicas.

Cada planta establece los límites de microorganismos en superificies, medio

ambiente y operarios.


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43

GRACIAS

Luciana Maiorano

[email protected]

3M Argentina-Uruguay

mailto:[email protected]

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