of 6
8/20/2019 isolasi dgn medium.ppt
1/12
Medium Pertumbuhan untuk
Isolasi Bakteri
Muh. Nasrum Massi, MD., Ph.D
Makassar, Indonesia
8/20/2019 isolasi dgn medium.ppt
2/12
Isolasi & identifikasi bakteriIsolasi & identifikasi bakteri
Pendahuluan:Pendahuluan:
1.1. Kultur u/ isolasi bakteri dr spesimen penderitaKultur u/ isolasi bakteri dr spesimen penderita
2.2. Kmd identifikasi sifat bakteri dgn: morfologi sel,Kmd identifikasi sifat bakteri dgn: morfologi sel,
sifat pearnaan, sifat pertumbuhan morfologisifat pearnaan, sifat pertumbuhan morfologikoloni, tes biokimia dll.koloni, tes biokimia dll.
!.!. Pertumbuhan koloni min 1" #am, identifikasi 2 hrPertumbuhan koloni min 1" #am, identifikasi 2 hr #adi spe$ies bakteri pen%ebab infeksi min ! hr. #adi spe$ies bakteri pen%ebab infeksi min ! hr.
&.&.
Kadang butuh tes aglutinasi u/ tentukan serot%peKadang butuh tes aglutinasi u/ tentukan serot%pe'.'. Medium ad lingk buatan %g dipakai u/Medium ad lingk buatan %g dipakai u/
mempertahankan a/ mengembang(biakkan bakterimempertahankan a/ mengembang(biakkan bakteridi luar tubuh manusia.di luar tubuh manusia.
8/20/2019 isolasi dgn medium.ppt
3/12
Medium Transfor= carrier mediumMedium Transfor= carrier medium
)ungsi:membaa spe$imen agar bakteri tetap hidup di)ungsi:membaa spe$imen agar bakteri tetap hidup di
luar tubuh. *etap hidup tapi tak berkembang biak.luar tubuh. *etap hidup tapi tak berkembang biak.
+ontoh: $arr% and blair medium u/ spe$imen %g $uriga+ontoh: $arr% and blair medium u/ spe$imen %g $uriga
ada bakteri gr neg termasuk flora normal tubuh, misada bakteri gr neg termasuk flora normal tubuh, misu/ tin#a %g ada salmonella, - $oli apusan rektum adau/ tin#a %g ada salmonella, - $oli apusan rektum ada
ibrio.ibrio.
tuard medium u/ spe$imen dgn N gonorrhoe a/ strep.tuard medium u/ spe$imen dgn N gonorrhoe a/ strep.Pd dasarn%a membaa semua #enis bakteri.Pd dasarn%a membaa semua #enis bakteri.
8/20/2019 isolasi dgn medium.ppt
4/12
Medium dasarMedium dasar
Medium %g mengandung bahan mkn 0Medium %g mengandung bahan mkn 0
kebutuhan lain u/ bakteri bertumbuh.kebutuhan lain u/ bakteri bertumbuh.
Nutrient broth: dr ekstrak daging sapi 0 pepton Nutrient broth: dr ekstrak daging sapi 0 peptontambah agar shg padat a/ semi padat nutrienttambah agar shg padat a/ semi padat nutrient
agar ini agar murni u/ memadatkan medium.agar ini agar murni u/ memadatkan medium.
3ir pepton mengandung pepton, mis medium3ir pepton mengandung pepton, mis medium
gula(gulagula(gula
8/20/2019 isolasi dgn medium.ppt
5/12
Enriched mediumEnriched medium
Medium diperka%a dgn drh, bgn(bgn drh, $airan tubuhMedium diperka%a dgn drh, bgn(bgn drh, $airan tubuh
man, suplemen khusus %g dibutuh bakteri.man, suplemen khusus %g dibutuh bakteri.
4lood agar plate kandungan butir drh merah domba %g4lood agar plate kandungan butir drh merah domba %g
utuh terlihat hemolisis sel(sel drh disekeliling koloniutuh terlihat hemolisis sel(sel drh disekeliling koloni bakteri %g melisis sel drh merah tsb. bakteri %g melisis sel drh merah tsb.
+ho$olate agar plate mengandung sel drh %g lisis krn+ho$olate agar plate mengandung sel drh %g lisis krn
pemanasan shg lepas N3D faktor 5 0 6 hemin 7 pemanasan shg lepas N3D faktor 5 0 6 hemin 7influensa butuh 8at tsb u/ tumbuh bisa #uga u/ Ninfluensa butuh 8at tsb u/ tumbuh bisa #uga u/ N
gonorrhoegonorrhoe
8/20/2019 isolasi dgn medium.ppt
6/12
Enrichment mediumEnrichment medium
Medium u/ mempersubur pertbh bakteri t! tuMedium u/ mempersubur pertbh bakteri t! tu
spe$imen di$urigai ada bakteri kontaminanspe$imen di$urigai ada bakteri kontaminan
3ir pepton alkalis: mempersubur ibrio pd tin#a3ir pepton alkalis: mempersubur ibrio pd tin#aKaldu selenite a/ mediumKaldu selenite a/ medium
rappaportmempersubur salmonella dlm tin#a.rappaportmempersubur salmonella dlm tin#a.
8/20/2019 isolasi dgn medium.ppt
7/12
Selective mediumSelective medium
Medium %g han%a ditumbuhi o/ bakteri t!, krn adaMedium %g han%a ditumbuhi o/ bakteri t!, krn ada penghambat bg bakteri lain mis menumbuhkan penghambat bg bakteri lain mis menumbuhkan bakteri patogen dr daerah %g ban%ak flora normal. bakteri patogen dr daerah %g ban%ak flora normal.
agar: han%a sa#a agar: han%a sa#a*a%er Martin agar isolasi N gono krn ada suppl khusus,*a%er Martin agar isolasi N gono krn ada suppl khusus,
flora normal tidak tumbuh9 *r. rogenital.flora normal tidak tumbuh9 *r. rogenital.
*ellurite medium u/ $ difteriae, flora normal tidak*ellurite medium u/ $ difteriae, flora normal tidak
tumbuh. ((( tr gastro intestinaltumbuh. ((( tr gastro intestinalM$ +onke% agar u/ basil gr negatif dr ekstrak empeduM$ +onke% agar u/ basil gr negatif dr ekstrak empedu
%g menghambat bakteri gr pos%g menghambat bakteri gr pos
8/20/2019 isolasi dgn medium.ppt
8/12
Differential mediumDifferential medium
Medium %g dipakai u/ identifikasi bakteri berdsr sifatMedium %g dipakai u/ identifikasi bakteri berdsr sifat biokimia dr bakteri #d u/ medium tes biokimia. biokimia dr bakteri #d u/ medium tes biokimia.
M$ +onke% agar: ada laktose bakteri %g meragikanM$ +onke% agar: ada laktose bakteri %g meragikan
laktose(( koloni merah, %g tidak meragikan(( taklaktose(( koloni merah, %g tidak meragikan(( tak berarna berarna
*I agar: ada laktose, sukrose, maltose9 merah fenol*I agar: ada laktose, sukrose, maltose9 merah fenolsbg indikator.sbg indikator.
Medium tes biokimia: produksi 72((*I agar ureaseMedium tes biokimia: produksi 72((*I agar urease ;medium urease nitrat #adi nitrit;nitrit broth $itrat ;medium urease nitrat #adi nitrit;nitrit broth $itratsumber energi9 medium $itrat dllsumber energi9 medium $itrat dll
8/20/2019 isolasi dgn medium.ppt
9/12
Medium khususMedium khusus
Medium khusus u/ bakteri t!Medium khusus u/ bakteri t!
8/20/2019 isolasi dgn medium.ppt
10/12
8/20/2019 isolasi dgn medium.ppt
11/12
8/20/2019 isolasi dgn medium.ppt
12/12
Identifikasi bakteriIdentifikasi bakteri
1.1. Pearnaan gram dr biakan murniPearnaan gram dr biakan murni
2.2. *es( tes biokimia*es( tes biokimia
!.!. *es agglutinasi u/ serot%pe satu isolate*es agglutinasi u/ serot%pe satu isolateidentifikasi antigen atau antibodi.identifikasi antigen atau antibodi.