Lab 1 Microscopa Ptica

5/22/2018 Lab 1 Microscopa Ptica

1/37

NORMAS DE

LABORATORIOPontificia Universidad Catlica de Valparaso

Facultad de Ciencias Bsicas y MatemticasInstituto de Biologa


2/37

Obligaciones

delantal OBLIGATORIO.

80% de asistencia.

entrada al laboratorio en horario fijado.

ingreso al prctico con la gua delaboratorio pertinentey con losmateriales solicitados.

prohibido el cambio de seccin.


3/37

pertenencias guardadas en los lockers.

pelo largo tomado.

prohibido fumar, beber y/o comer.

comportamiento adecuado yrespetuoso con docentes, ayudantes ycompaeros.

dejar los microscopios apagados ydesenchufados.

Obligaciones


4/37

todo material debe quedar limpio alfinal del prctico.

cuidado con el material utilizado.

cualquier material cortopunzante rotodebe ser debidamente desechado.

celulares apagados o en tono de

silencio. profundizar los conocimientos previo

a la actividad.

Obligaciones


5/37

Evaluaciones Todas las clases se realizar un control de

entrada. (20% del laboratorio) Primera prueba de laboratorio, terica-

prctica. (45% del laboratorio) Segunda prueba de laboratorio, terica. (35%del laboratorio)


6/37

Programa de actividades

Lab 1. Microscopia ptica

Sistemas del microscopioPoderes del microscopio

Formacin de la imagen


7/37


Lab 2. Formas y tamaos celulares

Reconocimiento de tiposcelulares en tejidos.

Determinacin de factoresque determinan tiposcelulares.

Tejido epitelial y conjuntivo

Tejido muscular y nervioso


8/37

Lab 3. Tipos de microscopia


Conocimientoterico de los tiposde microscopiautilizadoscomnmente enbiologa celular.

Tipos de tcnicasen la preparacin delas muestras.


9/37

Lab 3. Frotis de sangre.


Obtencin de muestras

histolgicas. Observacin ycaracterizacin declulas sanguneas.


10/37

Lab 4. Fagocitosis


Obtencin dehemocitos deMytilus edulis.

Observacin defagocitosis en

clulas de levadura.Caracterizacin delas etapas de lafagocitosis.


11/37

Lab 5. Citoesqueleto y Mitosis.



12/37

Lab 6. Conteo y viabilidad celular.


Tcnica experimental paraestimar viabilidad de clulasde Saccharomyces cerevisiaeen diferentes condiciones.

Conteo de clulas en cmara

de neubauer.


13/37


Lab 7. Extraccin de protenas

Lisis Celular

Extraccinmecnica

Buffer de lisis


14/37

Lab 8. Cuantificacin de protenas.Mtodo de Bradford.


Realizar una curva decalibrado utilizando BSAcomo protena patrn.

Determinar la

concentracin de protenatotal en una muestra.


15/37

Lab 9. Electroforesis de protenas


Conocer la tcnica de

separacin deprotenas en geles deA/BA.

Calcular el PMapararente de unamuestra problema.


16/37

Laboratorio N 1

Microscopa ptica

Laboratorio Biologa Celular


17/37

Microscopia

Una clula animal tpica mide de 10 a 20 m de dimetro, lo quees unas 5 veces ms pequeo que la partcula ms pequea visible

al ojo humano desnudo. Las clulas animales no-solo son pequeas,sino que tambin son incoloras y transparentes.

La descripcin de sus detalles internos se debe en gran parte, aque durante la ltima parte del siglo XIX, se desarrollaron

variadas tinciones que permitieron aumentar el contraste losuficiente como para hacer evidentes las diferentesestructuras intracelulares.


18/37

1 metro = 100 centmetros

1 centmetro = 10 milmetros1 milmetro = 1000 micras1 micra () =1.000 nanmetros1 nanmetro = 10


19/37

Sistemas que componen unMicroscopio

Sistema Mecnico Sistema deIluminacin

Sistema deAmplificacin


20/37

Sistema Mecnico

Pie

Columna

Platina

Tubo o can

Revolver o Tambor

Tornillos de focalizacin

Macromtrico

Micromtrico

Carro de Vernier


21/37

Sistema de iluminacin

Fuente luminosa

Espejo

condensador

Diafragma Iris

Anillo porta filtro

Sistema de Amplificacin

Lentes Oculares

Lentes objetivos


22/37

A. Oculares

B. Revolver

C. Lentes objetivos

D. PlatinaE. Carro de vernier

F. Condensador.

G. Tornillo macromtrico.

H. Tornillo micromtrico

I. Diafragma Iris

J. Tornillo

K. Interruptor

L. Potencimetro

M. Brazo

N. Pie

M


23/37


24/37

Sistema de iluminacin y formacinde la imagen


25/37

Propiedades del microscopio

Poder de Resolucin

Poder de Penetracin

Poder de Aumento

Poder de Definicin


26/37

Poder de Resolucin

Capacidad del instrumento para dar imgenesdistintas de puntos situados muy cerca uno delotro.

Poder de resolucin = 1______Lmite de resolucin

RELACIN INVERSAMENTEPROPORCIONAL


27/37

Limite de resolucin (LR)

Distancia mnima a la cual se deben encontrardos objetos para verlos por separado.

LR = K ___AN

K = 0.61 (para microscopios pticos)

= longitud de onda de la luz blanca (0.5 m).AN = apertura numerica


28/37

Apertura Numrica

Producto (n sen ) que aparece en la expresindel poder de resolucin

A.N = n sen

n= ndice de refraccin del medio:

Aire = 1 A. inmersin = 1,4

Semiangulo deapertura

Objetivo


29/37


30/37

Semingulo de apertura

AN = n sen


31/37

Ejercicios:

Calcule el limite de resolucin yposteriormente el poder de resolucin con lossiguientes datos:

I:

- Lambda 0.5 micrmetros- ndice de refraccin del aire y aceite- Semiangulo igual a 14,4

II:- Lambda 0.4 micrmetros.- ndie de refraccin del aire y aceite.- ngulo de apertura de 60


32/37

Muestra de Hilos de colores Con el objetivo de 5x Cuntos colores de

hilos distintos distingue? Al pasar al objetivo de 10x Qu sucede? y al

de 40x Qu explicacin le da usted a esto? Para observar uno de los hilos sobre el otro

con mas precisin que estructura (parte) del

microscopio deber mover? Por qu?


33/37

Poder de definicin:

Es la capacidad del microscopio de dar imgenesntidas, de contornos precisos


34/37

Poder de Penetracin

Cualidad de las lentes que permite averiguarhasta que lmite podemos reconocer detalles deestructuras situadas a diferentes niveles de la

preparacin.Ejercicio: Con los hilos de colores Cmo varia la penetracin

(profundidad) cuando se cambia de objetivo de 10x al de

40x? Determinar con cual de los aumentos se obtiene:

Mayor amplitud de campo Menor distancia de trabajo Mayor poder de resolucin


35/37

Poder de aumentoRazn que existe entre el tamao de la imagen producida

por el microscopio y el tamao del objeto observado.

Ejercicio:

Si tengo el objetivo del microscopio en 40x y el ocular en10x, en cuanto veo aumentada la imagen.

Aumento total = aumento lente objetiva x aumento lente ocular

Directamente proporcional


36/37

Muestra de Papel milimetrado

Observar una muestra de papel milimetrado con unaletra impresa ( 5X)

Con un papel milimetrado medir la distancia entre el

objetivo y la preparacin en el portaobjeto. Usando las lneas del papel milimetrado determine eldimetro del campo observado, luego el radio y apartir de ste calcule el rea del campo.

Usando las lneas del papel milimetrado determine eltamao de la letra.


37/37

Enfocar la letra con el objetivo 10X: Mida la distancia entre el lente objetivo y la

preparacin con un papel milimetrado. Describa como se ve la letra (derecha, invertida,

difusa, etc) Desplace la platina a la derecha y a la izquierda

en que direccin se mueve la letra? Usando las lneas del papel milimetrado, calcule el

rea del campo observado

Muestra de Papel milimetrado

Date post:	13-Oct-2015
Category:	Documents
Upload:	romina-santander
View:	22 times
Download:	0 times

Lab 1 Microscopa Ptica

Documents