Diapositiva 1

Low BCR-ABL expression levels in hematopoietic precursor cells enable persistence of chronic myeloid leukemia under imatinib Ashu Kumari, Cornelia Brendel, Andreas Hochhaus, Andreas Neubauer and Andreas BurchertJanuary, 2012 Alumno: Jorge Prez V.Profesores: TM. Dr. Rodrigo Moore TM. Lic. Simn Navarrete

Universidad de TalcaFacultad de Ciencias de la SaludDepto. De Bioqumica Clnica e Inmunohematologa

IntroduccinLMC Trastorno Stem cells hematopoyticas (STH).Expresin gen aberrante BCR-ABL que genera una protena de fusin.Mesilato de imatinib (IM) en un inhibidor selectivo de BCR-ABL.Induce altas tasas de remisiones citogenticas estables (CCyRs).

Persistencia de clulas madres en pacientes en CMR pueden causar una recada hematolgicaPersistencia de LMC se debe a insensibilidad inherente por parte de clulas madres primitivas y maduras.

mRNA BCR-ABLCFU BCR-ABL positivosHiptesis: La persistencia de la LMC puede resultar de una supervivencia selectiva de los precursores que presentan una baja expresin de BCR-ABL.Objetivo general:Estudiar diferentes respuestas a IM en pacientes con diagnstico reciente (LMC-Dx) y MMRObjetivo especficos:Realizar seguimiento de la enfermedad residual en pacientes MMR.Estudiar diferentes fracciones de la MO de los pacientes.Analizar genticamente los clones presistentes.Analizar respuesta de LMC a tratamiento IM en pacientes con diagnstico reciente.

Respuesta TipoTcnicaHematolgicaParcialCompleta CHRHemogramaCitogenticaMenor Parcial PCyRCompleta CCyRFISH (Ph+)MolecularMayor MMRCompleta CMRPCR (BCR-ABL)Materiales y MtodosSeleccin de pacientes y evolucin de la respuesta clnica

Seleccin de progenitores CD34+ por MACSClasificacin de clulas (cell sorting) linaje negativo (lin-): CD2, CD3, CD4, CD8, CD14, CD19, CD20, CD56.Ac. Anti-CD34 y CD38 lin- CD34+ CD38- primitivas lin- CD34+ CD38+ maduras

Aislamiento de mRNA y RT-PCR cualitativa para BCR-ABLPCR Cuantitativa BCR-ABLEnsayo CFUFISH de interfase BCR-ABL

Transduccin retroviral en cultivo celular (Ratones C57Bl/6; clulas 32D LSK y LK) Mutagnesis ENU y deteccin de la resistencia IM basado en clulasWestern blottingTcnicasResultados

Fig1. Deteccin mRNA transcrito BCR-ABL en subpoblaciones de MO. (B) RT-PCR BCR-ABL normalizado a ABL, se muestran las subpoblaciones ordenadas de pacientes con diagnstico primario de LMC (LMC-Dx) y los pacientes MMR. (**P