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M-1 BB BOB1 ÕBE.%B1 æ B.B)Þ-~ B¶ Ã ³- B¶B B B¶BkB ......BB BOB1 ÕBE.%B1 æ B.B) Þ-~ B Ã...

Date post: 10-Feb-2021
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いずれの検体も下記の条件にて作製 ・末梢血 ・スピナ法 ・メイ・グリュンワルド・ギムザ染色 Photo No. M-3,4 M-5,6,7 M-8,9 M-10,11 Sample Name Sample A Sample B Sample C Sample D マウス/(ICR) マウス/(ICR) ラット/(Fisher) ラット/(Fisher) Age 90w 110w 110w 105w 投薬あり 投薬あり 投薬なし 投薬あり 瀕死例と して剖検 投与終了 投与終了 瀕死例と して剖検 M-1
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  • いずれの検体も下記の条件にて作製・末梢血・スピナ法・メイ・グリュンワルド・ギムザ染色

    Photo No. M-3,4 M-5,6,7 M-8,9 M-10,11

    Sample Name Sample A Sample B Sample C Sample D

    マウス/♂(ICR)

    マウス/♂(ICR)

    ラット/♀(Fisher)

    ラット/♀(Fisher)

    Age 90w 110w 110w 105w

    投薬あり 投薬あり 投薬なし 投薬あり

    瀕死例と

    して剖検投与終了 投与終了

    瀕死例と

    して剖検

    M-1

  • Sample NamePhoto No.

    Sample AM-3,4

    Sample BM-5,6,7

    Sample CM-8,9

    Sample DM-10,11

    HCT (%) 34.1 24.6 43.9 14.3HGB (g/dl) 10.3 6.7 15.4 4.1RBC (x10^6/µL) 7.2 3.31 8.72 1.85MCV (fL) 47.3 74.3 50.3 76.9MCH (pg) 14.4 20.1 17.6 22.2MCHC (%) 30.3 27.1 35 28.9PLT (x10^3/µL) 2118 87 518 266RC%A (%) 6.8 13.8 3 20.23.WBC (x10^3/µL) 2.63 11.13 6.51 220.08

    3.NEU (%) 35.7 36.1 52.7 8.03.LYM (%) 59.3 37.7 42 66.43.MON (%) 2.8 12.3 1.7 3.3

    3.EOS (%) 1.4 3.8 0.6 0.13.BAS (%) 0 3.4 0.2 2.93.LUC (%) 0.8 6.8 2.8 19.4

    3rNEU (x10^3/µL) 0.94 4.01 3.43 17.563rLYM (x10^3/µL) 1.56 4.19 2.73 146.033rMON (x10^3/µL) 0.07 1.37 0.11 7.223rEOS (x10^3/µL) 0.04 0.42 0.04 0.113rBAS (x10^3/µL) 0 0.38 0.01 6.413rLUC (x10^3/µL) 0.02 0.00 0.18 42.74

    M-2

  • M-3

  • M-4

    1

    2

  • M-5

  • M-6

    3

  • M-7

    4

  • M-8

  • M-9

    5

  • M-10

  • M-11

    6

    7

  • 細胞名と観察のポイントを教えてください

    動物種:CD-1(ICR)マウス

    5週齢から発がん性試験を開始、無処理群粉末飼料を58週間投与時に切迫殺した。

    標本は末梢血のみ

    血液学的検査:WBC 270×103 cell/uLRBC 2.94×106 cell/uLHB 5.7 g/dLHct 20.1 %PLT 618×103 cell/uLRetic 15.1 %

    脾臓、リンパ節の腫大を認めた。

    I-1

  • I-2

  • I-3

    1

  • I-4

    2

    3

  • 【動物モデル】

    ●間質性肺炎モデル作製

    麻酔下でマウスにブレオマイシン2.5 mg/kg

    (約50

    μL)を気管内投与し,その7

    日後に安楽死させ,BALFを採取した.

    動物:C57BL/6Jマウス(雄,8週齢)

    ●気管支喘息モデル作製

    マウスの両鼻にダニ抽出物Dfを25 µL/片鼻の容量で点鼻した.点鼻は初日を

    Day 0としてDay 0, 1, 2, 3, 4および11の日程で実施し,Day 14に安楽死させ, BALFを採取した.

    動物:

    NC/NgaTndマウス(雄,8週齢)

    気管支肺胞洗浄液(BALF)中の白血球分類について判定困難(?印)の細胞を判定してください

    1. 採取したBALFを遠心後に上清を除去し、EDTA・PBSを加えて再遠心し,一定

    量の上清を除去して濃縮.2. マイクロピペットを用いて,1スポット当たり1 μLをスライドに滴下する.

    3. ドライヤーの冷風で風乾後,ディフ・クイック染色液を用いて染色.

    (血液標本ではスピナーを使用するが,スライド上に滴下して乾燥させる方法を試みた)

    【塗抹標本作製方法】

    K-1

  • ×1000

    :リンパ球と判定

    :マクロファージと判定?

    :判定困難(3つ)

    BALF中の白血球鏡検写真(健常マウス)

    リンパ球?

    リンパ球?

    K-2

  • ×1000

    BALF中の白血球鏡検写真(ブレオマイシン気管内投与7日目)

    :リンパ球と判定

    :マクロファージと判定

    :好中球?

    マクロファージ?:判定困難

    (1つ)

    K-3

  • ×1000

    BALF中の白血球鏡検写真(ブレオマイシン気管内投与7日目)

    マクロファージ?

    マクロファージ?

    :リンパ球と判定

    :マクロファージと判定

    :好中球?

    :判定困難(2つ)

    K-4

  • 【質問】

    通常、血液標本の作製にはスピナーを使用しま すが,今回は,スライド上に滴下して乾燥させる 方法を試みました。

    1. 正しい鏡検結果を得るためには,スピナーもしく はサイトスピンを使わないと不可能でしょうか?

    もしくはスピナーやサイトスピンを使用しても困 難な場合が多いのでしょうか?

    2. 今回のスライドへ滴下する方法では、固定液に 浸漬する際に、血球が流れる事はありうるでしょう

    か?

    K-5

  • 症例Wistar rat ♀

    15週齢

    投薬有り

    一般状態や摂餌量・体重減少はない無処置群との比較

    RBCx106 /μL

    HGBg/dL

    HTC%

    MCVfL

    MCHPg

    MCHCg/dL

    PLTx109 /μL

    Retic%

    症例ラット

    6.39 11.9 37.1 58.1 18.7 32.1 531 2.2

    無処置群ラット

    7.79 14.6 45.0 57.8 18.8 32.5 1078 2.9

    WBCx103 /μL

    NEUTx103 /μL

    LYMPx103 /μL

    MONOx103 /μL

    EOSx103 /μL

    BASOx103 /μL

    LUCx103 /μL

    症例ラット

    159.953.0

    (1.9%)149.55

    (93.5%)0.2

    (0.1%)0.05

    (0.0%)5.15

    (3.2%)1.95

    (1.2%)

    無処置群ラット

    5.100.77

    (16.4%)4.07

    (78.3%)0.12

    (2.6%)0.05

    (1.0%)0.02

    (0.4%)0.06

    (1.2%)

    スライド1,2,3 末梢血,

    サイトスピン標本

    メイーギムザ染色

    質問・スライド1のような血液塗抹標本を見た経験がありますか?・AとBの細胞をどのように分類しますか?

    A-1

  • スライド1 A-2

  • スライド2

    A-3

  • スライド3

    A-3


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