4
Agilent Bio-Monolith Protein A 및 Protein G Affinity 컬럼 MAB 정량화와 분석의 선택성 확대
Agilent Bio-Monolith Protein A 및 Protein G Affinity 컬럼
MAB 정량화와 분석의 선택성 확대
2
AGILENT BIO-MONOLITH PROTEIN A 및 PROTEIN G AFFINITY 컬럼
• 신속한 분리를 통해 분석법 개발 시간과 비용을 줄이고 생산적인 결과를 얻을 수 있는 기회를 제공합니다.
• 높은 결합 능력을 통해 적절한 농도 범위에서 적정 농도를 측정하며, 추가 특성화를 위해 후보 산물을 정제할 수 있습니다.
넓은 농도 범위
그림 1. Agilent Bio-Monolith Protein A 컬럼을 사용하여 CHO 세포의 전형적인 mAb 적정 농도 범위에서 진행한 IgG1 정량분석 결과는 직선성을 나타냅니다.
신속하고 정확하게 MAB 적정 농도(TITERS) 측정
단클론성 항체(mAb)의 적정 농도를 측정하고 추가적인 특성화를 위해 미량의 후보 산물을 정제하는 기능은 경제적인 생산 공정 개발에 있어 꼭 필요한 능력입니다.
Agilent Bio-Monolith Protein A 및 Protein G 컬럼은 분석법 개발 및 최적화, 생산 조건에서 일관성 있게 우수한 성능을 발휘합니다. 이 컬럼은 공정 개발, 세포 클론 선택, 발효 조건의 최적화 그리고 생산 과정에서의 적정 농도 측정에 적합하며 이를 통해 최적의 수집 시기를 결정합니다. 이는 올바른 세포계 선택과 수집 시기 파악에 도움을 주므로 공정 수율과 경제성을 높일 수 있습니다.
• 이제 새로운 Protein G Monolith 컬럼을 이용해 IgG 아강의 선택성을 확대할 수 있습니다.
• 컬럼 수명이 길고 복합한 시료 분석에서도 막힘이 적어 컬럼 세척 및 교체 빈도가 줄어듭니다.
모양이 특이하다고요? 아마도요. 그러나 Agilent Bio-Monolith Protein A 및 Protein G 컬럼은 재현 가능한 친화성 크로마토그래피에 필요한 대용량과 성능을 제공합니다.
R2 = 0.9999
0
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.6 1.8 2
Area
min0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4
mAU
0
500
1000
1500
2000
2500
2 mg/mL1mg/mL
0.5 mg/mL0.2 mg/mL
0.1 mg/mL0.05 mg/mL
0.02 mg/mL
min1.2 1.4 1.6 1.8 2 2.2 2.4
mAU
0
50
100
150
200
250
300
0.02 mg/mL0.05 mg/mL
0.1 mg/mL
0.2 mg/mL
0.5 mg/mL
Concentration (mg/mL)
3
AGILENT BIO-MONOLITH PROTEIN A 및 PROTEIN G AFFINITY 컬럼
입증된 특이성
그림 2. Bio-Monolith Protein A 컬럼을 사용하여 세포 배양 상청액에서 신속하고 특이성 있게 IgG1을 수집합니다. (A) E.coli 세포 용해질 상청액(총 40ug 중에 IgG1 2ug, 세포 용해질 단백질 38ug이 포함됨)이 컬럼에 로드되었습니다.
긴 컬럼 수명3
용해질 단백질
min 0 0.25 0.5 0.75 1 1.25 1.5 1.75 2 2.25
mAU
0
50
100
150
200
250
0.11
3 min 0 0.25 0.5 0.75 1 1.25 1.5 1.75 2 2.25
mAU
0 200
600
1000
1400
용해질 단백질에 IgG1이 포함됨
세척 용출 재평형화
통과액(8µm)
흡광
도(U
V 28
0mm
)
머무름 시간(분)
min 0.25 0.5 0.75 1 1.25 1.5 1.75 2 2.25
mAU
0 20 40 60 80
A
B
베이스라인 확장
IgG1
대용량에 신뢰할 수 있는 정확도까지
핵심:레인 1: 분리 전 전혈청
레인 2: IgG 표준물질
레인 3: 피크 1(통과한 분획물)레인 4: 피크 2(단백질 A 결합 분획물; 즉, IgG1 및 IgG2)
0
200
400
600
800
1000
1200
0 0.5 1 1.5 2 2.5 30
20
40
60
80
100
120
상대
흡광
도[m
AU]
% 기
울기
시간[분]
그림 4. Bio-Monolith Protein A 컬럼을 사용하여 신속하게 사람의 혈장에서 사람의 다클론성 IgG를 정량화하였습니다. IgG는 결합 상태이고 100% 완충액 B가 단계적으로 적용되었으며, IgG는 1.5분에 용출되었습니다.
100
300
500
700
900
1100
1300
1500
1700
1900
0 100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000
피크
면적
주입 수
그림 3. 1,000회 이상의 IgG3 결합과 용출을 통해 Agilent Bio-Monolith Protein G 컬럼의 사용 수명을 입증하였습니다. 피크 면적의 높은 재현성 덕분에 IgG3 적정 농도를 정확히 정량화할 수 있습니다.
피크 1
피크 2
기타 정보 http://www.agilent.com/chem/ AdvanceBio
지금 바로 Agilent Bio-Monolith Protein A 및 Protein G 컬럼을 주문하세요 www.agilent.com/chem/store
www.agilent.com/chem/contactus에서 애질런트 지역 사무소나 애질런트 공인 대리점에 대해 문의하시기 바랍니다
미국 및 캐나다 1-800-227-9770 [email protected]
아시아 태평양 [email protected]
연구 전용. 진단 용도로는 사용하실 수 없습니다. 이 정보는 사전 공지 없이 변경될 수 있습니다.
© Agilent Technologies, Inc., 20152015년 5월 23일, 한국에서 발행 5991-5961KO
서울 강남구 역삼로 542 신사제2빌딩 2층 우)135-848한국애질런트테크놀로지스(주) 생명과학/화학분석 사업부 고객지원센터 080-004-5090 www.agilent.co.kr
주문 정보
Agilent Bio-Monolith Protein A 및 Protein G 컬럼
설명 부품 번호
Bio-Monolith Protein A, 4.95 x 5.2 mm 5069-3639
Bio-Monolith Protein G, 4.95 x 5.2 mm 5190-6900
모든 분리 문제를 위한 애질런트 첨단 솔루션
Infinitely better technology - Agilent 1200 Infinity 시리즈
여러분이 일상적인 분석 작업을 위한 업무용 LC 시스템을 필요로 할 때나 고분리능 첨단 LC/MS 시스템을 필요로 할 때, Agilent 1200 Infinity 시리즈는 최상의 분리능과 감도를 제공합니다. 시간 당 분리능을 개선하고 재개발이나 재검교정 없이 간편한 시스템 간 분석법 이전을 보증합니다. 더 자세한 내용은 agilent.com/chem/infinity를 참조하시기 바랍니다.
보다 신속하고 일관성 있는 생체분자의 특성 규명 – Agilent AdvanceBio 컬럼
Agilent AdvanceBio 컬럼은 펩타이드와 단백질의 분리 및 특성화를 위해 일관되고 탁월한 성능을 제공합니다. 이 첨단 컬럼은 정확도와 생산성을 높여주고 분석을 방해할 수 있는 간섭을 없애줍니다. 컬럼은 엄격한 테스트를 거쳤으며 애질런트의 60일 품질 보증이 지원됩니다.
자세한 내용은 agilent.com/chem/AdvanceBio를 참조하시기 바랍니다.
