OWZG G15 E0501 (847) 1

Multifibren* USee shaded sections - updated information versus edition from August 2003

Intended UseQuantitative determination of fibrinogen in plasma.

Summary and ExplanationDepressed levels of fibrinogen are observed ina) acquired hypo- or afibrinogenemia. Acquired fibrinogen deficiency states occur especially as

a result of intravascular proteolysis of fibrinogen by thrombin (disseminated intravascular co-agulation, e.g. in obstetrics, after surgery), snake venoms or plasmin (primary hyperfibrinoly-sis after streptokinase, urokinase or tPA therapy). Furthermore, moderate hypofibrinogen-emias may occur in cases of diminished production (in acute or chronic liver diseases), loss into the intravascular space (e.g. in ascites or acute hemorrhage and burns) or increased degradation (in shock or carcinoma).

b) congenital hypo- and afibrinogenemias.

Temporarily elevated levels of fibrinogen are observed as a result of the behavior of fibrinogen as an ”acute-phase protein”:a) Transitory hyperfibrinogenemias may occur after operations, traumas, myocardial infarction

and infections1.b) Persistent hyperfibrinogenemias may be seen in patients with neoplasias and chronic inflam-

matory diseases.Levels of fibrinogen increase slightly with age. Elevated fibrinogen levels are a risk factor for cardiovascular disease2.

Principle of the MethodModification of the Clauss method.Citrated plasma is brought to coagulation by a large excess of thrombin. Here the coagulation time depends largely on the fibrinogen content of the specimen.

ReagentsMaterials providedMultifibren* U, [REF] OWZG 218 x l 5 mL orMultifibren* U, [REF] OWZG 1514 x l 2 mLEach pack of Multifibren* U contains a lot- and method-specific evaluation table.

CompositionMultifibren* U: bovine thrombin (50 IU/mL), fibrin-aggregation retarding peptide (gly-pro-arg-pro-ala-amide, 0.15 g/L), calcium chloride (1.5 g/L), hexadimethrine bromide, polyethylene glycol 6000, sodium chloride, Tris, bovine albumin; Preservative: sodium azide (< 0.1 %).

Warnings and Precautions1. For in-vitro diagnostic use only.2. Contains sodium azide (< 0.1 %) as a preservative. Sodium azide can react with copper or

lead pipes in drain lines to form explosive compounds. Dispose of properly in accordance with local regulations.

Preparations of the ReagentsDissolve the Multifibren* U with the amount of distilled or deionized water indicated on the label. Mix carefully once more before using.Bring the reagents to +37 °C before measuring (not required for automated coagulation analyz-ers with heated reagent probes).

Storage and StabilityStored unopened at +2 to +8 °C Multifibren* U may be used by the expiry date given on the label. Stability after reconstitution:+37 °C 8 hours+15 to +25 °C 1 day+2 to +8 °C 5 days≤-20 °C 2 monthsInformation about on-board stability is specified in the Reference Guides (Application Sheets) for the different coagulation analyzers.

Materials required, but not providedFibrinogen Calibrator KitKaolin Suspension for Fibrintimer (BFT* II)Control Plasma NControl Plasma PCi-Trol® Level 1Coagulation analyzer (see chapter "Equipment")

EquipmentMultifibren* U can be used on automated coagulation analyzers. Siemens Healthcare Diagnostics provides Reference Guides (Application Sheets) for several coagulation analyz-ers. The Reference Guides (Application Sheets) contain analyzer/assay specific handling and performance information which may differ from that provided in these Instructions for Use. In this case, the information contained in the Reference Guides (Application Sheets) supersedes the information in these Instructions for Use. Please also consult the instruction manual of the instrument manufacturer!

SpecimensMix 1 part sodium citrate solution (0.11 mol/L) with 9 parts venous blood. Centrifuge the blood specimen at 1500 x g for no less than 15 minutes at room temperature. Remove the supernatant plasma and store at +15 to +25 °C until required for the test.Stability of the samples:+15 to +25 °C 8 hours

ProcedureManual:

Bring Multifibren* U to +37 °C before using.Pipette into a test tube warmed to +37 °C:Sample 100 µLIncubate for 60 seconds at +37 °CMultifibren* U (+37 °C) 200 µLDetermine coagulation time

Automatic:See chapter "Equipment".

Calculating the reference curveCalculating the reference curve is done with the Fibrinogen Calibrator Kit.These calibrators are tested as samples in the particular coagulation analyzer. The graphic representation of the values obtained is best plotted in a log-log format.A new reference curve must be calculated each time there is a change in the device used or a change in the lot of Multifibren* U.

Internal Quality ControlNormal range: Control Plasma N, Ci-Trol® Level 1Pathological range: Control Plasma PTwo levels of quality control material (normal and pathologic range) have to be measured at start of the test run, with each calibration, upon reagent vial changes and at least every eight hours on each day of testing. The controls should be processed just like the samples. Each laboratory should determine its own quality control range, either by means of the target values and ranges provided by the manufacturer of the controls or by means of its own range established in the laboratory. If the control values lie outside the range determined beforehand, then the reagent, calibration curve and coagulation analyzer should be checked. Do not release patient results until the cause of deviation has been identified and corrected.

Calculating the Analytical ResultsThe results can be evaluated either with the enclosed table or with a reference curve calculated in the laboratory.Fibrinogen concentration is given in g/L. The data provided in the evaluation table are only valid for reagents with matching lot numbers and the indicated coagulation analyzers.A separate reference curve must be calculated for each coagulation analyzer, automated or not.The reference curves from the evaluation table can be verified with the help of Control Plasma N, Ci-Trol® Level 1 or with Control Plasma P. If the measured results lie outside of the indicated range, then a reference curve specific to the laboratory should be calculated.

Limitations of the ProcedureDegradation products of fibrin(ogen) lead to prolonged coagulation times and therefore to diminished recovery of fibrinogen. Heparin (up to 2 U/mL) does not affect the test. Therapy with direct thrombin inhibitors, e.g. hirudin, may contribute to diminished recovery3.Some analyzers in the KC 4/10/40 series may yield false results when running the test.With the artificially prepared (e.g. diluted) control plasmas for the lower range of some manu-facturers, recovery may be above the declared range if the sample matrix is not sufficiently plasma-like. In such cases, it is recommended that the Control Plasma P from Siemens should be used.Siemens has validated use of these reagents on various analyzers to optimize product per-formance and meet product specifications. User defined modifications are not supported by Siemens as they may affect performance of the system and assay results. It is the responsibility of the user to validate modifications to these instructions or use of the reagents on analyzers other than those included in Siemens Application Sheets or these Instructions for Use. Results of this test should always be interpreted in conjunction with the patient’s medical history, clinical presentation and other findings.

Expected Values1.8 – 3.5 g/L4

Systematic deviations from this range may be determined by the particular device. It may be necessary to calculate a reference range specific to the laboratory.

Specific Performance CharacteristicsMeasurement Range and SensitivityThe measurement range lies between 0.8 and > 12 g/L, and is even lower for more sensitive coagulation analyzers.

PrecisionThe precision of Multifibren* U in the BCS® was calculated with Control Plasma N and Control Plasma P for 5 days in 8-fold determination.The coefficient of variation within series was 2.9 % and 7.2 % for Control Plasma N and Control Plasma P, respectively. From day to day, it was 1.6 % and 3.4 %.

Bibliography1. Cooper J, Douglas AS. Fibrinogen level as a predictor or mortality in survivors of myocardial

Infarction. Fibrinolysis. 1991; 5: 105-8. 2. Cook NS, Ubben, D. Fibrinogen as a major risk factor in cardiovascular disease. TiPS. 1990;

11: 444-51. 3. Dempfle CE, Keller A, Kirchner A, Heene DL. The influence of hirudin on plasma fibrinogen

assays. Thromb Haemost.1998; 80: 716-7.4. Wagner C, Dati F. Fibrinogen. In: Thomas L, ed. Clinical Laboratory Diagnostics. Frankfurt:

TH-Books Verlagsgesellschaft, 1998; 609-12.

Ci-Trol and BCS are trademarks of Siemens Healthcare Diagnostics.* Multifibren and BFT are trademarks of Siemens Healthcare Diagnostics.

Edition July 2008

OWZG G15 E0501 (847) 2

Multifibren* USchattierte Abschnitte - Aktualisierte Informationen gegenüber der Ausgabe August 2003

AnwendungsbereichQuantitative Bestimmung von Fibrinogen in Plasma.

Diagnostische BedeutungErniedrigte Fibrinogenspiegel treten auf beia) erworbener Hypo- oder Afibrinogenämie. Erworbene Fibrinogenmangelzustände treten be-

sonders infolge intravaskulärer Proteolyse von Fibrinogen durch Thrombin (Verbrauchsko-agulopathie, z. B. in der Geburtshilfe, nach chirurgischen Eingriffen), Schlangengifte oder Plasmin (primäre Hyperfibrinolyse nach Streptokinase-, Urokinase- oder tPA-Therapie) auf. Weiterhin können mäßige Hypofibrinogenämien bei verminderter Produktion (bei akuten oder chronischen Lebererkrankungen), bei Verlust in den intravaskulären Raum (z. B. bei Aszites oder akuter Blutung sowie Verbrennungen) oder bei vermehrtem Abbau (bei Schock oder Karzinomen) vorkommen.

b) angeborenen Hypo- und Afibrinogenämien.

Vorübergehend erhöhte Fibrinogenwerte werden infolge des Verhaltens von Fibrinogen als “Akute-Phase-Protein” beobachtet:a) Transitorische Hyperfibrinogenämien können nach Operationen, Traumen, Herzinfarkt und

Infektionen vorkommen1.b) Länger bestehende Hyperfibrinogenämien können bei Neoplasien und chronisch entzünd-

lichen Erkrankungen festgestellt werden.Mit zunehmendem Alter werden geringfügig steigende Fibrinogenspiegel beobachtet. Erhöhte Fibrinogenspiegel sind ein Risikofaktor für kardiovaskuläre Erkrankungen2.

Prinzip der MethodeModifikation der Methode nach Clauss.Citrat-Plasma wird mit einem großen Überschuss an Thrombin zur Gerinnung gebracht. Die Gerinnungszeit hängt hierbei weitgehend vom Fibrinogengehalt der Probe ab.

ReagenzienInhalt der HandelspackungenMultifibren* U, [REF] OWZG 218 x l 5 ml oderMultifibren* U, [REF] OWZG 1514 x l 2 mlJede Packung Multifibren* U enthält eine chargen- und methodenspezifische Auswertetabelle.

ZusammensetzungMultifibren* U: Thrombin vom Rind (50 IU/ml), Fibrinaggregation-verzögerndes Peptid (Gly-Pro-Arg-Pro-Ala-amid, 0,15 g/l), Calciumchlorid (1,5 g/l), Hexadimethrinbromid, Polyethy-lenglycol 6000, Natriumchlorid, Tris, Albumin vom Rind; Konservierungsmittel: Natriumazid (< 0,1 %).

Warnungen und Vorsichtsmaßnahmen1. Nur zur in-vitro diagnostischen Anwendung.2. Enthält Natriumazid (< 0,1 %) als Konservierungsmittel. Natriumazid kann mit kupfer- oder

bleihaltigen Abflussrohren explosive Verbindungen eingehen. Entsorgen Sie bitte ordnungs-gemäß entsprechend den örtlichen Richtlinien.

Vorbereitung der ReagenzienMultifibren* U mit der auf dem Etikett angegebenen Menge destilliertem oder entionisiertem Wasser lösen. Vor Gebrauch noch einmal vorsichtig mischen.Vorwärmen auf +37 °C (nicht notwendig bei automatischen Gerinnungsmessgeräten mit be-heizten Reagenzpipettoren).

Haltbarkeit und LagerungsbedingungenMultifibren* U ist ungeöffnet bei +2 bis +8 °C gelagert bis zu dem auf dem Etikett angegebenen Verfallsdatum verwendbar.Stabilität nach Rekonstitution:+37 °C 8 Stunden+15 bis +25 °C 1 Tag+2 bis +8 °C 5 Tage≤-20 °C 2 MonateDie Angaben zur Stabilität auf dem Gerät sind in den Referenzhandbüchern (Applikationsvor-schriften) für die einzelnen Gerinnungsmessgeräte aufgeführt.

Zusätzlich benötigte MaterialienFibrinogen Kalibrator KitKaolin-Suspension für Fibrintimer (BFT* II)Kontroll-Plasma NKontroll-Plasma PCi-Trol® Level 1Gerinnungsmessgerät (siehe Kapitel "Geräte")

GeräteMultifibren* U kann manuell oder an automatischen Gerinnungsmessgeräten verwendet wer-den. Siemens Healthcare Diagnostics stellt für verschiedene Gerinnungsmessgeräte Referenz-handbücher (Applikationsvorschriften) zur Verfügung. Diese enthalten geräte-/ testspezifische Informationen zur Abarbeitung und zu Leistungsdaten, die von den Informationen in dieser Ge-brauchsanweisung abweichen können. In diesem Fall ersetzen die Informationen in den Refe-renzhandbüchern (Applikationsvorschriften) die Informationen in dieser Gebrauchsanweisung. Bitte auch die Bedienungsanleitung des Geräteherstellers beachten!

Untersuchungsmaterial1 Teil Natriumcitrat-Lösung (0,11 mol/l) mit 9 Teilen Venenblut mischen. Sofort bei Raumtempe-ratur mindestens 15 Minuten bei ca. 1500 x g zentrifugieren, überstehendes Plasma abhebern und bis zum Test bei +15 bis +25 °C aufbewahren.Stabilität der Proben:+15 bis +25 °C 8 Stunden

TestdurchführungManuell:

Multifibren* U vor Gebrauch auf +37 °C erwärmen.In ein auf + 37 °C temperiertes Teströhrchen pipettieren:Probe 100 µl60 Sekunden bei +37 °C inkubierenMultifibren* U (+37 °C) 200 µlGerinnungszeit bestimmen

Automatisch:Siehe Kapitel "Geräte".

Erstellung der BezugskurveDie Erstellung der Bezugskurve erfolgt mit dem Fibrinogen Kalibrator Kit.Diese Kalibratoren werden als Proben mit dem entsprechenden Gerinnungsmessgerät getestet. Für die graphische Darstellung empfiehlt sich eine doppelt logarithmische Auftragung (log/log).Bei jedem Gerätewechsel und für jede Charge Multifibren* U muss eine neue Bezugskurve erstellt werden.

Interne QualitätskontrolleNormalbereich: Kontroll-Plasma N, Ci-Trol® Level 1Pathologischer Bereich: Kontroll-Plasma P Bei jedem Wechsel der Reagenzflaschen, zu Beginn eines Testlaufes, bei jeder Kalibration und mindestens alle 8 Stunden an jedem Testtag müssen zwei Kontrollen (eine im Normalbereich und eine im pathologischen Bereich) gemessen werden. Die Kontrollen sollten wie die Pro-ben behandelt werden. Jedes Labor sollte seinen Qualitätskontrollbereich entweder anhand der vom Hersteller der Kontrollen angegebenen Sollwerte und -bereiche oder anhand des im Labor bestimmten eigenen Bereichs festlegen. Liegen die Kontrollwerte außerhalb des vorher festgelegten Bereichs, sollten Reagenz, Kalibrationskurve und Gerinnungsmessgerät überprüft werden. Die Ergebnisse der Patientenproben dürfen nicht freigegeben werden, bevor der Grund der Abweichung eruiert und korrigiert wurde.

Berechnung der AnalysenergebnisseEs kann wahlweise über die beiliegende Auswertetabelle oder über eine selbst erstellte Bezugs-kurve ausgewertet werden.Die Fibrinogen-Konzentration wird in g/l angegeben. Die in der Auswertetabelle gemachten Angaben sind nur für Reagenzien mit gleicher Chargenbezeichnung und die angegebenen Ge-rinnungsmessgeräte gültig. Für automatisierte oder andere Gerinnungsmessgeräte ist jeweils eine eigene Bezugskurve zu erstellen.Die Bezugskurven aus der Auswertetabelle können mit Hilfe von Kontroll-Plasma N, Ci-Trol® Level 1 oder mit Kontroll-Plasma P überprüft werden. Liegen die gemessenen Ergebnisse au-ßerhalb des angegebenen Bereichs, sollte eine eigene Bezugskurve erstellt werden.

Einschränkungen der TestdurchführungFibrin(ogen)-Spaltprodukte führen zu verlängerten Gerinnungszeiten und damit erniedrigter Wiederfindung des Fibrinogens. Heparin (bis 2 U/ml) stört den Test nicht. Unter Therapie mit direkten Thrombininhibitoren, z. B. Hirudin, kann es zu erniedrigter Wiederfindung kommen3.Bei manchen Gerinnungsmessgeräten der Serie KC 4/10/40 kann es bei der Abarbeitung des Tests zu Fehlbestimmungen kommen.Bei künstlich, z. B. durch Verdünnung, hergestellten Kontrollplasmen für den erniedrigten Be-reich einiger Hersteller kann es zu Wiederfindung oberhalb des deklarierten Bereichs kommen, wenn die Probenmatrix nicht ausreichend plasmaähnlich ist. In diesem Fall wird die Verwen-dung von Kontroll-Plasma P von Siemens empfohlen.Siemens hat den Einsatz dieser Reagenzien auf verschiedenen Analysengeräten auf optimale Produktleistung und Einhaltung der Produktspezifikationen überprüft. Vom Benutzer vorgenom-mene Änderungen werden von Siemens nicht unterstützt, da sie die Leistung des Systems und die Testergebnisse beeinflussen können. Es liegt in der Verantwortung des Benutzers, Änderungen an diesen Anleitungen oder die Verwendung dieser Reagenzien auf anderen als in den Applikationsvorschriften von Siemens oder diesen Gebrauchsanweisungen genannten Analysengeräten zu validieren.Resultate dieses Tests sollten stets in Verbindung mit der Vorgeschichte des Patienten, dem klinischen Bild und anderen Untersuchungsergebnissen interpretiert werden.

Erwartete Werte1,8 - 3,5 g/l4

Systematische Abweichungen von diesem Bereich können gerätebedingt sein. Gegebenenfalls muss ein eigener Referenzbereich durch das Labor erstellt werden.

Leistungsmerkmale des TestsMessbereich und EmpfindlichkeitDer Messbereich reicht von 0,8 bis >12 g/l, bei empfindlich messenden Gerinnungsmessgerä-ten auch tiefer.

PräzisionDie Präzision von Multifibren* U am BCS® wurde mit Kontroll-Plasma N und Kontroll-Plasma P an 5 Tagen in 8-fach-Bestimmung ermittelt.Der Variationskoeffizient in der Serie lag bei 2,9 % bzw. 7,2 % für Kontroll-Plasma N und Kontroll-Plasma P und von Tag zu Tag bei 1,6 % und 3,4 %.

LiteraturSiehe Seite 1.

Ci-Trol und BCS sind Warenzeichen von Siemens Healthcare Diagnostics.

* Multifibren und BFT sind Warenzeichen von Siemens Healthcare Diagnostics.

Ausgabe Juli 2008

Multifibren* UParagraphes surlignés - informations mises à jour par rapport à l’édition de Août 2003

Domaine d’utilisationDétermination quantitative du fibrinogène dans le plasma.

Intérêt diagnostiqueUn taux diminué de fibrinogène est observé dans les cas suivants :a) hypo ou afibrinogénémie acquise. Les états de déficits acquis en fibrinogène apparaissent

surtout suite à une protéolyse intravasculaire du fibrinogène due à la thrombine (coagulo-pathie de consommation, par ex. au moment de l’accouchement ou après une intervention chirurgicale), à un venin de serpent ou à la plasmine (hyperfibrinolyse primaire suite à un traitement à la streptokinase, à l’urokinase ou aux tPA). Par ailleurs, des hypofibrinogéné-mies modérées peuvent également apparaître en cas de production diminuée de fibrinogène (dans les maladies hépatiques aiguës ou chroniques), en cas de perte de volume intravas-culaire (par ex. en cas d’ascite, d’hémorragie aiguë ou encore de brûlure), ainsi qu’en cas d’une augmentation de sa dégradation (en cas de choc ou de carcinome).

b) hypo ou afibrinogénémie congénitale.Des valeurs de fibrinogène passagèrement augmentées sont observées suite au comportement du fibrinogène comme « protéine de la phase aiguë » :a) hyperfibrinogénémie transitoire apparaissant après une opération, un traumatisme, un in-

farctus du myocarde ou une infection1,b) hyperfibrinogénémie plus longue observée dans les néoplasies ou les maladies inflamma-

toires chroniques.Le taux de fibrinogène augmente faiblement avec l’âge. Un taux de fibrinogène augmenté constitue un facteur de risque pour les maladies cardiovasculaires2.

OWZG G15 E0501 (847) 3

Principe de la méthodeModification de la méthode de Clauss.Le plasma citraté est additionné de thrombine en large excès pour l’amener à coaguler. Le temps de coagulation alors obtenu est largement dépendant de la concentration en fibrinogène de l’échantillon.

RéactifsConditionnementsMultifibren* U, [REF] OWZG 218 x l 5 ml ouMultifibren* U, [REF] OWZG 1514 x l 2 mlChaque coffret de Multifibren* U contient un tableau d’évaluation spécifique au lot et à la mé-thode.

CompositionMultifibren* U : thrombine bovine (50 UI/ml), peptide retardant l’agrégation de la fibrine (Gly-Pro-Arg-Ala-amide, 0,15 g/l), chlorure de calcium (1,5 g/l), bromure d’hexadiméthrine, polyé-thylène glycol 6000, chlorure de sodium, Tris, albumine bovine ; agent de conservation : azide de sodium (< 0,1 %).

Mises en garde et précautions d’emploi1. Réservé à un usage de diagnostic in-vitro.2. Contient de l’azite de sodium (< 0,1 %) comme conservateur. L’ azite de sodium peut réagir

avec les tuyaux d’évacuation en cuivre ou en plomb et former des composés explosifs. L’évacuer conformément aux réglementations locales.

Préparation des réactifsReconstituer Multifibren* U avec le volume d’eau distillée indiqué sur l’étiquette. Agiter de nou-veau avec précaution avant emploi.Porter les réactifs à +37 °C avant de commencer le test (le préchauffage n'est pas néces-saire pour les appareils automatisés de coagulation sur lesquels les seringues de pipetage sont chauffées).

Stabilités et conditions de conservationÀ conserver entre +2 et +8 °C dans l’emballage fermé. Ne pas utiliser Multifibren* U après la date d’expiration mentionnée sur l’étiquetteStabilité après reconstitution :+37 °C 8 heures+15/+25 °C 1 jour+2/+8 °C 5 jours≤-20 °C 2 moisLes informations relatives à la stabilité du produit dans l’automate sont mentionnées dans les fiches d’application de l’automate de coagulation utilisé.

Autres réactifs et matériel nécessairesKit de calibration FibrinogèneSuspension de kaolin pour Fibrintimer (BFT* II)Plasma de contrôle NPlasma de contrôle PCi-Trol® Niveau 1Appareil de coagulation (cf. paragraphe « Matériel »)

MatérielMultifibren* U peut être utilisé manuellement ou sur un appareil automatisé de coagulation. Siemens Healthcare Diagnostics propose des Guides de référence (fiches d’application) pour plusieurs analyseurs de coagulation. Les Guides de référence (fiches d’application) contiennent des informations sur les performances et l’utilisation des différents appareils / dosages, qui peuvent différer de celles mentionnées dans la présente notice. Le cas échéant, les informations fournies dans les Guides de référence (fiches d’application) annulent et remplacent celles conte-nues dans la présente notice d’utilisation. En outre, veuillez consulter le manuel de formation du fabricant de l’appareil !

Echantillons à testerMélanger 1 part de solution de citrate de sodium (0,11 mol/l) avec 9 parts de sang veineux. Cen-trifuger l’échantillon sanguin à 1500 x g pendant au moins 15 minutes à température ambiante. Retirer le plasma surnageant et conserver entre +15 et +25 °C jusqu’au test.Stabilité de l’échantillon :+15/+25 °C 8 heures

Réalisation du testMéthode manuelle :

Préchauffer Multifibren* U à +37 °C avant son emploi.Pipeter dans un tube à essai préchauffé à +37 °CEchantillon 100 µlLaisser incuber 60 sec à +37 °CMultifibren* U (+37 °C) 200 µlMesurer le temps de coagulation

Méthode automatique :Cf. paragraphe « Matériel »

Etablissement de la courbe d’étalonnageL’établissement de la courbe d’étalonnage s’effectue à l’aide du Kit de Calibration Fibrinogène.Tester les Calibrateurs du kit sur l’appareil de coagulation utilisé comme des échantillons. Pour la représentation graphique, il est recommandé d’utiliser une échelle bi-logarithmique (log/log).Etablir une nouvelle courbe d’étalonnage à chaque changement d’appareil ou de lot de Multi-fibren* U.

Contrôle de qualité interneDomaine normal : Plasma de contrôle N Ci-Trol® Niveau 1Domaine thérapeutique : Plasma de contrôle PDeux contrôles (domaine normal et domaine pathologique) doivent être mesurés au début de chaque série de test, à chaque étalonnage, à chaque changement de flacon de réactif et au moins toutes les heures sur une journée de travail. Les contrôles doivent être manipulés comme les échantillons. Chaque laboratoire doit établir son propre domaine de contrôle qualité, soit en utilisant les valeurs cibles et les domaines de valeurs fournis par le fabricant des contrôles, soit en utilisant son propre intervalle de confiance établi dans le laboratoire. Si la valeur d’un contrôle n’est pas comprise dans l’intervalle de confiance prédéfini, il y a lieu de contrôler le réactif, la courbe d’étalonnage et l’appareil de coagulation. Les résultats de patient ne doivent pas être validés tant que l’origine des valeurs aberrantes n’a pas été identifiée et corrigée.

Calcul des résultats d’analyseLes résultats peuvent être évalués à l’aide du tableau joint ou d’une courbe d’étalonnage cal-culée au laboratoire.La concentration de fibrinogène est exprimée en g/l. Les données mentionnées dans le tableau d’évaluation sont valables uniquement pour les numéros de lot correspondants et pour les appa-reils de coagulation spécifiés. Une courbe d’étalonnage doit être calculée pour chaque appareil de coagulation, qu’il soit automatisé ou non.

Les courbes d’étalonnage du tableau d’évaluation peuvent être vérifiées à l’aide du plasma de contrôle N, de Ci-Trol® Niveau 1 ou du plasma de contrôle P. Si les résultats mesurés ne sont pas compris dans l’intervalle de référence, une courbe d’étalonnage spécifique au laboratoire doit être calculée.

Limites de réalisation du testLa présence de produits de dégradation de la fibrine (ou du fibrinogène) entraîne des temps de coagulation allongés, et donc une restitution moindre du fibrinogène. L’héparine (jusqu’à 2 U/ml) ne perturbe pas le test. Un traitement aux inhibiteurs directs de la thrombine, comme par ex. l’hirudine, peut provoquer une restitution diminuée3.Sur certains appareils de coagulation de la série KC 4/10/40, on peut obtenir pour ce test des résultats erronés.Avec certains plasmas de contrôle établis artificiellement par le fabricant à un niveau bas, par ex. par dilution, on peut obtenir une restitution supérieure au domaine déclaré si la matrice de l’échantillon n’est pas suffisamment comparable au plasma. Dans ce cas-là, il est recommandé d’utiliser le Plasma de contrôle P de Siemens.Siemens a validé l’utilisation de ces réactifs sur plusieurs analyseurs afin d’optimiser les perfor-mances du produit et répondre à ses spécifications. Les modifications apportées par l’utilisateur ne sont pas sous la responsabilité de Siemens dans la mesure où elles peuvent affecter les performances du système et les résultats des dosages. Il est de la responsabilité de l’utilisateur de valider toutes modifications apportées à ces instructions ou à l’utilisation des réactifs sur les analyseurs autres que ceux mentionnés dans les protocoles d’application Siemens ou dans la présente notice d’utilisation.Les résultats de ce test doivent toujours être interprétés en rapport avec les antécédents médi-caux du patient, les signes cliniques et autres constatations.

Valeurs attendues1,8 – 3,5 g/l4

Des déviations systématiques par rapport à ce domaine peuvent être dues à l’appareil utilisé. Le laboratoire devra éventuellement établir son propre domaine de référence.

Caractéristiques du testDomaine de mesure et sensibilitéLe domaine de mesure s’étend de 0,8 à > 12 g/l ; il peut être inférieur avec certains appareils de coagulation sensibles.

PrécisionLa précision de Multifibren* U sur le BCS® a été déterminée avec le Plasma de contrôle N et le Plasma de contrôle P, selon des mesures effectuées 8 fois sur 5 jours.Le coefficient de variation à l’intérieur d’une série était de 2,9 % et de 7,2 % pour le plasma de contrôle N et le plasma de contrôle P, respectivement. Il était respectivement de 1,6 % et de 3,4 % de jour en jour.

LittératureCf. page 1.

Ci-Trol et BCS sont des marques commerciales de Siemens Healthcare Diagnostics.* Multifibren et BFT sont des marques commerciales de Siemens Healthcare Diagnostics.

Edition Juillet 2008

Multifibren* UVedere sezioni ombreggiate - informazioni aggiornate rispetto all’edizione attuale da Agosto 2003

Settore d’impiegoDeterminazione quantitativa del fibrinogeno nel plasma.

Significato diagnosticoLivelli diminuiti di fibrinogeno si verificano nelle:a) ipofibrinogenemie o afibrinogenemie acquisite. Stati di carenza acquisita di fibrinogeno si ve-

rificano soprattutto in seguito a proteolisi intravascolare del fibrinogeno dovute alla trombina (coagulopatia da consumo, ad es. in ostetricia, dopo interventi chirurgici), veleno di serpente o plasmina (iperfibrinolisi primaria dopo terapia con streptochinasi, urochinasi o tPA). Inoltre, possono subentrare modeste ipofibrinogenemie in caso di diminuita produzione (malattie del fegato acute o croniche), perdita nello spazio intravascolare (per es. ascite o emorragia acuta o ustioni) oppure aumentata degradazione (per es. shock o carcinomi).

b) ipofibrinogenemie o afibrinogenemie congenite.Livelli di fibrinogeno temporaneamente elevati si riscontrano quando il fibrinogeno si comporta da ”proteina della fase acuta” nei seguenti casi:a) Iperfibrinogenemie transitorie che possono verificarsi dopo interventi chirurgici, traumi, infar-

to del miocardio e infezioni1.b) Iperfibrinogenemie prolungate si possono verificare nelle neoplasie e nelle malattie infiam-

matorie croniche.Con la vecchiaia, si nota un livello di fibrinogeno in leggero aumento. Un elevato livello di fibri-nogeno costituisce un fattore di rischio nelle malattie cardiovascolari2.

Principio del metodoMetodo di Clauss modificato.Il plasma citratato viene fatto coagulare con una quantità di trombina in eccesso. Il tempo di coagulazione dipende largamente dal contenuto di fibrinogeno del campione in esame.

ReagentiContenuto della confezioneMultifibren* U, [REF] OWZG 218 x l 5 mL oppureMultifibren* U, [REF] OWZG 1514 x l 2 mLOgni confezione di Multifibren* U contiene una tabella di valutazione lotto- e metodo-specifica.

ComposizioneMultifibren* U : trombina bovina (50 UI/mL), peptide ritardante l’aggregazione del fibrinogeno (Gly-Pro-Arg-Pro-Ala-ammide 0,15 g/L), cloruro di calcio (1,5 g/L), esadimetrimbromuro, polieti-lenglicole 6000, cloruro di sodio, Tris, albumina bovina. Conservante: sodio azide (< 0,1 %).

Avvertenze e precauzioni1. Solo per uso diagnostico in-vitro.2. Contiene azoturo di sodio (< 0,1 %) come conservante. L’azoturo di sodio può reagire con le

tubazioni in rame o piombo nelle linee di scarico formando composti esplosivi. Provvedere allo smaltimento in modo appropriato e secondo le normative locali.

OWZG G15 E0501 (847) 4

Preparazione dei reagentiRicostituire il Multifibren* U con la quantità di acqua distillata indicata sull’etichetta. Miscelare con cautela, ancora una volta prima dell’uso.Portare i reagenti a +37 °C prima di effettuare le misurazioni (non necessario nel caso di sistemi di coagulazione automatica che utilizzano sonde riscaldate).

Conservazione e stabilitàMultifibren* U può essere utilizzato fino alla data di scadenza indicata sull'etichetta, se conser-vato chiuso a +2/+8 °C.Stabilità dopo ricostituzione:+37 °C 8 ore+15/+25 °C 1 giorno+2/+8 °C 5 giorni≤-20 °C 2 mesiLe informazioni relative alla stabilità on board sono specificate nei Protocolli Applicativi per i vari analizzatori per coagulazione.

Altro materiale necessarioKit Fibrinogeno calibratoreSospensione di caolino per Fibrintimer (BFT** II)Plasma di controllo NPlasma di controllo PCi-Trol® Livello 1Analizzatore per coagulazione (v. capitolo “Strumentazione”)

StrumentazioneMultifibren* U può essere utilizzato manualmente o su analizzatori per coagulazione automa-tici. Siemens Healthcare Diagnostics fornisce Guide di Riferimento (Protocolli Applicativi) per diversi analizzatori per coagulazione. Le Guide di Riferimento (Protocolli Applicativi) conten-gono informazioni sulla manipolazione e sulle prestazioni specifiche per i diversi analizzatori/ test che possono essere diverse da quelle fornite nelle presenti Istruzioni per l‘uso. In questo caso, le informazioni contenute nelle Guide di Riferimento (Protocolli Applicativi) sostituiscono le informazioni delle presenti Istruzioni per l’uso. Consultare anche il manuale di istruzioni del produttore dello strumento.

Campioni in esameMiscelare 1 parte di soluzione di citrato di sodio (0,11 mol/L) con 9 parti di sangue venoso. Centrifugare il campione di sangue a 1500 x g per almeno 15 minuti a temperatura ambiente. Rimuovere il plasma sovranatante e conservare a +15/+25 °C fino al momento del test.Stabilità del campione:+15/+25 °C 8 ore

ProceduraManuale:

Portare il Multifibren* U a +37 °C prima dell’uso.Distribuire in una cuvetta riscaldata a +37 °C:Campione 100 µLIncubare per 60 sec. a +37 °CMultifibren* U (+37 °C) 200 µL Determinare il tempo di coagulazione

Automatico:V. capitolo “Strumentazione”.

Preparazione della curva di calibrazioneLa curva di calibrazione viene realizzata con l’impiego del kit Fibrinogeno Calibratore.Questi calibratori vengono esaminati come campioni sul relativo analizzatore per coagulazione. Per la rappresentazione grafica dei valori ottenuti, si consiglia una riproduzione bilogaritmica (log/Log). Ad ogni variazione dello strumento e per ogni nuovo lotto di Multifibren*U deve essere realizzata una nuova curva di calibrazione.

Controllo di qualità internoIntervallo normale: Plasma di controllo N, Ci-Trol® Livello 1Intervallo patologico: Plasma di controllo PÈ necessario misurare due livelli di materiale di controllo di qualità (intervallo normale e patolo-gico) all’inizio del test, con ogni calibrazione, al cambio del flacone di reagente, e almeno ogni 8 ore di ogni giorno di utilizzo. I controlli devono essere elaborati esattamente come i campioni. Ogni laboratorio deve stabilire i propri intervalli di controllo di qualità, tramite i valori e gli intervalli target forniti dal produttore dei controlli, oppure per mezzo di intervalli di confidenza stabiliti nel laboratorio. Se i valori di controllo sono fuori dall’intervallo di controllo precedentemente determi-nato, verificare il reagente, la curva di calibrazione e l’analizzatore per coagulazione. Non refer-tare i risultati dei pazienti finché non è stata individuata e corretta la causa della deviazione.

Calcolo dei risultati analiticiLa valutazione dei risultati può essere effettuata tramite la tabella dei valori allegata oppure con una curva di calibrazione realizzata nel laboratorio.La concentrazione di fibrinogeno viene espressa in g/L. I dati indicati nella tabella di valutazione sono validi solo per reagenti con il medesimo numero di lotto e con gli analizzatori di coagula-zione indicati. Con ogni strumento di coagulazione, automatizzato e non, occorre determinare la relativa curva di calibrazione.Le curve di calibrazione della tabella di valutazione possono essere verificate con il Plasma di Controllo N, Ci-Trol® Livello 1 o Plasma di controllo P. Se i risultati ottenuti si trovano al di fuori dell’intervallo di accettabilità, occorre determinare una propria curva di calibrazione.

Limitazioni della proceduraI prodotti di degradazione del fibrinogeno/fibrina e portano a tempi di coagulazione prolungati e conseguente diminuzione della riproducibilità del fibrinogeno. L’eparina (fino a 2 U/mL) non pregiudica l’esito del test. Una terapia con inibitori diretti della trombina, ad es. irudina, può portare ad una diminuita riproducibilità3.Con alcuni strumenti della serie KC 4/10/40 si possono verificare determinazioni errate nel-l’esecuzione del test.Con plasmi di controllo prodotti artificialmente (ad es. mediante diluizione) nell’intervallo basso di alcuni produttori, può verificarsi una riproducibilità al di sopra dell’intervallo dichiarato se la matrice dei campioni non è sufficientemente simile al plasma. Si consiglia in questo caso, di utilizzare il Plasma di controllo P della Siemens.Siemens ha validato l’uso di questi reagenti su vari analizzatori per ottimizzare le prestazioni e rispettare le specifiche dei prodotti. Le modifiche definite dall’utente non sono supportate da Siemens poiché possono influire sulle prestazioni del sistema e sui risultati del test. Pertanto è responsabilità dell’utente validare tutte le modifiche apportate a queste istruzioni, l’uso dei reagenti su analizzatori diversi da quelli inclusi nei fogli di istruzioni o nelle istruzioni d’uso fornite da Siemens.I risultati di questo test devono essere sempre interpretati alla luce della anamnesi del paziente, della presentazione clinica e valutando contestualmente l’esito di altri accertamenti.

Valori attesi1,8 - 3,5 g/L4

Le deviazioni sistematiche da questo intervallo possono essere dovute allo strumento utilizzato. Il laboratorio dovrebbe calcolare un proprio intervallo di riferimento.

Caratteristiche specifiche del testIntervallo di misura e sensibilitàL’intervallo di misura è compreso fra 0,8 e >12 g/L, con strumentazione sensibile anche più basso.

PrecisioneLa precisione del Multifibren* U sul BCS® è stata calcolata con il Plasma di controllo N e Plasma di controllo P, per 5 giorni in determinazioni ripetute 8 volte.Il coefficiente di variazione intra-serie era compreso tra 2,9 % e 7,2 % per il Plasma di controllo N e Plasma di controllo P rispettivamente e inter-serie dell’1,6 % e 3,4 %.

BibliografiaVedi pagina 1.

Ci-Trol e BCS sono marchi di Siemens Healthcare Diagnostics.

* Multifibren e BFT sono marchi di Siemens Healthcare Diagnostics.

Edizione Luglio 2008

Multifibren* UObserve las secciones resaltadas - Es información actualizada de la edición anterior desde el Agosto 2003

Campos de aplicaciónDeterminación cuantitativa de fibrinógeno en plasma.

Significado diagnósticoNiveles bajos de fibrinógeno se encuentran en:a) Hipo- o afibrinogenemias adquiridas. Los estados de deficiencia de fibrinógeno adquiridos

aparecen especialmente como consecuencia de una proteólisis intravascular del fibrinóge-no mediante trombina (coagulopatía de consumo por ej., en la asistencia al parto, después de una intervención quirúrgica), veneno de serpiente o plasmina (hiperfibrinólisis primaria después de una terapéutica con estreptoquinasa, uroquinasa o tPA) . Además, se puede presentar hipofibrinogenemia moderada por producción disminuida (enfermedades agudas o crónicas del hígado), por perdida en los espacios intravasculares (por ej., en la ascitis o en hemorragias agudas, así como en quemaduras), o por una desintegración incrementada (por ej., en shock o en carcinomas).

b) Hipo- o afibrinogenemias congénitas.Valores elevados pasajeros de fibrinógeno se van a encontrar, como consecuencia del compor-tamiento del fibrinógeno como "proteína de fase aguda" en:a) Hiperfibrinogenemias transitorias pueden aparecer después de operaciones, traumas, infar-

to cardíaco e infecciones1.b) Hiperfibrinogenemias de larga insistencia pueden ser determinadas en neoplasias y en en-

fermedades infecciosas crónicas.Con el aumento de la edad se observa un aumento poco importante del nivel de fibrinógeno. Niveles elevados de fibrinógeno son un factor de riesgo a enfermedades cardiovasculares2.

Principio del métodoModificación del método de Claus.El plasma citratado se va a llevar a coagulación agregando una cantidad en exceso de trom-bina. El tiempo de coagulación depende, en este caso, además del contenido de fibrinógeno en la muestra.

ReactivosContenido del envase comercialMultifibren* U, [REF] OWZG 218 x l 5 ml oMultifibren* U, [REF] OWZG 1514 x l 2 mlCada kit de Multifibren* U contiene una tabla de evaluación específica del lote y del método.

ComposiciónMultifibren* U: Trombina bovina (50 UI/ml), péptido retardador de la agregación de fibrina (Gly-Pro-Arg-Pro-Ala-amida, 0,15 g/l), cloruro de calcio (1,5 g/l), hexadimetrinbromuro, polietilenglicol 6000, cloruro de sodio, Tris, albúmina bovina; agente de conservación: azida sódica (< 0,1 %).

Advertencias y medidas de seguridad1. Sólo para ser utilizado en diagnósticos in-vitro.2. Contiene azida de sodio (< 0,1 %) como conservante. La azida de sodio puede reaccionar

con tuberías de cobre o de plomo en los conductos de drenaje y formar compuestos explo-sivos. Elimine este producto de forma apropiada conforme a la normativa local.

Preparación de reactivosDisolver el Multifibren* U con la cantidad de agua destilada indicada en la etiqueta. Antes de usar, mezclar cuidadosamente.Los reactivos deben alcanzar una temperatura de +37 °C antes de la medición (esto no es necesario en el caso de analizadores de coagulación automatizados con pipetas de reactivos termostatizadas).

Conservación y estabilidadAlmacenado sin abrir entre +2 y +8 °C, Multifibren* U puede utilizarse hasta la fecha de cadu-cidad indicada en la etiqueta.Estabilidad después de la reconstitución:+37 °C 8 horasentre +15 y +25 °C 1 díaentre +2 y +8 °C 5 días≤-20 °C 2 mesesEncontrará información específica sobre la estabilidad a bordo de los diferentes analizadores de coagulación en las Hojas de aplicación.

Materiales adicionales necesariosKit de calibradores para FibrinógenoSuspención de caolín para el Fibrintimer (BFT* II)Plasma control NPlasma control PCi-Trol® Nivel 1Aparato de medida de la coagulación (ver capitulo "Equipo“)

OWZG G15 E0501 (847) 5

EquipoMultifibren* U puede emplearse en procedimientos manuales o en analizadores de coagulación automatizados. Siemens Healthcare Diagnostics tiene a su disposición Guías de Referencia (Hojas de aplicación) para varios analizadores de coagulación. Las Guías de Referencia (Hojas de aplicación) contienen información específica sobre el manejo y el rendimiento de los analiza-dores/ensayos que puede diferir de la ofrecida en estas instrucciones de uso. En ese caso, la información contenida en las Guías de Referencia (Hojas de aplicación) reemplaza la informa-ción de estas instrucciones de uso. Le rogamos consulte también el Manual de Instrucciones del fabricante del instrumento!

Material a investigarMezcle 1 parte de solución de citrato sódico (0,11 mol/l) con 9 partes de sangre venosa. Centrifu-gue la muestra de sangre a 1500 x g durante al menos 15 minutos a temperatura ambiente. Retire el plasma sobrenadante y manténgalo entre +15 y +25 °C hasta la realización del análisis.Estabilidad de la muestra:entre +15 y +25 °C 8 horas

ProcedimientoManual:

Calentar el Multifibren* U a +37°C antes de usarlo.Pipetear en un tubo de ensayo precalentado a +37 °C:Muestra 100 µlIncubar 60 segundos a +37 °CMultifibren* U (+37 °C) 200 µlDeterminar el tiempo de coagulación

Automático:Ver capitulo "Equipo“.

Elaboración de la curva de referenciaLa elaboración de la curva de referencia se efectúa con el Kit de calibradores para fibrinógeno.Estos calibradores van a ser medidos como muestras en los respectivos aparatos de medida de la coagulación. Para la representación gráfica se recomienda usar papel logarítmico doble (log/log)Para cada cambio de aparato y para cada nuevo lote de Multifibren* U se debe elaborar una nueva curva de referencia.

Control de calidad internoRango normal: Plasma control N, Ci-Trol® Nivel 1Rango patológico: Plasma control PAl iniciar un ciclo de pruebas, con cada calibración, al cambiar el frasco de reactivo y en cada turno de trabajo deben medirse dos niveles de control (intervalo normal y patológico). Los con-troles deben procesarse como si fueran muestras. Cada laboratorio debe establecer su propio intervalo de control de calidad, ya sea por medio de valores objetivo e intervalos proporcionados por el fabricante de los controles, o por medio de sus propios intervalos de confianza estable-cidos en el laboratorio. Si los valores de control se encuentran fuera del intervalo de confianza determinado previamente, el reactivo, la curva de calibración y el analizador de coagulación deberán examinarse. Los resultados de los pacientes no deberán validarse hasta identificar y corregir la causa de la desviación.

Cálculo de los resultados del análisisLos resultados pueden evaluarse o con la tabla adjunta o con una curva de calibración realizada por el laboratorio.La concentración de fibrinógeno se indica en g/l. Los datos proporcionados en la tabla de evaluación sólo son válidos para reactivos con idéntico número de lote y con los analizadores de coagulación indicados. Debe realizarse una curva de referencia para cada analizador de coagulación, sea éste automatizado o no.Las curvas de referencia de la tabla de evaluación pueden verificarse con la ayuda del Plasma de control N, Ci-Trol® Nivel 1 o Plasma de control P. Si los resultados obtenidos se encuentran fuera del intervalo indicado, deberá realizarse una nueva curva de calibración específica del laboratorio.

Limitaciones del procedimientoProductos de degradación fibrino(geno)líticos conducen a tiempos de coagulación prolongados y por lo tanto a una baja recuperación de fibrinógeno. La heparina (hasta 2 U/ml) no altera el test. Una terapéutica con inhibidores directos de trombina, por ej., hirudina, puede llevar a una recuperación disminuida3.Para algunos aparatos de medida de la coagulación de la serie KC 4/10/40 se puede llegar a determinaciones erradas al realizar el test.Con plasmas de control artificialmente preparados, por ej., por dilución, para establecer plas-mas de control para los rangos bajos de algunos fabricantes, se puede llegar a tener una recu-peración por encima del rango declarado, si la matriz de las muestras no es lo suficientemente similar al plasma. En estos casos se recomienda usar el Plasma control P de Siemens.Siemens ha validado el uso de los reactivos en varios analizadores para optimizar el rendi-miento del producto y cumplir con las especificaciones del mismo. Las modificaciones definidas por el usuario no están garantizadas por Siemens dado que pueden afectar al rendimiento del sistema y a los resultados del ensayo. Es responsabilidad del usuario validar las modificaciones realizadas a estas instrucciones o el uso de los reactivos en analizadores distintos a los inclui-dos en las hojas de aplicaciones de Siemens o en estas instrucciones de uso.Los resultados de esta prueba deberán interpretarse siempre de acuerdo con la historia clínica del paciente, la sintomatologia clínica y otras observaciones.

Valores esperados1,8 - 3,5 g/l4

Las desviaciones sistemáticas de este rango pueden ser dependientes del aparato. En este caso, el laboratorio deberá establecer su propio rango de referencia.

Características del testRango de medida y sensibilidadEl rango de medida va de 0,8 hasta > 12 g/l; para aparatos de medida de la coagulación más sensibles aún más abajo.

Presición La presición del Multifibren* U en el BCS® fue determinada con Plasma control N y Plasma control P, durante 5 días en determinaciones óctuplas.El coeficiente de variación intra- serie fue de 2,9 % y 7,2 % para el Plasma de control N y Plasma de control P respectivamente. El CV inter.-serie, fue de 1,6 % y 3,4 %.

Literatura Ver página 1.

Ci-Trol y BCS son marcas comerciales de Siemens Healthcare Diagnostics.

* Multifibren y BFT son marcas comerciales de Siemens Healthcare Diagnostics.

Edición Julio 2008

Multifibren* USecções sombreadas - Informações actualizadas versus a edição de Agosto de 2003

Campo de aplicaçãoDeterminação quantitativa de fibrinogénio no plasma.

Significado diagnósticoNíveis baixos de fibrinogénio encontram-se em caso dea) hipofibrinogenemia ou afibrinogenemia adquiridas. As deficiências de fibrinogénio adqui-

ridas ocorrem especialmente em consequência de proteólise intravascular do fibrinogénio pela trombina (coagulopatia de consumo), p. ex., em obstetrícia, após intervenções cirúrgi-cas, venenos de serpente ou plasmina (hiperfibrinólise primária ou terapia com estreptoqui-nase, uroquinase ou tPA). Além disso, podem ocorrer hipofibrinogenemias moderadas no caso de produção reduzida (nas doenças hepáticas agudas ou crónicas), perda no espaço intravascular (p. ex., ascites ou hemorragia aguda, assim como queimadelas) ou aumento de degradação (em caso de choque ou carcinomas).

b) hipofibrinogenemias ou afibrinogenemias congénitas.Níveis temporários de fibrinogénio elevados são encontrados como resultado do comportamen-to do fibrinogénio como uma ”proteína de fase aguda”:a) as hiperfibrinogenemias transitórias podem ocorrer após operações, traumas, enfarte do

miocárdio e infecções1.b) as hiperfibrinogenemias persistentes podem ser observadas nas neoplasias e doenças in-

flamatórias crónicas. Com o aumento da idade, observam-se níveis de fibrinogénio ligeiramente ascendentes. Os ní-veis de fibrinogénio elevado constituem um factor de risco para as doenças cardiovasculares2.

Princípio metodológicoModificação do método de Clauss.O plasma citratado é levado à coagulação com um grande excesso de trombina. Neste caso, o tempo de coagulação depende largamente do teor de fibrinogénio da amostra.

ReagentesConteúdo das embalagens comerciaisMultifibren* U, [REF] OWZG 218 x l 5 ml ouMultifibren* U, [REF] OWZG 1514 x l 2 mlCada embalagem de Multifibren* U contém uma tabela de avaliação específica do lote e do método.

ComposiçãoMultifibren* U: Trombina bovina (50 IU/ml), péptido retardador da agregação da fibrina (Gly-Pro-Arg-Pro-Ala-Amido, 0,15 g/l), cloreto de cálcio (1,5 g/l), brometo de hexadimetrina, polietileno glicol 6000, cloreto de sódio, Tris, albumina bovina; conservante: Azida de sódio (< 0,1 %).

Advertências e medidas de precaução 1. Só para uso diagnóstico in-vitro.2. Contém azida de sódio (< 0,1 %) como conservante. A azida de sódio pode reagir com os

tubos de cobre ou de chumbo das canalizações de esgotos formando compostos explosi-vos. Elimine este produto de forma correcta e de acordo com as regulamentações locais.

Preparação dos reagentesDissolver Multifibren* U com a quantidade de água destilada indicada no rótulo. Antes usar, misturar cuidadosamente uma vez mais.Aquecer os reagentes para +37 °C antes de proceder a medições (não é necessário para ana-lisadores de coagulação automatizados com pipetas de reagentes aquecidas).

Estabilidade e condições de conservaçãoConservado por abrir entre +2 e +8 °C, o Multifibren* U pode ser utilizado até à data de validade indicada no rótulo.Estabilidade após a reconstituição:+37 °C 8 horas+15 a +25 °C 1 dia+2 a +8 °C 5 dias≤-20 °C 2 mesesInformação acerca da estabilidade no equipamento é especificada nas folhas de instruções de aplicação para os diferentes analisadores de coagulação.

Outros materiais necessáriosKit calibrador de fibrinogénioSuspensão de caulino para Fibrintimer (BFT* II)Plasma de controlo NPlasma de controlo PCi-Trol® Level 1Coagulómetro (veja o capítulo “Equipamento”)

EquipamentoMultifibren* U pode ser utilizado manualmente ou em analisadores de coagulação automatiza-dos. A Siemens Healthcare Diagnostics fornece guias de consulta (folhas de instruções de apli-cação) para diversos analisadores de coagulação. Os guias de consulta (folhas de instruções de aplicação) contêm informações específicas sobre o manuseamento e desempenho do ana-lisador/teste que podem diferir das fornecidas nestas instruções. Nesse caso, as informações contidas nos guias de consulta (folhas de instruções de aplicação) substituem as informações dadas nestas instruções. Consulte ainda o manual de instruções do fabricante do aparelho.

Material de análiseMisture 1 parte de solução de citrato de sódio (0,11 mol/l) com 9 partes de sangue venoso. Centrifugue a amostra de sangue a 1500 x g por um período não inferior a 15 minutos à tempe-ratura ambiente. Retire o plasma sobrenadante e conserve entre +15 e +25 °C até ser preciso para o teste.Estabilidade da amostra:+15 a +25 °C 8 horas

Execução do testeManual:

Antes de usar, aquecer Multifibren* U a +37 °C.Pipetar para um tubo de ensaio temperado a +37 °C:Amostra 100 µlIncubar durante 60 seg. a +37 °CMultifibren* U (+37 °C) 200 µlDeterminar tempo de coagulação

Automática:Veja o capítulo “Equipamento”.

OWZG G15 E0501 (847) �

Preparação da curva de referênciaA preparação da curva de referência é efectuada com o kit calibrador de fibrinogénio. Estes calibradores são testados como amostras com o coagulómetro correspondente. Para a repre-sentação gráfica, é aconselhável fazer uma plotagem em escala logarítmica dupla (log/log). É necessário preparar uma nova curva de referência para cada mudança de equipamento e de lote de Multifibren* U.

Controlo de qualidade internoIntervalo normal: Plasma de controlo N, Ci-Trol® Level 1Intervalo patológico: Plasma de controlo PÉ necessário medir dois níveis de material de controlo de qualidade (intervalo normal e intervalo patológico), no início de cada processamento de teste, com cada calibração, depois da troca de frascos de reagentes e, pelo menos, de oito em oito horas em cada dia de realização de testes. Os controlos devem ser processados exactamente como as amostras. Cada laboratório deverá estabelecer o seu próprio intervalo de controlo de qualidade, quer por meio de valores alvo e intervalos fornecidos pelo fabricante dos controlos quer por meio do seus próprios intervalos de confiança, definidos no laboratório. Se os valores de controlo se situarem fora do intervalo de confiança previamente determinado, deve então verificar-se o reagente, a curva de calibração e o analisador de coagulação. Os resultados dos pacientes não devem ser transmitidos até a causa do desvio ter sido identificada e corrigida

Cálculo dos resultados da análiseOs resultados podem ser avaliados com a tabela em anexo ou com uma curva de referência calculada no laboratório.A concentração de fibrinogénio é dada em g/l. Os dados fornecidos na tabela de avaliação só são válidos para reagentes com números de lote correspondentes e para os analisadores de coagulação indicados. É necessário calcular uma curva de referência separada para cada analisador de coagulação, independentemente de ser ou não automatizado.As curvas de referência da tabela de avaliação podem ser verificadas com a ajuda de Plasma de Controlo N, Ci-Trol® Level 1 ou com o Plasma de Controlo P. Se os resultados medidos estiverem fora do intervalo indicado, nesse caso deverá calcular-se uma curva de referência específica do laboratório.

Limitações de execução do testeOs produtos de degradação de fibrina(ogénio) a levam a tempos de coagulação prolongados, originando, assim, uma recuperação reduzida do fibrinogénio. A heparina (até 2 U/ml) não perturba o teste. Sob o efeito de terapia com inibidores directos da trombina, como p. ex., a hirudina, pode ocorrer uma recuperação reduzida3.Nalguns coagulómetros da série KC 4/10/40 podem ocorrer determinações erradas durante o processamento do teste. Nos plasmas de controlo preparados artificialmente, p. ex., diluídos, para o intervalo inferior de alguns fabricantes, pode ocorrer uma recuperação acima do intervalo declarado, se a matriz da amostra não for suficientemente semelhante ao plasma. Neste caso, é aconselhável utilizar o Plasma de controlo P da Siemens.A Siemens validou a utilização destes reagentes em vários analisadores, com o intuito de op-timizar o desempenho do produto e satisfazer as especificações do produto. As modificações definidas pelo utilizador não são suportadas pela Siemens, na medida em que podem afectar o desempenho do sistema e os resultados do ensaio. Constitui responsabilidade do utilizador validar as modificações efectuadas nestas instruções ou em relação ao uso dos reagentes noutros analisadores que não os incluídos nas folhas de instruções de aplicação da Siemens ou nestas instruções de utilização.Os resultados deste teste devem sempre ser interpretados em conjunto com o histórico médico do doente, estado clínico e outros dados de interesse.

Valores expectáveis1,8 – 3,5 g/l4

Os desvios sistemáticos destes intervalos podem ser devidos aos aparelhos. Se for necessário, o laboratório deverá estabelecer um intervalo de referência próprio.

Características de performance do testeIntervalo de medição e sensibilidadeO intervalo de medição situa-se entre 0,8 a >12 g/l, e ainda é inferior para os coagulómetros com medição sensível.

PrecisãoA precisão de Multifibren* U no BCS® foi determinada com os Plasmas de controlo N e P du-rante 5 dias com determinações repetidas oito vezes . O coeficiente de variação dentro da série foi de 2,9 % e 7,2 % para o Plasma de Controlo N e o Plasma de Controlo P, respectivamente. De dia para dia, foi de 1,6 % e 3,4 %.

BibliografiaVeja página 1.

Ci-Trol e BCS são marcas comerciais da Siemens Healthcare Diagnostics.* Multifibren e BFT são marcas comerciais da Siemens Healthcare Diagnostics.

Edição Julho 2008

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