Progress ReportProgress ReportModul 2 & 3

Pembuatan Inokulum & Pengaruh Umur Inokulum

Kelompok 6Dimas Arif Nugraha 10407009Marcelia 10407010Aldyla Nisa Raditya 10407013Astri Elia 10407025Hawa Firdausi K. 10407027Yunitazari Laksmi P. 10407031Oktira Roka Aji 10407038

BM3201 Prinsip Teknologi FermentasiProgram Studi Sarjana MikrobiologiSekolah Ilmu dan Teknologi Hayati

Institut Teknologi BandungBandung

2010

Senin Selasa Rabu Kamis Jumat Sabtu Minggu

Maret

1 2 3 4 5 6 7

8 9 10 11 12 13 14

15 16 17 18 19 20 21

Bulan

Hari

Pengambilan data Kurva

Tumbuh(NB + 0.1%

glukosa)

10-11 Maret

Today!Progress

report

Aktivasi III

(NB + 0.1% glukosa)

Aktivasi II(NB)

Aktivasi I(NB)

Pembuatan Kurva Baku

(NA + 0.1% glukosa)

Progress TimetableProgress Timetable

Somogyi-Nelson

Pengamatan TPC Kurva

Baku

TujuanTujuan

Menentukan pengaruh umur inokulum terhadap produktivitas Bacillus cereus

TEORI DASARTEORI DASAR

Faktor-faktor yang mempengaruhi pertumbuhan antara lain:

Temperatur pH Kadar garam di medium/salinitas Kadar nutrisi

Untuk Bacillus cereus, keadaan lingkungan yang optimum antara lain:

• Temperatur : 30-37° C

• pH : pH minimum untuk tumbuh adalah 4.3 sementara pH maksimum sekitar 9.3.

• Tumbuh optimum dalam keadaan aerob (perlu aerasi).

• Aktivitas air yang diperlukan (Aw) antara 0.912 – 0.950

(Anonim1, 2001)

Bacillus cereus dapat memetabolisme glukosa sebagai sumber nutrisinya dalam the Embden-Meyerhof-Parnas pathway dan the pentose phosphate pathway

Toksin yang dihasilkan Bacillus cereus akan meningkat dengan keberadaan glukosa

Penentuan umur inokulum menghasilkan inokulum aktif yang memberikan fase lag pendek pada kultur berikutnya.

Digunakan pada saat fase log : metabolisme sudah aktif waktu generasi cepat bakteri pembentuk spora sebelum terjadi

pembentukan spora (pembentukan spora dimulai pada akhir fase log)

HASIL PENGAMATAN dan HASIL PENGAMATAN dan PEMBAHASANPEMBAHASAN

OD=0,1

OD=0,2TSUD

OD=0,3

OD=0,4

OD=0,5

Koloni jamur

Koloni bakteri,TSUD

TBUDTBUD

TBUD

Koloni menyebar

TSUD

TSUD

TSUD

TSUD

TSUD

TSUD

TSUD

Koloni menyebar

Koloni menyebar

KURVA BAKU GAGALKURVA BAKU GAGALKurva baku merupakan kurva log

jumlah sel (CFU) terhadap OD.Karena hasil plating gagal, jumlah sel

(CFU) tidak dapat dihitung.

KURVA BAKU GAGAL

Grafik Nilai OD terhadap Waktu

0

0.2

0.4

0.6

0.8

1

1.2

1.4

1.6

1.8

2

0 2 4 6 8 10 12 14 16 18

Waktu (jam)

Op

tica

l Den

sity

(O

D)

umur inokulum 6 jam umur inokulum 9 jam umur inokulum 12 jam

OD v.s. waktuOD v.s. waktu

OD

tn

Umur inokulum

6 jam 9 jam 12 jam

t0 0.3288 0.4714 0.3746

t1 0.947 0.8412 0.9246

t2 0.4714 1.1638 1.3278

t3 1.495 1.398 1.4204

t4 1.6204 1.523 1.523

t5 1.699 1.5856 1.5692

t6 1.7454 1.6388 1.5382

t7 1.824 1.6582 1.602

t8 1.8556 1.6388 1.602

OD v.s. waktuOD v.s. waktu

OD awal (t0): umur inokulum 9 jam > 12 jam > 6 jam

OD akhir (t8): umur inokulum 6 jam > 9 jam > 12 jam

Umur inokulum 9 dan 12 jam: OD cenderung naik (grafik membentuk lengkungan)

Umur inokulum 6 jam: gejolak nilai OD◦ Turun drastis t1 t2 (0.945 0.4714)◦ Naik drastis t2 t3 (0.4714 1.495)

Konsentrasi OD

1 ppm 0.0118

2 ppm 0.102

3 ppm 0.1702

4 ppm 0.2576

5 ppm 0.3074

6 ppm 0.3746

7 ppm 0.4644

8 ppm 0.4856

Waktu (jam) OD

0 0.0618 0.1794

2 0.0406 0.1208

4 0.0236 0.066

6 0.0236 0.0332

8 0.0266 0.0122

10 0.0164 0.0212

12 0.02 0.032

14 0.0056 0.013816 0.0066 0.0242

Waktu (jam) OD0 0.05342 0.04184 0.03946 0.03228 0.0324

10 0.018812 0.016414 0.01316 0.0122

Semakin tinggi nilai OD (Optical Density) berarti semakin tinggi kandungan gula dalam larutan.

Kurva reduksi gula (dari setiap umur inokulum) menunjukkan bahwa semakin lama waktu inkubasi maka semakin rendah nilai OD. kandungan gula dalam larutan semakin berkurang

Setelah dididihkanSetelah ditambah larutan nelson dan aquades

Grafik Nilai pH terhadap Waktu

0

1

2

3

4

5

6

7

8

9

0 2 4 6 8 10 12 14 16 18

Waktu (jam)

pH

umur inokulum 6 jam umur inokulum 9 jam umur inokulum 12 jam

pH v.s. waktupH v.s. waktu

pH

tn

Umur inokulum

6 jam 9 jam 12 jam

t0 6.63 6.31 6.65

t1 5.6 4.58 5.54

t2 4.99 5.22 4.96

t3 6.2 5.08 5.49

t4 6.5 5.90 6.07

t5 6.84 6.29 6.59

T6 7.65 6.57 6.65

T7 8.12 6.75 6.95

T8 7.38 6.96 6.99

Selang waktu antar t adalah 2 jam

pH v.s. waktupH v.s. waktu Awal (t0): range pH netral (semua umur inokulum)

2 – 6 jam pertama: pH turun◦ Umur inokulum 9 jam: titik terendah pada t1

◦ Umur inokulum 6 & 12 jam: titik terendah pada t2 pH terendah dicapai oleh umur inokulum 9 jam (pH=4.58) pada t1

pH naik kembali:◦ Umur inokulum 9 jam: pH naik kembali setelah 2 jam dari t0

◦ Umur inokulum 6 & 12 jam: pH naik kembali setelah 4 jam dari t0 pH tertinggi dicapai oleh umur inokulum 6 jam (pH=8.12) pada t7

pH mengalami kestabilan:◦ Umur inokulum 6 jam: t3-t4 (sekitar pH=6)◦ Umur inokulum 9 jam: t2-t3 (sekitar pH=5)◦ Umur inokulum 12 jam: t5-t6 (sekitar pH=6.5)

pH mulai mendekati range pH netral (mendekati akhir pengamatan kurva tumbuh):◦ Umur inokulum 6 jam: t3-t5

◦ Umur inokulum 9 & 12 jam: t4

Akhir (t8): range pH netral (semua umur inokulum)

pH v.s. waktupH v.s. waktuGlukosa asam asetat & piruvat

(Nakata et.al., 1960)◦pH medium turun pada 2 – 6 jam

pertama pembuatan kurva tumbuhAsam asetat & piruvat

dimetabolisme B. cereus dalam kondisi kekurangan nutrisi (Nakata et.al., 1960)◦pH naik kembali setelah turun pada

beberapa jam pertama

KENDALAKENDALAShaker kurang memadai

shaker manual

Prosedur Somogyi Nelson yang kurang valid Pengenceran berdasarkan perhitungan

Warna terlalu pekat, %T=0

KesimpulanKesimpulanUmur inokulum terbaik untuk

produktivitas adalah 6 jam.