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Respuesta de plantas de pltano (Musa AAB cv.Hartn) a la inoculacin con hongos micorrzicos

arbusculares nativos e introducidos,bajo condiciones de campo

Response of plantain plants (Musa AAB cv. Horn) toinoculation with indigenous and introduced arbuscular

mycorrhizal fungi (AMF) under field conditions

M. Gonzlez1,2 y G. Cuenca1

1Instituto Venezolano de Investigaciones Cientficas (IVIC), Centrode Ecologa2Universidad Nacional Experimental Sur del Lago "Jess MaraSemprum" (UNESUR)

Resumen

Estudios previos han evidenciado que los hongos micorrizgenos arbusculares(HMA) promueven el crecimiento y produccin de plantas de inters agrcola, debi-do a que facilitan la absorcin de nutrientes, mejoran la estructura del suelo, elbalance hdrico y protegen a las plantas contra patgenos. En este trabajo se eva-lu la respuesta de las plantas de pltano Hartn en trminos de su crecimiento,produccin de frutos, incrementos en la absorcin de P, N y colonizacin micorrzicabajo condiciones de campo. Para ello, se estableci un experimento utilizando undiseo completamente aleatorizado. Las plantas de pltano fueron inoculadas o no(tratamiento control) con dos especies de HMA introducidos, Glomus manihotis(Gm) y Scutellospora heterogama (Sh), y aislados de HMA nativos provenientes deplantaciones de pltano manejadas con bajos (BI) y altos (AI) insumos. La aplica-cin de fertilizantes en esos suelos parece ser excesiva, dado que incluso las plan-tas inoculadas con BI no presentaron diferencias en la respuesta con respecto a lasinoculadas con AI. Los HMA introducidos fueron ms eficientes que los HMA na-tivos, en especial Sh, el cual produjo las mejores respuestas en crecimiento y pro-duccin de frutos. Estos beneficios pueden ser explicados en funcin de una mayorabsorcin de N, pero no en trminos de un aumento en el contenido de P y lacolonizacin micorrzica. Se recomienda el uso de esta especie como una alternati-va para incrementar la produccin de pltano Hartn, minimizando la dependen-cia de fertilizantes qumicos y el impacto que stos generan sobre el ambiente.Palabras clave: Musa AAB, pltano, fertilizacin, micorrizas introducidas,micorrizas nativas.

Recibido el 15-5-2007 z Aceptado el 7-4-2008Autor de correspondencia e-mail: mggonzal@ivic.ve

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Abstract

Many studies have shown that arbuscular mycorrhizal fungi (AMF)promote the development and production of plants with agronomic interest,because they improve the nutrient absorption, the soil structure, the waterbalance and protect their hosts against pathogenic organisms. In this work weevaluated the response of plantain plants (cv. Horn) in terms of growing, fruitproduction and P and N absorption to the inoculation with different AMF strainsat field conditions. Therefore, a field experiment using a complete ramdom designwas established. Plants were inoculated or not (control treatments) with twono native species Glomus manihotis (Gm) and Scutellospora heterogama (Sh);and two native isolates found in fields managed with low (LI) and high (HI)inputs. Plants belonging to LI and HI treatments did not show statisticaldifferences among them because that LI has been under excessive fertilization.Introduced AMF strains were more efficient than native ones, especially Sh,which had the best responses in terms of plant growing and fruit production.These benefits can be explained by a higher N absorption, but not in terms of ahigher P uptake and mycorrhizal colonization. The use of Sh as an alternativefor increasing the Horn plantain yield is suggested, because it allows decreasethe dependence of chemical fertilizing and its environmental impact.Key words: Musa AAB, plantain, fertilization, introduced arbuscularmycorrhizal Fungi, native arbuscular mycorrhizal Fungi.

Introduccin

El cultivo del pltano se encuen-tra ampliamente distribuido en las re-giones tropicales y subtropicales delmundo. Sus frutos tienen gran acep-tacin en los mercados internaciona-les, y constituyen tambin una fuen-te alimenticia. Para finales del 2005Latinoamrica produjo 88 millones detoneladas mtricas de pltano (FAO,2006). Dentro de los pases latinoa-mericanos, Venezuela es uno de losprincipales productores, ya que con un6% de la produccin se ubica en elcuarto puesto por debajo de Colombia(42%), Per (21%) y Ecuador (12%)(FAO, 2006).

En la zona Sur del Lago deMaracaibo se encuentran las mayoresplantaciones de pltano del pas, alcan-

Introduction

Plantain culture is widelydistributed in the tropical and subtropical regions around the world.Their fruit have a high acceptance inthe international markets, and alsoconstitutes a nutritious source. Forthe end of 2005 Latin Americaproduced 88 millions metric tons(FAO, 2006). In Latin America, Ve-nezuela is one of the principalproducers, since with a 6% ofproduction is located in the fourth pla-ce below Colombia (42%), Peru (21%)and Ecuador (12%) (FAO, 2006).

In the south of Maracaibo Lakeare the principal plantain plantationsof country, by reaching anapproximate surface of 40.000hectares (CORPOZULIA-CIPLAT,

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zando una superficie aproximada de40.000 hectreas (CORPOZULIA-CIPLAT, 2002). En esta zona se esti-ma una poblacin de 4.000 producto-res dedicados a este rubro, de los cua-les el 80% est representado por peque-os productores (CORPOZULIA-CIPLAT, 2002). Tales caractersticasindican que el cultivo del pltano re-presenta para Venezuela, as como paraotros pases de Latinoamrica un pro-ducto de gran importancia econmicay alimenticia. Esta alta demanda evi-dencia la necesidad de incrementar laproduccin de pltano. Para ello, lamen-tablemente se ha recurrido a prcticasagrcolas que utilizan gran cantidad deagroqumicos, dando lugar a la conta-minacin del suelo, agua y aire, la alte-racin de los ciclos biogeoqumicos y laprdida de la biodiversidad. Adems delos problemas ambientales que se ge-neran, el costo que cada da adquierenlos insumos importados afecta sensible-mente la rentabilidad de las empresasagrcolas.

Ante este escenario, el reto quedeben afrontar los partcipes del pro-ceso productivo radica en establecersistemas de produccin agrcola sus-tentable, en aras de satisfacer la de-manda creciente de productos agrco-las, minimizando la dependencia defertilizantes qumicos y el impacto quetales actividades generan sobre elambiente. En este sentido, losGlomeromicetes u hongos formadoresde micorrizas arbusculares podranconstituir una alternativa de manejo.

Los hongos micorrizgenosarbusculares (HMA) forman asocia-ciones simbiticas, generalmentemutualistas, que se establecen entrelas races de la mayora de las plan-

2002). In this region, there is anestimated population of 4.000producers dedicated to this crop, fromwhich 80% is represented by littleproducers (CORPOZULIA-CIPLAT,2002). These characteristics showthat the plantain crop represents forVenezuela, likewise for othercountries in Latin America a productof a high economical and nutritiousimportance. This high demand showsthe necessity of improving theplantain production. For that,unfortunately some agriculturalpractices that uses a high quantity ofagro chemicals, by giving place to thesoil, water and air pollution, thealteration of the biogeochemical cyclesand the lost of the biodiversity.Besides of the environmentalproblems caused, the cost of importedinputs affects in a sensible way therentability of the agriculturalenterprises.

In front of this scenario, thechallenge to be confront by theproductive process lies in the esta-blishment of sustainable agriculturalproduction systems, with the purposeof satisfying the increasing demandof agricultural products, by reducingthe dependence of chemical fertilizersand the impact that these activitiesgenerates on the environment. In thisessay, the Glomeromicetes orarbuscular mycorrhizal former fungicould constitute a managementalternative.

The arbuscular mycorrhizalfungi (AMF) form symbioticassociations, generally mutual, whichare established between roots ofmajority of plants and a limited fungigroup (Smith and Read, 1997). This

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tas y un limitado grupo de hongos(Smith y Read, 1997). Esta asociacinest basada funcionalmente en eltraslado de carbohidratos de la plan-ta al hongo y nutrientes que el hongoabsorbe del suelo (P, Cu, Zn, NH4+)hacia la planta (Marschner y Dell,1994; Smith y Read, 1997). El hongo,adems de incrementar el desarrollode las plantas debido a que mejora laabsorcin de nutrientes, desempeaotras funciones como proteger a lasplantas contra patgenos (Elsen, etal., 2003; Newsham, et al., 1995),mejorar la estructura del suelo y elbalance hdrico (Rillig, 2004; Ruiz-Lozano y Azcn, 1995), entre otras. Seha sealado que el principal benefi-cio que los HMA le proveen a las plan-tas es la absorcin de P (Smith y Read,1997). Sin embargo el N tambin esun elemento importante cuya absor-cin puede ser mejorada por los HMA(Feng, et al., 2002; Hodge, et al., 2001;Jin, et al., 2005).

El potencial de manejo de lamicorriza arbuscular en la agricultu-ra ha sido demostrado por numerosostrabajos realizados bajo condicionesde campo y de invernadero, en los cua-les se han evidenciado los efectos be-nficos de la inoculacin con HMAsobre la nutricin, crecimiento y pro-duccin de plantas de importanciaagrcola como el banano (Declerck, etal., 1994; 1995), caf (Estrada ySnchez, 1995), cacao (Cuenca, etal.,1990), pimentn (Estrada-Luna yDavies, 2003; Kim, et al., 2002), yuca,lechuga (Cuenca, et al., 2007), entreotros. No obstante, una serie de estu-dios han demostrado que la respues-ta de la simbiosis puede variar en unamplio intervalo que comprende des-

association is principally based inmoving of carbohydrates from plantto fungal and nutrients that fungalabsorption from soil (P, Cu, Zn, NH4+)toward plant (Marschner and Dell,1994; Smith and Read, 1997). Fungal,besides of increasing the plantsdevelopment because the improvingof nutrients absorption, play otherfunctions like to protect plants againstpathogens (Elsen et al., 2003;Newsham et al., 1995), to improve thesoil structure and the water balance(Rillig, 2004; Ruiz-Lozano and Azcon,1995), among others. The principalbenefit that AMF gives to plant is theP absorption (Smith and Read, 1997).However, N also is an importantelement whose absorption could beimproved by the AMF (Feng et al.,2002; Hodge et al., 2001; Jin et al.,2005).

The management potential ofthe arbuscular mycorrhizal in theagriculture have been demonstrate bynumerous works made under fieldand greenhouse conditions, in whichthe benefits effects of the inoculationwith AMF on nutrition, growth andplants production of agriculturalimportance like banana (Declerck etal., 1994; 1995), coffee (EstradaSanchez, 1995), cacao (Cuenca et al.,1990), pepper (Estrada-Luna andDavies, 2003; Kim et al., 2002),cassava, lettuce (Cuenca et al., 2007),among others. However, a serial ofstudies have demonstrate thatsymbiosis response could vary in awide interval that comprise from apositive response until a negative one,depending on the host plant specielike the specie or the AMF strainassociated and the environmental

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de una respuesta positiva hasta unarespuesta negativa, dependiendo tan-to de la especie de planta hospederacomo de la especie o cepa de HMAasociado y de las condiciones ambien-tales (Douds, et al., 1998; Johnson, etal., 1997; Taylor y Harrier, 2000).

Aunque en casi todos los suelosagrcolas estn presentes poblacionesde HMA nativas, con frecuencia lasprcticas agrcolas intensivas como lalabranza y el uso indiscriminado deagroqumicos conlleva a que stassean insuficientes o ineficientes parael establecimiento de una simbiosismutualista, que incremente el creci-miento y produccin de las plantashospederas (Cheng y Baumgartner,2004; Cuenca, et al., 1991; Jansa, etal., 2003; Sieverding, 1991). En estoscasos, la eficiencia de la micorrizapuede ser incrementada ya sea pormanejo cultural de los hongos nativosde un determinado suelo, o por inocu-lacin con hongos introducidos mseficientes (Cuenca, et al., 2007; Gazey,et al., 2004; Sieverding, 1991).

La efectividad de los HMA nati-vos puede ser mayor en comparacincon los HMA introducidos debido, pro-bablemente, a una mayor adaptacinal medio. Sin embargo, algunos estu-dios han mostrado resultados con-tradictorios. Mientras algunos resul-tados sealan que en comparacin alinculo introducido, los nativos pue-den provocar una mejor respuesta decrecimiento de las plantas (Gonzlez-Chvez y Ferrera-Cerrato, 1993),otros estudios han hallado que en al-gunas especies de plantas los hongosintroducidos fueron ms eficientesque el inculo nativo (Caravaca, et al.,2005). Esto sugiere que la efectividad

conditions (Douds et al., 1998;Johnson et al., 1997; Taylor andHarrier, 2000).

Although in the most ofagricultural soils native AMFpopulations are present, withfrequency the intensive agriculturalpractices like tillage and theindiscriminate usage of agrochemicals takes to these beinsufficient or inefficient for the esta-blishment of a mutualist symbiosis,that increases the growing andproduction of host plants (Cheng andBaumgartner, 2004; Cuenca et al.,1991; Jansa et al., 2003; Sieverding,1991). In these cases, the efficiency ofthe mycorrhiza could be increased bythe cultural management of nativesfungi of a determined soil, or byinoculation with those more efficientfungi introduced (Cuenca et al., 2007;Gazey et al., 2004; Sieverding, 1991).

The effectively of native AMFcould be higher in comparison withthe introduce AMF due, probably, toa higher adaptation to environment.However, some studies have showncontradictory result, whereas someresults point out that in comparisonto introduced inoculum, natives couldprovoke a better response of plantsgrowth (Gonzalez-Chavez andFerrera-Cerrato, 1993), other studieshave found that in some species ofplants, the introduced fungi weremore efficient than the nativeinoculum (Caravaca et al., 2005). Thissuggests that the AMF effectivenessalso can depend on host. Anyway,when finding efficient species AMF,being these natives or introduced,would permit to optimize theproductivity of Horn plantain

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de los HMA tambin puede dependerdel hospedero. De cualquier manera,el encontrar especies eficientes deHMA, sean stas nativas o introduci-das, permitiran optimizar la produc-tividad de las plantaciones de plta-no Hartn, minimizando el impactodel uso de agroqumicos sobre el am-biente.

En suma, el papel de los HMAes, sin lugar a dudas, relevante parael funcionamiento de losagroecosistemas, adems de poseer ungran potencial como bioinsumo agr-cola no contaminante y de bajo costo.Debido a ello, la presente investigacintiene como objetivo evaluar la respues-ta de las plantas de pltano (MusaAAB cv. Hartn), en trminos de laabsorcin de P y N, efectos en el creci-miento, produccin de frutos y coloni-zacin micorrzica, a la inoculacin conHMA nativos e introducidos, en con-diciones de campo. Asimismo, en estetrabajo se compara la respuesta de lasplantas de pltano inoculadas conHMA nativos asociados al cultivo depltano, aislados de plantaciones ma-nejadas con altos y bajos insumos.

Materiales y mtodos

El ensayo se estableci en la fincaSanta Luca ubicada en el sector Ban-cada de Limones, Parroquia El Moralito,municipio Coln del estado Zulia. Estesector se encuentra situado en 8 30 y9 15 de latitud Norte y 71 31 y 7200 de longitud Oeste, en el extremo SurOeste del sector Chama -Escalante, auna altura de 20 msnm (MARNR.,1981). Antes de establecer el ensayo setom una muestra compuesta de suelo,la cual demostr que el nmero de

plantations, by minimizing the impactof agro chemical use on theenvironment.

The AMF role is, without doubt,relevant for the functioning of theagro ecosystems, besides of having ahigh potential like agricultural bioinput without pollution and with a lowcost. Because of it, this research hasan objective to evaluate the responseof plantain plants (Musa AAB cv.Horn), in terms of P and N absorption,effects in the growth, fruits productionand mycorrhizal colonization, to theinoculation with natives andintroduced AMF, in field conditions.Likewise, in this study the responseof plantain plants inoculated withnatives AMF related to the plantaincrop, isolated from plantationsmanaged with high and low inputs iscompared.

Materials and methods

Essay was established in theSanta Lucia farm located in "Banca-da de Limones" sector, El MoralitoParrish, Colon municipality of Zuliastate. This sector is located in 8 30and 9 15 of North latitude and 7131 and 72 00 of West longitude, inthe South West extreme of Chama Escalante sector, at a height of 20msnm (M.A.R.N.R., 1981). Before ofestablishing the essay a soil composedsample was taken, which showed thatthe mycorrhizal propagules numberis very low, did not reach 200 sporesby 100 g soil. Previously, traps potwere established for producing anative inoculum AMF from Hornplantain plantations managed withlow inputs (LI) and other of

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propgulos de micorrizas arbuscularespresente era muy bajo, pues no alcan-zaba las 200 esporas por 100 g de suelo.Previamente se montaron potes tram-pa para producir un inculo de HMAnativos provenientes de plantaciones depltano Hartn manejadas con bajosinsumos (BI) y otro de plantacionesmanejadas con altos insumos (AI). Es-tas plantaciones estn ubicadas en elsector Bancada de Limones y fueron cla-sificadas con datos aportados por losproductores como: 1) Bajos insumos. Seaplican fertilizantes qumicos cada seismeses o ms, realizan control manualde malezas, no aplican funguicidas parael control de la Sigatoka Negra(Mycosphaerella fijiensis) u otras enfer-medades, y llevan a cabo un control agro-nmico (deshoje fitosanitario, deshije,desburre, resiembra, distribucin encampo de los desechos de cosecha); 2)Altos insumos. Se aplican fertilizantesqumicos cada 3 o 4 meses, realizan con-trol qumico de malezas cada 3 o 4 me-ses y realizan fumigaciones areas cada45 das para el control qumico de laSigatoka Negra.

Para preparar los inculos demicorrizas arbusculares usualmente setoma un nmero elevado de esporas delhongo micorrzico de que se trate, y secolocan en un suelo mezclado a partesiguales con arena, luego se siembra unaplanta micorrzica. En este caso se uti-liz Vigna luteola, por ser una plantaaltamente micorrzica (Hernndez, etal., 2000). Para el caso de los HMA in-troducidos que tambin se utilizaron eneste trabajo (Glomus manihotis yScutellospora heterogama), el suelo uti-lizado fue el del bosque nublado del Ins-tituto Venezolano de InvestigacionesCientficas (IVIC). Luego de 4 a 6 me-

plantations managed with highinputs (HI). These plantations arelocated in "Bancada de Limones" andwere classified with data gave byproducers like: 1) Low inputs.Chemical fertilizers were applied eachsix months or more, weeds manualcontrol is made, fungicides are notapplied for the Black Sigatoka(Mycosphaerella fijiensis) control orany other disease, and an agronomicalmanagement is accomplished(defoliate, desuckering, desburre,resowing, field distribution in harvestwastes; 2) High inputs. Chemicalfertilizers are applied each 3 or 4months, weeds chemical control ismade each 3 or 4 months and aerialfumigations are made each 45 daysfor the chemical control of BlackSigatoka.

For preparing inoculums ofarbuscular mycorrhizal usually ahigher spores number from thestudied mycorrhizal fungal is taken,and they are placed in a soil mixed toequal parts with sand, after amycorrhizal plant is sowed. In thiscase Vigna luteola is used, because itis a highly mycorrhizal plant(Hernandez et al., 2000). In case ofintroduced AMF that also were usedin this research (Glomus manihotisand Scutellospora heterogama), soilused was those of cloudy forest of theInstituto Venezolano de Investigacio-nes Cientificas (IVIC). After 4 to 6months, plant was allowed to dry off,the substrate contained in a contai-ner was homogenized besides of plantrootlets (previously cut in pieces about2 cm) and, this substrate was used asinoculum. In case of inoculums LI andHI were similarly prepared, but with

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ses la planta se dej secar y el sustratocontenido en el pote se homogeneizjunto con las raicillas de la planta (pre-viamente picadas en trozos de unos 2cm) y, ese sustrato es el que se utilizcomo inculo. Para el caso de losinculos BI y AI se prepararon de ma-nera similar, pero con la diferencia deque no se comenz a partir de esporasaisladas sino que se parti del suelo delas dos haciendas de pltano referidasarriba y esos suelos se mezclaron a par-tes iguales con arena. Con dichossustratos se llenaron cinco potes deplstico de 5 kg de capacidad y, en cadapote, se sembraron 2 semillaspregerminadas de Vigna luteola. Dichospotes se mantuvieron bajo condicionesde invernadero por un lapso de 4 a 6meses, el cual se consider suficientepara obtener un elevado nmero depropgulos infectivos e inculo mixto(Morton, et al., 1993; Sieverding, 1991).Al momento de establecer el ensayo,estos inculos contenan 3.013 y 1.405esporas por 100 g de suelo seco, paraBI y AI, respectivamente. Los inculosintroducidos utilizados provenan decolecciones internacionales: (Glomusmanihotis y Scutellospora heterogama),y han sido reproducidos durante largotiempo en el Laboratorio de Ecologa deSuelos del Centro de Ecologa del IVIC.El inculo de G. manihotis utilizadocontena 46.515 esporas por 100 g desuelo seco, con un 93% de pureza y, S.heterogama 5.670 esporas con un 74%de pureza. Adems de las esporas via-bles, dichos inculos tenan hifas y frag-mentos de races infectadas y, en todoslos casos se consider que posean unaconcentracin de propgulos saturante.El inculo nativo e introducido se colo-c en el hoyo de siembra, al momento

the difference that the beginning didnot begin from isolated spores butfrom the soil the two plantain farmsbefore mentioned and those soils weremixed with sand at equal parts. Withthese substrates five plasticcontainers were filled until 5 kg ofcapacity and, in each container, 2 pregerminated seeds of Vigna luteolawere sowed. These containers weremaintained under greenhouseconditions during a period of 4 to 6months, which was considered enoughfor obtaining a high number ofinfective propagules and mixedinoculum (Morton et al., 1993;Sieverding, 1991). At the moment ofestablishing the essay, this inoculumhad 3.013 and 1.405 spores by 100 gof dry soil, for LI and HI, respectively.Those Inoculum used came frominternational collections: (Glomusmanihotis and Scutellosporaheterogama), and they have beenreproduced during long time in theSoils Ecology Laboratory of theEcology Center of IVIC. Inoculum ofG. manihotis used had 46.515 sporesby 100 g of dry soil, with 93% of purityand S. heterogama 5.670 spores with74% of purity. Also, from the livesspores, these inoculum had hyphasand fragments of infected roots and,in all cases was considered for havinga saturate propagules concentration.The native and introduced inoculumwas placed in the sowing hole, at themoment of establishing the essay infield, in a dose of 100 g per plant.

As a vegetative seed, corms ofsword suckers of approximately 1 to1.5 kg were used. Those sword suckerswere separated from mother plants ofplantations of Horn plantain and

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de establecer el ensayo en campo, en ladosis de 100 g por planta.

Como semilla vegetativa se em-plearon cormos de hijos puyones depltano de aproximadamente 1 a 1,5kg. Los hijos puyones fueron separa-dos de plantas madres de plantacionesde pltano Hartn y se les cort elseudotallo unos 5 cm por arriba delcormo, para estimular la emisin deyemas laterales y acelerar la brotacin.Posteriormente fueron sembradossistemticamente en cuadros a unadistancia de 3 x 3 m. Se utiliz un di-seo completamente aleatorizado con5 tratamientos y 20 repeticiones. Elsuelo no fue fumigado por lo que todoslos tratamientos se establecieron enpresencia de los HMA nativos del sue-lo. Los tratamientos fueron los siguien-tes: 1) suelo nativo sin inoculacin conHMA (C), 2) inoculacin conScutellospora heterogama (Sh), 3) ino-culacin con Glomus manihotis (Gm),4) inoculacin con HMA nativos pro-venientes de plantaciones de pltanoHartn manejadas con bajos insumos(BI), y 5) inoculacin con HMA nati-vos provenientes de plantaciones depltano Hartn manejadas con altosinsumos (AI).

El ensayo se estableci el 03/05/2005 y se cosech el 25/02/2006. Parala cosecha se seleccionaron de formaaleatoria 10 plantas por tratamientoa las cuales se le evaluaron los si-guientes parmetros:

a) Masa seca de la hoja y delseudotallo: debido a la imposibilidadde trasladar, almacenar y secar todoel material vegetal cosechado, ste fueseparado en hojas y seudotallo y pe-sado para obtener su masa fresca enel campo. Luego se tomaron alcuotas,

pseudo stem was rapidly cut 5 cmabove the corm, for stimulating theemission of lateral buds and foraccelerating sprouting. Afterwards,they were systematically sowed intosquares at a distance of 3 x 3 m. Atotally at random design was used with5 treatments and 20 replications. Soilwas not fumigated, so, all thetreatments were established inpresence of natives AMF from soil.Treatments were the following: 1)native soil without inoculation withAMF (C), 2) inoculation withScutellospora heterogama (Sh), 3)inoculation with Glomus manihotis(Gm), 4) inoculation with natives AMFcomes from Horn plantain plantationsmanaged with low inputs (LI), and 5)inoculation with natives AMF comesfrom Horn plantain plantationsmanaged with high inputs (HI).

Essay was established on 03/May, 2005 and it was harvested on25/February, 2006. For the harvest,10 plants by treatment were randomselected for evaluating the followingparameters:

a) Dry matter from leave andpseudo stem: Due to theimpossibility of moving, storage anddry all the harvested vegetal material,it was separated in leaves and pseudostem and weighed for obtaining itsfresh mass in field. After, aliquotswere taken, which were placed in anstove at 60C. Finally, for obtainingthe dry mass from aliquots, thesewere weighed in a balance and byconversion the total dry mass of leavesand pseudo stems was determined.

b) Fresh mass of fruit: clusterswere separated from plant andindividually weighed in a roman.

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las cuales se colocaron en una estufaa 60C. Finalmente, para obtener lamasa seca de dichas alcuotas, stasse pesaron en una balanza y por con-versin se determin la masa seca to-tal de las hojas y los seudotallos.

b) Masa fresca del fruto: losracimos fueron separados de la plan-ta y pesados individualmente en unaromana.

c) Colonizacin micorrzica:se colectaron en el campo raicillas de10 plantas seleccionadas al azar quelucieran saludables y activas. Para ladeterminacin de la colonizacinmicorrzica se utiliz la metodologade McGonigle, et al. (1990), para locual las raicillas fueron previamenteteidas con azul de tripn segnPhillips y Hayman (1970). Debido aque durante el proceso de aclaracinlas races de pltano liberan un altocontenido de fenoles que oscurecen lasraces, se utiliz durante el procedi-miento de tincin una solucin deKOH al 10% a temperatura ambien-te, durante un lapso de 10 a 14 das,dependiendo del grado de pigmenta-cin. Posteriormente se calentaron enuna solucin nueva de KOH al 10%durante 10 minutos en bao Mara.Para blanquear aun ms las races,stas se colocaron en una solucin deagua oxigenada alcalina, la cual con-tiene H2O2 y NH4OH durante 10 mi-nutos.

d) Contenido de P y N: estosparmetros slo se midieron en 5plantas por tratamiento, las cualesfueron seleccionadas de formaaleatoria. Para ello, el material vege-tal fue secado, por separado, en unaestufa a 60C hasta peso constante.Luego este material fue molido en un

c) Mycorrhizal colonization:rootlets from 10 plants were atrandom collected looking healthy andactives. For determining themycorrhizal colonization themethodology of McGonigle et al.,(1990) was used; rootlets werepreviously dyed with trypan blueaccording to Phillips and Hayman(1970). During the clearing process ofplantain roots release a high phenolcontent darkening roots, because of it,during the dying procedure, a KOHsolution at 10% at environmentaltemperature was used during a periodof 10 to 14 days, depending onpigmentation degree. Afterwards theywere heated in a new solution of KOHat 10% during 10 minutes in a waterbath. For whiten even more the roots,these were placed in a solution ofalkaline oxygenated water, whichcontains H2O2 and NH4OH during 10minutes.

d) P and N content: theseparameters only were measured on 5plants by treatment, which were atrandom selected. For that, the vege-tal material was separately dried, inan oven at 60C until constant weight.After, this material was processed ona mill and 50 mg of each sample wereweighed. For the P analysis, sampleswere digested in 5 mL of concentratedsulphuric acid with successiveadditions of 0.5 mL of H2O2. Digestionwas diluted with demineralized wateruntil 75 mL and in this extract the Pconcentrations were measured byusing a spectrophotometer, throughthe Murphy and Riley methodology(1962). For the N analysis, sampleswere digested in 2 mL of H2SO4concentrated and selenium tablet

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molino y se pesaron 50 mg de cadamuestra. Para el anlisis de P, lasmuestras fueron digeridas en 5 mL decido sulfrico concentrado con suce-sivas adiciones de 0,5 mL de H2O2. Ladigestin se diluy con aguadesmineralizada hasta 75 mL y endicho extracto se midieron las concen-traciones de P utilizando unespectrofotmetro, mediante la meto-dologa de Murphy y Riley (1962).Para el anlisis de N, las muestrasfueron digeridas en 2 mL de H2SO4concentrado y pastilla de seleniocomo catalizador, posteriormente el Nse cuantific mediante el mtodo demicrokjeldahl.

Adems trimestralmente se mi-dieron la altura del seudotallo, el n-mero de hojas emitidas y el perme-tro del tallo a un metro desde la su-perficie del suelo.

Los datos obtenidos se analiza-ron mediante un anlisis de varianza(ANOVA). Previo al ANOVA, se apli-c el test de homogeneidad devarianzas de Bartlett. Los datos deporcentaje de infeccin micorrzicafueron transformados por el arcosenoprevio al ANOVA. Se utiliz un test aposteriori de comparacin de mediasde Tukey ( 0,05%) para n iguales.Todos los datos fueron procesados conel programa estadstico Statistica(versin 99).

Resultados y discusin

Respuesta de la planta y con-tenidos de P y N en el tejido vege-tal. Al realizar la evaluacin de losparmetros de crecimiento se encon-tr que, en general, las plantas de pl-tano Hartn sometidas al tratamien-

as catalyst, afterwards, N wasquantified by the microkjeldahlmethod.

Also, each three months, thepseudo stem height, the number ofemitted leaves and the stemperimeter at one meter from the soilsurface.

Data obtained was analyzedthrough an analysis of variance(ANOVA). Previously to ANOVA, thehomogeneity test of variances byBartlett was applied. Percentage dataof mycorrhizal infection were changedto arcsen previous to ANOVA. Aposteriori test of Tukey meanscomparison ( 0.05%) for n equal. Allthe data were processed with statisticalprogram Statistica (version 99).

Results and discussion

Response of plant andcontents of P and N in vegetaltissue. When making the evaluationof growth percentages, it was foundthat, in general, plants of Hornplantain subjected to Sh treatmentreached, in the different growthstages, larger height, leaves number(figure 1a, b) and larger dry mass ofpseudo stem and leave (table 1).During the first and secondevaluation, height values in thistreatment were statistically equal tothose Gm and C, but differentstatistically of treatments LI and HI,while in third evaluation the heightreached by Sh treatment wassignificant larger than the rest oftreatments (figure 1a).

In relation to the behavior ofpseudo stem diameter, during the firstand second evaluation, it was

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to Sh alcanzaron, en las distintas eta-pas de crecimiento, mayor altura,nmero de hojas (figura 1a, b) y ma-yor masa seca del seudotallo y de lahoja (cuadro 1). Durante la primera ysegunda evaluacin los valores de laaltura en dicho tratamiento fueronestadsticamente iguales a los trata-mientos Gm y C, pero diferentesestadsticamente de los tratamientosBI y AI. Mientras que durante la ter-cera evaluacin la altura alcanzadapor el tratamiento Sh fuesignificativamente mayor que el res-to de los tratamientos (figura 1a).

En relacin con el comporta-miento del dimetro del seudotallo,durante la primera y segunda evalua-cin, se observ que el tratamiento Shpresent diferencias significativas encomparacin con el tratamiento BI y,en la segunda evaluacin con AI y BI.Sin embargo, durante la tercera eva-luacin estas diferencias desaparecie-ron (Datos no mostrados). Durante lasegunda evaluacin, el nmero dehojas del tratamiento Sh difirisignificativamente del resto de los tra-tamientos, mientras que en la terce-ra evaluacin slo se encontraron di-ferencias significativas entre este y eltratamiento BI (figura 1b). Como sesabe, este parmetro es indicativo dela potencial capacidad de llenado delfruto, ya que para obtener un buenracimo de pltano, la planta debe con-tar con al menos 8 hojas para el mo-mento de la floracin (Nava, 1997;Stover, 1987). Por lo tanto, estos re-sultados permitieron anticipar unaexcelente produccin por efecto deltratamiento Sh.

A los nueve meses de crecimien-to en campo, la inoculacin con S.

observed that Sh treatment showedsignificant differences in comparisonwith LI treatment and, in the secondevaluation with HI and LI. However,during third evaluation thesedifferences disappeared (not showndata). During second evaluation, theleaves number of Sh treatmentdiffered significantly of the rest of thetreatments, whereas in thirdevaluation significant differenceswere only found between thistreatment and LI (figure 1b). Asknown, this parameter is indicativeof potential capacity of fruit filled,because for obtaining a good plantaincluster, plant have to have at least 8leaves for the moment of flowering(Nava, 1997; Stover, 1987). Therefore,these results permitted to anticipatean excellent production by the effectof Sh treatment.

At nine months of growth infield, inoculation with S. heterogamaincreased in a significant way the drymatter of pseudo stem (DMP) and thedry matter of leaves (DML) incomparison with the rest oftreatments (table 1) in wheresignificant differences were notobserved in these parameters betweenHorn plantain plants inoculated withLI, HI and Gm. Likewise, differencesbetween theses and C plants were notfound. This situation would seems toindicate a functional complementarybetween Horn plantain plants and S.heterogama, because the rest ofinoculum used did not had anefficiency for distinguish them fromthose native AMF presents in the ex-perimental soil.

Fresh mass of cluster reached byHorn plantain plants inoculated with

Gonzlez y Cuenca

482

0,5

1,3

2,1

2,9

3 meses 6 meses 9 meses

Altu

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Tiempo

C BI AI Gm Sh

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Figura 1. a) Altura y b) nmero de hojas en plantas de pltano Hartninoculadas con hongos micorrzicos arbusculares (HMA)despus de tres, seis y nueve meses de tratamiento, bajocondiciones de campo.

Figure 1. a) Height and b) leaves number in Horn plantain plantsinoculated with AMF after three, six and nine months oftreatment, under field conditions.

C: control no inoculado con HMA; BI: inoculado con HMA nativos (bajos insumos); AI:inoculado con HMA nativos (altos insumos); Gm: inoculado con G. manihotis; Sh: inocula-do con S. heterogama. Letras diferentes indican diferencias estadsticamente significati-vas, a los nueve meses de tratamiento, para P

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