[T] Alterações no leucograma de felinos domésticos (Felis ......Eosinóﬁ los Totais e...

Rev. Acad., Ciênc. Agrár. Ambient., Curitiba, v. 8, n. 3, p. 299-306, jul./set. 2010

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[T]

Alterações no leucograma de felinos domésticos (Felis catus) decorrentes de estresse agudo e crônico

[I]

Alterations on leukogram of domestic felines (Felis catus) due to acute and chronic stress

[A]Ana Laura Pinto D’Amico Fam[a], Rita Maria Venâncio Mangrich Rocha[b],

Cláudia Turra Pimpão[c], Marúcia de Andrade Cruz[d]

[a] Médica veterinária residente em Patologia Clínica, Pontifícia Universidade Católica do Paraná (PUCPR), São José dos Pinhais, PR - Brasil, e-mail: [email protected]

[b] Médica veterinária, Mestre, professora de Bioquímica Geral e Aplicada e Patologia Clínica Aplicada, Pontifícia Universidade Católica do Paraná (PUCPR), Curitiba, PR - Brasil. e-mail: [email protected]

[c] Médica veterinária, professora Doutora de Farmacologia Geral e Aplicada, Pontifícia Universidade Católica do Paraná (PUCPR), Curitiba, PR - Brasil, e-mail: [email protected]

[d] Médica veterinária, Curitiba, PR - Brasil, e-mail: [email protected]

[R]Resumo

Os hormônios envolvidos com o estresse alteram a quantidade de células brancas presentes no sangue. Durante o estresse agudo, gatos podem desenvolver quadro de linfocitose fi siológica, caracterizado por linfocitose e neutrofi lia, graças à liberação de catecolaminas. A linfopenia é verifi cada quando há liberação de corticosteroides durante o estresse crônico, caracterizando o leucograma de estresse. O presente estudo tem por objetivo avaliar a incidência de leucogramas por estresse na rotina clínica de felinos. Para isso, 93 amostras de sangue de gatos, coletadas em uma clínica especializada, foram analisadas seguindo técnicas padronizadas pelo laboratório. Os resultados foram signifi cativos para os parâmetros Linfócitos Totais, Eosinófi los Totais e Bastonetes (p < 0,001), sendo que o grupo avaliado apresentou valores menores que a média para os parâmetros Linfócitos e Eosinófi los, e maiores que a média para Bastonetes. Conclui-se que adaptar consultórios para o atendimento de felinos reduz signifi cativamente as alterações sanguíneas decorrentes do medo e da excitação (leucocitose fi siológica). Os valores encontrados, eosinopenia e linfo-penia, foram compatíveis com a liberação de glicocorticoide, provavelmente responsiva às doenças e à dor.[P]Palavras-chave: Felinos. Hemograma. Estresse. Catecolaminas. Glicocorticoides.


FAM, A. L. P. D’A. et al.300[B]Abstract

Hormones involved with stress change the amount of white blood cells. During acute stress, cats may develop physiological leykocytosis, characterized by lymphocytosis and neuthophilia due to catecholamine release. Lymphopenia may be verifi ed when there is a corticosteroid release during chronic stress, leading to the stress leukogram. The aim of the present study is to evaluate the incidence of stress leukograms. To carry it out, 93 blood samples from felines, collected in a specialized clinic, were analyzed following standardized techniques by the laboratory. The results were signifi cant for the parameters: total lymphocytes, total eosinophils and band cells (p < 0,001), where the evaluated group displayed values lower than the media for the parameter lymphocytes and eosinophils and higher than the media for band cells. It’s possible to conclude that clinics programmed to attend felines reduce signifi cantly the blood alterations caused by fear and excitement (physiologic leukocytosis). The found values, eosinopenia and lymphopenia, are compatible with the release of glucocorticoids, probably in response to diseases or pain.[K]Keywords: Felines. Blood count. Stress. Catecholamines. Glucocorticoids.

Introdução

Ao longo dos anos, o ser humano vem mudando a tradição de morar em casas para morar em apartamentos. Esta modifi cação da estrutura urbana fez com que os gatos fossem cada vez mais solicitados como animais de estimação, visto que não precisam de grandes ambientes para viver, são higiênicos e inde-pendentes. Com isso, a população de felinos domésticos vem crescendo. Segundo Almeida, Paixão e Labarthe (2005), estima-se que nos Estados Unidos da América existam aproximadamente 105 milhões de gatos, sendo 75 milhões domésticos e 30 milhões livres. São classifi cados segundo a forma de criação, como: confi nados, mantidos exclusivamente dentro de casa; semiconfi nados, mantidos dentro de casa com acesso ao ambiente externo; e livres, aqueles que vivem livremente. No Brasil, com o aumento de pessoas morando em apartamen-tos, houve um signifi cativo acréscimo de gatos mantidos exclusivamente dentro das residências, visto que não existe o hábito de se levar gatos para passear. Quando esses animais precisam deixar suas casas, por exemplo, para ir ao veterinário, passam por uma situação de medo, excitação ou estresse (DALE, 1990; MEYER et al., 1995; COWELL; DECKER, 2000; SOUZA, 2003). O estresse desencadeia respostas hormonais que alteram a concentração das células sanguíneas (SOUSA, 2007; LEANDRO et al., 2006; ENGLER et al., 2004; DUNN, 2000). Pode ocorrer diminuição da concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM) (WATSON; PAINE, 1943), aumento do número total de eritrócitos (WRIGHT et al., 1951), hematócrito (ERSLEV, 1990), plaquetas (CHATTERJEA et al., 1953) e de leucócitos totais. As células sanguíneas brancas são mais variáveis nos gatos do que nos cães. Isso ocorre porque os felinos possuem um pool marginal muito maior (KOCIBA, 2004; LACERDA, 2005; CLINKENBEARD; MEINKOTH, 2000). Assim sendo, a leucocitose nos gatos pode chegar a valores quatro vezes superiores ao limite de referência (LACERDA, 2005).

A resposta dos animais ao estímulo estressante pode ser dividida em três fases: alteração compor-tamental, estimulação do sistema simpático (estresse agudo) e ativação do eixo hipotálamo-pituitária-adrenal (estresse crônico) (LANDSBERG, 2006; MALM et al., 2005; SPARKES et al., 1990).

Em situações que causem o estresse agudo, como medo, excitação ou punção venosa, espera-se encontrar um conjunto de alterações, como leucocitose, neutrofi lia, eosinofi lia e linfocitose, denominado leucocitose fi siológica (KOCIBA, 2004; LATIMER; TVEDTEN, 1999; PRASSE; KAEBERLE; RAMSEY, 1973). Já no estresse crônico, como em casos de dor persistente ou ambientes estressantes, espera-se encontrar o leucograma de estresse, caracterizado por leucocitose, neutrofi lia, eosinopenia e linfopenia (YAGI et al., 2004; KERR, 2003; OVERALL, 1997; KLEMM, 1996).

O presente estudo tem por objetivo avaliar hematologicamente 93 gatos, visando a verifi car alterações no hemograma de felinos decorrentes de estresse que ocorrem na rotina clínica e verifi car diferenças dessa resposta entre animais machos e fêmeas.


Alterações no leucograma de felinos domésticos (Felis catus) decorrentes de estresse agudo e crônico 301

Material e métodos

Os resultados de hemogramas dos gatos atendidos na clínica Mania de Gato durante os meses de janeiro de 2004 e dezembro de 2006 foram tabulados e comparados com os valores de referência existentes para animais normais, fornecidos pelo laboratório onde os exames foram realizados. A clínica Mania de Gato trabalha com agendamento de horários, atendendo prontamente os pacientes que chegam à clínica. Os con-sultórios são telados, pequenos, com poucos móveis (embutidos), com iluminação indireta e limpos entre as consultas. Foram computados os resultados de 93 hemogramas, sendo 39 de fêmeas e 54 de machos, todos adultos e a maioria sem raça defi nida. As amostras de sangue foram colhidas em intervalo entre 15 e 30 minutos após a chegada do paciente à clínica, durante a rotina do atendimento, por meio de venopunção da jugular. Os exames foram processados no laboratório habitual utilizado pela clínica, seguindo técnicas padronizadas.

Para a análise estatística dos dados foi utilizado o teste “t” de Student, comparando os valores médios entre machos e fêmeas e entre o grupo todo e os valores de referência. O nível de signifi cância adotado foi de 5% (α = 0,05). Todos os cálculos foram realizados utilizando o software estatístico GraphPad Prism version 3.0 for Windows®, San Diego, Califórnia, EUA.

Resultados e discussão

A Tabela 1 mostra os resultados obtidos para série vermelha. Observam-se valores máximo e mínimo de referência, média das fêmeas, médias dos machos e a média geral de todos os animais.

Tabela 1 - Valores hematológicos fi siológicos (máximos e mínimos), valores médios verifi cados em gatos domés-ticos (Felis catus) fêmeas e machos, e a média geral verifi cada em eritrogramas. Curitiba, PR (n = 97)

Valores IdadeEritrócitos(×106/μl)

Hemoglobina (g/dl)

Hematócrito (%)

VGM CHGM

Valor de referência máximo 10 15 45 55 36

Valor de referência mínimo 5 8 24 39 33

Fêmeas (n = 40) 7,3 ± 6,2 7,6 ± 2,2 11,6 ± 2,9 36,6 ± 10,4 48,9 ± 12 31,8 ± 5,9

Machos (n = 53) 4,4 ± 3,6 8,3 ± 1,8 12,5 ± 2,8 38,7 ± 9,2 49 ± 8,1 31,6 ± 4,7

Todos (n = 93) 5,8 ± 5,2 7,9 ± 2 12 ± 2,9 37,6 ± 9,7 48,9 ± 9,9 31,7 ± 5,2

Observa-se que nenhum valor possui diferença signifi cativa quando comparado aos valores de refe-rência, assim como não há diferença estatística entre os valores médios das fêmeas e dos machos (p > 0,05). Na série branca houve diferença estatística nos parâmetros Eosinófi los, Linfócitos e Neutrófi los Bastonetes.

A Figura 1 mostra a avaliação do parâmetro Leucócitos Totais, em que se pode observar que não houve diferença estatística entre a média dos animais e a média dos valores de referência.

O parâmetro Linfócitos Totais demonstrou grande diminuição nos animais testados (Figura 2). Os monócitos (Figura 3) não apresentaram diferença.A Figura 4 mostra a quantidade de neutrófi los segmentados. Não houve alteração considerável

entre as amostras testadas e os valores de referência. Porém, os neutrófi los bastonetes apresentaram elevação signifi cativa, como mostra a Figura 5.

Já a Figura 6 mostra a diferença constatada entre a média dos animais em relação à média dos valores de referência para o parâmetro Eosinófi los.


FAM, A. L. P. D’A. et al.302

Figura 1 - Comparação do número de leucócitos do sangue (cel/mm³) dos gatos atendidos na clínica Mania de Gato entre os meses de janeiro de 2004 e dezembro de 2006, em relação aos valores normais para a espécie. A abscissa dentro do quadrilátero representa os valores da média; a delimitação do quadrilátero, os percentis de 25% a 75%; e as ordenadas, o mínimo e o máximo

Figura 3 - Comparação do número de monócitos do san-gue (cel/mm³) dos gatos atendidos na clínica Mania de Gato entre os meses de janeiro de 2004 e dezembro de 2006 em relação aos valores normais para a espécie. A linha abscissa dentro do quadrilátero representa os valores da média; a delimitação do quadrilátero, os percentis de 25% a 75%; e as extremidades das barras, ordenadas o mínimo e o máximo

Figura 4 - Comparação do número de neutrófi los segmen-tados do sangue (cel/mm³) dos gatos atendidos na clínica Mania de Gato entre os meses de janeiro de 2004 e dezembro de 2006, em rela-ção aos valores normais para a espécie. A linha abscissa dentro do quadrilátero representa os valores da média; a delimitação do quadrilátero, os percentis de 25% a 75%; e as extremidades das barras, ordenadas o mínimo e o máximo

Figura 2 - Comparação do número de linfócitos do sangue (cel/mm³) dos gatos atendidos na clínica Mania de Gato entre os meses de janeiro de 2004 e dezembro de 2006, em relação aos valores normais para a espécie. A abscissa dentro do quadrilátero representa os valores da média; a delimitação do quadrilátero, os percentis de 25% a 75%; e as extremidades das ordenadas, o mínimo e o máximo

** p < 0,001 em relação ao grupo normal

AmostraReferência0

5000cel/mm³

10000

15000

AmostraReferência0

1000

2000

3000

4000

5000

cel/mm³

**

AmostraReferência0

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AmostraReferência0

5000cel/mm³

10000

15000



Segundo Kociba (2004), Latimer e Tvedten (1999), Ishizaki e Kariya (1999), Bounous, Hoskins e Boudreaux (1993) e Prasse, Kaeberle e Ramsey (1973), ambientes estressantes, medo, excitação e punção venosa levam à liberação de adrenalina. Rebar (2003), Nelson e Couto (2001) e Cowell e Decker (2000) apontam que de 20 a 30 minutos após esta liberação ocorrem mudanças no hemograma. Porém, alterações na série ver-melha e branca, compatíveis com secreção de adrenalina, não foram evidenciadas após análise das amostras. Isto possivelmente se deve ao fato de que os animais sentem-se mais ambientados nos consultórios da clínica, diminuindo a excitação e o medo e, portanto, a liberação de adrenalina. Outro fator importante é a idade. De acordo com Bounous, Hoskins e Boudreaux (1993) e Cowell e Decker (2000), animais jovens respondem à adrenalina mais intensamente do que adultos. Neste estudo, todos os animais avaliados eram maiores de 1 ano.

Os principais achados durante a avaliação dos resultados foram: eosinopenia e linfopenia. Ambos são característicos do leucograma de estresse. Outras alterações desse quadro incluem leucocitose e neutro-fi lia, não evidenciadas durante a análise dos dados (SHILOV; ORLOVA, 2000; GARCIA-NAVARRO, 1994; DUNCAN; PRASSE, MAHAFFEY, 1994; JAIN, 1993).

Segundo Greco (2007), a linfopenia é a alteração mais consistente após a liberação de glicocorticoides. Porém, Sousa (2002) acredita que a linfopenia não é um componente marcante no leucograma de estresse de felinos, particularmente. Sendo assim, outras causas poderiam levar à diminuição de linfócitos. Porém, poucas delas levam à diminuição de eosinófi los concomitantemente. Cowell e Decker (2000) afi rmam que eosinopenia é difícil ser evidenciada em qualquer espécie. No entanto, é uma das principais alterações encontradas neste estudo.

Sabe-se que o leucograma de estresse leva de quatro a oito horas para aparecer (LACERDA, 2005; REBAR, 2003; WOLF, 1995; ULICH et al., 1988). Como as consultas não demoram esse tempo, outras causas que levam ao aumento de glicocorticoides devem ser lembradas. As principais são doenças e dor (YAGI et al. 2004; KERR, 2003; OVERALL, 1997; KLEMM, 1996; MEYER, 1995). Como o estudo foi realizado em uma

Figura 5 - Comparação do número de neutrófi los bastonetes do sangue (cel/mm³) dos gatos atendidos na clí-nica Mania de Gato entre os meses de janeiro de 2004 e dezembro de 2006 em relação aos valores normais para a espécie. A linha abscissa dentro do quadrilátero representa os valores da média; a delimitação do quadrilátero, os percentis de 25% a 75%; e as extremidades das barras, ordenadas o mínimo e o máximo


Figura 6 - Comparação do número de eosinófi los (cel/mm³) dos gatos atendidos na clínica Mania de Gato entre os meses de janeiro de 2004 e dezembro de 2006, em relação aos valores normais para a espécie. A linha abscissa dentro do quadrilátero representa os valores da média; a delimitação do quadrilátero, os percentis de 25% a 75%; e as extremidades das barras ordenadas, o mínimo e o máximo


AmostraReferência0

500

1000

1500

cel/mm³

**

AmostraReferência0

250

500 **

750

1000

cel/mm³



clínica, alguns dos animais envolvidos nesta pesquisa provavelmente são animais doentes. Este fato também explica por que alto número de neutrófi los bastonetes foi encontrado durante a análise dos resultados, já que muitas doenças levam ao desvio nuclear de neutrófi los à esquerda (DNNE).

Assim como em humanos, não foram evidenciadas diferenças signifi cativas nas respostas hemato-lógicas entre machos e fêmeas (CHATTERJEA; DAMESHEK; STEFANINI, 1953).

Conclusão

Nas condições do presente estudo, após a avaliação hematológica dos gatos, concluiu-se que adaptar consultórios para o atendimento de felinos reduz signifi cativamente as alterações sanguíneas decorrentes do medo e/ou da excitação (leucocitose fi siológica). Evidenciou-se ainda que não há diferença de resposta entre os sexos. Os valores encontrados, eosinopenia e linfopenia, são compatíveis com a liberação de glicocorticoide, provavelmente responsiva a doenças e à dor.

Referências

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Recebido: 05/05/2009Received: 05/05/2009

Aprovado: 03/02/2010Approved: 02/03/2010

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