Uvod u
veterinarsku
laboratorijsku
praksu
Status predmeta: Izborni
Broj ESPB: 3,5
Šifra predmeta: ФВМИС1ИП09
Cilj predmeta:
Student treba da razume osnovne principe
izvedenih dijagnostičkih postupaka u laboratorijskoj
praksi
Treba da zna mogućnosti primene pojedinih
laboratoriskih tehnika u cilju praćenja zdravstvenog
stanja životinja
Treba da stekne veštinu prijema i usmeravanja
uzorka za dalji laboratorijski pregled
POSTUPAK UZIMANJA I
SLANJA MATERIJALA ZA
PATOHISTOLOŠKI
PREGLED
• pravilan odabir uzorka
• pravilan odabir metode
uzorkovanja
• pravilno procesovan
• prosečna veličina
2x3cm
debljina 2-3mm
• klinike
• farme
• klanice
• obdukciona sala
• laboratorije
• neposredno nakon uginuća
• u što kraćem vremenskom periodu
od uginuća ili posle hirurške
intervencije
• sa granice promenjenog i zdravog
tkiva
• makroskopska
• mikroskopska
MAKROSKOPSKA
ispitivanja
OBDUKCIJA
FeLV, FIP
• uzimanje otisaka tkiva - IMPRINT
• uzimanje briseva
• skarifikat tkiva
• aspiriranje solidnih masa i tečnosti
Obezbediti više pločica radi primene
različitih metoda bojenja!!!
FIP citologija
Infektivni peritonitis mačaka-
FIP
TKIVA : pluća, jetra, slezina, lnn, crevo, mozak, bubreg
Granulomi i piogranulomi
• razliĉite veliĉine
• bele boje
• izdignuti iznad nivoa površine seroza i
organa.
• isečak treba dostaviti ODMAH nefiksiran ili
fiksiran u10% neutralnom formalinu
• uzorkovati i okolno tkivo – analiza reakcije
okolnog tkiva na tumor
• veliki tumor – napraviti poprečni presek i
manje isečke
• limfni čvor – praćenje metastaza
• velike lezije – eksciziona biopsija
• male biopsije – ne raditi elektrokauterizaciju
• endoskopska biopsija – najmanje 3-5
uzoraka sluznice organa sa prisutnom
lezijom
• uzorke uzeti na granici bolesnog i
zdravog tkiva
• uzeti više uzorka
• veličina uzorka približno iznosi
1x1x0,5cm
FIKSIRANJE TKIVA
Isečak dostaviti odmah
nefiksiran ili
fiksiran u 10%
neutralnom formalinu.
Odnos tkiva i formalina
TREBA DA BUDE 1:10.
48h na temperturi od 19 do 22°C
• sprečava se autoliza
• sprečava se putrefakcija
• dolazi do denaturisanja strukturnih i enzimskih
proteina
• druge komponente tkiva ne podležu
promenama
očuvanje morfologije ćelije
njene veličine i oblika
stabilnost tkivnih i ćelijskih struktura
Mere opreza!!!
• potencijalni kancerogen
• nadražuje oči i disajne puteve
• izazivanje ekcema
Automatsko procesovanje:
• fiksiranje
• dehidraciju
• prosvetljavanje tkiva
• fiksiranje - 10% formalin
• modeliranje debljine 0,2-0,3 cm
• ispiranje u vodi
• dehidracija da bi parafin ušao u tkivo
koncentracije alkohola od 60%, 96% do 100%
• prosvetljavanje tkiva 10-20min
ksilol
• rastopljeni parafin 24h
• parafinski blokovi
• sečenje na mikrotomu (5-10μm)
• kadica sa vodom (45°C)
• sušenje u termostatu
• rehidracija
• bojenje
• tkivo ukalupiti u čvrstu podlogu
• da može da se seče
• da ne ošteti nož
• da ne ošteti tkivo
• Patohistologija
• Imunohistohemija
Infektivni peritonitis mačaka-
FIP
jetraPOZITIVNA REAKCIJA
Makrofage, plazma ćelije
MAb FCoV
granulom
1. GREŠKA
Nedovoljno fiksirano tkivo
Nedovoljno fiksirano tkivo
POSLEDICA
SMRZAVANJE
2. GREŠKA
Autoliza
POSLEDICA
Mesto uzorkovanja
3. GREŠKA
www.vet.bg.ac.rs
Radno vreme Laboratorije za patologiju je radnim danima od 8-19 časova. Uzorci koji su dostavljeni na analizu u Odeljenje za transmisivne spongiformne encefalopatije do 14 časova ispituju se odmah i nalaz se izdaje istog dana.
Rezultati patohistološkog ispitivanja izdaju se za 3-5 dana od dana prijema uzorka.
Uz uzorke je obavezno dostaviti odgovarajući uput.
Politika kvalitetaCenovnik uslugaUputstvo za uzorkovanje i slanje uzoraka za TSEUputstvo za uzorkovanje i slanje uzoraka za patohistologijuUput za TSEUput za patohistologijuUput za obdukciju
Laboratorija za patologiju je rešenjem Akreditacionog tela Srbije od 14.07.2008. akreditovana za obavljanje poslova patohistološke i imunohistohemijskedijagnostike, kao i za obavljanje poslova dijagnostike transmisivnih spongiformnih encefalopatija