Curriculum Vitae
Nama: Dr. Lucia Herminawati, Apt.
TTL: Jakarta, 19 Agt 1979
Pekerjaan: QA Manager di PT Prodia Diagnostic Line (ProLine)
Riwayat Pendidikan:
1997 – 2001 : S1 Farmasi Universitas Surabaya
2001 – 2002 : Program Profesi Apoteker
2010 – 2012 : S2 Kimia Klinik Universitas Hassanudin Makassar
2012 – 2015 : S3 Biomedik Universitas Hassanudin Makassar
VALIDASI
METODE
REAGEN KIMIA
KLINIK
Lucia Herminawati
Purwokerto, 06 Oktober 2019
VALIDASI
Konfirmasi, melalui penyediaan bukti
objektif, bahwa persyaratan bagi
pemakaian atau persyaratan formal
dimaksud telah dipenuhi.
what?
akreditasiPengakuan formal kepada suatu lembaga untukmelakukan kegiatan tertentu, yang telah memenuhistandar yang ditetapkan.
why?
Apa persyaratan ISO 15189?
5.5.1.3 Validasi prosedur pemeriksaan
Laboratorium harus mem-validasi prosedur pemeriksaan yang berasal dari sumber-
sumber berikut:
a) Metode non-standar;
b) Metode yang dirancang atau dikembangkan oleh laboratorium;
c) Metode standar yang digunakan di luar lingkup yang dimaksudkan;
d) Metode tervalidasi yang kemudian dimodifikasi,
Validasi harus seluas yang diperlukan dan memastikan, dengan memberikan bukti
obyektif (dalam bentuk spesifikasi kinerja), bahwa persyaratan tertentu untuk
penggunaan yang diinginkan dari pemeriksaan telah terpenuhi.
Non standard method
Laboratory design by developed method
Modified validated methode
VALIDATION
Before use as diagnostic test method
Define performance characteristic
Existing method
with defined performance
Existing methode used after repair
VERIFICATION
Before use as diagnostic test method
Compare performance characteristics with
specification
REAGEN KIMIA KLINIK?
Manufaktur sudah melakukan validasi metode, kemudian
mengapa laboratorium harus melakukan uji performa lagi ?
Beberapa faktor yang dapat mempengaruhi performa:- Efek pengiriman dan penyimpanan- Perbedaan lot kalibrator dan reagen- Perubahan pada persediaan & distributor komponen instrumen- Kondisi kontrol terhadap iklim lokal- Kualitas air- Stabilitas arus listrik- Ketrampilan operator
Verifikasi diperlukan untuk membuktikan bahwa metode yang digunakan bekerja dengan baik sesuai kondisi di Laboratorium memberikan hasil tes yang terpercaya bagi pasien.
A practical validation approach
Performance CLIA CAP
AccuracyMethod comparison
+ +
PrecisionReplication experiment
+ +
Reportable rangeLinearity experiment
+ +
Reference range - Established + +
Analytical sensitivityLimit of detection study
Not required Not required
Analytical specifityInterference study
Not required Not required
Recovery to determine proportional systematic error Not required Not required
precision
standard
presisi
– Hitung Mean, SD, dan CV untuk setiap tes CV yang
diperoleh secara statistik dibandingkan dengan klaim
manufaktur menggunakan signifikansi tes ANOVA
(umumnya pada tingkat kepercayaan 95%)
– Diterima jika CV within run < 1/4 TEaCV intermediate < 1/3 TEa
Assume TEa = 10%, CV within run < 2.5%, CV Between Day < 3%
METHOD
COMPARISON
standard
Studi minimal yang direkomendasikan
Dilakukan terhadap 40 sampel pasien
(bisa menggunakan 20 sampel jika memiliki rentang analitik
yang lebar)
Pengujian pada ≥ 5 hari yang berbeda;
Plot data pada grafik perbandingan;
Gunakan statistik regresi atau t-test
Westgard JO, Basic Method Validation, 3rd, 2008.
Periksa nilai r (koefisien korelasi):
r < 0.975 analisis regresi linier mungkin tidak valid; Mungkin indikasi rentang data terlalu terbatas (r dipengaruhi rentang nilai).
r hanya dipengaruhi oleh RE, tidak oleh SE. r = istilah statistik = derajat hubungan linier antar metoda.
y = ax + ba = slope (indikasi proportional error) b = intercept (indikasi constant error)
Studi minimal yang direkomendasikan
– Jika r > 0.975
Hitung SE pada kadar yang penting untuk membuat keputusan
klinis (medical decision level)
– y = ax + b
Contoh: y = 0.985 x - 4.69.
Pada decision level x = 200 mg/dL y = 192.31 mg/dL SE =
7.69 mg/dL atau 3.85 %.
Studi minimal yang direkomendasikan
SE = standard error
y = 1.05 x + 0.680r = 0.9992
Pada decision level x = 120 mg/dL y = 126.68 mg/dL SE = 6.68 mg/dL atau 5.57 %.
Perbandingan Metode
Nama Produk : Glucose Hexokinase FSMaterial sampel : serum pasien, serum kontrolInstrument : respons 910
X: Hitachi 911 Glucose Hexokinase FS Unit: mg/dL
Y: respons910 Glucose Hexokinase FS Unit: mg/dL
Studi minimal yang direkomendasikan
linearity
CLSI Guidelines
Linearity = Reportable Range / Analytical Measurement Range (AMR)
Reportable range = the span of test result values over which the laboratory can establish or verify the accuracy of the system.
AMR = range of analyte where results are proportional to the TRUE concentration of analyte in the sample.
HOW
Westgard JO, Basic Method Validation, 3rd, 2008.
Linearity = Analytical Measurement Range (AMR)
Assigned value
Measured value
Rep. 1 Rep. 2 Rep.3 Mean
0 0 5 10 5
100 95 100 105 100
200 200 195 205 200
300 310 300 290 300
400 380 390 400 390
500 470 460 480 470
Example:Rentang pengukuran : 0 – 500 mg/dL Buat sampel dengan dilusi dari 500 hingga 0
Rentang dapat dilaporkan hingga 300 mg/dL hasil valid.Bagaimana untuk hasil 400 mg/dL dan 500 mg/dL?
Asumsi TEa yang ditetapkan untukCholesterol = 10% dan CV 3%
Sampel 500 mgTEa = 50 mg/dL; SD = 15 mg/dL RE = 30 mg/dL (2SD)Nilai terukur = 470 mg/dL SE = -30 mg/dL
TE = 60 mg/dL > TEa (50 mg/dL)
Sampel 400 mgTEa = 40 mg/dL; SD = 12 mg/dL RE = 24 mg/dL (2SD)Nilai terukur = 390 mg/dL SE = -10 mg/dL
TE = 34 mg/dL < TEa (40 mg/dL)
TE = SE + RE
Characteristic of RE and SE
Random Error (RE) Systematic Error (SE)
Affect Precision Affect Accuracy
May be caused by (e.g.):o Variability in volume of sample or reagent
delivered; o Changes in environment; o Inconsistent handling of materials.
Types of SE: o Proportional- indicated by Slope o Constant – indicated by Intercepto Combination
Estimated by: − Standard Deviation (SD) − Coefficient of variation (CV) − Correlation coefficient (r)
Caused by (e.g.):Bad calibrators, bad reagents,interference
Yusmiati, HKKI, 2016
Terima Kasih
Do the Right Thing, From the First
Time and Every Time!
