Víctor Hugo Casco

Principales tipos de ARN producidos en las Células

Tipo de ARN Función

ARN mensajero Código para la síntesis de proteínas

ARN ribosomal Forma la estructura básica de los ribosomas y cataliza la síntesis de proteínas

ARN de transferencia

Centrales para la síntesis de proteínas como adaptadores entre el ARNm y los aminoácidos

ARNs pequeños nucleares

Funcionan en una variedad de procesos nucleares, incluyendo el splicing de pre-ARNm

ARNs pequeños nucleolares

Usados para procesar y modificar químicamente ARNrs

Otros ARNs no codificantes

Actúan en diversos procesos celulares, incluyendo la síntesis de los ARNs de la síntesis de telómeros, inactivación del cromosoma-X, transporte de proteínas hacia el RER.

ARN polimerasa de E. coli

ω

ARN polimerasa de E. coli

β

β´

ω

Transcripción por la ARN polimerasa de E. coli

Terminación de la Transcripción

Formación del stem loop

Disociación del ARN a partir de molde de ADN

ADN

ARN

ADN

Repetición ricaen GC - invertida

Control negativo del operón lac

Control positivo del operón lac por glucosa

Proteína activadora de genes catabólicos

Separación e identificación de las tres ARN polimerasas eucariontes

Polimerasa I: nucleolar (pre-ARNrs)

Polimerasa II: ARNm y cuatro ARNnps

Polimerasa III: ARNts, ARNr 5,S y ARNpestables (U6, S7)

Experimento usando - amanitina (octapéptido de acción

diferencial)

En eucariotas ARN que transcribe cada ARN Polimerasa también es diferente ARN polimerasa I produce pre-ARN ribosómico (pre-ARNr)

18S, 5.8S y 28S

ARN polimerasa II produce pre-ARN mensajero (pre-ARNm) y ARN pequeño nuclear (ARNsn)

ARN polimerasa III produce el pre-ARN de transferencia(pre-ARNt), ARNr 5S y otros ARNsn

ARN polimerasa mitocondrial produce el ARNmitocondrial

Comparación de las subunidades de las ARN polimerasasde las Levadurascon las de E. coli

ARN polimerasa II holoenzima La holoenzima consiste de un

complejo preformado deARN Polimerasa II, losfactores de transcripcióngenerales: TFIIB, TFIIE,TFIIF, and TFIIH, y otrasproteínas que activan latranscripción

Este complejo puede serreclutado directamente a unpromotor vía la interaccióncon TFIID (TBP + TAFs).

Complejo de Iniciación de la Polimerasa II y factores de transcripción generales aislados

Complejos ARN polimerasa - mediador

Iniciación de la transcripción del ADNr

Transcripción de los genes de la polimerasa III

Un promotor eucariótico típico

Ejemplo del promotor del gen de timidina-quinasa del gen devirus herpes simple contiene tres elementos de secuenciascorriente arriba de la caja TATA que son requeridos para unatranscripción eficiente: una caja CCAAT y dos cajas GC(secuencias consensa GGGCGG).

El amplificador SV40

El promotor de SV40 para la expresión de genes de expresión temprana contieneuna caja TATA y seis cajas GC agrupadas en tres conjuntos de secuenciasrepetidas. Adicionalmente, la transcripción eficiente requiere de un amplificadorcorriente arriba consistente de dos repeticiones de 72 pares de bases

Acción de los amplificadores Sin un amplificador, el gen es

transcripto a un bajo nivel basal (A).

La adición de un amplificador Epara el ejemplo del SV40 lasrepeticiones de 72-pares de basesestimula la transcripción.

El amplificador es activo no sólocuando se lo coloca muy próximocorriente arriba sino (B), sino quetambién lo hace cuando se lo ubicavarias kilobases corriente arriba oabajo (C y D).

Adicionalmente los amplificadoresson activos tanto en orientaciónforward o backward (E).

Torsión del ADN

Secuencias reguladoras de genes

ADN espaciador

Proteínas reguladorasde genes

Factores generales de transcripción

ARN polimerasa

Promotor

Caja TATAComienzo de la transcripciónCorriente abajo

Las distintas etapas en el metabolismo del ARNm pueden ser reguladas

ADN

ARN Transcripto

primario ARNm ARNm

ARNm inactivo

Control de laDegradación del

ARNm

Control del procesamiento

del ARNm

Control transcripcional

Control del transporte del ARNm

Control de la traducción

Control de la actividadproteica

Proteína ProteínaInactiva

Núcleo Citosol

Splicing

El proceso consiste en el corte de los intrones El proceso consiste en el corte de los intrones y empalme y empalme de los de los exonesexones

Splicing

Formación del extremo 3´ de ARNms eucariotas