ADLN - Airlangga Digital Library Networkrepository.unair.ac.id/9845/13/FULLTEXT-...

B A B I

TINJATJAN PUSTAXA

M i .. kPERPUSTAK \AN

’UNIVERSIJV.S Al R.L \' 'GGA'S u R -S u Y ,\

Cholesterol dalam darah ( j*

Cholesterol. s

Rumus bangunannyay w ,, Ha M:

i \ K i'C H

*6x4 C H 3

C *3*•7

Rumus molekulnya : c27Hi|60

Berat molekul : 386,67

Tltlk leburnya S 145° - ISO0C*

Sifat-sifat flsik dan kimia :

Merupakan serbuk halus/granul-granul halus, warna

putih agak kekuningari, tidak berbau*,

Kelarutan s tak larut dalam air

alkohol : 1 : 100

larut dalam ; aceton, hexana*

kholoroform eter* ethyl asetat,

minyak tumbuh-tumbuhan*

ADLN - Airlangga Digital Library Network

Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan

Dalam plasma darah hampir semua leraak terikat de-

ngan protein dan membentuk lipoprotein yang larut dalam

air*;

Dengan bentuk inilah lemak utama plasma darah seperti :

cholesterol*trigleserida,phospolipida diangkut dan be-

redar keseluruh tubuh (11)

Lemak-lemak didalam darah terdiri dari ( 2 ) :

a* cholesterol : * 20% terdiri dari

free cholesterol : «= 30%esterified cholesterol: * 70%

b. trigliserida : ± 35%

c* phospolipida : * k5%

d* asam lemak

Dari susunan tersebut diatas yang selalu berubah kadar-

nya adalah cholesterol dan trigleserida.

Total cholesterol dalam darah normal antara 1,3 -

1tkk mg/ml darah*

Perbandingan antara free cholesterol dan esterified

cholesterol didalam darah == /*.:!•

Sedangkan didalam cerum atau plasma perbandingan anta -

free cholesterol dan esterified cholesterol = 1:3 •

Harga total kadar cholesterol dalam tubuh akan -

meningkat pada (15) •

keadaan dimana didapatkan kenaikan salah satu

atau lebih lemak darah ( hyperlipemia );

hyper ( ) lipoproteinemla.



nephrosis ; diabetes mellitus.

Sedangkan harga total cholesterol dalam tutouh akan me-

nurun pada keadaan :

hOTerthyroidism dan hepatic disease*

2*Metoda_Eemerytsaan_kadar_total_cholesterol_dalam_se-

ru m *

Untuk menentukan kadar total cholesterol dalam se-

rum ada berbagai macam prosedur (3*6,7,10,14*16,20 )

dan pada umumnya akan melalui fase-fase analisa sbb:

Ifekstraksi

2:saponifikasi

3sisolasi

4:penentuan titik akhir*

Banyak dari cara analisa untuk pemeriksaan kadar cho -

lesterol total dalam serum tidak mempergunakan seluruh

analisa yang disebut diatas*

Pemeriksaan kadar total cholesterol dalam serum -

paling sering dilakukan secara spektrofotometri dengan

mempergunakan metoda reaksi warna Liebermann Burchar d*

Kemudian pada akhir-akhir ini telah mulai dipakai me -

toda reaksi warna Besi(III)Chlorida dalam lingkungan -

H SO pekat*

a#SsS2 2 (4* 6,7,8 * 15) *

Pemeriksaan kadar cholesterol dalam serum dari-*

metoda ini pertama kali dikemukakan oleh Liebermann -



pada tahun 1885 yaitu mereaksikan cholesterol dengan

asam asetat anhidrida dalam suasana H^SO^ pekat,war-

na yang timbul yaitu merah violet sampai biru kohi -

jauan*

Kemudian oleh Burchard reaksi ini disempumakan

dimana cholesterol dilarutkan dalam chloroform*

Perkembangan metoda ini dikembangkan dengan leblh lu-

as serta dimodifikasi sedemikian rupa*

©ari modifikasi metoda Liebermann Burchard banyak -

berdasarkan pada ekstraksi cholesterol dan masih di-

bagi lagi, dalam beberapa macam prosedur-prosedur*

Kemudian berkembang lebih lanjut dan pada * /

akhir-akhir ini populair pemeriksaan secara langsung

pada serum*

Reaksi v/ama Liebermann Burchard kompleks dan-

dipengaruhi* oleh ( 7 ‘) s

l:Konsentrasi p P©ât yang digunakan

2:Pelarut-pelarut yang dipergunakan,

3*VJaktu selama reaksi •

/ Kandungan air dan asam asetat didalam asam-

asetat anhidrida *

5:Temperatur yang diperlukan selama reaksi -

berlangsung «



xo

Untuk mendapatkan nilai absosbsi yang baik para *

penyelidik memberi batasan pada panjang gelombang yang *

di pakai untuk pentuan kadar total Cholesterol dalam se-

rum, diantaranya pada panjang gelombang : 430 mu, 5i|0 mu

610 mu* 630 mu*

b. Metoda Besi ( III ) Ohlorada ( 2*JmI Q U I Z >2Q)

Penentuan kadar Cholesterol dalam serum dari me*

toda ini pertama kali dikemukakan oleh Lipschits pada *

tahuri 1907 dan kemudian pada tahun 1953 metoda Ini baru

di publikasi oleh Zlatkls , Zak, Boyle.

Cara dari slatkio dan kawan-kawan tersebut pemerlk

saan penentuan kadar Cholesterolnya dalam serum secara -

langsung tanpa ekstraksi dan presipitasi dari protein ~

serum*

prinsip reaksinya I

Berdasarkan reaksi warna yang terjadi antara cho-

lesterol yang dl selidiki dengan pereaksi Besi -*

( III ) Chloride dalam suasana H SO pekat» dlma~

na warna ungu yang timbul absorbsinya di baca pada

alat spektofotometer pada panjang gelombang t *■

560 mu*

Kemudian cara tersebut dimodifikasi dan dlkembang

kan lebih lanjut oleh para penyelidik yaitu :f



XX

X* Diekstaksi dengan pelarut organik :

Pelarut organiknya i metanol

etanol*

Pelarut organik campuran t

etanol - aseton*

etanol - eter*

etanol - ethyl asetat dan -

lain-‘lain*

2* Dilokuken cara pemeriksaan secara tidak langsung-

penentuen kadar cholesterol dalam seruni yaitu di-

lakukan presipitasi protein seruni dengan asara ase

tat.atau larutan Besi ( III ) Chlorida dalam asam

asetat,*

Miselnya : cara dari Henly*

cara dari 2ak*B*

3* Dengan melalui ion exchange resin kemudian dieks*

traksi-dengan polarut organik campuran khloroform

dan metanol*



tu METODA KHKTA■ w w w w m i w i B i m » ’

• fkhanjsenelitian $

Sobagai bahon penolitian uatuk mengetahui -

apakah notoda Llebomann Burchard dan motoda Beci *

(lll)Chlorida aceuracyCkotopatannya) baik/tidak isa*>

ka dtipak&i norm kontrol «

Selanjutnya aobasai bafcan ponclition pcne -

srlkaaan kadar total cbolootorol daXannooruH paclen*

(pondorlta) dongan me&nfHaaeing notoda toroobufc a-

daloh Gojap©l*sanpel darl pcnderita-ponderita yang •

ceaorlkoakan darahnya dllabaratoriua Patologi Eli -

nils R.S*Dr.Sootono Surabaya untuk ditentukan kadar-

cfcoleoterolnya •

Pengambilan darah dilakukan oloh para nodio labors-

torlura torcobut pada pagl hari dlaona pondcrlta da-

les* keadaan ptiasa 10-12 $ m ecbDlucinya tidak aakan.

Alat yang diporgunokan adalah dicpooablo oyringo *

buatan bopong *

Sotelah penganbilan colocai , darnh did!arakan pada «

tmporatur kanar solanc 1-2 jan sehingga ©orumnya <*■

ncnltjah *



Apabila keadaannya pemisahan serum kurang baik maka

dipusingkan dahulu selama kurang lebih 5 menit pa -9

da kecepatan 300° rpm setelah serumnya diambil.

Untuk mendapatkan hasil precision(ketelitian)

yang baik maka memilih serum-serum yang mengandung-

kadar cholesterol dengan variasi yang bermacam

macam.

2:Pemeriksaan_kadar a

Pemeriksaan terhadap serum kontrol yang tersedia -

dengan masing-masing metoda dilakukan 3X pemerlk -

saan*

Sedangkan untuk pemeriksaan terhadap serum pasien -

(penderita) dengan masing-masing metoda dilakukan -

tiap sampel serum pasien 2X pemeriksaan,serum pasi-

en yang diperiksa 30 sampel*



3 «a. mem erd-fesa aril Kaaar total cholesterol dal am serum

dengan metoda Liebermann Burchard ( & )*

Prinsip sDengan metoda ini adalah berdasarkan reaksi warna

yang terjadi antara cholesterol yang diselidiki dengan -

pereaksi-pereaksinya dimana warna coklat hljau yang timbul

absorbsinya dibaca pada alafc spektrofotometer.

Metoda ini pemeriksaannya secara langsung artinya

bahwa penentuan kadar total cholesterol dilakukan tenpa-

ekstraksi atau presipitasi dari protein serum*

3* b* Alat yang dipergunakan*

Coleman apsktrofotometer, Junior spektofotometer-

model 6/35* ?

Mikro pipet, pipet volume, buret, tabung reaksi, water -

bath*

3* c* Pembuatan reagenala dengan mempergunakan reagen -r

kit Cholesterol Iferckoteat n*

Larutan reagensia cholesterol t

6*33 mraole/L Asam Asetat anhidrida di dalam Asam-

Asetat glasial*

Larutan standard cholesterol : 300 mg/100 ml*

Dibuat dari 5

Cholesterol 300 mg dilarutkan dalam Ethyl Acetat*



50 til fica clhciai cfccolut 19 cijfcc iGicj caoertm

Ccac-n eeriest 11 cl Ccn ctbyl ccctaft cxr cl -

1C3 cl *

3 * a » S ^ ^ j U O ^ r ; r i U ^ *

C£EDJZ3$S^ *

E c ^ i G 3 j ^ m i 2 3 f e a *

Ccrun CScltcica Ccnc^ cclcpattia 1 fcrÂra 'lipid . CC3fcr0i*> yeas tcrccaici Ccacâ 5*0 cl ccaaUCcstS» Icta ccqâp cc~ ~ cX fccsocra tcc^crct^? trôr-

ccloa JO cc=ats*fcc=3£lca ccrtn tested tAco catah

etpcrlhca fccirr cioXcctcrolcyn.

f c & t g s & U K a a ^ a s a a f e a 1Pipet» Coc cilao iApct 0#02 cl oasr) totrol c.:ca! x3Cdcn tv.Lu^c rc±~3. tcrtata^#tt^:i^!±r3 l^cstca rccc"« d o c—olcctcrol cctscnjci 1,0 ol •

CoCdcb 50 ccnlt totdSSca lcrct dcdca tctac 0,£D *■

cl 0^^pclc.t*lx=s£lC3 ncratio « 1 :1 0 cr.tc? tcth rcic* tcr^crr.fcr? tr^cr cdcsa 9 ccaifc £ca I—cc*i c r;cS> t r a -

ces#

a.c±ca K i c a 15 ncolfc IrnadScn ftier. n&lci cfc=a?fci -

nyo prjfla clct cc^troffotcdcCer Cc-Z- c=len »tciso CIO esi*

r i p e * C c a c ^ a c i l a e o d o e i 0 »C2 c l l a r a t c s c t c z i r r d c t o -

lcotc?oi c^caKra fleln fccfcaa tci'5atc3*6c:txj^n la -

niters rcncc=do ctolc~tcrol ccfcjiyJj lf0 ol •



Setelah 30 menit tambahkan lewat dinding tabung 0,20 ml-

H SO pekat, kemudian masulrkan dalam water bath pada tem -

peratur kamar selama 5 menit dan kocok sempal homogen*

fl&amkan selama 15 aje»£t kemudian jbaca'.'hilai /abcorbsinya-

pada alat spektrofotometer dengan panjang golombang

610 mu# i

J&SSgfeSL*

Pipet dengan mikro pipet 0,02 ml aqu&dest masukkan dalam

dalam tabung reaksi tertutup,tambahkan larutan reagensia

cholester&l sebanyak 1,0 ml •

Setelah 30 menit tambahkan lewat dinding tabung 0,20 ml •*

H-pSO pekat-kemudian masukkan dalam water bath pada tempe-

ratur kamar selama 5 menit dan kocok sanpai homogen *1

Diamkan selama 15 menit kemudian baca nilai absorbsinya **

pada alat apektrofotometer dengan panjang gelombang

610 mu *

3* e • Prosedur'pemeriksaan kadar total cholesterol dalam

serum snmpel i

Cara pelaksanaannya pemeriksaan kadar total cholesterol *f

dalam serum sompel pasien oesual dengan cara no#3* d* -

diatas*

4* a «Pemeriksaan kadar total'cholesterol dalam serum de-a w — M i i m u m t m » » » # « « m m w M w n n w i i w i i i i f c u i i m i i i « ■ » « ■ » « — w w t w B a -

ng an metoda Besi(IlI)Chlorida ( 19 ) «O ® • • • W t ^ W



17

Dengan metode ini berdasarkan reaksi warna yang -

terjadi antara cholesterol yang diselidiki dengan pereak

sl-pereaksinya dimana warna ungu yang timbul absorbsinya

dibaca pada alat spektrofotometer*

Metoda ini pemeriksaannya secara tidak langsung -

artinya bahwa penentuan kadar total cholesterol dengan -

dilakukan ekstraksi atau presipitasi dari protein serum#

k* b* Alat yang dipergunakan :

Coleman spektrofotometer* junior spektrofotometer

model 6/35$ beker gelas, pengaduk» corong, tabung reaksi»

gelas ukur, alat pemusing# labuukur#

4# e« Pembuatan reaaensla t

Pembuatan larutan standard cholesterol t 0

Tibang telifci ceholesterol murni 100 mg, 250 mg,-

300 mg, 3 0 mg, 400 mg* masing-masing Istrutksn dengan -

asam asetat gloeial secukupnya kampai larut» pindahkan -

ke dalam labu ukur 100 ml kemudian tambahkan gsam asetat

glasial sampai garis tanda.

Dari larutan-larutan standard tersebut buat larut

an standard dengan konsentrasl 50 mg per 100 ml* 200 mg*

per 100 ml» 150 mg per 100 ml dengan penambahan asam ase

tat glaaial sampai 100 ml*



18

Pembuatan pemakaian larutan standard Chloleaterol t

Pipet 10.0 ml masing-masing larutan standard eho- lesterol tersebut dlatas tambahkan masing-masing 8,5 ml*

larutan Besi ( 111 ) Chlorida dan encorkan dengan asam *

asetat glasial sampai 100 ml*

Pembuatan larutan Beal ( 111 ) Chlorida t

Timbang dengan tellti 0,8i|0 g Ferri Chlorida 6lL>0

( Pe Cl^ 6 HÔ ), pindahkan kedalam labu ukur 100 ml de~

ngan pertolongan asam asetat glasial secukupnya kemuclan

ditambahkan Asam Asetat glasial sampai garis tanda*

Pembuatan larutan presipitat Besi ( III ) Chlorida *

Larutan Besi ( 111 ) Chlorida di encerkan dengan-

asam asetat glasial dengan perbandingan 1 t 10*

Pembuatan larutan blangko Besi ( III ) Chlorida

8,5 ml larutan Besi ( 111 ) Chlorida di encerkan*

dengan asam esetat glasial sampai 100 ml*

Pembuatan larutan UaCl 0*9 % ( B/v ) i

Timbang 0,900 g NaCl, pindahkan ke dalam labu ukur

100 ml dengan pertolongan aquadest secukupnya kemudian *

di tambah aquadest sampai tanda*

Hg30^ pekat*

k» d* Pembuatan kurva absorbal terhadap pan.jang gelom -

bang*

Pipet Ojl ml larutan standard 100 mg cholesterol-



19

per 100 ml larutan masukkan dalam rabung reaksi tertutup

tambahkan larutan presipitat Besi ( III ) Chlorida sam *

pai 4 ml kemudian pusingkan selama 2*3 menit*

Pindahkan filtratnya sebanyak 3 ml ke tabung reaksi lain

nya kemudian tambahkan 2 ml I^SO^ pekat kocok sampai -

homogen*

Sebagai blangko di gunakan larutan blangko Besi -

( XXX ) Chlorida dan dikerjakan sesuai cara tersebut di*

atas* Kemudian baca nilai absorbsinya pada panjang gelom

bang $00 mu, 510 mu* 520 mu, 530 mu, 540 mu# 55° mu, 560

mu, 5?0 mu, 580 mu, 590 mu, 600 mu, 610 mu*

Dengan cara yang sama seperti diatas ditentukan -

juga nilai absorbsi pada konsentrasi 200 mg Gholesterol-

per 100 ml larutan dan 300 mg cholesterol per 100 ml la»

rutan*

Buat grafik dengan nilai absorbsl sebagai ordinat dan -

panjang gelombang sebagai absis*

4* ©* Pembuatan kurva baku i

Pipet 0*1 ml pemakaian larutan standard 50 mg «

aholeaterol per 100 ml larutan, masukkan dalam rabung re

aksi tertutup* Tambahkan larutan presipitat Besi ( XXX )

Chlorida sampai 4 ml, kemudian1 tambahkan 0,1 ml lar&tan

ftaCl 0,9# b/v kocok sampai homogen*



20

P$j&££ca JLcraCo tcrcetat cct ry; h 5 cl to

pccfccA 3UAo*bc=a£ka tcofcJs ca H cl C-p^pc^t £ 3 fcoecS CC3 i fcSDSCra *cctrc l cicsi: 3 Icratca tlcac^D Dx±(2H)C2lo»rlCa C'3 C2fcr?Jc!xa cccad Cca cpz c>ru fccrcctat CJcfccs# Cbsa rJLlrA ctcartclnyo pcdn dr.t or^Scofotc^ctcff Ccacâ

Dcnjoa cciC3fcc2Q 5S3 ca *

Ecac a ccsa ycaa cica t cr1 nilci ofcscsfcdcya -fcc&ra Icratca c^Cira cbolcctcr.l Cc^c.n fcrrx-t,.ci -

ICCâ ei^lcctcrcl do? IC3 cl icsafecni Lr=sc2fc£cc& X£^> £ 3 ^ i J S ^ j P ^ l S J ^ l £ £ = a c ^ o l c c t c r o l p c f f 1 C D d l o

jrotcn .Ci t cziSiii Cetera cilcl ctecrfci cotxî ccdcuft toa * Ixaccatrccl cefc^r± ctdo ■

k* i •,53sttZ2tJzz2&^5LizfaUjafc^jr^sscssj^&a

csaajtafegft*

f i c s a c ^ w ^ n J r r A s a *

Ccnn cadk^xa Coen cclcrtiticn 1 L&cld Csatcolycao tcrccdc Ccacra 3*0 cl c acbidestilcta (xrc ff ca « pci fcsssc i pc£a tcr crr-ta? ccloa 53 tX3it»tcaa -files cc=tn tr trci c&cy cafc±s <a. c;fes o fcrlccto * roJwc.

Pi ot 0#1 cl ccixi) t33tool trc3££23 C.lr > tc.t-.oj -

rcctd tcrtata^f c:csl±r» C 2I 0 fcafcrc rcc£c$ Gcrcctaft * Icratcn rrcc3c3.fc.-6 CxMXXX) CilcriCa c r ci. <> cl* to -



cciicn Lcct-i txnccsa cclor, £»

5 cc=at*

Pir^^rs ieratcc^ra tkscctst cctr-ry.?? S rl tetc.t=2c rccirA ?riQ#rxt^ClLa tcsfcl&ca C rl D;jC^rx! :t Ccs*lr;cc!j ccr ciL

Cctrc tSc Js cac=id 3 lrrati.3 £1 *3 CccatrC2)OlcrOto Ccs CSbcs-Scbca cccri cc^c=3 ccô fccscctafc

CScCco *

lisa did. ctc^teSoya pc£a clct cjc^trofcicrxtc? «

Cc2C2* I?caica3 cdot'.n3 553 cs •

Gc£=s t o tc l cidcctcrol CcltD ccr=3 tested fccrcctat

0:~t aiperaixn Ccnc-3 pctenjti fcsra bcis Cescct^fc

Cictes*

<>» -

C^£3J33E3J13SL'

Cera ixldrx3ix2ara pc=cratr^c3 fcicr totci eSdo

tcsd Crlo ccrtn crz d pcdcs cccucl Ccac > c~rc-G0» 4 • £• dctcs»



fi®»G3Q urafccrt

£:ewMtcotn

m 110 *• 7.C& n&U

e ( 5 a f i CO ) .

c

tacp toia

<y,3Aiiafc paOc. tatKt X

ffiaiSL I

P£23iSBlIia® BfiSflU CC®/® ©QMSEJm

* BBSSli DAE*ijjiaatLMMHWia^nai &

* #

G



23

ias-c^dv*

Ccac J txr cad o rcccca bit rC£clcctcrcl*

rtcrc&ctcct0

Ccrrj cc^rci r^C Circr22m t £3 erred, C-a *tic? <x~jci d^crllxn t C S •Cc op CoSlJI ctdcctcrcl Cdtcn ccraa rc~cl a

a 550 cc/j.c3 cx £.te?9teS ctcnC sfl lerotea

C:. aicyo C-5L,fc CUlhnt pu±3 Ccbd ft cctxxr.i,-

fccrSIrjfc •

caci n

a**j& d: J3~:c;“ cr£*D cr,zr.s gx^3 ly* t n err: c ^ n . era r.rr::r. ttrr ~:.rn c m ' . D»o ooo»-oojj a- jo )dc *• . ot . >e', . ' ooo

Ccrjti, rczcratccm Fo^~rn rm:xs rsrcicci2

___...— j ^ i ___. s f c a ___ .il.,.:.gL

1 152 « 3 s , £3

/3 sac jut 3 , C3

3 CGI C23 t> 15



eassisga;

Sampel Pemeriksaan I mg $

Pemeriksaan II Big #

Deviasi= a

Deviasi^

k 16l{. 159 5 25

5 15k 157 3 9

6 228 226 2 k

7 216 211 5 25

8 i so 151* 1* 16

9 301 305 k 16

10 270 271 1 1

11 235 230 5 25

12 250 25i* k 16

13 120 121* k 16

Ik 322 326 k 16

15 178 181 3 1$

16 219 222 A 9

17 165 169 4 16

18 33*4- 339 5 25

19 131». 137 3 9

20 292 Z9k 2 k

21 22? 22k 3 9

22 181 185 k 16

23 168 162 6 36

2b 301 305 k 16



; mm m m Mmmmmmmmmmm »*

Pesesihccxn. fcsesSJssssn dcvXuA covlcd £Iteefi) »<«=#> o d B' a2

23 ITS 173i S 9i m « S

<«j i 16

27 a o ; 206 1 « ! M£3 u o m i. 1 1

i 102 ' m h ; ft30 £46 9 . £5

m b 115

a o 3»?6

r»2* 475

0 D o

XI.

32

® 2,01

C B » £,01 BtP$

Pc»be4csn tcvbcoar e , 6

Pcrfco&nen *ate.*jrntce 3#76 o£C«

£&£:Skg££S&J&&

a * G S 3 2 ^ J t & S £ 3 .

m- *

Kcdlnya fiilihat pedo tcfccCt III cobsc-'i*’



26

TABEL III

HASIL PENGAK4TAN NILAI ABSORBSI TERHADAP PANJAWG

GELOMBAJTG DARI METODA BESl { III ) CHLGHIDA

PanjangGelombang

Nilai Absorbs!100 mg/100 ml 200 mg/100 ml c c 3 H O H

500 0,195 0,l).60 o#5io

510 0,215 0,1*68 0,665

520 0,230 0, 75, 0*705

530 0,235 0,1*80 0,715

5^0 0,245 0,11.97 0,7 5

550 0,252 0,512 0,762

560 0,2I).0 0,1*92 0,722

570 0,22:5 0,1*57 0,690

580 0,195 0,392 0,614.0

590 0,165 0,327 0,580

600 0,lij-0 0,267 0,510

610 0,120 0J230 Q,i|.60

Bila data-data pada tabel III di gainbarkan sebagai

kurva absorbs! dengan nilai absorbsi aobagai ordinat dan

panjang geloxnbang sebagai abals, akan terlihat seperti *

gambar 1•



27

Pada gambar I tersebut akan temp.ak bahwa hasil -

penguatan nilai absorbs! terhadap panjang gelombang me-

nurut metoda Besi ( III } Chlorida mempunyai panjang ge-

lombang t 550 aw*

b* Pembuatan kurva baku.

Kurva baku dibuat dengan pembacaac nilai absorbs!

pada bermacam-macam konsentrasi*

Pembacaan nilai absorbs! di lakukan pada panjang gelom -

bang maksimum 550 mu*

Hasil-hasil pengamatan pembacaan nilai absorbs! dengan *

bermacam-macam konsentrasi dapat dilihat pada tabel IV -

sebagai berikut *



Kurva &lloi abgorbci* terhadap punjcai*; k’clcuubnai,; ■ Cholesterol, konoontrao^ 100 mg/100- ml| 200 tn&/ 100 ui; 300 mg/ 100 ml ‘ :



29

T ABEL IV

HASIL PENGAMATAN NILAI ABSORBSI TBRHABAF KONSENTRASI

MEBtJROT METODA BESI ( III ) CHLORIDA

fSBf

Konsentrasi per 100 ml

Nilai Abs6rbsiI II III Rata-rata

50 mg 0,120 0,124 0*122 0*122

100 mg 0*248 0,252 0,253 0,251

150 mg0*380 0*376 0*384 0,380

200 mg 0,512 0,510 0,508 0,510

250 mg 0*640 0,635 0,645 0*640

300 mg0#?62 0,765 0,768 0,765

350 mg 0*915 0*916 0,917 0*916

400 mg0,990 0,985 0,995 0,990

Bila data-data tabel IV di gambarkaa sebagai kurva

absosbsi terhadap konsentrasi» dengan nilai absorbs! se-

bagai ordinat dan konsentrasi sebagai absls dapat dilihat

pada gambar II*

Pada gambar II akan terlihat bahwa Cholesterol •

dalam a sara asetat glaslal memenuh! Eukura Beer Lambert -

pada konsentrasi 50 mg/lOO ml larutan sampai 350 mg/100 ml

larutan# dan pada konsentrasi 400 mg/ 100 ml larutan mu-



30

Ml terjadi panyiisponean <3ari Hulcura Beer-frimb©rt*

G. Pfcrhitunasm odanvo korelael llnialr { pearnon ) ~

mt&m tedar dengan absorbo! ♦Untufc mnkeua ini perlu 61 buat tobol «ebecni berikut ( Xi

hat Mlam&ii berikut }«TABKL V

& m m m m n n aw mmei am lOUEMsmssi

XOTGM ABSGRBSl PAHA SEBIffa0FC»<J8t££a£

r ~ r ~(ottffflgltei)

E»S

P T ' 0'(absorbs!)

X2 *2 XX

so 0,152 2500 0,0148 6,1

100 0*251 10000 0,0630 25,1

150 0*380 22500 0,U44 57

200 0*510 40000 0,2601 log

250 0,640 68f00 0,4096 160

300 0*765 90000 0,5652 289*5

350 0*916 122500 0,8390 380,6

KX*140C m«$§m B&^SSOOOO B¥2c=2,3161 «*«900,3

HomiG yang dipa&ei edelab aebag&i berifcut tn/ajf -

r ® ----- -I—---:--- -----I/ n % 2 - «&)2i/ & «y? • (Ey)s

r * Koefflaler. korolasi.

x ** JCoBSQTitroGi dftlom



i AJIUM ABSOR&St

31

M *

o*pqo

o,eop

o#?qo

OjfiOO

0 ,5 0 0

0,400

0*30?

0,^00

0,100

0 s p l c j 1 5 3 2 5 0 5 0 0 5 5 0 400

I&cucatruji rux/100 nl ■ - tobarilS

Iftinru ulld ahacu’bKt terfca&Jp koiutril tiurl Cholesterol* paOa jpanjLîj colcubuna * 550 era*



32

X = absorbs!*

n = banyeJmya sampel, or = koeffisien determinasi*

Maka didapat harga

r * 0*9999»

jadl harga koeffisien korelasl » 1

Interpretesi dari perhitungan korolasi dimana di dapat -

kan harga r = 1 tersebut perlu di perhatikan raasalah ke~

rnaknaannya apakah korelasl tersebut di dapat karena faktor

kebetulan ( tidak bermakna ) ataukah bermakna*

Penyelesaian tersebut dapat dilihat melalui pera -

bacaan pada tabel*

Dengan melihat tabel apabila harga r > r dalam tabel sesu

ai dengan degrees o f freedom yang bersangkutan maka harga

r tersebut bermakna* sebaliknya r < dari pada r dalam-

tabel maka harga r tersebut tak bermakna*

Menurut tabel r dengan 7 pengamatan t

« degree of freedom - n - 2

*= S maka r tabel « 0,75*

Jadi harga r tersebut bermakna oleh karena r > r tabel-

maka dapat disimpulkan bahwa antara kedua varlabel yaitu

konsentrasi dengan absorbsinya mempunyai korelasi linialr

secara bermakna*

Koeffisien determinasi r = 1 berarti bahwa 100 % dari -

fiata-data y6ng ada mempunyai hubungan linier.



33

2* Persamaan g a rIs regress! llniair.

Karena hal-hal tersebut diatas untuk mendapatkan*

tltik-titik yang terletak pada garis lurus maka digunakan

persamaan garis regress! dimulai dari konsentrasi 50 mg/

10© ml larutan sampai 350 mg/100 ml larutan*

Persamaan garis regresl sebagai berikut S

y *S ax 4 b

a = koeffisien regresfci yang menunjukkan arah -

peningkatan atau penurunan harga y persatu**

an x*

a « + maka harga y meningkat pada kenalkkan x

y absorbs! x « konsentrasi (mg)E ( x - 5r /(y - f \

a «= ...i'"»..— ' i ■■■ ..E ( x - x ) &

Untuk maksud diatas perlu dibuat tabel sebagai berikut :

TABEL V I

DATA UNTUK MENTOStm PERSAKAAK GARIS REC-RESSI

PADA SPEKTH 0P0T0METRI

X y x-X

rrssssssttgasasiscg

7~f (x-x)(y-y)2

{ X * * )

50 0,122 - 150 - 0,39 58*5 22500

100 0,251 - 100 - 0,26126,1 10000

150 0,380 * 50 - 0,132 6,6 2500



34

a & x>& (o-S) <H?) (n *->*

COO 0*530 0 -0»UJG 0 0cw 0,C^0 «3o,m 0»t> CS >SZJ 0,705 103 0*LS3 £5*3 10220

5^ 0#UC.1£)60*6 i:SJ0

0 o c^> t:(c-S>(p$) «&SS*9V L(&S)a C

ncz&A i o cOgCacsa

& c£#C&2

l'crcrrxz.3 c~rio rc^cxl tcrcctat Cc~c.t dtuiia jt=0»C:Cj£«0»012

Pcia ccsc:~4x3 cxlo rccpccdl tcrecfcifc &«“

vj Ixia Cocro nJAt A ctcsftei ccfccA crdtx.S d.2 t,^cc=tr.rl-

cc^cl ctdLo Crn C"X.t CHitct pcia CX3to? X2S#

c* -

ISS*

^crc: IrstxrslcffD cc^tggsn^ja CcaCcSX11

Ccrcu rctc-r^Co c!x3.cctcrol (S) o 1£3 cdJ#

L-2C0 CC^CEitCLUl O no * ICO C£J

o (0 6 i. CU )*

Ccics? tci 1 c~-2cc6crcl era Crrst GLtr.t 'j Cco ; v> rclibct tar*

va fcJrj Cira gcrcrrri; c ^ c rcc-'cc L <rd;;S »jr— 1*1 *

Dilakukan tiga kali ?3X). pct;cr2£ccO C.n fe'CoSnyj C jzt d-

lifcift t:;tea as cctzj.1 t-^*-jtii



t e a n t

UfiSIt PEHtlSOBGAW KADAR M CHOLESTEROL m'M SEHJM

. K0H5R0I. DABI fSETQDA 8ESZ<I1I) CHLOHm

Scapol 1 i hosilnjra 9 .IJjS isg*

Saspd a I hooUaya e Ik? og$

Sarapel 3 s � hnoiluya a 143 mg%

liaoil rafcn-rata » 1^6 r e%

«# g ^ s ^ a a s j s ^ - j o ^ . s & o l s g t o r o i ^ ^ ^ ^ •

S S 9 A *

Kadar total cholesterol dapat dlttitung dcngen noXlhct*

su m &sk« dari pssssasaan gorle ragroeal aiatan pads -

geaafear I.IS*.Tinp ccsspol Sllakuktm : Z X pejsorikcaan *Saftpel yoBg diporikea g 30 fsorapol *

Haeilnya .dapat. dillftot ®ada tabel s VOX scbagol bozl-



36

Kui'Vi.. luUi U.ix'i iwaû.n ya-'ic ro reaal

X a* Ut Cru£{*^X— 0«0X^»



37

TABEL mi

HASIL PBRHIfUHGAN SADAH fOtfAL CHOLESTEROL DALAM SERUM

DAH1 METODA BBSI (III ) CHLORIDA.

tewpet

9 �» <�» « » M -M 4» «

Pemeriksaan 1 Pemeriksaan II® rag %

Deviasi Deviasi2=a5

1 127 130 3 9

2 307 315 6 6ll

3 205 19? a 6U

it 157 159 2f c

S 157 1M 10 100

6 217 22k ? 1*9

7 206 210 k 16

a lit? 150 3 9

9 297 291*. 3 9

10 270 26k 6 36

11 219 22k 5 25

12 2i*.0 2k5 5 25

13 121 115 6 36

14 316 312 6 36

IS 163 1?0 ? *4-9

16 212 209 5 25

17 1 161 169 3 6k

18 331 325 it 16



Sampel

«%

Pemeriksaan I *= mg %

Pemeriksaan IX = mg %

Deviasi = d

Deviasi2e

19 129 124 5 25

20 288 291 7 49

21 217 222 5 25

22 180 182 2 4

23 155 160 5 25

24 294 300 6 36

25 167 174 7 49

26 117 119 2 4

27 210 207 3 9

28 144 147 3 9

29 174 179 5 25

30 233

tsasasssssiascassastsss :

2^0

ssscssb

8 64

° = V2i E d = Uj.6 E d2<= 844

d = 4*86* 3*75

Hasilnya sebagai berikut :

3 D = 3,75

Perbedaan rata*rata « 4#86 mg %»

Perbedaan terbefea» * X0 mg %*



Analisa ha&il*haoil yang didapat dari dua motoda «Ilf W i n w u m < ■ i ^ g T T i i i i ) w f c ^ p i — m s m W W — i d » M w y n g » » » » » m b i > > b i » m u m M t i H W

1* Basil pengematan darl dua motoda torhadap go *

rip kontrol *In 3* M»«* wMm o»*» an •» w

Sorum kontrol torccbut menpunyai liarga rata -

rata cholesterol (5) & 138 rag##

Rango pcmorikeaan » 110*166 rag% <g * 2SD) *

§ ^ i ^ 9 5 s ^ M ^ ! A ^ 5 s £ e . t e - i ^ 2 & 2 £ 5 s s s . § y > s s 1 i a ! : 3“ I P • • « V Z I P n v l V l T ^ a V U f f t 4V B V V V V C 9B C V • ■ * • • • ■ V ^ b W ■ ■ f c T V *

Berdasarkan perhitungan pada tabol I t

har&a r&ta«rafca cholesterol (x) a 14 4 mg& «

I l ^ . B E S ® g t s M S £ l . g g S 2 ^Berdasarkan perliitungan pate tctbol \SX*

harga rata-rafca choloefcerol (3) « 1 6 isg% *

Harga rata-rata poEiorlkoaan macing *►

making motoda tersebut mondokati harga rata*-

rata dari oarum kontroldan Juga mGmenii&i m m

#£C peincrikaaan * maka kodua motoda torcebut-

accuraey<kcfcepafcannya) baik .



pegSsltt»3&* s fla tefcct if i

,ica?cD: etsEfera sotA&A p0&= %6i tySJ *

EspfioeaipJtoi» pcrtiitttncciti pedn tabs! 'Wilt

ilczcT' ctcMora m&Lsei «SB= s*?5 nc «'Stefio ata Stc&fiord Itevicei (G o }r«r fesEl ncfccfia -

UflbaRMsES lofeili fcccil CzrX cctoSa JScclttll)

C62.cr5.c2i'. ceto r.otodo Mfctoiosim Dardi'-.i’t’ Ixtcliti»

cssya iotfflb. fcoAU flei&ntvga cotOfla JtoGl{ni)C2xie?2,«

£a a '

. 2 . b » i i ^ s j i » j s s i s

044 £ sdtttd: dindseM iiftttth eeUlirjt opzfcaii. eflo/tificit pcr'oe-fccn yrac tacaJase cnteisa cotofia I4.ebc-ir.rna »

IMWsmM d-c cctosc. Ecci C 111) (ftlci'iCr. tercctat • O&tah cefeo&a tersebut <4®c*ycHBt&c» :peat 3a#e$a tcbcl ‘'t" aesfeeiteci «



Jadi dengan maksud mempergunakan analisa Paired *

n t " teat tersebut hasil-hasil dari metoda Liebermann -■

Burchard dan metoda Besi ( III ) Chlorida apakah ada per

bedaan yang bermakna/tidak bermakna*

Untuk maksud tersebut dfepat dilihat pada tabel -

XX sebagai berikut :

TABEL XX

HASIL RATA-RATA TIAP SAMPEIi SERUM DARI DUA METODA

C£SS£SS 7=22=

Harga rata- rata metoda

L#B.

Harga rata* rate metoda

Deviasi = d

Deviasi2 = d2

132,s 128,5 4 16

318,5 311 7,5 56,25

203 201 2 4

161,5 158,5 3 9

155*5 152 3,5 12,35

227 220,5 6,5 42.55

213,5 208 4*5 20,25

152 148,5 3,5 12,25

303 295,5 4.5 56,25

270,5 267 3*5 12,25

232,5 221,5 11 121

252 242,5 9,5 90,25



Harga rata* rata raetoda

L.B*

=2=ess=s:=5:s=e=e52£=ss=:

Harga rata- rata-xnefcoda PeCX*3

Deviasi= a.

Deviasi=

122 118 k 16

321». 315 9 81

179*5 166,5 13 169

220,5 211,5 9 81

336,5 328 8,5 72,25

135,5 126,5 9 81

293 289,5 ' 3,5 12,25

225,5 219,5 6 36

183 181 2 k

165 157,5 7,5 56,25

303 297 6 36

171).» 5 170,5 16

123 116 5 25

208 208,5 0,5 0,25 •

1M.5 345,5 2 1*

183 176,5 6,5 42,25

21*3.5' 236 7,5 56,25

167 165 2 If



Hasil-hasil tabel IX t

Harga rata-rata metoda Liebermann Burchard s 211,85mg$«

Harga rata-rata metoda Besi (XXX) Chlorida : 206,15

Deviasi rata*rata « d S 5# 7 *ng$.

E d2 il2liif,S rag$*

n t 30

Ruamm yan& dipergunakan :

' . J L - V h S 2 . = E * 2p2P * f

- n d2 n * 1

Keterangan s

d s beda rata-rata

n ; jumlah pasangan

S t Pooled variance variabel d.X r

Po,05 ; level of signifigant “ kemaknaan alpha*

Hasllnva sebagal berikut *

s P * 9» 30

Sp = 3.04t _ J U U j o 6

3*04 ' 10*26«Menurut tabel t distribusi t

degree of freedom « n - 1 » 29

uji 2 pihak Po»05 tabel = 2*0 5

Hasil n t n parhitungan } n t n Po,05 tabel*



Kesimpulannya�tm ! ■ » i i f ! ! ■ ♦ > ^ — — « w — i f a W M »

Perbedaan ter jadi secara bermakna pada ■*

Harga rata-rata metoda Liebermann Burchard

a 211*85 mg#»

Harga rata-rata metoda Besi(III)Chlorida

= 206»15 /

kk



Date post:	28-Oct-2020
Category:	Documents
Upload:	others
View:	0 times
Download:	0 times

ADLN - Airlangga Digital Library Networkrepository.unair.ac.id/9845/13/FULLTEXT-...

Documents