CULTIVO IN VITRO DEL TEJIDO VEGETAL DEL EMBRION DEL FRIJOL

PRESENTADO POR:

Jonathan F. Ochoa Bedoya.

Jeison A. Zúñiga Pineda.

Brandon Zúñiga Pineda.

Carlos Ortegón Vergel.

Jorge Castañeda.

PRESENTADO A:

Fabio Morales.

Andrés Sosa.

Dianit Lemus.

Edison Correa.

CURSO:

11-01.

FECHA:

09-11-2011.

INSTITUCION EDUCATIVA DISTRITAL LA AURORA.

PENSAMIENTO EMPRENDEDOR HACIA LA GESTION SOCIAL.

CULTIVO IN VITRO DEL TEJIDO VEGETAL DEL EMBRION DEL FRIJOL

El frijol común es uno de los cultivos de mayor importancia económica y alimenticia de los seres humanos. Es la principal fuente de proteína, hierro y fibra en la dieta de las personas, la producción del frijol se enfrenta a varias limitaciones, tales como enfermedades causadas por hongos, bacterias y virus, ataque de insectos, deficiencias nutricionales y la pérdida de tolerancia a sequías. Para tratar de solucionar estos problemas, es indispensable buscar alternativas que permitan el mejoramiento de las variedades existentes por técnicas biotecnológicas. Para tales efectos, es importante desarrollar un sistema eficiente de cultivo in vitro que permita la regeneración de plantas del embrión del frijol, para esto tenemos en cuenta a los diversos métodos de cultivo in vitro. Muy pocos grupos en el mundo han logrado desarrollar procedimientos exitosos de regeneración de plantas para este cultivo. Así mismo, a pesar del gran número de investigaciones sobre la regeneración de plantas in vitro, con métodos de la embriogénesis u organogénesis, en numerosas especies vegetales, además, este estudio busca optimizar el proceso de organogénesis y regeneración de plantas del frijol. Esa información es muy importante, pues se desconoce la respuesta de las variedades del frijol común que se cultivan, a la aplicación de técnicas de cultivo de tejidos. Estas técnicas pueden ser de gran utilidad para complementar programas de mejoramiento y de conocimiento.

PREGUNTA-PROBLEMA

Nuestra pregunta problema es:

¿Cómo conocer las variedades del cultivo in vitro de tejido vegetal del embrión del frijol y como incrementar con una forma factible la micro propagación de las plantas del frijol para así determinar su estructura?

RESUMEN

El frijol es uno de los granos de mayor importancia en la dieta alimenticia de la población en general, especialmente la de escasos recursos económicos, y nos brinda unas proteínas muy importantes para nuestro crecimiento. El presente proyecto se realizó dentro de un programa de investigaciones y de realizaciones de cultivos. Se tuvo como objeto de estudio la variabilidad genética del frijol, con el fin de seleccionar, caracterizar y conservar los genotipos que presenten la capacidad de regenerar plantas in vitro del embrión del frijol. El desarrollo se realizo en tres etapas:

La primera la investigación de todo lo relacionado con los cultivos in vitro.

La segunda fue la realización de diferentes cultivos para tener en cuenta diferentes resultados.

La tercera fue la revisión de los diferentes cultivos para observar cual salió mejor y escoger los dos mejores para poder tomar similitudes y diferencias de los dos cultivos.

En los resultados encontramos que los dos cultivos escogidos fueron muy buenos, que la micro propagación de estos cultivos fueron excelentes y que poco a poco pudimos ir descubriendo muchas formas de regeneración de plantas en un cultivo in vitro.

Pero se hace necesario continuar con los estudios ya que estos procedimientos no están descubiertos en su totalidad y así podríamos optimizar los resultados.

ABSTRACT

Beans are one of the most important grains in the diet of the general population, especially low-income, and give us a very good protein.

This project was conducted within a research program and accomplishments. The aim was to study the genetic variability of bean, to select, characterize and conserve the genotypes showing the ability to regenerate plants in vitro embryo of the bean.

The development was done in three stages:

The first investigation of all matters relating to in vitro cultures.

The second was the realization of different crops to account for different results.

The third was to review the different cultures that came to look better and chose the top two in order to make differences and similarities of them.

The results found that the two selected crops were very good, that the micro propagation of these crops was very good and little by little we can discover many things that do not know about these crops of beans embryo.

But it is necessary to continue studies as these procedures are not discovered all and to optimize the results.

OBJETIVO GENERAL

Nuestro objetivo general es que todos los interesados en implementar las diversas técnicas de un laboratorio de cultivo in vitro de tejido vegetal, lo obtengamos a partir de explantes para la multiplicación de las plantas y observación de su método, encontrando métodos con dichas herramientas para manipular los tejidos del embrión del frijol y así realizar el cultivo propuesto.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

Nuestros objetivos específicos son:

1. Tener conocimiento de los cultivos in vitro de tejidos vegetales del embrión del frijol.

2. Profundizarnos con los factores de los cultivos in vitro de tejidos vegetales del embrión del frijol.

3. Aplicar nuestro conocimiento y aprendizaje dentro de los cultivos in vitro de tejidos vegetales del embrión del frijol.

4. Aplicar la transformación de plantas para así tomar como prueba el cultivo in vitro de tejidos vegetales del embrión del frijol.

HIPOTESIS

El cultivo in vitro de tejido vegetal del embrión del frijol es una alternativa que buscamos que sea viable y eficaz para contribuir con la regeneración y conservación de plantas del frijol, en general de todas las plantas debido a su bajo potencial. Y dar a conocer las diferentes formas de cultivos para observar sus factores.

JUSTIFICACION

De acuerdo a los esfuerzos que llevamos a cabo para establecer este proyecto y sus conservaciones del cultivo in vitro del tejido vegetal del embrión del frijol, no se ha logrado establecer las causas, los problemas o las consecuencias de este, debido a esto nace la necesidad de llevar a cabo estrategias que busquen encontrar de alguna manera la variedad de tejidos y células de la micro propagación de células del embrión del frijol. Son muy pocas las investigaciones  que hemos realizado para encontrar resultados sobre esta micro propagación. Las ventajas que ofrecen las técnicas de cultivo in vitro del tejido vegetal del embrión del frijol contribuyen con un conocimiento de este. Este trabajo lo que busca es establecer las preguntas del cultivo in vitro del tejido vegetal del embrión del frijol  y su germinación con el objetivo de promover la micro propagación masiva de los tejidos, las bacterias y otras variedades de este cultivo.

MARCO TEORICO

El frijol común es uno de los cultivos más viejos del mundo, y el de mayor consumo a nivel mundial, pertenece a la familia de las legumbres, se conocen entre 5 especies de frijol: el frijol común, frijol yearlong, frijol scarlet runner, frijol terapia y el frijol Lima han sido domesticados, el frijol común se encuentra entre las especies más cultivadas en el mundo, siendo la legumbre más importante, el frijol común se consume como grano maduro, grano inmaduro o como vegetal, la alta calidad nutricional de los frijoles en términos de porcentaje de proteína es un importante complemento de los alimentos almidonados, el alto contenido mineral, especialmente hierro y zinc, así como fuente de fibra, ácido fólico, tiamina, magnesio y potasio, son de gran importancia en regiones donde hay una alta prevalencia de deficiencias de micronutrientes, la semilla del frijol contiene entre 20-25% de proteína, Contiene biotina la cual es un factor esencial para una variedad de carboxílicas y descarboxilasas establecidas en diversas vías metabólicas de todos los organismos.

Características del frijol: El frijol es una planta anual, de crecimiento rápido, el sistema radicular es poco profundo, está constituido por una raíz principal y gran número de raíces secundarias con elevado grado de ramificación, el tallo principal es herbáceo, es el eje central de la planta, el cual está formado por una sucesión de nudos y entrenudos; se origina del meristemo apical del embrión de la semilla. Las primeras hojas son simples, las demás hojas son compuestas, trifoliadas y su tamaño cambia según la variedad. La flor presenta una coloración que varía de blanco al color lila, según la variedad, las inflorescencias presentan de 4 a 8 flores por racimo, cuyos pedúnculos nacen en las axilas de las hojas o en las terminales de algunos tallos. El fruto es una

legumbre de color, forma y dimensiones variables, en cuyo interior se disponen 4-6 semillas.

Distribución: El frijol se cultiva en gran diversidad de climas entre los 0 a 3000 m.s.n.m. y sus mayores rendimientos se obtienen en zonas donde la temperatura promedio oscila entre los 15 y 27 °C., temperaturas promedio superiores a 27 °C favorecen el desarrollo vegetativo, pero ocasionan el aborto y desprendimiento de las flores, reduciendo el número de vainas y de semillas por planta.

Origen del frijol: Existe duda sobre cuál nombre debe darse a la especie silvestre cercana, además los fósiles de frijoles, están mal representados en los registros arqueológicos, como resultado de los métodos de recolección, pues los agricultores de regiones como México, arrancan las plantas con crecimiento erecto o arbustivo del suelo cuando maduran y las desgranan en estelas, por lo tanto, el principal recurso de evidencia disponible para el análisis de la distribución y orígenes del frijol, comprende semillas y fragmentos de semillas, las cuales pueden ser carbonizadas por la ausencia del contacto con la humedad.

Cultivo in vitro de tejidos vegetales: Una amplia variedad de técnicas de cultivo de tejidos, manipulación genética y biología molecular han sido desarrolladas en varias especies de plantas, estas técnicas han tenido profunda repercusión en las prácticas agrícolas y en el mejoramiento de la calidad y cantidad de alimentos y plantas cultivables de interés comercial. El cultivo de tejidos consiste esencialmente en aislar una porción de la planta (explante) y obtener así células, tejidos u órganos, que se cultivan en condiciones asépticas, en un medio de cultivo de composición química definida y que se colocan en condiciones ambientales controladas de luz, fotoperíodo, temperatura y humedad, adecuadas a la fisiología de la planta. Se pueden obtener diferentes respuestas dependiendo de la metodología y de los medios de cultivo utilizados. Estos van desde la formación de tejidos organizados (organogénesis) hasta la obtención de embriones somáticos y células embrionarias, el cultivo de tejidos vegetales es una técnica que puede ser aplicada para la obtención y propagación de plantas libres de patógenos; en estudios de genética, ingeniería genética, fisiología, biología molecular,

fitopatología, en la bioconversión y producción de compuestos útiles; en el incremento de la variabilidad genética de los cultivos; en la conservación e intercambio de germoplasma; en la obtención de mutantes y plantas haploides, el cultivo in vitro de tejidos vegetales es una herramienta poderosa y versátil para el estudio de problemas básicos y para la solución de problemas aplicados en el campo de la biotecnología agrícola del frijol.

Por qué el uso de la biotecnología para el mejoramiento del frijol: Existe un considerable interés mundial por el desarrollo de métodos no convencionales de mejoramiento genético en la agricultura, tales como la modificación genética, vía transgénesis o por inducción de mutaciones por irradiación o por métodos químicos. El objetivo es generar plantas tolerantes a factores de estrés biótico o abiótico que no pueden ser obtenidas por métodos tradicionales, los cuales pueden utilizar solamente la variabilidad genética disponible en los recursos genéticos primarios de la especie, tales como variedades locales, o especies silvestres relacionadas y reproductivamente compatibles con ella, el incremento de la producción del frijol se ha debido principalmente a la alta tasa de compuestos químicos aplicados, a la mecanización o prácticas de amelioración. Los métodos de producción tradicional llegan a ser limitados por el bajo potencial de recombinación como resultado de la autopolinización, la baja capacidad hereditaria de algunas características importantes y al aborto de embriones en algunos híbridos ínter específicos. Para utilizar exitosamente la gran variedad de aplicaciones biotecnológicas disponibles en mejoramiento genético, se requiere contar con metodologías de regeneración de plantas a partir de células somáticas generadas por cultivo in vitro. De otra manera, se obtendrían plantas modificadas genéticamente, pero de naturaleza genéticamente heterogéneas. La producción de brotes y la regeneración de plantas en el frijol bajo condiciones de cultivo in vitro ha sido descrita por autores como Malik y Saxena, sin embargo la frecuencia de brotes obtenidos es aún limitada, 4-8 brotes por explante. Muy pocos laboratorios en el mundo, particularmente en Brasil, han desarrollado procedimientos exitosos de cultivo in vitro y regeneración de plantas para variedades de frijol de origen andino.

¿QUE ES EL CULTIVO VEGETAL IN VITRO DEL EMBRION DEL FRIJOL?

Es un método de micro propagación del frijol que se realiza en un laboratorio a condiciones estériles muy máximas.

¿COMO SE HACE EL CULTIVO VEGETAL IN VITRO DEL EMBRION DEL FRIJOL?

Este cultivo se hace tomando el embrión del frijol, poniéndolo a cultivar en un tubo de ensayo sobre un medio nutritivo, en condiciones controladas y estériles con unos materiales especiales para este procedimiento.

¿PARA QUE SE HACE EL CULTIVO VEGETAL IN VITRO DEL EMBRION DEL FRIJOL?

Se hace para conocer la conservación de la planta del frijol y las variedades de esta planta.

AVANCES:

Los avances los veremos en los resultados encontrados después de hacer la investigación y la práctica del cultivo.

METODOLOGIA

Nuestra metodología consistío en buscar la micro propagación de la planta del frijol partiendo desde el embrión del frijol para así buscar la multiplicación de esta planta siguiendo un proceso que se ha llevado a cabo hace mucho tiempo.

A continuación les presentamos los pasos utilizados dentro de este proyecto.

MATERIALES:

Para realizar el cultivo de tejido vegetal del embrión del frijol nos dimos a la necesidad de utilizar:

AUTOCLAVE: Aquí esterilizamos todo lo que utilizamos durante el proceso del cultivo. Es como una olla a presión.

CAMARA DE FLUJO LAMINAR: Aquí manipulamos el embrión del frijol ya que tiene un ambiente estéril.

MEDIO DE CULTIVO: Aquí mantuvimos las proteínas y el agua que le aplicamos al embrión dentro de un tubo de ensayo.

PLANTA: El embrión del frijol lo extraemos de un frijol normal y lo dejamos reposando unos días antes para que así le salga el embrión.

CAMARA DE CULTIVO: Este es un lugar en el cual mantuvimos el cultivo del embrión del frijol a unas condiciones máximas.

BATA: Esta nos sirvió para realizar la prevención de infectar el cultivo.

FUENTE DE CARBONO: Esta nos sirve para que nuestro cultivo coja nutrientes.

VITAMINAS Y AMINOACIDOS: Estos nos sirvieron para que nuestro cultivo tenga fuente de crecimiento.

AGENTE GELIFICANTE: Nos sirvió para que se endureciera nuestro cultivo.

MACRO Y MICRO NUTRIENTES: Nos sirvió para que nuestro cultivo mantuviera una forma de crecimiento normal dentro de estos van todas las vitaminas necesarias.

AGUA: Es un nutriente necesario para nuestro cultivo.

MICROSCOPIO: Nos sirvió para observar nuestros cultivos.

BALANZA DE PRESICION: Nos sirvió para pesar los químicos necesarios.

CONDICIONES EL CULTIVO:

En la cámara de flujo laminar no puede entrar ninguna pieza contaminada.

En la autoclave no podemos meter sustancias como medicamentos, vitaminas, etc.

El vidrio que cubre el cultivo debe ser muy duro y grueso para que en no deje meter ninguna clase de contaminación.

Los ayudantes al crecimiento deben obligatorios ya que sin ellos no puede crecer el medio de cultivo.

El pH debe ser entre 5 y 6.

Se necesita agar-agar obligatorio para endurecer el cultivo.

El cultivo debe llevar agua, azúcar y reguladores de crecimiento.

Según el medio de cultivo que sea puede tener diferente momento para prepararse.

En la cámara de cultivo debemos aplicar diferentes grados de calor.

PROCESOS:

PRIMERA ETAPA

INVESTIGACION DEL CULTIVO DE TEJIDO VEGETAL IN VITRO: Lo primero que realizamos fue investigar todo sobre los cultivos in vitro.

Dentro de ello encontramos técnicas como; la micro propagación, la organogénesis, la embriogénesis, las suspensiones celulares, el cultivo de anteras y polen y el cultivo de protoplastos entre otros. Después de este paso nos encargamos en conseguir los embriones del frijol e investigamos como los obtendríamos. Así de igual forma obtuvimos factores de un cultivo vegetal in vitro de un embrión de un frijol.

MICRO PROPAGACION: Este es el proceso de la multiplicación de plantas cultivadas y producidas vegetativamente a gran escala, producidas por la reproducción asexual.

ORGANOGENESIS: Este es el proceso de diferenciación de órganos como raíces, brotes o tallos y se forman directa o indirectamente a partir de otros tejidos.

EMBRIOGENESIS: Este proceso es el que sucede después de tener embriones zigoticos y sexuales inmaduros los cuales inician la formación del embrión.

SUSPENCIONES CELULARES: Este proceso se utiliza en medios líquidos a partir de tallos los cuales se dispersan.

CULTIVO DE ANTERAS Y POLEN: Este proceso es empleado para obtener mutaciones de especies.

CULTIVO DE PROTOPLASTOS: Este proceso es empleado para obtener unas mismas especies.

FASES DEL CULTIVO DE TEJIDO VEGETAL IN VITRO:

Se desinfecta el embrión en alcohol se flamea.

Se separa el embrión de la semilla del frijol.

Se introduce dentro del tubo.

A la primera semana se puede ir reconociendo la planta.

Se va dejando crecer y se va pasando por los procesos a seguir.

VENTAJAS DEL CULTIVO DE TEJIDO VEGETAL IN VITRO:

Permite obtener plantas libres de enfermedades hongos, bacterias, virus. La micro propagación vegetal nos permite propagar masivamente material vegetal en cualquier época del año y en corto tiempo conservando su potencial genético y calidad sanitaria. Permite optimizar el uso de factores ambientales y nutricionales. Facilita el cultivo de un gran número de plantas en una superficie pequeña. Puede conservar material biológico por periodo de tiempo prolongados. Además mediante este método de propagación se puede incluir aspectos de fito mejoramiento.

DESVENTAJAS DEL CULTIVO DE TEJIDO VEGETAL IN VITRO:

Requiere de personal especializado, requiere de infraestructura y equipamiento, los productos químicos son de elevado costo.

SEGUNDA ETAPA

REALIZACION DEL CULTIVO: Lo segundo realizado fue empezar el proceso del laboratorio.

La realización del laboratorio del cultivo se llevo a cabo en el laboratorio del colegio la aurora y en laboratorio de la universidad nacional con la ayuda de profesores especializados en el tema, el cual nos sirvieron de guías y a esto le sumamos los aprovechamientos que tuvimos los años pasados.

1. OBTENCION DEL EXPLANTE DEL EMBRION DEL FRIJOL: Dejamos unos cuantos frijoles en agua por unos días a los cuales les nace el embrión, obteniendo el embrión del frijol procedimos a desinfectarlo con hipoclorito de sodio y alcohol reuniendo un setenta por ciento (70%) de solución antes de introducirlo al medio de cultivo bajo unas condiciones de asepsia.

2. MEDIO DE CULTIVO DEL EMBRION DEL FRIJOL: El embrión fue encubado a una temperatura de veinte cuatro grados centígrados (24°) para que fuera mantenido el embrión y no tuviera problemas de climatización.

3. SUSTANCIAS UTILIZADAS EN EL EMBRION DEL FRIJOL:Thiamina. Vitaminas.Sacarosa. Agar Agar. PH. Adenina.Macro elementos y Micro elementos.Auxinas.Cito quininas.Geberelinas.Azucares.

4. CLIMATIZACION DEL EMBRION DEL FRIJOL: El embrión lo adaptamos a una condición esterilizada para mantenerlo a una temperatura variada entre veinte y venti cinco grados centígrados,(20 y 25º).

5. MULTIPLICACION DE BROTES A PARTIR DEL EMBRION DEL FRIJOL: En esta parte nos fue necesaria el azúcar, los aminoácidos y las vitaminas para regular el crecimiento de nuestro cultivo y así el embrión se esparciera alrededor del tubo.

6. ENRAIZAMIENTO DEL EMBRION DEL FRIJOL: Nos fue necesario transferir el cultivo a un medio que contenía reguladores especialmente introducimos auxinas y así nuestros cultivos fueron madurando y cogiendo su forma.

7. ENDURECIMIENTO DEL EMBRION DEL FRIJOL: Nos fue necesario para que el cultivo nos quedara listo ya por último en condiciones húmedas y gelatinosas aumentamos un poco de agar agar y quedo listo.

8. Por último procedemos a observar su crecimiento y maduración.

TERCERA ETAPA

REVISION DEL CULTIVO: Lo tercero que realizamos fue observar el crecimiento y la transformación que se obtuvieron de los cultivos:

Durante los primeros días el cultivo estuvo endurecido normalmente se fue y le iban saliendo raíces por todos los lados del embrión.

A las dos semanas el cultivo ya tuvo sus primeros resultados ya se veía la planta, así fue creciendo y reproduciéndose.

Observamos que dentro de los cultivos no hayamos tenido ninguna clase de contaminación ya que nos encontraremos en la necesidad de volver a repetir el cultivo. Si hubiera contaminación era grave y hay una reacción que se llama vitrificación el cual la planta se ve como un vidrio, si esto pasar nos hubiera tocado sacar los pedacitos buenos y volver a hacer un sub cultivo.

Para analizar nuestros cultivos del embrión del frijol observamos las diferencias y las similitudes que tienen entre los dos y se examina todo el cultivo y así observamos que alguno de los dos tuvo que salir mejor que el otro aunque no sea perfecto tiene algo más que el otro.

RESULTADOS

PRIMERA ETAPA

En esta primera etapa encontramos en la investigación muchos factores empleados de un cultivo in vitro los cuales nos sirven para diferentes formas de cultivo. Investigando todo sobre los cultivos in vitro encontramos que a pesar de que es difícil encontrar resultados de este procedimos a partir de lo investigado nos basamos en la micro propagación de un cultivo el cual tenía un proceso fácil, y la realización de este nos resulto mejor que todas ya que hicimos el intento con las otras formas de cultivo este fue el más fácil y además de eso era el que mas sabíamos.

SEGUNDA ETAPA

En esta segunda etapa realizamos diferentes cultivos del embrión del frijol con la intención de tener diferentes muestras para saber cual salió más viable haciendo la prueba y escogiendo las dos mejores de ellos, al escoger los dos cultivos mejores. Analizamos los dos salieron muy bien y muy similares, claro que con algunas diferencias las cuales uno se diferencio de otro por las diferencias y ese fue el que dejamos como muestra.

En la contaminación de los cultivos se realizo una prueba de los dos para examinar cual estaba más contaminado, y el resultado fue que los dos estaban contaminados; pero en su totalidad solo uno estaba contaminado totalmente, el otro solo mas o menos la quinta parte más o menos.

En la obtención del explante nos fue fácil sacar cada embrión de cada frijol con utilización de una tijeritas prácticas para esta práctica.

Dentro de los medios de cultivo los embriones tuvieron un cincuenta por ciento (50 %) de respuesta buena pero decidimos realizarlos dentro de otro subcultivo el cual fue mucho mejor la respuesta.

Las sustancias utilizadas fueron suficientes para que nuestro cultivo tuviera un crecimiento y desarrollo muy bueno.

La climatización fue muy alta y el cultivo se iba descomponiendo nos toco bajarle los grados centígrados a veinte grados centígrados (20 °) e ir programándolo entre veinte y veinte cinco por ciento (20 y 25%) para que el cultivo nos diera un resultado como debía ser y ahí si fue lo necesario para el cultivo.

En la multiplicación del embrión no fue fácil encontrar la diferencia entre los dos cultivos ya que los tejidos eran muy parecidos. Se realizaron dos siembras mas con las mismas cualidades y después de este intento encontramos muchas diferencias entre ellos.

En el enraizamiento los dos cultivos fueron muy buenos con las mismas condiciones nos fue muy bien en dos semanas ya veíamos resultados y estos fueron capaces de desarrollar una gran mayoría de raíces.

En el endurecimiento dentro de los dos cultivos nos fue muy bien, los dos cultivos a pesar de tantos inconvenientes se endurecieron lo mínimo que debían endurecersen y tuvieron su proceso de formación dentro del tubo muy bueno.

Dentro de los resultados damos a conocer que los cultivos tuvieron su proceso de etapas de maduración bueno, sin embargo al comparar los dos cultivos se notaron las diferencias de ambos y se obtuvo una variabilidad en tiempo y control de cultivos.

TERCERA ETAPA

En esta tercera etapa logramos revisar los dos cultivos y observamos las similitudes y diferencias de los dos cultivos y encontrándolas definimos cual de los dos fue el mejor en la maduración que era lo más importante dentro del proyecto.

DISCUSION DE DATOS Y DE RESULTADOS

En lo referente que se obtiene del cultivo vegetal in vitro del embrión del frijol se puede dar a conocer que en un cincuenta por ciento (50%) de lo realizado fue obtenido lo mejor de los dos cultivos escogidos dentro de todos los realizados y teniendo dificultades con algunos de ellos estos dos fueron los dos mejores cultivos realizados en las practicas.

En la contaminación podemos mencionar que de los dos cultivos escogidos uno totalmente estaba contaminado y el otro en una quinta parte más o menos, esto debido a que algún contaminante extraído por cualquier contaminación producida en la práctica, por esto es necesario tener en cuenta las medidas que debemos optar por tener unas buenas condiciones de asepsia, es decir realizando la desinfección y esterilización de todos los objetos de manejo dentro de la práctica y así evitaremos las contaminaciones de los cultivos.

Los que es la obtención de explante del embrión del frijol al cabo de 15 días después de dejarlo en agua para que el embrión del frijol saliera a la luz, logramos obtener unos pocos, el medio de cultivo le ayudo al embrión a desarrollarse por las condiciones ambientales.

Respecto a las sustancias utilizadas estuvieron a favor ya que fueron las necesarias para obtener un buen cultivo y con las condiciones climáticas fueron beneficiarias en los cultivos.

Para la multiplicación se mencionan entre uno y dos meses aunque dentro de dos semana ya iba dandi a luz ciertas raíces y plantas y después de esto se

obtuvo resultados buenos, esto nos indica que el factor de brotes y desarrollo de formación de enraizamiento con ayuda de fitohormonas.

Sobre el endurecimiento del embrión del frijol es claro decir que el agar-agar lo ayudo en un noventa por ciento (90%) y así el embrión coge su dureza normalmente, sobre el crecimiento del embrión se obtuvo un crecimiento bueno y nos demuestra que los nutrientes tuvieron la reacción necesaria sobre ellos.

Referente al cultivo se obtuvo de un cien por ciento (100%) un ochenta por ciento (80%) de lo necesario de un cultivo contando con las sustancias y las demás cosas que se tuvieron en cuenta para el cultivo.

CONCLUSIONES

De acuerdo a los resultados, llegamos a las conclusiones que es posible la regeneración in vitro de plantas del embrión del frijol, la regeneración se dá cuando se transfiere el embrión a medios de cultivos. La multiplicación del embrión del frijol está relacionada con el frijol y sus orígenes, de tal forma que explantes provenientes de la semilla del frijol sean multiplicados bajo el proceso de un cultivo. El resultado aquí descrito muestra una mejor respuesta organogénica con el uso de ejes embrionarios, además este protocolo puede adaptarse a otros medios de cultivo. Este procedimiento es reproducible, lo que lleva al desarrollo de plantas completas partiendo de un pequeño embrión. Finalmente este proceso es una transformación de cualquier cultivo para el mejoramiento de las plantas. De este trabajo se deben destacar los siguientes aspectos fundamentales: Que la vinculación entre las instancias productoras de cultivos, puede lograrsen en la medida en que se establezcan las formas de apoyo. Los resultados obtenidos permitirán en el futuro aplicar esta metodología a otras comunidades con problemas de marginación con lo cual se contribuirá por una parte a la creación de empleos y por otra a impulsar fuertemente la actividad de cultivos, produciendo plantas ornamentales de calidad para ser más competitivos en esta área.

RECOMENDACIONES

Para la regeneración del cultivo de tejido vegetal in vitro del embrión del frijol utilizar de base el protocolo desarrollado en el presente proyecto de investigación y de prácticas.

Observando esto hay que continuar con estudios que tiendan a optimizar estos procedimientos para así ampliar nuestro conocimiento.

Tener en cuenta los materiales y os elementos utilizados para obtener un mejor cultivo.

BIBLIOGRAFIA

Profesores colegio la aurora:

Fabio Morales, Edison Correa y Luz Mary Ballestero. J.M Y J.T. 2011.

Profesor universidad nacional instituto de biotecnología. 2011.

Allavena, A y Rossetti L Efforts in somatic embryogenesis of Phaseolus vulgaris. Act Horticulturae. 1983.

Biotecnologías en el sector Forestal. Loewe, V. Chile Forestal. 1995.

HURTADO, D, MERINO, M. Cultivo de tejidos vegetales. Editorial Trillas. 2000.

ANEXOS

TABLAS:

Composición de medios de cultivo para células vegetales:

Componentes Características y ejemplosAgua destilada Representa el 95% del medio nutriente.

Fuente de carbono

Generalmente se usa sacarosa. La fuente de carbono se necesita porque los explantos no son completamente autótrofos, y no pueden cubrir sus necesidades con la fotosíntesis que pueden realizar in Vitro.

Sustancias inorgánicas

Macro elementos (N, P, K, Ca, Mg, S) y micro elementos (Fe, Co, zn, Ni, B, Al, Mn, Mo, Cu, I), en una proporción adecuada para la planta elegida.

Vitaminas Vitaminas B1, B2, B6, vitamina H, vitamina E, ácido fólico, ácido nicotínico, entre otras.

Hormonas y reguladores del crecimiento

Auxinas: promueven la elongación celular, la formación de callos y raíces adventicias, inhiben la formación de brotes axilares adventicios y, a veces, inhiben la embriogénesis.Cito quininas: promueven la división celular, regulan el crecimiento y el desarrollo de los tejidos vegetalesOtras: giberelinas, ácido absícico, etileno.

Mezclas de sustancias poco definidas

Ejemplos: extracto de levadura, extractos vegetales.

Materiales inertes Usados como soporte. Incluyen agar, azarosa, otros

polisacáridos, lana de vidrio, papel de filtro, arena.

IMÁGENES: