“Effectiveness of ozone againstendodontopathogenic microorganisms in a root canal

biofilm model”

“Efectividad del Ozono contra los microorganismos patógenos endodonticos en un modelo de biofilm del

conducto radicular”

K. C. Huth, M. Quirling S. Maier, K. Kamereck, M. AlKhayer, E. Paschos, U. Welsch, T. Miethke, K. Brand6& R. Hickel. I.E.J, 42, 3–13, 2009

Dr . Henrry E. Ruiz Méndez

Segunda especialización en Endodoncia y Cariologia

Introducción

• El objetivo principal del tratamiento endodontico es erradicar o reducir sustancialmente la carga microbiana en el sistema de conductos radiculares.

• Enterococcus faecalis, Candida albicans, Peptostreptococcus micros y otros P. especies (G-) se han asociado a infecciones persistentes de los conductos radiculares

Nair PN (2006) On the causes of persistent apical periodontitis:a review. International Endodontic Journal 39,249–81.

Introducción

• NaOCl >5.25%, NaOCl+H2O2 ,CHX 2% son los irrigantes mas usado en Odontología.

• En periodontitis apical refractaria el éxito es 50%-70% NaOCl >3% y CHX 2% Eficacia limitada y resultados inconsistentes.

•.Takeda FH, Harashima Y, Kimura Y, Matsumoto K (1999) Acomparative study of the removal of smear layer by threeendodontic irrigants and two types of laser. I.E.J.32, 32–9

•Siqueira JF Jr, Batista MMD, Fraga RC, de Uzeda M (1998) Antimicrobial effects of endodontic irrigants on blackpigmentedgram- negative anaerobes and facultative bacteria.J.O.E.24, 414–6.

Gomes BPFA, Ferraz CCR, Vianna ME, Berber VB, Teixeira FB,Souza-Filho FJ (2001) In vitro antimicrobial activity ofseveral concentrations of sodium hypochlorite and chlorhexidinegluconate in the elimination of Enterococcus faecalis.I.E.J. 34, 424–8.

Introducción

• NaoCl y H2O2 hemorragia, edema, ulceración de la piel y citotoxicidad.

• CHX 2% descamación de la mucosa, deterioro en la cicatrización de las heridas, tinción dental

•Pashley EL, Birdsong NL, Bowman K, Pashley DH (1985) Cytotoxic effects of NaOCl on vital tissue. JOE 11, 525–8•Gernhardt CR, Eppendorf K, Kozlowski A, Brandt M (2004)Toxicity of concentrated sodium hypochlorite used as anendodontic irrigant. IEJ 37,272–80.•Huth KC, Jakob FM, Saugel B et al. (2006) Effect of ozone onoral cells compared with established antimicrobials. European Journal of Oral Sciences 114, 435–40.•Hyslop PA, Hinshaw DB, Halsey WA et al. (1988) Mechanisms of oxidant-mediated cell injury. The glycolytic and mitochondrial pathways of ADP phosphorylation are majorintracellular targets inactivated by hydrogen peroxide.Journal of Biological Chemistry 263, 1665–75.•Bassetti C, Kallenberger A (1980) Influence of chlorhexidinerinsing on the healing of oral mucosa and osseous lesions.Journal of Clinical Periodontology 7, 443–56.

Introducción

• Ozono tiene un poder alto poder antimicrobiano y no presenta resistencia bacteriana, Restaino 1995

• El Ozono al 4gm-3 (endodoncia) menos citotóxico que el Naocl 2.5% y el Ozono acuoso no es toxico para las células orales in vitro

•Restaino L, Frampton EW, Hemphill JB, Palnikar P (1995)Efficacy of ozonated water against various food-relatedmicroorganisms. Applied and Environmental Microbiology 61,3471–5.•Filippi A (2001) The effects of ozonized water on epithelialwound healing (in German). Deutsche Zahna¨rztliche Zeitschrift56, 104•Ebensberger U, Pohl Y, Filippi A (2002) PCNA-expression of cementoblasts and fibroblasts on the root surface after extraoral rinsing for decontamination. Dental Traumatology18, 262–6.

Introducción

•Nagayoshi M, Kitamura C, Fukuizumi T, Nishihara T,Terashita M (2004) Antimicrobial effect of ozonated wateron bacteria invading dentinal tubules. JOE 30, 778–81•Arita M, Nagayoshi M, Fukuizumi T et al. (2005) Microbicidalefficacy of ozonated water against Candida albicans adheringto acrylic denture plates. Oral Microbiology and Immunology20, 206–10.•Bezrukova IV, Petrukhina NB, Voinov PA (2005) Experiencein medical ozone use for root canal treatment. Stomatologiia84, 20–2

Tiempo? Concentración?

Objetivo

Investigar la eficacia antimicrobiana del ozono gaseoso y acuoso contra patógenos endodonticos específicos en suspensión y en biofilm cultivado en canales radiculares humanos

Materiales y Métodos

• Microorganismos

E.faecalis C. albicans Ps. Aeruginosa y P .Micros

suspensión

Materiales y Métodos

• Agentes evaluados

Ozono gas1gm-3 al 53gm-3

Ozono acuoso 20ug ml-1 y 1.21ug ml-1

Materiales y Métodos

• Agentes evaluados

NaOCl 5.25% CHX 2% PBSH2O2 3%

Control

Materiales y Métodos

• Evaluación del ozono contra los Microorganismos en suspensión

Agar

P. Micros

Agar

Ozono

Materiales y Métodos

• Evaluación del ozono contra los Microorganismos en biofilm

desecho SalivaSacarosamicroorganismos

Reservorio

Raíces

Frasco de desecho

SalivaSacarosamicroorganismos

desecho

Método Estadístico

•Test de Anova de una vía•P = 0.05

Resultados

Efecto del Ozono sobre los microorganismos en suspensión

acuoso

p< 0.05

p< 0.05

Efecto del Ozono sobre los microorganismos en biofilm

acuoso

acuoso

P<0.05

Exposición del biofilm al ozono gas, en un modelo diferente y en diferentes tiempos

Discusión

• Nagayoshi 2004, no encuentran una eliminación completa de E. faecalis con Ozono acuoso(4ug ml-1) Vs NaOCl 2.25%

• Hems 2005, no encontró reducción significativa de E. faecalis en biofilm con Ozono acuoso pero si con E. faecalis planctonicas.

Discusión

• Arita 2005, utiliza ozono acuoso (2y4ug ml-1) y elimina casi por completo a cándida albicans(3Hs).

• En el presente estudio, se elimino por completo la C.alb. con NaOCl, y en 96% por 53gm-3 de O. Gas y 20ug ml-1 de O acuoso y CHX2%

Discusión • No hay estudios con P.Micros• En el presente estudio, se elimino por completo P.

micros. con 1gm-3 de O. Gas y >2.5ug ml-1 de O acuoso y CHX2%

• Filippi 1995, usa ozono acuoso contra P. aeruginosa, pero no hay datos suficientes.

• En el presente estudio, se elimino por completo P. aeurg. con 32gm-3 de O. Gas y NaOCl 2.25% y 20 ug ml-1 de O acuoso o CHX2% casi total

Conclusión

• La efectividad de altas concentraciones de Ozono gaseoso y acuoso fueron dosis – cepa – tiempo dependientes contra los microorganismos evaluados en suspensión y en un modelo de Biofilm no obstante, el NaOCl fue el único método que elimino a todo tipo de microorganismos