Date post: | 07-Jul-2019 |
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HANTAVIRUS EN CHILE
SECCION VIRUS HEPATICOS Y EMERGENTES ISP 2012
Características generales
• Partícula viral esférica de 80-120 nm
• Envoltura lipídica
• Pleomórfica
• 2 glicoproteínas superficiales G1 y G2
• 1 nucleoproteína central (N)
• Genoma RNA trisegmentado
• Segmentos Large (proteinas funcionales, polimerasa)
• Medium: glicoproteinas
• Small: nucleoproteína
Roedor transmisor del hantavirus
• Roedor transmisor de la enfermedad: Oligorizomys longicaudatus (ratón colilargo)
• Habitat del roedor: 3º a 11º región
• Ratón de hábitos nocturnos. Se alimenta de frutos silvestres (quila).
• Transmisión por orina, deposiciones y saliva
Virus asociados a subfamilia Murinae Virus Huesped Lugar Enferm.
Hantaan Apodemus agrarius Asia, Rusia este HFRS
Dobrava Apodemus flavicollis Balcanes HFRS Apodemus agrarius Europa
Seoul Rattus norvegicus Todo el mundo HFRS Rattus rattus
Virus asociado a subfamilia Arvicolinae
Virus Huesped Lugar Enferm.
Puumala Clethrionomys glareolus Europa HFRS
*Otros numerosos hantaviruses han sido identificados pero no asociados a enfermedad humana
Hantaviruses en el viejo mundo
Hantavirus del Nuevo Mundo
CASOS HANTAVIRUS EN CHILE
POR REGION (1995-2012) REGION Nº CASOS
ARICA-PARINACOTA 0
TARAPACA 0
ANTOFAGASTA 0
ATACAMA 0
COQUIMBO 0
VALPARAISO 14
METROPOLITANA 32
O`HIGGINS 33
MAULE 92
BIO BIO 194
ARAUCANIA 116
LOS RIOS 78
LOS LAGOS 134
AISEN 68
MAGALLANES 0
NO DETERMINADO 7
TOTAL PAIS 768
0
20
40
60
80
100
120
140
160
180
200
15
1
2
3
4
5
13
6
7
8
9
14
10
11
12
Indet
ALGORITMO DIAGNOSTICO SOSPECHA
INFECCION POR HANTAVIRUS
Período de incubación difícil de precisar: 3 a 45 días
Incubación
Pródromos
1 a 12 días, promedio 4 días
Sindrome cardiopulmonar por virus Andes
Fase cardiopulmonar
Fallecimiento
24 – 48 H 7 a 15 días
Convalescencia
Dra Castillo, Universidad de la Frontera
Sintomas prodromicos SCPH
Síntomas Coyhaique
n=24
Pto. Montt
n=25
Temuco n=54 Concepción
n=23
Fiebre 95 96 100 87
Mialgia 69 96 100 66
Cefalea 43 60 60 35
Nauseas-
vómitos
63 24 50 22
Diarrea 63 8 20 9
Lumbalgia 45 4 38 61
Artralgia - - 13 -
CEG - 76 - 87
Sospecha clínica en fase prodrómica
Fiebre y mialgias, con o sin síntomas gastrointestinales.
Plaquetopenia <100.000 y/o inmunoblastos en sangre.
Antecedente de exposición a roedores o excretas
HUM PATHOL 1995, Lancet 1996, Hospital Practice 1997,
Sem Respir Crit Care Med 2000
Secundario a daño viral o endotelial, ocurre precozmente trombocitopenia y precede al edema pulmonar.
La presencia de inmunoblastos predice la aparición del EPA
n = 22
(valor más alterado)
100% Hemoconcentración (Hto 47% a 70%)
100% Trombocitopenia (Plts 84.000 a 12.000 x mm3)
95% Leucocitosis (GB 10.600 a 41.700 x mm3)
Hemograma virus Andes
Mayores niveles de ARN se correlacionan con peak del hematocrito, nadir de las plaquetas y aparición del edema pulmonar.
JID 1999
Rev Chil Infect 2000 , CHEST Jun 2001
C Romero et al. Rev Méd Chile 2003; 131: 1173-1178
Inmunoblastos: Linfocitos Hiperbasófilos HANTAVIRUS
Linfocitos Atípicos
Hipoxemia 100% Alza de LDH y CPK 100% Alza de SGOT, SGPT 94% PTT prolongado 90% Hiponatremia 79% Alza de creatininemia 55% Alza de amilasa sérica 9%
Laboratorio virus Andes n=22
Rev Chil Infect 2000
CHEST Jun 2001
Neumonitis instersticial
Congestión
Infiltrado mononuclear
( inmunoblastos )
Edema intra - alveolar y septal
Membranas hialinas focales,
escasas
Histología pulmonar
CDC
Ausencia o escasez de:
Neutrófilos
Daño epitelial
Detritus celulares
MUESTRA SOSPECHOSA
ELISA IgM ELISA IgG
NEGATIVO POSITIVO
IgM -
INFECCION
ANTIGUA
HANTAVIRUS
POSITIVO
INFECCION
RECIENTE
HANTAVIRUS
NEGATIVO
DIAS DE
EVOLUCION
CLINICA
< 48 HRS
PCR
POSITIVO
NEGATIVO
> 48 HRS
SOLICITAR 2º
MUESTRA
PARA
SEROLOGIA
Tecnica ELISA IgM Hantavirus del CDC
Placa ELISA IgM Hantavirus
Test rápidos hantavirus
J Clin Microb 2001: 2146-2150
388pb
RT PCR HANTAVIRUS
Inmunohistoquímica hantavirus
Gentileza Dr Gracia, Panamá (virus choclo) JAMA 2000
1.- Caso sospechoso
Exámenes Virológicos ANDV
SEROLOGIA IgM/IgG
• Confirmatorios
• Si son tomadas muy precozmente en la fase prodrómica pueden resultar negativos o “limítrofe” tanto la IgM como la IgG*
• La IgM dura alrededor de 8 semanas*
PRUEBAS MOLECULARES
• Confirmatorios
• Altamente sensibles y especificas.
• La muestra de elección son las células blancas.
• Sirve para Dg aún en fases precoces de la infección.
• Útil para buscar virus en tejidos
3.- Expuesto a riesgo con síntomas dentro
del PI
• Ante síntomas como fiebre evaluación clínica y
HEMOGRAMA mirando el recuento de plaquetas
y los linfocitos hiperbasófilos.
• Considerar exámenes virológicos conversando
con infectólogo idealmente.
– PCR HV en células blancas, tubo con
anticoagulante (EDTA)
– Serología IgM/IgG HV **
Situaciones laborales de mayor
riesgo
• Ingreso a lugares cerrados y con escasa iluminación
(galpones, graneros, bodegas, leñeras)
• Ocupación de cabañas previamente deshabitadas sin
ventilación previa
• Manipulación de leña, objetos o herramientas que han
estado en contacto con ratones silvestres
• Desmalezar, limpiar canales o limpieza de pastizales
• Ingresar a bosques o entre matorrales o zarzamoras
infestadas de ratones
• Dormir a la intemperie, acampar en zonas silvestres por
recreación o trabajo.
ALERTA SANITARIA
El 06 de febrero del año 2012, el Ministerio de Salud decretó Alerta Sanitaria por aumento de casos de Hantavirus para la Región del Bío Bío y la provincia de Malleco en la Región de La Araucanía.
RED DE LABORATORIOS PARA EL DIAGNOSTICO DE HANTAVRIUS
Desarrollar una red de laboratorio para la detección de virus Hanta mediante la Técnica de ELISA directa (Kit IgM Virus Andes), que cubra las necesidades de un diagnóstico mas oportuno de esta enfermedad emergente.
INSTITUTO DE SALUD PÚBLICA
Se han seleccionado los siguientes laboratorios de la red pública: Región de Valparaíso: Hospital Gustavo Fricke Región del Maule: Hospital de Talca Región del Bío Bío: Hospital Guillermo Grant
Benavente Región de La Araucanía: Hospital Dr. Hernán
Henríquez Aravena Región de Los Lagos: Hospital Base de Puerto
Montt.
DESARROLLO
09 de Febrero: Hospital Guillermo Grant Benavente.
23 de Febrero: Hospital Dr. Hernán Henríquez Aravena. Hospital Base de Puerto Montt.
27 de Febrero: Hospital Gustavo Fricke.
07 de Marzo: Hospital Regional de Talca
OBJETIVOS
Implementar Técnica de ELISA para diagnóstico inicial de Infección por Virus Hanta, que apoye el criterio para el diagnóstico clínico. Conocer el desempeño en la práctica clínica de un test que se encuentra verificado por ISP y que presenta una sensibilidad del 100% y una especificidad del 96% en los análisis realizados por la institución.
TÉCNICA
El Test es una prueba de ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA) que permite la detección de anticuerpos IgM contra el virus Hanta (virus Andes y virus Sin Nombre) en muestras de suero o plasma humano.
Técnicas verificadas por ISP:
• Ventajas y desventajas
• Recalcar que el 100% de sensibilidad es con IgM captura Andes,
pero que durante la fase aguda de la enfermedad, como también en
la fase prodrómica, cuando la detección de inmunoglobulinas
específicas es todavía negativa.
• Técnica ELISA al ser directa, puede tener falsos positivos.
NOMBRE ENSAYO
TIPO DE ENSAYO ANTIGENO SENSIBILIDAD ESPECIFICIDAD
REAGENA POC
PUUMALA IgM
INMUNOCROMATOGRAFIA PUUMALA 82.6% 95.37%
ANTI-HANTA
VIRUS POOL 2
AMERICA
IgM
ELISA ANDES Y
VSN 100% 96.2%
CONSIDERACIONES
El objetivo de la implementación de este test a nivel local, no es reemplazar la confirmación del ISP, sino permitir un diagnóstico inicial optimizando el tiempo de respuesta para la atención clínica Se recomienda centralizar a Nivel Regional la ejecución de esta metodología con la intención de mejorar el rendimiento del KIT. Se realizará estudio de concordancia de los resultados con el ISP con los diferentes laboratorios. Así mismo, recomendamos que la mantención de la técnica en dicho hospital sea responsabilidad de las autoridades locales, mientras que el ISP se compromete a otorgar la supervisión de la técnica implementada.
CO
NFI
RM
AC
IÓN
Red Central
Red Regional
Nivel Local
Red de laboratorio Virus Hanta
•Región Valparaíso: Hospital de Viña del Mar
•Región del Maule: Hospital de Talca
•Región de Bío Bío: Hospital Guillermo Grant Benavente
•Región Araucanía: Hospital de Temuco
•Región Los Lagos: Hospital de Puerto Montt
•Laboratorios que
realizan Test
Rápido Puumala
Confirmación de casos
Acercamiento al diagnóstico clínico
Acercamiento al diagnóstico clínico
Métodos verificados por el ISP (Puumala y test de ELISA que utiliza antígeno Andes y antígeno Virus Sin Nombre)
•Araucanía •Los Ríos •Los Lagos
•Centros
Asistenciales que
no disponen de
Test Rápido y
pertenecen a otras
regiones del país
U.A.V I.S.P P.U.C
•Resto del País •En caso requerido
•Centros Asistenciales
que no disponen de
Test Rápido y
pertenecen a las
Regiones V, VII,VIII,IX y
X; enviar sus muestras
a laboratorio regional
CONDICIONES
Horario de Recepción de muestras: de Lunes a Domingo las 24 horas. Horario de procesamiento de muestras: de lunes a viernes. En estado de alerta sanitaria: de lunes a sábado y domingo muestras urgentes. Tipo de muestra: sangre total sin anticoagulante en tubo estéril tapa rosca o de goma. (tubo tapa roja ) y además envío de tubo tapa lila con sistema de extracción al vacío (EDTA) Adultos: 5-8 ml
Pediátricos: 3- 4ml
En caso de paciente fallecido enviar: tejidos en tubo estéril tapa rosca y muestra de punción cardiaca y tejido pulmonar.
IMPORTANTE
Comunicar por mail la vía de transporte, día y hora del despacho de la muestra para el examen de Hantavirus. Cada tubo debe estar identificado con el nombre del paciente, tipo de muestra y fecha de obtención. Las muestras deben ser acompañadas con los antecedentes del paciente en el ”Formulario de Notificación y Envío de Muestras”, el cual debe consignar claramente la fecha de toma de muestra, fecha de inicio de los síntomas, y demás antecedentes clínicos solicitados en el formulario. Envío de todos los datos, y el SEGUIMIENTO CLINICO, y diagnóstico en base a antecedentes:
clínicos , epidemiológicos y de laboratorio
Precauciones en toma de muestra, procesamiento y envío
• Uso de precauciones estandar, más mascarilla
N 95 al puncionar o aspirar secreciones del
paciente.
• Procesamiento de muestras en el laboratorio
ojalá bajo campana, siempre reforzar las BPL
(antiparras, guantes, delantal).
• Evitar aerosoles al abrir los tubos.
• Envíos bajo normas de bioseguridad y en tubos
sellados con tapa rosca, envueltos en papel
absorbente y en contenedores de plástico.
• Temperatura 4° transporte en el dia,
alternativamente congelados en hielo seco
Identificación y tipificación de
Hantavirus en muestra de suero.
Nº ISP RT-PCR Tipificación
11-3933
Positivo
NT 98.4%
AA 98.9%
11-5498
11-5499
11-5859
11-6606
La cepa control Hantavirus CHI-7913 (AY228237) fue
utilizada para determinar la identidad.
NT Nucleótidos, AA Aminoácidos.
SIMILITUD SECUENCIAMIENTO
NUCLEOPROTEINA HANTAVIRUS CHILE 2011
REGION Nº CASOS % SIMILITUD NP
HANTAVIRUS
6º REGION 1 97,8
14º REGION 5 98,4
8º REGION 1 97,7
11º REGION 1 94,4
11º REGION 1 96,4
Árbol Filogenético de una Región
de Nucleoproteina de Hantavirus.
Gracias