Preface B.F. Feldman1 and C.A. Sink2 1Dept of Biomedical Sciences & Pathobiology, VA-MD - Regional College of Veterinary Medicine, Blacksburg, VA, USA

(Deceased).2Laboratory Diagnostic Services, VA-MD - Regional College of Veterinary Medicine, Blacksburg, VA, USA.

Dedication This book is dedicated to the memory of Dr. Bernard F. Feldman.

Carolyn Sink

Donna Burton

Acknowledgment Recognizing that no technical book is completely the original work of the authors, I would like to express my appreciation to

everyone who gave me direction and helped me understand what would be most clinically useful on a day to day basis.

Special thanks to Donna Burton and Dr. William Swecker, Jr.

Carolyn Sink

Preface Interest in transfusion medicine by veterinary professionals was first recorded at the 87th Annual Meeting of the American

Veterinary Medical Association in 1950. Since this time, advances in human transfusion medicine have led to advances in

veterinary transfusion medicine. One benefit of this technology has been in blood component therapy. Separation of a unit of

whole blood into components was made possible by the development of plastic bags for blood collection and high speed

refrigerated centrifuges. Manipulation of whole into blood components is a relatively simple task and this text has been created

to highlight the fundamental principles of blood bank techniques. We have included fuller procedures of some critical

requirements for accuracy and service to the needs of our patients.

Bernard Feldman

Carolyn Sink

Tabla de Contenidos Creación de un banco de sangre basado en la comunid ad (Pag. 4) Introduction

Some Helpful Hints

Owner Recruitment

Owner and Donor Attributes

Basic Equipment Needs for Blood Collection, Processing, and Storage

Recolección, procesamiento, almacenamiento y envío (Pag. 16) Anticoagulants and Preservatives

Blood Collection Systems

Blood Product Overview

Blood Collection Systems and Pre-Processing Guidelines

Preparation of Fresh Whole Blood

Preparation of Red Cells and Fresh Frozen Plasma

Preparation of Cryoprecipitated Anti-Hemophilic Factor and Cryo-Poor Plasma

Preparation of Platelet Rich Plasma

Short Draw and Decreasing the Amount of Anticoagulant Preservative

Purchasing and Receiving Blood Products from Outside Sources

Preparing Blood Products for Shipment

Consideraciones clínicas en la práctica de la trans fusión (Pag. 40) The Crossmatch

Blood Transfusion Guidelines

Blood Substitutes: Alternatives to Blood and Blood Products

Compatible IV Solutions

Blood Administration Sets

Adverse Effects of Blood Transfusion

Bioseguridad (Pag. 51) Laboratory Safety

Quality Assurance

Records

Inventory Management

Métodos (Pag. 57) Preparation of Fresh Whole Blood

Preparation of Red Cells and Fresh Frozen Plasma

Preparation of Cryoprecipitate and Cryoprecipitate-Poor Plasma

Preparation of Platelet Rich Plasma

Crossmatch Procedure

Washed Cell Suspension

Reaction Grading

Saline Replacement Procedure

Warming Whole Blood, Red Cells or Thawing FFP, Cryo or Cryo-Poor Plasma

Centrifuge Calibration

Appendices (Pag. 80) Manufacturers of Blood Collection Bags

Organizations with Veterinary Blood Bank Interests

Recommended Readings

Creación de un banco de sangre basado en la comunidad B.F. Feldman1 and C.A. Sink2 1Dept of Biomedical Sciences & Pathobiology, VA-MD - Regional College of Veterinary Medicine, Blacksburg, VA, USA

(Deceased).2Laboratory Diagnostic Services, VA-MD - Regional College of Veterinary Medicine, Blacksburg, VA, USA.

Traducido por: L. Delgadillo Keenan, Clínica Veterinaria Sr. Dog's, Guadalajara, Jalisco, México. (24-Sep-2008).

Introducción La meta principal de este libro es proveer un texto de referencia de fácil lectura y accesible, el cual deseamos que pueda ser

rápidamente encontrado en el laboratorio y sea constantemente abierto y utilizado.

Algunas indicaciones útiles Los siguientes símbolos se encuentran dispersos a través de este texto para ayudarle a concentrarse en lo que realmente es

importante.

♣ Esta es una característica de rutina del sujeto en discusión. Hemos intentado resumirlo.

♠ Esta es una característica importante. Debe usted recordar esto.

♥ Algo serio puede suceder si usted no recuerda esto.

Reclutamiento del propietario ♣ Se puede reclutar a los propietarios para enlistar a su(s) mascota(s) a un programa de donador de sangre en una gran

variedad de maneras. Estas incluyen:

Poniendo anuncios en el recibidor de las clínicas veterinarias

Anunciando en el periódico

Anunciando en las ferias o eventos locales

Poniendo anuncios en el banco de sangre de humanos local

Mencionando la necesidad de donadores de sangre a los clientes

Anunciando en las asociaciones caninas y felinas

Reclutando perros policía

♣ Puede ser necesario proveer incentivos a los propietarios por tener a su(s) mascota(s) en el programa de donadores de

sangre. Esto puede incluir:

Descuentos o vacunas gratuitas

Descuentos o tratamientos preventivos contra pulgas gratuitos

Descuentos o tratamientos preventivos gratuitos contra gusano del corazón

Crédito monetario en cuotas hospitalarias en las que han incurrido

Descuento o paquete de alimento para mascotas gratis por cada donación de sangre

Camisetas gratuitas para el propietario, correas o collares con el logotipo de la clínica que puede funcionar como publicidad,

así como incentivo para el programa

♣ Las fotografías de los donadores de sangre pueden colocarse en el recibidor de la clínica veterinaria para servir como

publicidad para propietarios que pueden ser prospectos así como un reconocimiento de los donadores de sangre enlistados

actualmente en el programa.

♣ La buena comunicación entre el propietario y el practicante es crítica para el éxito del programa de donador de sangre. Es

muy importante especificar al propietario exactamente que es lo que se espera del propietario y el donante.

♣ Esta información debe ser proporcionada al propietario al crear un acuerdo por escrito o un tríptico de" Preguntas

frecuentes". Algunos puntos que se deben incluir son:

Las fechas y horas de la recolección rutinaria de sangre

El volumen total de donación de sangre

La frecuencia de la donación de sangre

Cuantas veces por año se espera que el donante done su sangre

Si se espera que el donante esté disponible para donaciones sanguíneas de emergencia

El propietario debe ser informado de que se rasurará una zona pequeña en el cuello del donante para ser usada como sitio de

venopunción

♣ Es aconsejable especificar las cuotas que cubrirá el lugar donde se recolectará la sangre, y que cuotas se le cobrarán al

cliente, incluyendo las provisiones para la investigación de hallazgos anormales en el examen físico o complicaciones por la

flebotomía.

Atributos de propietarios y donantes Atributos del propietario ♣ Es importante seleccionar a los propietarios que estén interesados en el programa de donación de sangre y que entienden

que la participación de su mascota en el programa de verdad salva vidas. Los propietarios conscientes serán de ayuda en el

monitoreo del estado de salud general del donador para que así ni el donante de sangre ni la fuente de sangre se perjudiquen

en ninguna manera.

Atributos del donante ♥ Los atributos positivos del donante pueden hacer que todo el proceso de la recolección de sangre sea más fácil para todos

los involucrados. Los donantes potenciales no deben morder o resistirse a la venopunción o sujeción. Los donadores de

sangre deben tener buena disposición y buena salud.

Atributos físicos

Donadores de sangre caninos

♣ Los donadores de sangre caninos deben pesar al menos 50 libras para que se puedan usar bolsas de recolección de

sangre de uso humano (capacidad de 450 ml). Puede donarse un máximo de 22 ml de sangre /kg cada 21 a 28 días; sin

embargo, será preferible para el propietario una donación cada 3 a 4 meses.

♣ Para facilitar la recolección de sangre, los donantes deben poseer venas yugulares de fácil acceso; deben tener la mínima

cantidad de arrugas en el cuello o no ser de piel gruesa.

♣ El donante debe ser macho o hembra ovariohisterectomizada que nunca ha parido.

♣ Deben de carecer de historia de transfusiones sanguíneas previas.

♥ Adherido a los dos criterios anteriores se deberán eliminar los donantes que han estado expuestos a grupos sanguíneos

extraños y potencialmente puedan haber desarrollado anticuerpos que puedan interferir con las pruebas de compatibilidad.

♣ Los donantes deben tener entre 1 y 8 años de edad.

♣ El estado de vacunación debe estar al corriente y el donante debe estar en tratamiento preventivo contra gusano del

corazón.

♣ Todos los factores de coagulación incluyendo los niveles del factor von Willebrand deben estar normales.

Donadores de sangre felinos

♣ Los donantes de sangre felinos deben pesar al menos 10 libras. Se puede extraer un máximo de 15 ml/kg cada 4

semanas; sin embargo, será preferible para el propietario una donación cada 3 a 4 meses.

♣ Aunque los donantes de sangre felinos preferentemente deberán sedarse para la flebotomía, deberán ser elegidos

aquellos con buena disposición.

♣ Es deseable una yugular fácilmente palpable. Un cuello y torso largos pueden contribuir a facilitar la flebotomía, al proveer

un sitio de flebotomía plano, suave.

♣ El donante debe ser macho o hembra ovariohisterectomizada que nunca ha parido.

♣ Debe de carecer de historia de transfusiones sanguíneas previas.

♠ Adherido a los dos criterios anteriores se eliminarán los donantes que han sido expuestos a grupos sanguíneos extraños y

que potencialmente puedan haber desarrollado anticuerpos que puedan interferir con pruebas de compatibilidad.

♣ Los donantes deben tener entre 1 y 8 años.

♣ Para minimizar la exposición a enfermedades infecciosas felinas, los donantes de sangre felinos deben ser gatos que

habiten estrictamente dentro de la casa, y que no tengan ninguna exposición a los gatos del exterior.

♣ Todos los niveles de factores de coagulación deben estar normales.

Evaluación de laboratorio

♣ En adición a estas características físicas, se deben realizar varias pruebas de laboratorio para asegurar el estado de salud

del donador y para asegurar la inocuidad del consorcio de donación de sangre.

♣ Para perros, debe realizarse un hemograma completo y perfil bioquímico. Se recomienda hacer análisis de laboratorio para

brucelosis, enfermedad de Lyme, fiebre moteada de las montañas rocallosas, dirofilariasis y ehrlichiosis. Pueden ser

requeridas pruebas de laboratorio adicionales para evaluar el estado de salud del donador, incluyendo análisis de laboratorio

para evaluar cualquier enfermedad endémica de la localización geográfica.

♣ Para gatos, debe realizarse un hemograma completo y perfil bioquímico. Se recomiendan análisis de laboratorio para el

virus de leucemia felina, virus de inmunodeficiencia felina, dirofilariasis y hemobartonelosis. Así como con los perros, pueden

requerirse pruebas adicionales de laboratorio para evaluar el estado de salud del donador incluyendo análisis para evaluar

cualquier enfermedad endémica de la localización geográfica.

♠ Un atributo adicional a considerar del donador es el tipo sanguíneo del mismo donador. A continuación una breve discusión

de los tipos sanguíneos caninos y felinos en relación a la selección del donador.

Caninos

♣ Se han descrito once grupos sanguíneos (Tabla 1-1). Más de un grupo sanguíneo puede estar presente en cualquier

donador. Los Antígenos Eritrocitarios Caninos (DEA, por sus siglas en inglés- Dog Erithrocyte Antigen) 1.1, 1.2 y 7 son los

más importantes cuando se consideran transfusiones de sangre caninas. Los DEA 1.1 y 1.2 son altamente antigénicos y los

perros previamente sensibilizados pueden tener reacciones hemolíticas a la transfusión cuando son transfundidos con sangre

DEA 1.1 o 1.2. Si se da una transfusión de un tipo sanguíneo al azar, existe un 25% de posibilidad de que se done sangre

DEA 1.1 o 1.2 positivo a un perro 1.1 o 1.2 negativo. Las transfusiones subsecuentes del mismo tipo sanguíneo ofensivo

resultarán en una reacción mayor a la transfusión en al menos 15% de estos receptores. El DEA 7 es moderadamente

antigénico para los receptores DEA 7 negativos. Este grupo sanguíneo puede causar reacciones a la transfusión de leves a

moderadas y puede disminuir la sobrevida de los glóbulos rojos cuando se administra a perros DEA 7 negativos previamente

sensibilizados. Los perros que son DEA 1.1, 1.2 o 7 negativos son considerados donadores universales.

♣ Es importante entender la importancia de estos tipos sanguíneos cuando se seleccionan los donadores de sangre caninos

para un programa de donadores de sangre. La meta general del programa de donadores de sangre debe considerarse. Si se

espera que la mayoría de las transfusiones sean de ocurrencia única en la vida, puede ser apropiada la inclusión de todos los

tipos sanguíneos caninos. Esto puede asegurar un gran número de donadores para el programa. Si se considera que la

mayoría de los receptores necesitarán transfusiones múltiples, puede ser apropiado incluir sólo donadores universales al

programa para prohibir el desarrollo de anticuerpos no esperados.

Tabla 1-1. Frecuencias de los grupos sanguíneos can inos

Sistema DEA Incidencia Información adicional

1.1 45% en E.U.A

1.2 20% en E.U.A.

1.3 No evaluado en

E.U.A.

A

nulo

Antisuero isoinmune producido para uno de los antígenos A pueden tener reacción cruzada

con otros antígenos

Si un perro DEA 1.1, 1.2, 1.3 negativo es inmunizado con células 1.3 positivas, el antisuero

aglutina fuertemente y hemoliza las células 1.1 y 1.2 positivas y reacciona pobremente con

células 1.3 positivas.

3 6% en E.U.A.

B

nulo

Ocurrencia natural anti-DEA 3 ocurre en 20% de los perros DEA 3 negativos en E.U.A.

La transfusión de GR DEA3 positivos a perro sensibilizado = pérdida de los GR

transfundidos dentro de los 5 días y reacción aguda severa a la transfusión

4 98% en E.U.A.

C

nulo

No se ha reportado ocurrencia anti-DEA 4 de forma natural

Los perros DEA 4 negativos producen anticuerpos cuando se sensibilizan con glóbulos

rojos DEA 4 positivos, pero no hay pérdida de GR o hemólisis al ser transfundidos

5

5

nulo

Ocurrencia natural anti-DEA 5 en ≈10% de los perros DEA 5 negativos en E.U.A.

La transfusión de glóbulos rojos DEA 5 positivos a un perro sensibilizado= pérdida de los

glóbulos rojos transfundidos dentro de 3 días

Tabla 1-1. Frecuencias de los grupos sanguíneos can inos

Sistema DEA Incidencia Información adicional

6 ≈ 100% en

E.U.A. 6

nulo

No se ha reportado ocurrencia anti-DEA 6

El suero tipificador ya no existe

7

(Tr) 40 - 54%

0 Tr

nulo

Ocurrencia natural anti-DEA 7 en 20 - 50% de los perros DEA 7 negativos

Si es transfundida a perro sensibilizado = pérdida de glóbulos rojos transfundidos dentro de

3 días

El antígeno Tr no es un antígeno de membrana del GR, es producido y secretado en

plasma y absorbido al GR

8 8 40 - 45% El suero tipificador ya no existe

Otra información sobre el sistema A:

El anti-DEA 1.1 es una hemolisina potente in vivo e in vitro.

La ocurrencia natural anti-DEA 1.1 y 1.2 no ha sido documentada, así que las reacciones a una primera transfusión no deberían

ocurrir

Una vez sensibilizado, los anti-DEA 1.1 y 1.2 pueden causar una reacción severa aguda a la transfusión con remoción de los

glóbulos rojos transfundidos dentro de 12 horas

La transfusión de plasma con anti-DEA 1.1 a un receptor DEA 1.1 positivo causa una reacción hemolítica a la transfusión

Un receptor DEA 1.2 positivo puede producir anticuerpos fuertes anti-DEA 1.1 cuando ha sido expuesto a glóbulos rojos DEA 1.1

positivos. Puede ocurrir reacción inmediata a la transfusión

Condensado de: Feldman BF, Zinkl JG, Jain NC. Schalm’s Veterinary Hematology, 5th Ed. Philadelphia: Lippincott Williams and

Wilkins, 2000.

Felinos

♣ Se han descrito tres grupos sanguíneos en felinos (Tabla 1-2). Son el A, B y AB. El tipo sanguíneo A es el grupo sanguíneo

más frecuente, el tipo B es mucho menos frecuente y el tipo AB es extremadamente raro. La frecuencia del tipo sanguíneo

felino difiere en la localización geográfica, así como la frecuencia del tipo A y B en razas puras. Es importante resaltar que los

gatos no necesitan estar previamente sensibilizados por embarazo o transfusiones previas para tener serias complicaciones

en la primera transfusión. A diferencia de los perros, los gatos poseen ocurrencia natural de anticuerpos contra el antígeno A

o B ausente de sus propios glóbulos rojos. Estos anticuerpos pueden ser responsables de las reacciones a la transfusión y la

isoeritrolisis neonatal. Con el tipo sanguíneo B, 70% de los gatos tienen una ocurrencia natural de anticuerpos A que causan

una disminución de la sobrevida de los glóbulos rojos y hemólisis aguda cuando son transfundidos a receptores tipo A. Con el

tipo A, 35% de los gatos tienen ocurrencia natural de anticuerpos B, pero el título es generalmente muy bajo para causar

reacciones significativas a la transfusión. El tipo AB no tiene ocurrencia natural de aloanticuerpos.

♣ Cuando se seleccionan donadores de sangre felinos para un programa de donadores de sangre, el tipo sanguíneo es

extremadamente importante. El tipo sanguíneo de la población receptora debe ser examinada, y los gatos deben ser

aceptados al programa de acuerdo a lo anterior.

Tabla 1-2. Frecuencia de grupos sanguíneos felinos

Sistema DEA Incidencia Información Adicional Incidenc ia Información Adicional

A 98.5% 97.5% 99.4% 99.7% 94.8%

B 1.5% 2.5% 0.4% 0.3% 4.7%

AB 0 0 0.2% 0.0% 0.5%

Condensado de: Feldman BF, Zinkl JG, Jain NC. Schalm’s Veterinary Hematology, 5th Ed. Philadelphia: Lippincott

Williams and Wilkins, 2000.

Selección del donador ♣ El criterio para la selección de donadores sanguíneos resaltado anteriormente debe ser mejor evaluado en una visita a la

clínica separada o distinta de la visita para la donación sanguínea programada. Esto debe proveer al veterinario de tiempo

para evaluar los hallazgos del examen físico y resultados de pruebas de laboratorio en vista de las metas generales del

programa de donador de sangre. Una vez que un donador es aceptado dentro del programa de donador de sangre, se debe

repetir este proceso anualmente para mantener la integridad del donador y del producto. No es necesario verificar los tipos

sanguíneos de los donadores anualmente.

Mantener contacto con los donadores ♣ Una vez que los donadores han calificado dentro del programa de donador de sangre, es necesario mantener información

con relación a los donadores individuales en un formato de fácil acceso. Esto debe de realizarse creando una base de datos

que contenga una variedad de información del donador incluyendo el nombre del propietario, números telefónicos de trabajo y

casa del propietario, número de expediente médico del donador, y fecha de la última flebotomía. Al realizar esta tarea, los

donadores pueden ser monitoreados de su estado vacunal, último chequeo anual y última fecha de flebotomía. Esto puede

ser una herramienta muy valiosa cuando se programan los donadores para flebotomía.

Programación de donadores para flebotomía ♣ Se debe contactar a los propietarios para programar la flebotomía con anticipación a la fecha deseada para la recolección

de la sangre. Puede ser conveniente fijar un día y hora consistente (por ej. una vez cada 8 semanas en Lunes a las 8:00 a.m.)

para la flebotomía de rutina, para que los propietarios recuerden su obligación hacia el programa de donador de sangre. Sin

embargo, si la flebotomía se programa con más de una semana de anticipación, puede ser necesario un mensaje de

recordatorio.

♣ Cuando se contacte a los propietarios para programar una donación, se debe preguntar acerca de cualquier cambio en el

estado de salud del donador desde la última visita a la oficina del Doctor o donación. Es útil tener un cuestionario pre-

flebotomía para complementar esta tarea. Este cuestionario debe incluir cualquier pregunta que pueda concernir a cualquier

cambio en el estado de salud tales como pérdida de peso reciente, vómitos o diarrea agudos, o cambios en el

comportamiento. Este cuestionario puede ser completado cuando se contacte al propietario para programar la flebotomía.

Esto no elimina la necesidad de realizar un examen físico previo a la donación de sangre.

Necesidades básicas de equipo para la recolección, procesamiento y almacenamiento de sangre Bolsas de recolección de sangre ♣ Las flebotomías caninas deben realizarse utilizando bolsas de recolección y almacenamiento de sangre para uso humano.

Estas están disponibles a través de los fabricantes enlistados en el Apéndice 1.

♣ Las flebotomías felinas pueden realizarse utilizando una bolsa de recolección y almacenamiento de sangre especializada

enlistada en el Apéndice 1. (Las bolsas de recolección y almacenamiento de sangre de uso humano NO deben utilizarse para

gatos). Adicionalmente, la sangre entera puede ser recolectada para transfusión inmediata utilizando una jeringa con

anticoagulante; un procesamiento y almacenamiento limitado ocurre utilizando este método de recolección de sangre.

Para la recolección de sangre canina ♣ Una cámara al vacío (Figura 1-1) adherida a una fuente al vacío puede proveer un vacío ligero el cual facilita el flujo de

sangre hacia dentro de la bolsa de recolección.

♣ Un enjugador de tubo (Fenwal) es usado para sacar la sangre de la línea de flebotomía (Figura 1-2).

♣ Un sellador de mano (Fenwal) utilizado en conjunto con clips metálicos proveerá un método para sellar las líneas de la

bolsa de recolección de sangre. El sellador de mano y los clips selladores de aluminio de Terumo realizan ambas funciones

(Figura 1-3). Los selladores con calor eléctricos (Figura 1-4) están disponibles con ambos fabricantes.

Figura 1-1. Cámara de vacío.

Figura 1-2. Enjugador de tubo (foto usada con permiso de Baxter Healthcare Corporation).

Figura 1-3. Sellador de mano (foto usada con permiso de Baxter Healthcare Corporation).

Figura 1-4. Sellador Hematron Rite (foto usada con permiso de Baxter Healthcare Corporation). Para la separación de la sangre entera ♣ Para poder separar la sangre entera en glóbulos rojos y plasma fresco congelado, se necesita una centrífuga refrigerada.

El rango de temperatura necesaria es de 1-6°C. Una c abeza rotatoria con recipientes que se balancean o columpian puede

proveer una recuperación máxima de plasma.

♣ Se necesita un extractor de plasma (Fenwal, Terumo) para remover una cantidad apropiada plasma de los glóbulos rojos

(Figura 1-5).

♣ Se necesitará una báscula para el pesaje de los productos (Figura 1-6).

Figura 1-5. Extractor de plasma (foto usada con permiso de Baxter Healthcare Corporation)

Figura 1-6. Báscula para pesaje de productos sanguíneos (imagen proporcionada por y utilizada con permiso de Fisher Scientific).

Almacenamiento de sangre ♣ Se necesita un refrigerador para almacenar productos de glóbulos rojos. El rango de temperatura debe estar entre 1 - 6°C,

con un método de monitoreo de la temperatura.

♣ Se necesita un congelador para almacenar productos de plasma. Estos artículos deben almacenarse a -18°C o menos. Un

congelador dedicado solo al almacenamiento de plasma es lo óptimo. Debe de existir algún tipo de monitoreo de temperatura,

ya sea humano o electrónico, para asegurar que el producto esté siendo almacenado a una temperatura constante.

♥ No compre un congelador que tenga ciclo de descongelación, ya que este ciclo de descongelación puede templar o

calentar el producto y causar una degradación no esperada.

Recolección, procesamiento, almacenamiento y envío B.F. Feldman1 and C.A. Sink2 1Dept of Biomedical Sciences & Pathobiology, VA-MD - Regional College of Veterinary Medicine, Blacksburg, VA, USA

(Deceased).2Laboratory Diagnostic Services, VA-MD - Regional College of Veterinary Medicine, Blacksburg, VA, USA.

Traducido por: L. Delgadillo Keenan, Clínica Veterinaria Sr. Dog's, Guadalajara, Jalisco, México. (9-Mar-2009).

Algunas indicaciones importantes: Los siguientes símbolos se encuentran dispersos en el texto para ayudarle a concentrarse en lo que realmente

es importante.

♣ Esta es una característica de rutina del sujeto en discusión. Hemos intentado resumirlos.

♠ Esta es una característica importante. Usted debe recordar esto.

♥ Algo serio puede ocurrir si usted no recuerda esto.

Anticoagulantes y agentes conservadores ♣ Las siguientes preguntas deben ser respondidas antes de la recolección de sangre y deberán ayudar en la selección del

anticoagulante-conservador apropiado y el sistema de recolección de sangre que mejor se adecué a la necesidad del

producto.

¿Qué producto sanguíneo se necesita?

¿Se utilizará el producto para transfusión inmediata?

¿Se realizarán componentes?

¿Se almacenará la sangre?

Anticoagulantes-conservadores ♣ Obviamente, un anticoagulante debe prevenir la coagulación de la unidad de sangre, por lo tanto mantener la unidad en un

estado líquido transfundible. Sin embargo, el anticoagulante debe además asegurar que el producto sanguíneo mantenga su

integridad para que así el producto pueda proveer un beneficio óptimo al paciente. Los dispositivos de recolección de sangre

modernos utilizan una solución líquida que contiene ambos, anticoagulante y conservadores. El anticoagulante es citrato; los

conservadores son soluciones fosfato-dextrosa. Estas soluciones mejoran la preservación de los eritrocitos y previenen los

cambios nocivos del producto manteniendo el pH y promoviendo la producción de adenosina trifosfato (ATP) para mantener

la viabilidad de los eritrocitos. El citrato-fosfato-dextrosa (CPD) y el citrato-fosfato-doble-dextrosa (CP2D) contienen fosfato y

dextrosa. El citrato-fosfato-dextrosa-adenina (CPDA1) tiene adicionada la adenina para mejorar la sobrevida de los eritrocitos.

(Tabla 2-1).

♣ Esta combinación de anticoagulante y conservadores, provee un ambiente seguro para almacenar productos sanguíneos:

los productos de eritrocitos deben ser almacenados entre 1 - 6 °C, los productos de plasma deben almac enarse a -18°C o

menos. Las plaquetas deben ser almacenadas entre 22 - 25 °C.

♣ Las soluciones anticoagulantes-preservativas no inhiben el crecimiento de contaminantes microbianos. La refrigeración de

eritrocitos y congelamiento de los productos de plasma asisten en la inhibición del crecimiento microbiano dentro del producto

sanguíneo.

Tabla 2-1. Anticoagulantes-conservadores/aditivos p ara vida en estante

Anticoagulante Contiene Vida en estante de

eritrocitos a 1 - 6°C

Tabla 2-1. Anticoagulantes-conservadores/aditivos p ara vida en estante

Anticoagulante Contiene Vida en estante de

eritrocitos a 1 - 6°C

Heparina Heparina 24 horas

Anticoagulante

conservador Contiene

Vida en estante de

eritrocitos a 1 - 6°C

ACD Anticoagulante-citrato-dextrosa 21 días

CPD Citrato-fosfato-dextrosa 21 días

CP2D Citrato-fosfato-doble-dextrosa 21 días

CPDA-1 Citrato-fosfato-dextrosa-adenina 35 días

Aditivo Contiene Vida en estante de

eritrocitos a 1 - 6°C

AS-1 (Adsol®) Dextrosa, adenina, manitol, cloruro de sodio 42 días

AS-3 (Nutricel®) Dextrosa, adenina, fosfato de sodio monobásico, cloruro de

sodio citrato de sodio, ácido cítrico 42 días

AS-5 (Optisol®) Dextrosa, adenina, manitol, cloruro de sodio 42 días

Aditivos

♣ Al igual que los conservadores, los aditivos son una combinación de químicos utilizados para extender la vida de los

eritrocitos. Existen tres soluciones aditivas comercialmente disponibles: Adsol ® (AS-1, Fenwal), Nutricel ® (AS-3,

Haemonetics) y Optisol ® (AS-5, Terumo). Los componentes de estos aditivos varían según el fabricante, pero todos

contienen dextrosa, adenina, y cloruro de sodio. Otros componentes que pueden ir incluidos son fosfato de sodio, manitol,

citrato de sodio, y ácido cítrico.

♣ Los aditivos son utilizados adicionalmente a los anticoagulantes y conservadores. El aditivo sirve para incrementar la

sobrevida del eritrocito por un período de tiempo mayor que un anticoagulante-conservador solo. El aditivo permite la

remoción de cantidades máximas de plasma de la unidad de eritrocitos. Ya que la solución aditiva se adiciona directamente a

los eritrocitos, el hematocrito de la unidad de eritrocitos se disminuye, y por lo tanto crea una unidad de sangre menos viscosa,

más transfundible. El aditivo debe adicionarse a los eritrocitos dentro de las 72 horas después de la recolección.

Vida en estante ♣ Recuerde que una unidad de sangre es un biosistema y su muerte es innata. El producto almacenado o "en banco" tiene

una "vida en estante" específica. En general, la "vida en estante" se basa en consideraciones funcionales en lo que respecta

a los componentes de la sangre.

♠ La vida en estante de un producto sanguíneo es el máximo tiempo de almacenamiento permitido.

♣ La duración del tiempo de almacenamiento también se ve afectada por la naturaleza del dispositivo de recolección de la

sangre utilizado: si el dispositivo es "cerrado" o "abierto".

♣ Un sistema de recolección cerrado no le permite a sus componentes estar expuestos al aire o a los elementos externos

durante la recolección, el procesamiento o el almacenaje.

♣ Los sistemas cerrados tienen agujas adheridas de manera integral y bolsas satélite. El fabricante coloca anticoagulante-

conservadores y aditivos al sistema; estos sistemas están disponibles comercialmente. El uso de un sistema cerrado

promueve un tiempo de estante más largo, el cual es dependiente del tipo de anticoagulante-conservador-aditivo utilizado.

♣ Un sistema abierto expone sus componentes al aire o elementos externos en algún punto durante la recolección, el

procesamiento o el almacenamiento. El uso de un sistema abierto demanda que el producto sanguíneo sea usado dentro de

4 horas si el producto se ha almacenado entre 22 - 25 °C o 24 horas si se almacena entre 1 - 6 °C. Los sistemas abiertos

incluyen jeringas y bolsas o botellas sin las agujas de recolección o bolsas satélites adheridas de manera integral.

Sistemas de recolección de sangre Sistemas de recolección de sangre canina

Sistemas abiertos

♣ Como se ha mencionado previamente, los sistemas abiertos de recolección de sangre le permiten a la sangre a estar

expuesta al aire o los elementos externos en algún momento de durante la recolección, el procesamiento o almacenamiento.

Esto obliga que el producto sea usado dentro de 4 horas si se almacena a temperatura ambiente o de 24 horas si se

almacena entre 1 - 6 °C. Aunque hay muchos anticoag ulantes disponibles, algunos se ajustan mejor a la recolección de

sangre y a la transfusión que otros. La heparina y el citrato de sodio son dos de los anticoagulantes frecuentemente usados

en sistemas abiertos.

♣ La heparina actúa como un anticoagulante acelerando la acción de la antitrombina III, neutralizando la trombina, y

previniendo la formación de fibrina a partir del fibrinógeno. La heparina además inactiva las plaquetas, haciendo prohibitivo su

uso para la recolección de sangre para tratamiento de alteraciones de la coagulación. La heparina no provee nutrientes para

facilitar la sobrevida de los eritrocitos.

♣ El citrato de sodio actúa como anticoagulante quelando el calcio. Cuando se utiliza solo, el citrato de sodio no es apropiado

para la recolección de sangre para transfusión debido a su pH. El citrato usado en conjunto con otros químicos es el

anticoagulante de elección para la recolección de sangre para transfusión porque tiene baja toxicidad y es fácilmente

metabolizado. Las botellas de vidrio que contienen citrato dextrosa citrato ácido dextrosa, ACD) han sido utilizadas en el

campo veterinario durante muchos años. Ya que las botellas son un sistema abierto, este producto deberá ser utilizado dentro

de las 24 horas después de la recolección.

♥ El vidrio inactiva las plaquetas, el factor de coagulación XII y el factor VIII. El uso de otros sistemas de recolección puede

proveer un producto sanguíneo superior.

Sistemas cerrados

♣ Un sistema de recolección de sangre cerrado no le permite a la sangre estar expuesta al aire o elementos externos durante

la recolección, el procesamiento o el almacenamiento. Los sistemas cerrados tienen agujas y bolsas satélite integralmente

adheridas. En los sistemas de recolección de sangre humana (utilizada para perros), el fabricante coloca anticoagulantes-

conservadores y aditivos en el sistema (enlistados en el Apéndice 1). En el sistema de recolección de sangre felina el

anticoagulante debe ser agregado (enlistado en el Apéndice 1).

♣ Los anticoagulantes-conservadores incluyen ACD. CPD, CPDA-1, y CP2D. El CPD y CPDA-1 son los más ampliamente

utilizados en sistemas cerrados.

♣ El ACD, CPD o CP2D usados en un sistema cerrado permiten la vida de estante de los eritrocitos por 21 días cuando se

almacena a 1 - 6 °C, CPDA-1 permite la vida en estante de los eritrocitos por hasta 35 días cuando se almacena a 1 - 6 °C.

♠ Recuerde que las bolsas que se compran comercialmente tienen una fecha de caducidad independiente de la recolección

del producto. La fecha de caducidad garantiza la actividad del anticoagulante-conservador y la esterilidad de la bolsa.

Aditivos

♣ El Adsol® (AS-1 Fenwal), Nutricel® (AS-3, Haemonetics), y Optisol ® (AS-5, Terumo) son tres aditivos comercialmente

disponibles. Estos aditivos permiten la vida en estante de los eritrocitos de 42 días cuando se almacena a 1 - 6 °C. En los

sistemas de recolección de sangre humana, estos aditivos son utilizados en conjunto con el anticoagulante CPD.

Sistemas de recolección de sangre felina

Sistemas abiertos

♣ Recuerde que el volumen de sangre extraída de un donante de sangre felino es considerablemente menor que el de su

contraparte canina. Una donación felina típica es de aproximadamente 50 ml, haciendo de las jeringas de 60 ml un artículo

para recolección de sangre de gatos muy popular. Ya que este en un sistema abierto, la sangre almacenada a 1 - 6 °C debe

ser usada dentro de las 24 horas después de la recolección.

♣ El anticoagulante de elección es el citrato fosfato dextrosa adenina. La cantidad de sangre tomada con cualquier

anticoagulante a base de citrato es crítica. Muy poca sangre con mucho citrato libre está contraindicada para su uso en gatos.

El citrato no consumido en la anticoagulación es un quelante notable del calcio del paciente, tanto que puede ocurrir una

hipocalcemia severa, frecuentemente tardía. El anticoagulante CPDA es por mucho superior a cualquier otro anticoagulante

comúnmente usado ya que la viabilidad de los eritrocitos se mantiene y las proteínas plasmáticas permanecen funcionales.

Este anticoagulante puede ser comprado de un banco de sangre veterinario comercial en viales multidosis.

Sistemas cerrados

♣ Los sistemas de recolección usados para la recolección de sangre canina no son apropiados para la recolección de sangre

felina, ya que el volumen de anticoagulante en la bolsa de recolección de sangre es el necesario para una extracción de 450

ml de sangre. Aunque la cantidad de anticoagulante puede reducirse para realizar una extracción de un volumen menor de

sangre, la aguja de recolección calibre 16 integrada es muy grande para la vena yugular utilizada para la recolección de

sangre. Por esta razón, las bolsas de sangre utilizadas para la recolección de sangre canina no son usadas con gatos.

♣ Un sistema de recolección de sangre especializada para gatos (Figura 2-1) esta disponible través de Animal Blood Bank

(Apéndice 1).

Figura 2-1. Equipo de recolección para animales pequeños con doble jeringa Revisión del producto sanguíneo Productos sanguíneos ♣ Ya que las propiedades de los productos sanguíneos son similares en perros y gatos, esta discusión se limita a los

sistemas cerrados y extracciones de sangre de 450 ml.

♠ Recuerde - los productos recolectados en sistemas abiertos deben ser transfundidos dentro de las 24 horas de la

recolección. Los sistemas cerrados que han sido abiertos deben ser usados dentro de las 24 horas después de la apertura.

♣ La siguiente información se resume en el Tabla 2-2.

Tabla 2-2. Revisión de los productos sanguíneos

Nombre del producto Contiene Almacenaje Caducidad

Sangre entera fresca Todos los elementos sanguíneos: eritrocitos,

plaquetas, factores de coagulación 1 - 6 °C 24 horas

Sangre entera, sangre

entera almacenada

Eritrocitos, proteínas plasmáticas, factores de

coagulación estables 1 - 6 °C

ACD, CPD y CP2D: 21 días

CPDA-1: 35 días

Eritrocitos, paquete

celular Eritrocitos 1 - 6 °C

ACD, CPD y CP2D: 21 días,

CPDA-1: 35 días con aditivo:

42 días

Plasma Fresco Todos los factores de coagulación, proteínas -18 °C o año desde la fecha de

Tabla 2-2. Revisión de los productos sanguíneos

Nombre del producto Contiene Almacenaje Caducidad

Congelado plasmáticas menos recolección

Plasma Factores dependientes de la vitamina K, albúmina,

inmunoglobulinas

-18 °C o

menos

5 años desde la fecha de

recolección

Crioprecipitado de

factor antihemofílico

Fibrinógeno, fibronectina, factor von Willebrand,

factor VIII, factor XIII

-18 °C o

menos

1 año desde la fecha de

recolección

Plasma pobre

crioprecipitado

Fibrinógeno, fibronectina, factores XI, XIII y VIII,

factor von Willebrand, factores dependientes de

vitamina K, albúmina, globulinas

-18 °C o

menos

1 año desde la fecha de

recolección

Plasma rico en

plaquetas

Plaquetas, todos los factores de coagulación,

proteínas plasmáticas 22 - 25 °C Transfundir inmediatamente

Sangre entera y productos de eritrocitos

Sangre entera fresca

♣ La sangre entera fresca provee una expansión de volumen sanguíneo y un incremento de la capacidad de transporte de

oxígeno al receptor. También aporta plaquetas viables y factores de coagulación. Frecuentemente es utilizada en pacientes

con hemorragias activas con una pérdida aguda de volumen sanguíneo de más del 25%.

♣ A una unidad de sangre entera se le llama sangre entera fresca por un período de tiempo de 24 horas después de la

flebotomía.

♣ La sangre entera fresca contiene todos los elementos de la sangre: eritrocitos, plaquetas, factores de coagulación y

proteínas plasmáticas.

♣ La sangre entera fresca se almacena a 1 - 6 °C.

♣ El ACD, CPD, CP2D, y CPDA-1 son anticoagulantes-conservadores apropiados. No se recomienda el uso de heparina.

♣ Los aditivos de eritrocitos NO se mezclan con la sangre entera.

♣ Debido a su limitada viabilidad, la sangre entera fresca no está generalmente disponible a menos que sea recolectada

inmediatamente previo a que se necesite. Debido a que la obtención de un donador de sangre de emergencia puede no ser

práctico, la transfusión de sangre entera fresca puede no ser factible. En cambio, la sangre entera fresca generalmente es

usada para la preparación de componentes.

Sangre entera y sangre entera almacenada

♣ La sangre entera provee expansión de volumen, incremento de la capacidad de transporte de oxígeno, fuente de proteínas,

y factores de coagulación estables.

♣ Una vez que la sangre entera se almacena a 1 - 6 °C por un período mayor a 24 horas, se le denomina sangre entera

almacenada.

♣ La sangre entera contiene eritrocitos y proteínas plasmáticas, pero las plaquetas y los factores de coagulación han

disminuido. Se conservan los factores de coagulación estables II, VII, IX, X, y fibrinógeno.

♣ Los anticoagulantes-conservadores ACD, CPD y CP2D mantienen este producto por 21 días. El uso de CPDA-1 mantiene

la sangre entera por 35 días.

♣ Los aditivos de eritrocitos NO se mezclan con la sangre entera.

♣ El almacenamiento de la sangre entera es una opción para extender el uso de una unidad de sangre entera fresca una vez

que su vida en estante ha excedido las 24 horas.

Extracción corta

♣ Las bolsas de sangre que son más disponibles comercialmente están hechas para 450 ml + 45 ml de volumen de sangre.

Estas bolsas contienen 63 ml de anticoagulantes-conservadores para tener una relación final de 10:1 de sangre a

anticoagulante.

♣ Si se extrae de 300 - 404 ml de sangre dentro de una bolsa hecha para 450ml de sangre extraída, la unidad debe

mantenerse como sangre entera; no se deben hacer componentes de esta unidad. La unidad puede ser utilizada para

transfusión, pero debe etiquetarse como una unidad de volumen baja. Las unidades subllenadas pueden causar intoxicación

con citrato al ser transfundidas.

♣ Si se necesita una recolección de sangre menor a 300 ml, la cantidad de anticoagulante-conservador deberá ser reducido

asépticamente previo a la recolección de sangre.

Eritrocitos y paquete celular

♣ Los Eritrocitos asisten en la restauración de la capacidad de transporte de oxígeno al receptor con una menor expansión

del volumen sanguíneo en comparación con la sangre entera. Los eritrocitos son utilizados para tratar la anemia en pacientes

normovolémicos o la anemia intratable farmacológicamente.

♣ Los eritrocitos se preparan de una unidad de sangre entera fresca o de sangre entera. Para preparar este producto, se

extrae el plasma de la unidad de sangre entera y las células remanentes en la bolsa son llamadas eritrocitos. Este

procedimiento puede ser realizado por centrifugación, o se les permite a los eritrocitos sedimentarse al fondo de la unidad de

sangre entera sin movimiento. El ACD, CPD, y CP2D le proveen una vida en estante de 21 días a 1 - 6 °C. El CPDA-1 le

provee 35 días de vida en estante.

♣ Los aditivos de eritrocitos pueden extender la vida de la unidad de eritrocitos a 42 días a 1 - 6 °C . Los aditivos de eritrocitos

deben ser mezclados con los eritrocitos dentro de las 72 horas de la flebotomía.

Productos de plasma

Plasma fresco congelado

♣ El plasma fresco congelado (PFC) contiene todos los factores de coagulación, incluyendo los factores obligados V y VIII.

Es una fuente de proteínas plasmáticas y expansor de volumen. El plasma fresco congelado es usado para el tratamiento de

pacientes con factores de coagulación inadecuados por cualquier razón. El plasma fresco congelado usado en conjunto con

eritrocitos provee la mayoría de los beneficios de la sangre entera fresca.

♣ El plasma fresco congelado se prepara a partir de una unidad de sangre entera fresca. El plasma se separa de los

eritrocitos por centrifugación y es removido. Entonces se congela por completo a -18 °C o menos. El con gelamiento completo

del plasma debe ocurrir dentro de las 8 horas de la flebotomía si el anticoagulante-conservador es CPD, CP2D, o CPDA-1. Si

se usa ACD, la separación y el congelamiento deben ocurrir dentro de 6 horas de la flebotomía. Una vez congelado, el

producto tiene una vida en estante de 1 año desde su fecha original de flebotomía.

Plasma

♣ El plasma es usado para tratar deficiencias de factores de coagulación estables. Este producto contiene factores

dependientes de la vitamina K, albúmina e inmunoglobulinas. Puede ser usado como un expansor del volumen, en toxicidad

por warfarinas/cumarinas y en parvovirosis canina.

♣ Este producto se obtiene a partir de extender la vida en estante de la unidad de plasma fresco congelado. Cuando la

unidad del plasma fresco congelado está almacenada a -18° C y ha excedido un año, se re-etiqueta como "Plasma". Esto se

realiza para indicar la pérdida de factores de coagulación que ocurre durante el almacenamiento de un año.

♣ El plasma tiene una vida en estante de 5 años desde la fecha de la flebotomía original. El plasma que no se ha separado

de los eritrocitos dentro de la 6 - 8 horas después de la flebotomía se etiqueta como "Plasma" (no PFC).

Factor antihemofílico crioprecipitado

♣ El Factor antihemofílico crioprecipitado (FAH, también conocido como "Crioprecipitado" o "Crio") es una fuente rica en FVW,

Factor VIII, Factor XIII, fibrinógeno, y fibronectina. Es útil en el tratamiento de la enfermedad de von Willebrand, Hemofilia A,

hipofibrinogenemia, coagulación intravascular diseminada, y septicemia.

♣ El crioprecipitado se hace a partir de una unidad de plasma fresco congelado. El PFC contiene proteínas plasmáticas de

alto peso molecular las cuales se precipitan con el frío. Cuando el PFC se descongela a 1 - 6 °C, el pr ecipitado resultante es

un FAH crioprecipitado. Después se remueve aproximadamente el 90% del crio plasma pobre, el FAH crioprecipitado es

recongelado y mantenido a -18 °C o menos. Su vida en estante es de un año desde la fecha de la flebotomía.

Plasma crioprecipitado pobre

♣ El Plasma crioprecipitado pobre (Crio plasma pobre) contiene muy pequeñas cantidades de fibrinógeno, fibronectina,

factores XI, XII, VIII y factor von Willebrand. No contiene factor V. El crio plasma pobre contiene los factores dependientes de

vitamina K, albúmina y globulinas. Es apropiado para el tratamiento de parvovirosis canina o toxicidad por

warfarinas/cumarinas.

♣ El crio plasma pobre es el plasma residual que queda después de hacer crio. Cuando se mantiene a -18 °C o menos, tiene

una vida en estante de un año desde la fecha original de la flebotomía.

Plasma rico en plaquetas y concentrados de plaquetas

♣ Las plaquetas detienen la hemorragia, ya que ellas son el primer elemento celular de la sangre periférica en reaccionar

cuando los vasos sanguíneos son dañados.

♣ El Plasma rico en plaquetas (PRP) es preparado por una centrifugación diferencial a partir de sangre entera fresca que ha

sido mantenida entre 22 - 25 °C.

♣ Para proveer plaquetas viables al receptor, el plasma rico en plaquetas debe transfundirse tan pronto sea preparado.

♣ Los Concentrados de plaquetas se preparan por centrifugación de plasma rico en plaquetas. Se remueve el exceso de

plasma y las plaquetas remanentes son viables por al menos 5 días de la fecha de la flebotomía cuando se almacena entre

22 - 25 °C. Para evitar la agregación plaquetaria y proveer un intercambio adecuado de oxígeno y dióxido de carbono, los

concentrados de palquetas deben almacenarse con una agitación suave y continua.

Sistemas de recolección de sangre y guías preproces amiento. Acerca de los sistemas de recolección de sangre ♣ Los sistemas de recolección de sangre están disponibles en una variedad de configuraciones. Están compuestos por la

bolsa primaria y las bolsas satélite (Figura 2-2).

Figura 2-2. Sistema de recolección de sangre (imagen bajo premiso de Baxter Healthcare Corporation).

♣ El volumen óptimo de extracción de sangre es dependiente del sistema de recolección de sangre utilizado. El volumen de

la extracción es determinado por el tamaño de la bolsa y la cantidad de anticoagulante contenido en la bolsa primaria.

♣ La aguja esta adherida a la bolsa primaria. La bolsa primaria contiene anticoagulante; la sangre fluirá directamente dentro

de la bolsa primaria durante la flebotomía. Otras bolsas pequeñas, las cuales están integralmente adheridas a la bolsa

primaria a través de puertos sellados, son las bolsas satélite. Puede haber una o más bolsas satélite dependiendo de la

configuración del sistema de recolección de sangre seleccionado.

♣ Las bolsas satélite destinadas para el almacenamiento de eritrocitos, plasma o plaquetas están etiquetadas como tal por el

fabricante.

Guías preprocesamiento ♠ Todos los productos sanguíneos deben ser etiquetados con la fecha de la flebotomía, el nombre del producto y la fecha de

caducidad. La información adicional tal como el grupo sanguíneo y el donador pueden ser de ayuda. Se deben usar

marcadores permanentes para las etiquetas para que esta información no se borre durante el almacenamiento, deshielo o

calentamiento del producto.

♣ Antes de iniciar el procesamiento, la aguja debe ser removida del sistema de recolección de sangre. Esto se logra al sellar

con calor (Hematron Dielectric Sealer, Baxter Healthcare, Fenwall Division) o con clips metálicos (Hand Sealer, Hand Sealer

Aluminum Clips, Baxter Healthcare, Fenwal Division).

♣ Una vez que la aguja es removida, la línea de flebotomía debe ser limpiada usando el stripper o limpiador de tubo (Donor

Tube Stripper, Bexter a Healthcare, Fenwal Division). Esto puede asegurar que la línea esta apropiadamente anticoagulada

(Figura 2-3). Esto es importanteporque esta línea ahora deberá ser separada en segmentos (Figura 2-4) que serán usados

como muestra de la sangre del donante para pruebas de compatibilidad.

♣ Cada bolsa de sangre tiene una serie de números de identificación repetidos a lo largo de la línea de recolección de sangre.

Coloque el primer sello después del primer número de identificación que está localizado en la parte más alta de la bolsa de

sangre y repetir sellando los segmentos para la longitud de la línea de flebotomía. Doble los segmentos orilla con orilla y

coloque una liga alrededor de ellos para mantenerlos juntos. Esto prevendrá que se enreden en la cabeza de la centrífuga si

la unidad es procesada para componentes (Figura 2-5).

♣ Si los segmentos son separados inadvertidamente de la bolsa de sangre durante el almacenamiento, el número de

identificación en los segmentos puede ser comparado con el número de identificación en la bolsa de sangre.

Figura 2-3. Limpiando la línea de flebotomía.

Figura 2-4. Sellando los segmentos.

Figura 2-5. Segmentos asegurados. Preparación de sangre entera fresca Caninos ♣ Una vez que una unidad de sangre entera se ha recolectado, debe ser almacenada a 1 - 6 °C hasta que sea posible un

procesamiento a menos que vaya a ser usada para preparaciones de plaquetas. Una unidad de sangre entera es considerada

sangre entera fresca por un período de tiempo de 24 horas después de la flebotomía. La sangre entera fresca contiene todo

los elementos de la sangre.

♣ Si no se va a procesar absolutamente ningún componente a partir de la unidad de sangre entera fresca, las bolsas satélite

pueden ser selladas de la bolsa primaria, cortadas y descartadas.

♣ Este procedimiento se repite en un formato paso por paso en la Sección Métodos.

Felinos Cuando se recolecta sangre entera felina en una jeringa o bolsa en un sistema abierto, debe ser transfundida tan pronto sea

posible. Si es inminente un retraso significativo, almacene el producto a 1 - 6 °C hasta que la transfu sión sea posible.

Preparación de eritrocitos y plasma fresco congelad o ♣ Cuando el proceso de recolección se ha completado, la unidad de sangre entera debe ser almacenada a 1 - 6 °C hasta

que la preparación de componentes sea posible.

♣ Esta discusión se limita a la recolección de 450 ml de sangre para perros. Para la preparación de componentes

sanguíneos felinos, el Banco de Sangre Animal (enlistado en el Apéndice 1) provee las técnicas de preparación de los

componentes sanguíneos con la compra de "el equipo de recolección de doble jeringa para pequeños animales".

♣ Si el componente que se va a realizar es Plasma Fresco Congelado, el plasma debe ser separado de los eritrocitos y

completamente congelado dentro de 8 horas desde la recolección si el anticoagulante-conservador es CPD, CP2D, o CPDA-1.

Si el anticoagulante-conservador es ACD, la separación y congelamiento deben ocurrir dentro de las 6 horas de la flebotomía.

♣ La sangre entera designada para preparaciones plaquetarias debe permanecer a temperatura ambiente hasta que las

plaquetas sean removidas.

♣ Este procedimiento se repite en un formato de paso por paso en la sección de Métodos.

Preparación para centrifugación ♣ La unidad entera de sangre debe ser pesada. Este peso es usado exclusivamente para balancear la centrífuga.

♣ El balance apropiado de la centrífuga es importante para prevenir el desgaste del rotor de la centrífuga; el peso total

dividido en recipientes opuestos debe ser equitativo (Figura 2-6).

♣ Cualquier bolsa para sangre vacía puede llenarse con glicerina al 10% para proveer una bolsa de balance con peso

equitativo para la centrifugación. También pueden ser utilizados ligas y discos plásticos pesados para lograr el balance

(Figura 2-7).

Figura 2-6. Una centrífuga balanceada (imagen bajo permiso de Kendro Laboratory Products).

Figura 2-7 Artículos para el balance. Centrifugación ♣ Las bolsas de sangre deben colocarse en la cubeta de la centrífuga con la etiqueta hacia afuera. Esto reduce la fuerza de

centrifugación en los márgenes sellados de la bolsa de sangre. Las centrífugas con recipientes que columpian proveen una

más fácil separación del plasma y los eritrocitos (Figura 2-6).

♣ La unidad de sangre entera debe ser centrifugada usando un "giro pesado" en una centrífuga refrigerada entre 1 y 6

grados centígrados. Un giro pesado se define como 5000 g por 5 minutos. (Ver Calibración de centrífuga en la sección de

Métodos para mayor información con relación a la velocidad y tiempo de la centrífuga).

♣ Una vez que la centrifugación ha cesado, es importante permitir que la centrífuga deje de girar sin asistencia, ya que, el

uso de un freno o un alto agudo del rotor puede alterar la separación del plasma y los eritrocitos, y por lo tanto se contamina

el plasma con eritrocitos.

Figura 2-8 Extrayendo el plasma de la sangre entera centrifugada (imagen usada con el permiso de Acculab and Baxter Healthcare Corporation).

Separación de los componentes

♣ La unidad de sangre debe ser removida de la centrífuga sin agitarla para no alterar los eritrocitos y el plasma. La unidad

debe colocarse en un extractor de plasma (Fenwal; Plasma Separation Stand, Terumo®). Este pedazo de equipo provee un

poste de pie rígido en el cual se colocan las unidades de sangre entera. Un plato articulado esta adherido al poste de pie y

puede ser liberado para aplicar presión a la unidad de sangre entera para extraer el plasma hacia dentro de una bolsa satélite

(ver Figura 2-8).

♠ Para esta discusión, existen dos bolsas satélite: una contiene Adsol®, una está vacía. Sin embargo, el número de bolsas

satélite adheridas depende del sistema de recolección de sangre que se esté utilizando.

♣ El plasma debe ser extraído hacia dentro de la bolsa satélite vacía. La bolsa satélite vacía debe ser colocada en una

báscula. El peso debe tararse a cero.

♣ Remueva 230 a 256 g de plasma.

Acerca de este cálculo:

La gravedad específica del plasma es de 1.023, así que 1 g de plasma es aproximadamente igual a 1 ml de plasma.

Removiendo 230 - 256 g de plasma dejará la unidad de eritrocitos con un paquete de volumen celular final del 70 a 80%.

Nota: Esta guía debe seguirse usando sistemas de recolección de sangre en las cuales los eritrocitos serán suplementados

con Adsol®. Sin embargo, los eritrocitos pueden estar preparados sin Adsol® variando los volúmenes de paquete celular. Ver

Tabla 2-3 para guías.

Tabla 2-3. Preparación de eritrocitos con un hematoc rito (Ht) conocido

Ht del donador

0.35 L/L (35%) 0.40 L/L (40%) 0.45 L/L (45%)

0.50 L/L (50%) 135 90 45

0.60 L/L (60%) 188 150 113

0.70 L/L (70%) 225 193 161

Ht deseado

0.80 L/L (80%) 253 225 197

El área sombreada denota el volumen de plasma a ser removido de una unidad (450 ml) de sangre entera

Los volúmenes son aproximados, basados en 1 g= 1 ml

♣ Usando hemostatos, ponga el clamp en la línea de la bolsa que contenga el plasma recogido. Luego, rompa el sello de la

bolsa de Adsol® y permita que el Adsol® fluya dentro de los eritrocitos. Selle la bolsa que contiene los eritrocitos y el Adsol®

y separe la bolsa de eritrocitos de las bolsas con plasma. Gentilmente mezcle los eritrocitos y el Adsol®.

♣ Quedan dos bolsas satélite; una contiene 230 - 256 g de plasma con un volumen de 225 - 250 ml. El plasma puede dejarse

en una bolsa, o ser dividido equitativamente en dos bolsas. Selle la(s) bolsa(s) de plasma apropiadamente.

♠ La opción de dividir el plasma debe ser basada en la talla típica del receptor y la demanda de plasma. Los sistemas de

recolección de sangre pueden ser adquiridos con una a cuatro bolsas satélite y debe seleccionarse de acuerdo a la necesidad.

♣ Tare el peso de la báscula a cero y pese cada una de las bolsas de sangre llenas. El peso de la bolsa vacía debe

sustraerse del peso final de la bolsa. La gravedad específica de los eritrocitos es de 1.080 a 1.090; la gravedad específica del

plasma es 1.023. Al dividir el peso final del producto entre la gravedad específica apropiada, se puede calcular el volumen en

ml del producto.

♣ El producto final debe ser etiquetado con el nombre del producto y el volumen en ml. Si se le ha agregado Adsol® a los

eritrocitos, deberá ser anotado en la bolsa.

Almacenamiento

♣ Los eritrocitos deben ser refrigerados a 1 - 6 °C . Mientras que lo ideal es un refrigerador dedicado al almacenamiento de

sangre, existen una gran variedad de refrigeradores disponibles en un amplio rango de precios que mantienen la temperatura

adecuada. Los productos sanguíneos deben ser almacenados en una manera organizada. Es ventajoso colocar la fecha más

próxima (la unidad que caduca primero) en el frente del refrigerador para que sea utilizada primero. Otros productos o

accesorios que pueden ser almacenados en el mismo refrigerador deben ser mantenidos separados de las unidades de

eritrocitos (Figura 2-9).

Figura 2-9. Almacenamiento de eritrocitos.

♣ Los productos de plasma deben ser almacenados a -18 °C o menos. Lo óptimo es tener un congelador ded icado al

almacenamiento de plasma. Los congeladores utilizados para almacenar los productos de plasma no deben tener un ciclo de

descongelamiento, ya que este ciclo puede incrementar la temperatura dentro del congelador temporalmente y puede causar

un derretimiento inadvertido del producto. El derretimiento inadvertido del producto también puede ocurrir durante

interrupciones del suministro eléctrico.

♣ Para prevenir) derretimientos inadvertidos del plasma congelado almacenado, puede utilizarse una de las dos técnicas

siguientes (Figura 2-10).

♣ Se puede colocar una liga alrededor de la mitad de la unidad de plasma antes de que sea congelado. Una vez que el

producto se congele, la liga se remueve, formando una marca de "cintura" en la unidad de plasma. Si la unidad se derrite, la

cintura desaparece. Por lo tanto, si una unidad de plasma es sacada del congelador sin la marca de cintura, es probable que

se calentara por encima del congelamiento durante su almacenamiento.

♣ Otra técnica que puede usarse consiste en congelar inicialmente la unidad de plasma en posición invertida. Esto crea una

“burbuja” en el fondo de la bolsa de plasma. Una vez congelada, la bolsa deberá colocarse en posición normal. Por lo tanto, si

una unidad de plasma es sacada del congelador sin la burbuja en el fondo de la bolsa, es probable que se calentó por encima

del congelamiento durante el almacenamiento.

♣ Adicionalmente, un indicador externo de temperatura en el/los congelador(es) de almacenamiento de plasma es útil para

revisar la temperatura del congelador. Estos indicadores están disponibles con lectores electrónicos o de tablas.

• ♣ Las bolsas de almacenamiento de sangre plásticas pueden romperse si se les da un mal manejo a temperaturas bajo cero. Para proteger el plasma congelado, envolver el producto en una envoltura de plástico con burbujas previo al congelamiento. ¡Los productos de plasma congelado deben ser manejados con cuidado!

Figura 2-10. Evaluando el almacenamiento del producto congelado: el producto de la derecha tiene una marca de "cintura" congelada, mientras que el producto de la izquierda contiene espacio muerto congelado en el fondo de la bolsa. El producto

en el centro representa un producto que se ha derretido y vuelto a congelar.

Registros del producto

♣ Una bitácora del producto es útil para rastrear el uso del producto. El número de identificación del donante, la fecha de la

donación, la fecha de caducidad, el volumen del producto, y la disposición final de la unidad puede ser información útil para

mantener.

Preparación del factor anti-hemofílico crioprecipit ado y crio plasma pobre. ♣ El factor antihemofílico crioprecipitado y crio plasma pobre son hechos a partir de una unidad de plasma fresco congelado

(PFC).

♣ Para procesar el factor antihemofílico crioprecipitado del plasma fresco congelado, se necesita una unidad completa (225 -

250 ml) de plasma fresco congelado con al menos una bolsa satélite integralmente adherida que va a ser necesaria.

♣ El plasma fresco congelado debe ser procesado como se describe en el procedimiento mencionado anteriormente excepto:

♣ La unidad entera (225 a 250 ml) de PFC debe permanecer en una bolsa satélite.

Es importante documentar el volumen total de la unidad de PFC ya que este valor será usado en un cálculo posterior.

♣ La línea entre las dos bolsas satélite debe ser ocluida temporalmente para prevenir que se transfiera plasma hacia dentro

de la segunda bolsa satélite.

♣ El PFC debe estar sólido congelado antes de preparar el factor antihemofílico crioprecipitado.

♣ Permitir que la unidad de plasma fresco congelado se descongele a 1 - 6 °C. Este proceso toma aproxima damente 8 horas.

Cuando el plasma tiene una consistencia blanda (de helado), recolecte factor antihemofílico crioprecipitado utilizando uno de

los dos métodos siguientes.

Colocar el plasma que se está derritiendo en un extractor de plasma. Extraiga el plasma líquido dentro de la bolsa satélite

vacía integralmente adherida. La bolsa satélite recién llena contiene el 90% del volumen original del PFC. Sellar ambas

bolsas.

Centrifugar el plasma utilizando alta velocidad. El factor antihemofílico crioprecipitado se precipitará y se adherirá a los lados

de la bolsa (Figura 2-11). Extraer el 90% del sobrenadante hacia dentro de la bolsa satélite vacía. Sellar ambas bolsas.

♣ La bolsa satélite recién llenada contiene 90% del PFC, y es ahora crio plasma cripobre. La bolsa satélite que contiene el

10% residual del PFC es factor antihemofílico crioprecipitado.

♣ Congelar el factor antihemofílico crioprecipitado y el crio plasma pobre dentro de una hora después que se completó la

preparación. Ambos productos deben almacenarse a -18 °C o menos.

♣ La fecha de caducidad del producto es de un año desde la fecha de flebotomía (no de la fecha de preparación).

♣ El producto debe ser etiquetado con el nombre del producto, volumen total y fecha de caducidad.

Figura 2-11. Crioprecipitado. Preparación de plasma rico en plaquetas ♣ El Plasma Rico en Plaquetas (PRP) se hace de una unidad de sangre entera fresca (extracción de 450ml).

♣ Para preparar el plasma rico en plaquetas, se necesita una unidad de sangre entera fresca con por lo menos una bolsa

satélite integralmente adherida . La unidad de sangre entera fresca debe ser mantenida a 22 - 25 °C y procesada

inmediatamente para recuperar plaquetas viables.

Preparación para centrifugación ♣ La unidad completa de sangre debe ser pesada. Este peso es usado exclusivamente para balancear la centrífuga.

♣ El balance apropiado de la centrífuga es importante para prevenir el desgaste del rotor de la centrífuga, el peso total en los

vasos opuestos debe ser igual (ver Figura 2-6).

♣ Una bolsa para sangre vacía puede llenarse con 10% de glicerina para proveer una bolsa de balance igualada en peso

para la centrifugación. También pueden usarse ligas y discos de plástico pesados para lograr el balance (ver Figura 2-7).

♣ La unidad de sangre entera debe ser centrifugada usando una “centrifugación ligera” en una centrífuga refrigerada entre

22 - 25 °C. Un a centrifugación ligera se define co mo 2000 g por 3 minutos (ver Calibración de centrífuga en la sección de

Métodos para mayor información en relación a la velocidad y tiempo de centrifugado).

♣ Una vez que la centrifugación ha cesado, es importante permitir que la centrífuga deje de girar sin asistencia, ya que un

freno o una parada aguda del rotor puede alterar la separación de eritrocitos/ plasma, y por lo tanto la contaminación del

plasma con eritrocitos.

Separación de componentes ♣ La unidad de sangre debe ser removida de la centrifuga sin agitación para no alterar los eritrocitos y el plasma. La unidad

debe colocarse en un extractor de plasma (Fenwal; Poste Separador de Plasma, Terumo®) Esta pieza de equipo provee un

poste rígido en el cual se colocan las unidades de de sangre entera. Se adhiere un plato con bisagra al poste y este puede

soltarse para aplicar presión a la unidad de sangre entera para extraer el plasma hacia dentro de una bolsa satélite (ver

Figura 2-8).

♣ El plasma será extraído hacia dentro de la bolsa satélite vacía. La bolsa satélite vacía debe ser colocada en una báscula.

El peso debe tararse a cero.

♣ Remover el plasma.

♥ La tarea de extraer plaquetas de sangre entera centrifugada puede ser un reto, ya que los eritrocitos descansan justo

debajo de la capa de plaquetas (Figura 2-12). El plasma rico en plaquetas debe ser de un color amarillo claro y no debe

contener contaminación de eritrocitos visible.

Figura 2-12. Sangre entera centrifugada con una capa de plaquetas.

♣ Utilizando hemostatos, colocar un clamp en la línea de la bolsa que contiene el plasma recolectado y sellar. Procesar los

eritrocitos como se describe en la sección Preparación de eritrocitos y plasma fresco congelado.

♣ Calcular el volumen de plasma fresco congelado.

Acerca de este cálculo:

La densidad del plasma es 1.023, así que 1 g de plasma es aproximadamente igual a 1 ml de plasma.

♣ Tarar el peso de la báscula en cero y pesar el plasma rico en plaquetas. El peso de la bolsa vacía deberá sustraerse del

peso final de la bolsa. Al dividir el peso final del producto entre la densidad apropiada, se puede calcular el volumen del

producto en ml.

♣ El producto final debe ser etiquetado con el nombre del producto y el volumen en ml.

Almacenamiento ♣ Para preservar la viabilidad de las plaquetas, se le debe permitir al plasma rico en plaquetas "reposar" a temperatura

ambiente, con la etiqueta hacia abajo por 1 - 2 horas y ser transfundido tan pronto sea posible después de esto.

♣ Este procedimiento se repite en un formato paso por paso en la sección de Métodos .

Sangrado corto y Disminución de la cantidad de anti coagulante-conservador ♣ Las bolsas de sangre comercialmente disponibles están diseñadas para anticoagular y preservar una cantidad específica

de sangre. Las desviaciones del volumen de sangre esperado deben ser manejadas apropiadamente para asegurar la

viabilidad del producto. Esta discusión será limitada a aquellas bolsas diseñadas para una sangría de 450 ml, aunque los

principios pueden aplicarse a bolsas con un volumen de sangre esperado diferente.

Llenado incompleto ♣ Las bolsas de recolección de sangre diseñadas para 450 ml de sangría contienen aproximadamente 63 ml de

anticoagulante-conservador. Esta cantidad de anticoagulante-conservador es suficiente para dar soporte a 450 - 495 ml se

sangre entera. Si se colectan 300 - 404 ml de sangre entera dentro de una bolsa diseñada para 450 ml, la unidad de sangre

no debe ser procesada a componentes y debe permanecer como sangre entera. La unidad de sangre debe ser etiquetada

como "llenado incompleto" y se debe documentar el volumen de la sangría sobre la bolsa.

♥ Estar atentos a que estas unidades contienen una cantidad incrementada de anticoagulante y la toxicidad por citrato al

receptor es un factor a considerar. Esto debe prohibir el uso de unidades de sangre de llenado incompleto para algunos

receptores.

Disminuyendo la cantidad de anticoagulante-conserva dor ♣ Si se planea una flebotomía menor de 300 ml, la cantidad de anticoagulante- conservador en la bolsa de sangre debe de

disminuirse previo a la recolección de sangre. Se puede remover anticoagulante-conservador extrayendo el exceso de la

solución de anticoagulante-conservador dentro de una de las bolsas satélite integralmente adheridas.

♣ Cálculo de la cantidad de anticoagulante-conservador que debe ser removido:

Cantidad de anticoagulante-conservador necesario en ml= (ml de sangre a ser extraída/100) X 14 ml

Anticoagulante-conservador a remover de la bolsa de sangre principal= 63 ml – cantidad de anticoagulante-conservador

necesario en ml

♥ Este cálculo es válido sólo para anticoagulantes-conservadores en los cuales la relación de anticoagulante a sangre es de

1.4:10. Esto incluye la mayoría de los sistemas de recolección de sangre que contengan CPD o CPDA-1.

Procedimiento de remoción de anticoagulante-conservador de la bolsa de sangre principal

♣ Obtener la gravedad específica y la cantidad del anticoagulante-conservador en la bolsa principal. Calcular el peso del

anticoagulante-conservador a ser removido de la bolsa principal.

♣ Pesar ambas bolsas, la principal y la satélite designada para la recolección del exceso de anticoagulante-conservador.

♣ Abrir el sello de la bolsa principal. Extraer la cantidad calculada de anticoagulante-conservador a ser removido hacia dentro

de la bolsa satélite vacía. Sellar y remover la bolsa satélite.

♣ La unidad puede ser procesada para componentes.

Comprando y recibiendo productos sanguíneos de fuen tes externas Comprando productos sanguíneos ♣ Puede ser necesario para un centro de práctica veterinaria ordenar productos sanguíneos de fuentes externas.

Esto puede ser debido a un caso de emergencia que consume todos los productos sanguíneos almacenados durante un

período de tiempo en el cual los donadores no están disponibles inmediatamente para la donación de sangre.

Algunos centros de práctica veterinaria pueden exclusivamente ordenar productos sanguíneos de fuentes externas.

♣ Debe identificarse un banco de sangre veterinario.

Algunos bancos de sangre veterinarios que proveen productos sanguíneos para venta se enlistan en el Apéndice 2.

Es recomendable establecer una relación de cliente con el proveedor de sangre antes de que surja la necesidad de un

producto sanguíneo.

♣ La comunicación en relación a la anticipación de la necesidad de productos sanguíneos provee al distribuidor de

información valiosa; el distribuidor puede ajustar la recolección de sangre para que se pueda mantener un suministro de

sangre adecuado.

Esto además provee al comprador la oportunidad de preguntar o cuestionar acerca de métodos de recolección y calidad del

grupo de donadores.

Adicionalmente, el comprador puede obtener información en relación a las políticas del proveedor y a los procedimientos

relacionados a la manera de ordenar los productos sanguíneos. ¡Compra bajo advertencia!

♣ El comprador puede cuestionar:

¿Cuál es el precio de venta del producto?

¿Cuánto tiempo toma usualmente para recibir el producto de manera rutinaria?

¿Cuánto tiempo tomaría obtener el producto en una emergencia?

¿Cómo estará empacado el producto?

Una vez empacado, ¿Cuánto tiempo le permite el empaque al producto temperaturas de almacenamiento óptimas?

¿Se podrá usar el envío de un día para otro? ¿Cuál sería el costo asociado?

¿La ruta de entrega incurre en temperaturas externas extremadamente calientes o extremadamente frías? ¿Los materiales

del empaque compensarán esto?

¿Se utilizan dispositivos de revisión de temperatura para el proceso de envío? Se pueden utilizar etiquetas de tiempo

temperatura, termómetros de alta-baja (Taylor Instruments, Rochester,NY, USA) o Indicadores de temperatura R&D (Chek

Lab Inc, Aurora, IL, USA).

¿Cuál es la política si las unidades que se reciben han excedido las temperaturas de envío aceptables?

¿Cuál es la política si la unidad es mal manejada o perdida durante el envío?

¿Cuál será la(s) fecha(s) de caducidad de la(s) unidad(es)?

Recibiendo los productos sanguíneos ♣ Una vez que se recibe el producto, desempacarlo inmediatamente.

♣ Realizar una inspección visual. ¿Está el producto dañado en alguna manera? ¿Tiene alguna fuga?

♣ ¿Aparenta que el producto se ha mantenido a la temperatura apropiada?

Si no se ha utilizado ningún dispositivo para verificar la temperatura, se debe de revisar la temperatura de los eritrocitos

doblando la bolsa de sangre a la mitad (con las etiquetas viendo hacia afuera) y colocando un termómetro dentro del

"sándwich" de la bolsa (Figura 2-13). Leer la temperatura; no debe exceder los 10 °C.

¡Los productos congelados deben llegar congelados!

♣ El producto debe ser colocado en un lugar de almacenamiento a temperaturas adecuadas y documentarse como recibido

en la bitácora del producto.

Figura 2-13 Determinando la temperatura de los eritrocitos por la técnica de "sándwich".

Preparando los productos sanguíneos para envío ♣ Los productos sanguíneos deben ser empacados y enviados en una manera que preserve la integridad del producto.

♥ Se deben revisar las guías federales, estatales, y locales. En algunas instancias, es necesario obtener licencias (permisos)

de agencias federales o estatales previo al envío de productos sanguíneos.

Empaque del producto ♣ Los procedimientos de los contenedores para transporte y empaque deben ser validados previos a su uso. Estos

protocolos deben ser revisados periódicamente para asegurar que se mantiene la temperatura apropiada del producto

durante el proceso de envío.

♣ Los contenedores de transporte deben tener cubiertas apretadas y deben resistir fugas y presión. La mayoría de las

paqueterías piden que se envíe una hielera con una cubierta con caja de cartón. Se deben escribir etiquetas con la dirección

que sean legibles con tinta indeleble.

♣ Para empacar productos sanguíneos para envío:

Obtener un contenedor para transporte adecuado.

Con el contenedor, comenzando desde el fondo, capas de:

Congelante

Papel absorbente

Producto

Papel absorbente

Congelante

Tapa del contenedor

Asegurar la tapa del congelante y la caja exterior

Adherir la etiqueta

Entregar a la paquetería

♣ Para sangre entera y eritrocitos, el congelante de elección es hielo, el cual debe confinarse en bolsas de plástico con cierre

hermético.

♣ Para productos congelados, el hielo seco es el congelante de elección.

♥ El hielo seco es considerado un material peligroso ya que causa quemaduras en la piel y libera dióxido de carbono cuando

se volatiliza. Asegúrese de notificar a la paquetería que el paquete contiene este material peligroso.

♣ El papel absorbente debe ser capaz de contener cualquier fuga dentro del paquete. Son adecuadas las toallas de papel, el

periódico o pañales desechables.

♣ El producto sanguíneo debe además asegurarse en una bolsa de plástico con cierre hermético por si acaso hay un daño

accidental que resulte en una subsiguiente fuga del producto.

Consideraciones clínicas en la práctica de la transfusión B.F. Feldman and C.A. Sink

1Dept of Biomedical Sciences & Pathobiology, VA-MD - Regional College of Veterinary Medicine, Blacksburg, VA, USA

(Deceased).2Laboratory Diagnostic Services, VA-MD - Regional College of Veterinary Medicine, Blacksburg, VA, USA.

Traducido por: L. Delgadillo Keenan, Clínica Veterinaria Sr. Dog's, Guadalajara, Jalisco, México. (2-Apr-2009).

Indicaciones útiles: Dispersos a lo largo de este texto se encuentran los siguientes símbolos para ayudarle a enfocarse en lo que

realmente es importante.

♣ Esta es una característica de rutina del tema en discusión. Las hemos tratado de concretar.

♠ Esta es una característica importante. Usted debe recordar esto.

♥ Algo serio ocurrirá si usted no recuerda esto.

Las pruebas cruzadas Se realizan las pruebas cruzadas mayor y menor para proveer productos de eritrocitos compatibles y para posiblemente

mitigar las reacciones adversas a la transfusión.

♣ La prueba cruzada mayor se realiza para detectar anticuerpos en el suero del receptor que puedan aglutinar o lisar los

eritrocitos del donador.

♣ Por el contrario, la prueba cruzada menor detecta anticuerpos en el plasma del donador dirigidos contra los eritrocitos del

receptor.

Con respecto a la prueba cruzada menor ♣ El procedimiento de la prueba cruzada menor mezcla los eritrocitos del receptor con el plasma del donador. Después de

una incubación apropiada, la mezcla de células/plasma es centrifugada y observada para detectar aglutinación. Esta prueba

fue ampliamente utilizada en medicina humana hasta el advenimiento de las células detectoras de anticuerpos. La aparición

de las células detectoras de anticuerpos para los protocolos de detección de sangre del donador eliminó la necesidad de la

prueba cruzada menor.

¿Qué son las células detectoras de anticuerpos?

Las células detectoras de anticuerpos son eritrocitos comercialmente disponibles que son del tipo O de sangre humana. Estas

células han sido probadas para antígenos comunes de grupos de sangre humana clínicamente significativos (tales como el

sistema Rh, MNS, Lewis, P, Kell, y otros.) Las células detectoras de anticuerpos son típicamente vendidas en estuches que

contienen tres muestras de eritrocitos antigénicamente diferentes. Cuando se utilizan en medicina humana para protocolos de

selección del donador, el plasma de la sangre del donador es probada contra un grupo de células detectoras de anticuerpos.

Si la detección de anticuerpos es negativa, se puede asumir que la sangre del donador que está siendo probada está libre de

anticuerpos contra antígenos del grupo sanguíneo humano presentes en las células detectoras de anticuerpos. Si la

detección de anticuerpos es positiva, se prueba otro panel de células detectoras contra el plasma del donador y el anticuerpo

es identificado. Recuerde que la sangre entera es separada en componentes y una identificación y detección positiva de

anticuerpos puede solo excluir el plasma del donador de la lista de donantes para transfusiones rutinarias. Si la detección de

anticuerpos es negativa, se asume que el plasma puede ser transfundido con seguridad a un receptor ABO compatible. Es

por esta razón que rutinariamente ya no se realizan pruebas cruzadas en los productos de plasma en medicina humana.

Así pues, ¿qué sucede en medicina veterinaria?

Actualmente, las células detectoras de anticuerpos no están disponibles para uso veterinario. Es por esto que la prueba

cruzada menor es tan importante . Recuerde que en la prueba cruzada menor, se prueban los eritrocitos del receptor con el

plasma del donador. Esta prueba se realiza para proporcionar una transfusión segura, especialmente en el caso de que se

use sangre entera o plasma. Además, se debe pensar en la prueba cruzada menor para el proceso de selección del donador

ya que: los eritrocitos del receptor están actuando como células detectoras de anticuerpos. Es más, éstas células pueden o

no contener antígenos clínicamente significativos. Pero cuando un donador en particular es probado contra una o más

muestras de eritrocitos del receptor a través del uso de la prueba cruzada menor y se encuentra que es negativa, se puede

asumir de manera general que no hay anticuerpos clínicamente significativos en el plasma del donador. Mantenga en mente

que la mayoría de los donadores de sangre calificarán dentro de un programa de donación sanguínea por un periodo de

tiempo de al menos un año. Se desprende con esto que puede haber al menos 4 donaciones de sangre por año con plasma

de un donador que ha sido probado contra al menos una muestra de eritrocitos de un receptor por cada donación. Si el

programa de donación está dispuesto a aceptar esto como un método de selección de anticuerpos de los donadores,

entonces lo que sigue es que los productos del plasma podrían ser transfundidos sin realizar la prueba cruzada menor.

♣ Simultáneamente, es benéfico rechazar del programa de donadores de sangre a los donadores potenciales que han sido

previamente sensibilizados con antígenos de otros eritrocitos externos. Esto ayuda a eliminar de la lista de donadores el

plasma que potencialmente lleve anticuerpos contra antígenos de eritrocitos.

Guías para la transfusión sanguínea Justificación para la terapia La sangre entera es una mezcla de constituyentes celulares suspendidos en un medio de transporte líquido. Las células

tienen funciones diferentes. Los eritrocitos transportan oxígeno y participan en la defensa del huésped por medio de la

adsorción de superficie y absorción de muchos materiales, los fagocitos controlan a las bacterias, las plaquetas son

requeridas para la hemostasia, y los linfocitos son mediadores de la inmunidad. El medio líquido también contiene una matriz

de sustancias disueltas: albúmina, globulinas, proteínas de coagulación, intermediarios metabólicos, electrolitos, aniones

orgánicos, y elementos traza. Las técnicas prácticas para la separación y concentración de algunos de los constituyentes

celulares de la sangre entera esta disponible en todos los grandes centros veterinarios de donación de sangre. La terapia de

transfusión moderna debe estar basada en el uso de componentes de la sangre para tratar defectos específicos con

concentrados del constituyente sanguíneo del que se tenga deficiencia. Existen un número de justificaciones para el uso

preferencial de componentes sanguíneos.

Consideración de los recursos limitados El argumento más convincente que apoya la terapia de los componentes es que la sangre es un recurso preciado en vista de

su potencial terapéutico y la logística y costos requeridos en la obtención y entrega de productos sanguíneos. La separación

en componentes permite a una sola donación atender las necesidades individuales de varios pacientes. El criterio de elección

en la selección del donador de sangre debe ser suficiente para obtener una donación segura.

Consideraciones cinéticas Después de la hemorragia, los mecanismos homeostáticos restauran los diferentes constituyentes sanguíneos en rangos

diferentes, dependiendo de la capacidad de síntesis, consumo endógeno, degradación, y distribución en varios

compartimentos fisiológicos. El tiempo de inactivación media de los eritrocitos caninos y felinos es de de meses, mientras que

la vida media de la albúmina es solo de tres a cuatro días. La pérdida de sangre en cirugía puede requerir la reposición de

eritrocitos. La albúmina podría no ser requerida, ya que será repuesta dentro de los siguientes días. Otra consideración es la

tolerancia. La pérdida del 50% de la masa de eritrocitos es bien tolerada en un individuo sano mientras que la pérdida del

50% del volumen total de sangre puede ser fatal a menos que sea rápidamente corregida.

Consideración de los efectos adversos Otra razón fundamental para apoyar el uso de componentes sanguíneos incluye una lista innumerable de posibles efectos

adversos que pueden resultar de la transfusión innecesaria de constituyentes sanguíneos. Cualquier reacción a la transfusión

significa que la transfusión no está cumpliendo con su propósito y, de manera importante, ha creado otra carga en el paciente

que ya tiene además, una carga previa por el estado fisiológico por el cual requería la transfusión. La sensibilización a las

células sanguíneas puede inducir resultados refractarios en subsecuentes transfusiones. La transfusión de múltiples unidades

de sangre entera de manera secuencial para poder alcanzar un cierto hematocrito, puede también producir edema pulmonar

debido a la sobrecarga de volumen.

La decisión de transfundir Toda terapia de transfusión produce sólo una mejoría transitoria en la condición del paciente. A menos que el paciente sea

capaz de producir endógenamente el déficit de los componentes, serán necesarias más transfusiones. Además de esto, las

transfusiones disminuyen la respuesta fisiológica a la deficiencia del constituyente sanguíneo. Por ejemplo, si un paciente

tiene una masa de eritrocitos reducida, la hipoxia tisular provoca una producción incrementada de eritropoyetina y la médula

ósea responde con reticulocitosis. La transfusión de eritrocitos en este paciente, implicará una disminución y retardo en la

respuesta de los reticulocitos. Varias preguntas deben considerarse antes de una transfusión.

¿Es realmente necesaria la transfusión sanguínea?

¿Cuál es la necesidad particular del paciente?

¿Los beneficios potenciales justifican los riesgos de la transfusión?

¿Cuál componente sanguíneo será efectivamente conveniente para ésta necesidad especial, al costo más bajo?

Después de la transfusión: ¿La transfusión reflejó el beneficio previsto para el paciente?

Las respuestas a estas preguntas deben ser documentadas en el expediente del paciente. Como mínimo para una

transfusión de eritrocitos, se debe hacer una determinación de hematocrito y proteínas totales pre-transfusión seguidas de

una determinación post-transfusión (24 horas).

Los componentes sanguíneos deben ser convenientemente clasificados de acuerdo a sus funciones fisiológicas: transporte

de oxígeno, como adyuvante en el mantenimiento del volumen intravascular, hemostasia y fagocitosis. En medicina

veterinaria, el soporte de la fagocitosis con transfusiones de granulocitos no se realiza. El reemplazo del volumen requiere del

mantenimiento de la presión oncótica coloidal (POC) a través del uso de coloides (hetastarch, pentastarch, dextranos, y

productos de gelatina) además de plasma. La albúmina administrada en forma de plasma en pacientes hipo-oncóticos

(hipoalbuminémicos) que no reciben soporte coloidal concurrente, rápidamente equilibrarán la presión con desplazamiento

hacia los terceros espacios.

La transfusión para incrementar el transporte de ox ígeno No existe ningún equipo que contenga la concentración de hemoglobina o hematocrito específico para un paciente que

necesite eritrocitos. Los pacientes y el cuidado del paciente se calculan cuando se los eritrocitos son requeridos. Un paciente

que ha perdido un tercio de su masa de eritrocitos de manera aguda requerirá incrementar la capacidad de transporte de

oxígeno. Los pacientes con procesos crónicos pueden tener hematocritos dramáticamente bajos, pero si no se encuentran

bajo condiciones estresantes, no requieren de capacidad adicional de transporte de oxígeno. Sin embargo, en términos

generales, tanto en el perro como en el gato, la administración de eritrocitos para cubrir las necesidades de transporte de

oxígeno debe considerarse cuando la concentración de hemoglobina está por debajo de 7 g/dl (hematocrito de 21%). Cuando

se considera la transfusión en ciertos pacientes, el clínico debe considerar la edad, etiología y duración de la anemia, la

presencia de alteraciones cardiacas, pulmonares, o vasculares, y la estabilidad hemodinámica.

Productos que incrementan el transporte de oxígeno Sangre entera - Por la pérdida aguda de sangre que exceda el 20% del volumen sanguíneo (el volumen sanguíneo apropiado

para reemplazo es de 90 ml/kg -en caninos, 70 ml/kg -en felinos), o por una coagulopatía con pérdida de sangre masiva. El

hematocrito se incrementará por arriba del valor de referencia inmediatamente después de la transfusión y se incrementará

un poco más dentro de las 24 horas siguientes por la redistribución del volumen.

Red Cells (RC, Packed Cells) - R- Los eritrocitos se obtienen cuando la sangre entera refrigerada es centrifugada bajo

refrigeración y el plasma es removido. Debido a que el hematocrito se aproxima al 70 - 80%, los eritrocitos son

frecuentemente mezclados con solución salina estéril o con una solución aditiva para disminuir la viscosidad.

Para determinar el hematocrito esperado en pacientes que reciben eritrocitos, calcule el volumen total de sangre (ver Sangre

entera, arriba) y el volumen total de eritrocitos (calculado del hematocrito pre-transfusión). Determine el volumen total de

sangre después de administrar la transfusión (volumen de sangre pre-transfusión + volumen de transfusión). Determine el

nuevo hematocrito sumando el volumen de eritrocitos transfundidos más el volumen de eritrocitos pre-transfusión. El

hematocrito pos-transfusión esperado es el volumen de eritrocitos pos-transfusión dividido entre el volumen total de sangre

pos-transfusión.

Sustitutos sanguíneos: Alternativas para la sangre y productos sanguíneos Sustitutos de eritrocitos Requisitos para un sustituto de eritrocitos exitoso:

Debe funcionar

Tener una vida larga de almacenaj

Ser mínimamente inmunogénico

Ser libre de patógenos y endotoxinas

Estar fácilmente disponible a un costo razonable

Debe llevar y liberar oxígeno hacia los tejidos bajo condiciones clínicas.

Indicaciones clínicas para el sustituto de eritrocitos:

Anemia aguda

Pérdida de sangre aguda

Terapia pre-quirúrgica

Reemplazo intra-operatorio

Útil para proveer oxígeno como un radiosensibilizador en el tratamiento de algunas neoplasias.

Soluciones basadas en la hemoglobina:

Las soluciones basadas en la hemoglobina transportadora de oxígeno son una forma de sustituto sanguíneo utilizadas para

incrementar el contenido de oxígeno de la sangre y mejorar la entrega de oxígeno a los tejidos. La hemoglobina es

transportada en el plasma. La hemoglobina en el plasma incrementa la eficiencia de descarga de oxígeno de las células

sanguíneas hacia los tejidos al facilitar la difusión del oxígeno a través del plasma. Las soluciones a base de hemoglobina

tienen una vida de almacenamiento larga y son útiles inmediatamente. Estas soluciones son de hemoglobina polimerizada

libre de estroma que son virtualmente libres de membranas de eritrocitos y como tal son mínimamente inmunogénicas. Estas

soluciones llevan y liberan oxígeno durante 18 a 24 horas. Hay algunos cambios en las pruebas de laboratorio pero son

generalmente conocidos, previstos, o mínimos. Estos cambios dependen del instrumento utilizado. El nitrógeno ureico sérico

y los electrolitos parecen no afectarse. La administración de estas soluciones puede volver las membranas mucosas de un

color amarillo a rojo o café por al menos varios días.

Características de una solución basada en hemoglobina transportadora de oxígeno aprobada para su uso en perros (Solución

Oxyglobina®), Biopure Corporation, Cambridge, Massachusetts).

Este producto tiene una concentración fisiológica de hemoglobina de 13 g/dl y es presentada en solución iso-osmótica de

lactato de Ringer. El peso molecular promedio de esta solución es de 200kD con un rango de 65 - 500 kD. En esta solución la

afinidad del oxígeno es dependiente de los iones de cloro. Esto contrasta con la liberación de oxígeno de los eritrocitos la cual

depende del 2,3-difosfoglicerato (2,3-DPG). Las soluciones son universalmente compatibles y son estables a temperatura

ambiente.

Indicaciones para su uso - La Oxiglobina® es útil en el tratamiento de la anemia debida a cualquier causa incluyendo

hemólisis, pérdida de sangre por traumatismo, cirugía, hemorragia gastrointestinal o genitourinaria, o hemorragia causada por

toxicidad a rodenticidas.

Administración y monitoreo - El promedio de administración de Oxiglobina® es ≤10 ml/kg/hora en pacientes caninos

normovolémicos. Los signos de mejoría en la oxigenación incluyen estabilización de los signos vitales tales como frecuencias

cardiaca y respiratoria. Por supuesto, la causa primaria de la anemia debe ser tratada. Las membranas mucosas y la esclera

pueden transitoriamente tomar un color amarillo a rojo o café. La expansión del volumen debe ser monitoreada. Los

descensos en la masa de eritrocitos (volumen de paquete celular, hematocrito) son predecibles debido a la hemodilución. Sin

embargo, la concentración de hemoglobina se incrementa.

Efectos de la presión oncótica coloidal baja- edema pulmonar no cardiogénico, edema generalizado, hipovolemia.

Sustitutos de plasma El hetastarch como expansor de plasma - Este es un polímero sintético (una amilopectina de almidón cerosa) producido por

DuPont Pharmaceuticals bajo el nombre de Hespan®. El Hespan es el hetastarch en solución salina normal (0.9%) al 6%, el

cual es casi iso-osmótico (310 mOsm/L). El Hespan® tiene una vida de almacenamiento de 12 meses. Las dosis de

administración varían dependiendo de los autores. Aproximadamente 25 ml/kg tienen un tiempo de inactivación media de 7.5

a 8.4 días.

Seguridad y efectos secundarios - El Hetastarch tiene una toxicidad baja en humanos y perros. En la falla renal no oligúrica la

función renal puede mejorar. No hay efectos aparentes en la función granulocítica. La hemostasia puede verse afectada de

manera significativa. El número de plaquetas y su función pueden reducirse. Los tiempos de protrombina (PT) y de

tromboplastina parcial activada (APTT) pueden prolongarse. Han sido reportadas reacciones anafilácticas.

Ventajas de la terapia con coloides (hetastach) - La presión oncótica coloidal (POC) se mejora. Hay una expansión del

volumen plasmático sin incrementar el contenido de agua intersticial. El uso de hetastarsh se compara bien con soluciones

que contienen albúmina o dextranos. Es seguro para uso agudo y a largo plazo. Inyecciones únicas pueden incrementar el

volumen plasmático y la POC por más de cuarenta y ocho horas.

El hetastarch es útil en perros y gatos hipoalbuminémicos. Las dosis recomendadas actualmente son de 30 - 35 mls/kg/día

con uso repetido dependiendo del criterio clínico.

Contraindicaciones del hetastarch - El hetastarch está contraindicado en insuficiencia cardiaca y en falla renal oligúrica. El

hetastarch está contraindicado en hemorragia debida a la enfermedad de von Willebrand y puede estar contraindicada

cuando la hemostasia está comprometida o puede comprometerse.

VetaPlasma® (SmithKline Beecham)

El VetaPlasma® se comercializa como un expansor de plasma coloidal (NO es plasma ) en una solución electrolítica

fisiológica con un pH de 7.4. Es para uso intravenoso en perros y gatos. El VetaPlasma® es una oxipoligelatina con un peso

molecular promedio de 30,000 Daltons. No incrementa la viscosidad del plasma. Puede mejorar la función renal sin embargo

es excretada principalmente (88%) a través de los riñones. El VetaPlasma® puede causar reacciones anafilactoides. Tiene un

tiempo de inactivación media relativamente corto (2 - 4 horas) y es hipo-osmótico (200 mOsm/l). Existe una disfunción

hemostática mínima (pero existe) con el uso de este producto.

Soluciones intravenosas compatibles ♣ La administración de cloruro de sodio al 0.9% puede ser utilizada para facilitar la infusión de productos derivados de la

sangre.

♣ No deben adicionarse medicamentos ni alguna otra solución a los productos sanguíneos a menos que el producto esté

aprobado por la US FDA o que exista documentación adecuada de que el producto es seguro para usarse con productos

sanguíneos.

♣ Varias soluciones intravenosas interfieren con la transfusión sanguínea.

La solución de lactato de Ringer contiene suficiente calcio para superar a los agentes quelantes de los sistemas aditivos de

los anticoagulantes y conservadores.

La dextrosa al 5% en solución hace que los eritrocitos se aglutinen en la vía de infusión, causando que los eritrocitos se

hinchen y se hemolicen.

Equipos para la administración de sangre ♣ Los equipos para la administración de sangre son utilizados para la infusión de productos derivados de la sangre.

♣ El uso de equipos para la administración de sangre ayuda a prevenir que sean infundidos al receptor artefactos

potencialmente peligrosos. Estos equipos contienen un filtro que sirve para retener coágulos y otras partículas de

microagregados que se forman en la sangre almacenada. El tamaño de la partícula retenida por el filtro está directamente

relacionado al tamaño del filtro.

♣ Los equipos de administración de sangre deben ser usados con todos los componentes sanguíneos incluyendo a los

concentrados plaquetarios. Se debe evitar desviarse de las instrucciones del fabricante ya que esto puede volver ineficaz al

producto sanguíneo. Por ejemplo, el uso de un equipo de administración inapropiado para la infusión de productos

plaquetarios puede causar que las plaquetas sean retenidas inadecuadamente dentro del equipo de infusión, frustrando el

propósito de la transfusión.

♣ Existe una gran variedad de equipos de infusión comercialmente disponibles. Se debe consultar el uso recomendado.

♥ Recuerde: cualquier equipo sanguíneo debe ser cambiado cada 4 horas. Esto es debido al hecho de que puede ocurrir

contaminación bacteriana después de mayores períodos de tiempo.

♣ Algunos equipos para administración de sangre están diseñados para la transfusión de más de una unidad de sangre, pero

el tiempo total de uso no debe exceder de 4 horas.

♣ Los equipos para la administración sanguínea no deben ser reutilizados debido al riesgo de contaminación bacteriana.

♣ Existen dos tipos diferentes equipos para administración de sangre: goteo por gravedad y empuje con jeringa.

♣ Goteo por gravedad

Los equipos estándar para la administración de sangre contienen un filtro con poros de tamaño de 170 - 260 micras. El

equipo debe ser llenado de acuerdo a las instrucciones del fabricante con sangre o fluidos compatibles con sangre. Para una

velocidad de flujo óptima, el filtro debe estar completamente mojado y la cámara de goteo debe estar llena a no más de la

mitad durante la transfusión. Los equipos estándares son típicamente utilizados para transfundir sangre entera, eritrocitos, y

productos de plasma. Como lo indica el nombre, este equipo está unido al producto sanguíneo y el producto sanguíneo es

infundido por goteo por gravedad.

♣ Empuje con jeringa

Los equipos de empuje con jeringa pueden ser usados para la infusión de componentes o en la transfusión de productos con

volúmenes de menos de 100 ml. Este equipo de administración utiliza el volumen más pequeño de todos los equipos. Estos

equipos tienen una cámara de goteo muy pequeña y una longitud de la vía de infusión menor a los equipos de goteo por

gravedad. Esto es útil en la transfusión de productos de volumen pequeño. Los equipos de empuje con jeringa contienen un

filtro en la vía de infusión que es extremadamente pequeño y puede no ser notado.

Cuando se utiliza este equipo de infusión los productos sanguíneos pueden ser transfundidos de dos formas. El equipo puede

estar adherido a una bolsa de sangre, el producto sanguíneo llena el interior de la jeringa adherida desde la bolsa y es

después "empujado" hacia el receptor. De manera alternativa, este equipo puede estar adherido directamente a una jeringa

con sangre para una transfusión inmediata. Esto puede ser útil en la transfusión de sangre entera felina.

Efectos adversos de la transfusión sanguínea ♣ El principio básico en la terapia de transfusión, es la misma que en todos los procedimientos médicos, "primum non

nocere" - lo primero es no causar daño. A pesar de que el rango de mortalidad secundario a una transfusión es bajo, las

muertes ocurren, especialmente en gatos, y la morbilidad varía significativamente entre diferentes instituciones. Las

reacciones hemolíticas pueden ser el problema más serio. La observación cuidadosa de signos clínicos y una evaluación de

laboratorio adecuada de los posibles efectos adversos permitirán una práctica más segura para la realización de una

transfusión.

Signos de reacciones a la transfusión ♣ Las reacciones febriles o alérgicas pueden ocurrir con fiebre o escalofríos en la misma forma que la reacción hemolítica

severa. Por esta razón, cualquier cambio adverso en la condición del paciente debe ser considerada como un posible signo

de reacción adversa a la transfusión y debe ser evaluada.

♣ Las acciones principales que deben llevarse al cabo cuando se sospecha de una reacción a la transfusión son:

Detener la transfusión.

El acceso intravenoso debe mantenerse accesible por si es necesario un tratamiento.

El clínico responsable debe ser notificado para evaluar al paciente.

♣ Los individuos que han tenido múltiples transfusiones o han tenido gestaciones previas son los que tienen mayores riesgos

de reacciones febriles. Un paciente que ha tenido una reacción febril tiene un riesgo mayor de reacciones subsecuentes. La

premedicación no parece ser marcadamente efectiva en estos casos y no elimina la necesidad de una observación cercana.

♣ Cuando se sospeche de una reacción, el equipo de administración debe ser cambiado. Esto permite que se desechen los

10 - 15 ml de sangre restantes de la vía de infusión y no sean administrados al paciente.

Complicaciones-Efectos inmunológicos inmediatos Reacciones hemolíticas

Las reacciones hemolíticas son las más severas pero son raras y son secundarias a sangre incompatible o a la

incompatibilidad entre donadores por transfusiones múltiples. Debido a que los gatos tienen de forma natural aloanticuerpos

en el plasma (en particular, anti-A fuertes en gatos tipo B), la sangre de los donadores y receptores felinos debe ser tipificada

y deben realizarse pruebas cruzadas previas a la transfusión. Las transfusiones AB incompatibles no son seguras y pueden

causar reacciones hemolíticas a la transfusión y amenazan la vida del paciente.

♥ Debe resaltarse que la hemólisis puede también deberse a problemas no inmunológicos. La hemólisis puede generarse por

la destrucción física de células por sobrecalentamiento o por mezclar soluciones no isotónicas con eritrocitos. No se debe

infundir OTRA solución a través del sitio de transf usión a menos que la transfusión se haya completado .

Signos

Escalofríos (temblores), fiebre, dolor en el sitio de la colocación de la aguja o a lo largo del tracto venoso, náuseas, vómito,

orina oscura, dolor en los flancos, y si progresa, signos de choque y/o falla renal.

Precauciones

♣ Si es posible, identificar los tipos sanguíneos del donador y del receptor antes de iniciar la transfusión. Realizar las pruebas

de compatibilidad.

♣ Transfundir la sangre lentamente durante los primeros 15 - 20 minutos y/o el 20% inicial del volumen de transfusión

calculado; permanecer con el paciente durante este período.

Respuesta

♣ En el caso de una reacción:

Detener la transfusión

Mantener viable la línea intravenosa

Notificar al clínico encargado

Guardar la sangre del donador para repetir la prueba cruzada con la sangre del paciente.

♣ Si es posible:

Monitorear la presión sanguínea para prevenir un choque

Insertar un catéter urinario y monitorear la producción cada hora.

Enviar una muestra de la sangre y orina del paciente al laboratorio. La hemoglobinuria indica hemólisis intravascular.

Observar si hay signos de hemorragia como resultado de una coagulación intravascular diseminada (CID).

Dar terapia de soporte para tratamiento del choque

Reacciones febriles

Cualquier incremento de un grado (Celsius) o más debe considerarse como una reacción febril debido a los anticuerpos de

leucocitos, plaquetas o proteínas plasmáticas.

Signos

Fiebre, escalofríos.

Precauciones/ Respuesta

♣ Detener la transfusión inmediatamente.

♣ Considerar la terapia antialérgica.

Reacciones alérgicas

El paciente reacciona a los alergenos del donador que están en los eritrocitos, plaquetas, granulocitos, proteínas plasmáticas,

frecuentemente por reacciones de complemento e inmunoglobulinas.

Signos

Urticaria, disnea, edema laríngeo

Precauciones/ Respuesta

♣ Dar terapia antialérgica como profilaxis en pacientes con tendencias alérgicas, aunque que esto frecuentemente no es

efectivo.

♣ Detener la transfusión inmediatamente.

♣ La epinefrina puede ser utilizada para tratamiento de disnea o de una reacción anafiláctica.

Complicaciones- efectos no inmunológicos inmediatos Sobrecarga circulatoria

La sobrecarga circulatoria se debe a una transfusión demasiado rápida (aún pequeñas cantidades) o la administración de una

cantidad excesiva de sangre (aún si se administra lentamente).

Signos

Disnea, estertores, cianosis, tos seca, venas del cuello distendidas (si son visibles, pueden palparse).

Precauciones/ Respuesta

♣ Transfundir la sangre lentamente.

♣ Prevenir la sobrecarga utilizando eritrocitos o administrando cantidades divididas de sangre.

♣ Utilizar una bomba de infusión para regular y mantener la velocidad del flujo.

♣ Si aparecen signos de sobrecarga, detener la transfusión inmediatamente.

Hipotermia

La hipotermia es provocada más frecuentemente por la administración de productos derivados de la sangre fríos y de manera

demasiado rápida.

Signos

Escalofríos, descenso de temperatura, frecuencia cardiaca irregular, posible arresto cardiaco.

Precauciones/ Respuesta

♣ Utilizar un dispositivo de calentamiento para calentar productos derivados de la sangre.

♣ Si un paciente presenta escalofríos (temblores) y si la temperatura corporal del paciente está por debajo de la normal

(comparando con la temperatura basal), detenga la transfusión.

Desequilibrios electrolíticos

Los desequilibrios electrolíticos son raros pero frecuentemente se asocian a pacientes con función renal comprometida.

Signos

Náuseas, diarrea, debilidad muscular, parálisis flácida, bradicardia, aprehensión, arresto cardíaco.

Precauciones/ Respuesta

♣ Para pacientes en riesgo utilice eritrocitos lavados con solución salina o sangre entera fresca.

Intoxicación con citrato (hipocalcemia)

La intoxicación con citrato ocurre especialmente en gatos y por el uso de productos que contienen exceso de anticoagulante

debido a un llenado incompleto de la bolsa de transfusión.

Signos

Tetania, tremores musculares, hiperreflexia, actividad convulsiva, espasmo laríngeo, paro respiratorio.

Precauciones/ Respuesta

♣ Infundir la sangre lentamente.

♣ Si ocurre la tetania, cierre la vía de infusión inmediatamente, mantenga patente la vía intravenosa, notifique al clínico.

Complicaciones- efectos inmunológicos tardíos Reacción hemolítica tardía

Signos

Destrucción de eritrocitos y fiebre de 10 a 15 días después de la transfusión. Esta a menudo es una respuesta inmunológica

de memoria.

Precauciones/ Respuesta

♣ Observación para detectar anemia post-transfusión y la disminución del beneficio de transfusiones posteriores.

Reacción injerto contra Huésped

El injerto contra huésped es una rara complicación posterior a una transfusión en pacientes severamente inmunosuprimidos

como aquellos que han sido tratados intensivamente contra una enfermedad inmunomediada, o han sido inmunosuprimidos

con quimioterapia o radiación. La reacción tipo injerto contra huésped ocurre si los linfocitos inmunocompetentes del donador

se injertan y multiplican en el paciente inmunodeficiente. Las células injertadas del donador reaccionan contra las células

ahora "extrañas" del huésped-receptor.

Signos

Fiebre, urticaria, hepatitis, diarrea, supresión de médula ósea.

Precauciones/ Respuesta

♣ En medicina humana, los productos derivados de la sangre pueden ser irradiados. La función de los eritrocitos,

granulocitos y plaquetas no se afectan. De un 85 a 95% de los linfocitos se vuelven incapaces de replicarse.

♣ El tratamiento es de soporte y sintomático.

Púrpura post-transfusión

La púrpura post-transfusión es rara y es secundaria al desarrollo de anticuerpos antiplaquetas. La púrpura post-transfusión

ocurre casi exclusivamente en perras multíparas (raramente en gatos).

Signos

Petequias, púrpura, equimosis seguida de una caída en el conteo de plaquetas una semana después de la transfusión. Los

anticuerpos destruyen tanto a las plaquetas transfundidas como a las propias.

Precauciones/ Respuesta

♣ Terapia inmunosupresora.

♣ Si la vida está en peligro, en medicina humana, se inicia intercambio de plasma.

♣ El problema es generalmente autolimitante en perros.

Aloinmunización (formación de anticuerpos)

El paciente reacciona a los alergenos de eritrocitos, plaquetas, granulocitos, proteínas plasmáticas, reacciones de

complemento e inmunoglobulinas del donador.

Signos

Incremento del riesgo de reacciones hemolíticas, febriles y alérgicas.

Precauciones/ Respuesta

♣ Ocurre en pacientes que reciben múltiples transfusiones. Por lo tanto, transfunda productos de un número limitado de

donadores y valore para detectar signos de reacción adversa en el paciente.

Complicaciones- efectos no inmunológicos tardíos Transmisión de una infección

Signos

Ictericia por hepatitis, fiebre, dolor o malestar no específico (frecuentemente alrededor de la pared torácica o el esternón),

hipotensión, vómito, diarrea.

Precauciones/ Respuesta

♣ Interrogar al banco de sangre para ver si no se han notado hasta esa fecha algún signo asociado con el donador.

♣ Educar a los propietarios acerca de los posibles signos de infección.

Bioseguridad B.F. Feldman1 and C.A. Sink2 1Dept of Biomedical Sciences & Pathobiology, VA-MD - Regional College of Veterinary Medicine, Blacksburg, VA, USA

(Deceased).2Laboratory Diagnostic Services, VA-MD - Regional College of Veterinary Medicine, Blacksburg, VA, USA.

Traducido por: L. Delgadillo Keenan, Clínica Veterinaria Sr. Dog's, Guadalajara, Jalisco, México. (21-Oct-2009).

Consejos útiles:

A lo largo de este texto se encuentran los siguientes símbolos para ayudarle a concentrarse en lo que es

realmente importante.

♣ Esta es una característica de rutina del tema en discusión. Hemos intentado resumirlas.

♠ Esta es una característica importante. Usted debe recordar esto.

♥ Algo serio pasará si Usted no recuerda esto.

Seguridad en el laboratorio ♣ Es responsabilidad de cada contratista proveer un ambiente de trabajo seguro para sus empleados. Esto puede lograrse

desarrollando e implementando un plan de seguridad para el área de trabajo. La meta del plan de seguridad debe ser la

protección para los empleados de las situaciones que puedan comprometer su salud y bienestar. A pesar de que el desarrollo

de un plan de seguridad puede ser una tarea tediosa, vale la pena el esfuerzo. Lo siguiente es una discusión general acerca

del desarrollo de un plan de seguridad. Adicionalmente se deberán consultar y seguir las disposiciones federales, estatales y

locales.

♣ El plan de seguridad debe incluir un plan para incendios, para accidentes, para químicos, y para el mantenimiento de hojas

con datos del material de seguridad (MSDS, por sus siglas en inglés). Otros planes y políticas deben añadirse de acuerdo a

las actividades realizadas en el área de trabajo. El plan de seguridad debe incluir todos los peligros encontrados en el área de

trabajo.

♣ El plan de incendio debe incluir una política (o instructivo) de lo que se espera del empleado en caso de incendio,

incluyendo números telefónicos de emergencia. Esta póliza debe explicar si el empleado debe tratar de extinguir el fuego y en

qué momento es necesaria la evacuación del empleado y el paciente. Una buena idea es asignar a los empleados un área

específica exterior al área de trabajo para que los empleados puedan contar con ella. Los empleados deben ser entrenados

sobre todas las áreas de seguridad en incendios incluyendo la localización y uso de los extinguidores.

♣ El plan de accidentes debe incluir las políticas y procedimientos que se refieran a accidentes laborales. En el trabajo

pueden ocurrir accidentes menores y otros extremadamente serios, y todos los accidentes deben ser reportados al

contratante dentro de las primeras 24 horas de que ocurrió. Puede ser útil un formato para reporte de accidentes en la

documentación de accidentes y el seguimiento necesario. Puede resultar beneficioso especificar en el plan de accidentes, el

nombre y número telefónico del Doctor al cual el empleado accidentado puede consultar, en caso necesario.

♣ Un plan químico debe incluir la lista de todos los químicos peligrosos que se encuentren en el lugar de trabajo. El plan

químico debe incluir una política para etiquetas secundarias. Las etiquetas secundarias son colocadas en los recipientes de

los químicos que han sido removidos de su recipiente o contenedor original o primario. Por ejemplo, si el alcohol isopropílico

es vaciado de su contendor original dentro de otro contenedor, debe ser etiquetado con una etiqueta secundaria. La etiqueta

secundaria debe contener el nombre del producto, la fecha de elaboración o de transferencia, y cualquier información de

peligro, tal como "irritante al contacto con los ojos".

♣ En conjunto con el plan químico, se deben mantener Hojas de Datos de Seguridad del Material (MSDS por sus siglas en

inglés), para todos los químicos enlistados en el inventario de químicos. Estas hojas son proporcionadas por el fabricante, y

son generalmente enviadas con un producto que es considerado peligroso. Para algunos artículos de uso en casa, se

necesitará contactar el fabricante para obtener las MSDS. Las MSDS contienen información útil incluyendo información

química y física, datos sobre exposición al fuego y potencial de explosión, datos de peligros para la salud, y precauciones al

manejo, pero no limitándose a ingredientes peligrosos. Esta información contenida en las MSDS es útil en caso de derrames

accidentales, salpicaduras, o inyección o ingestión inadvertida.

♣ Otros asuntos que necesitan políticas y procedimientos incluyen el desecho de material peligroso, punzocortante y

residuos biológicos peligrosos. Puede ser necesaria una política separada para cada uno de estos artículos. Puede ser útil

incluir en la política de los residuos biológico-infecciosos como se deben de desechar con exactitud los componentes de

sangre que ya han expirado.

♣ El contratista tal vez quiera proveer un gabinete de primeros auxilios lleno para los empleados. Debe haber disponible una

estación para lavado de ojos para casos de salpicaduras accidentales a los ojos. El contratista debe aportar ropa y equipo

protectores así como un reglamento en relación a su uso. También resulta ser de beneficio tener un reglamento acerca del

lavado de manos.

♣ Una estación de trabajo y muebles ergonómicos pueden ayudar a prevenir los problemas de espalda de los empleados.

Existe una gran cantidad de fabricantes disponibles para consultar.

♣ Una vez que los reglamentos y procedimientos de seguridad apropiados han sido formulados y documentados, es

importante proveer entrenamiento de seguridad a cada empleado. Debe existir una forma u hoja de trabajo para documentar

este entrenamiento. Este entrenamiento debe ser continuo y retomado cada que los productos usados y las asignaturas de

trabajo cambiaran.

Garantía de Calidad ¿Qué es la garantía de calidad? ♣ La garantía de calidad es una filosofía del lugar de trabajo que provee una organización con información para examinar y

regular la calidad del cuidado del paciente. Examinar los asuntos relacionados con la garantía de calidad puede ayudar en la

organización al colocar altos estándares del cuidado a los pacientes a través del constante mejoramiento del servicio. Esto

puede lograrse poniendo metas en relación a la garantía de calidad. Todos los aspectos del cuidado de los pacientes deben

ser analizados y monitoreados; el desafío es regular las variables existentes.

♣ Para un banco de sangre o un centro de servicio de transfusión, la principal meta de un programa de garantía de calidad

debe ser proveer una transfusión segura para todos los pacientes.

¿Cómo se logra esto de la mejor manera? ♣ Primero, tiene ventajas establecer un comité de miembros del equipo de trabajo para servir en un equipo de garantía de

calidad. El equipo debe definir y poner las metas relacionadas con la garantía de calidad. Mientras el equipo de garantía de

calidad puede examinar los asuntos de calidad de una organización entera, esta discusión será limitada a los asuntos

relacionados con el banco de sangre o el centro de servicio de transfusión.

Como se discutió previamente, la organización debe tener reglamentos y procedimientos de seguridad en su sitio. Además,

debe haber manuales de reglamentos y procedimientos prácticos y concisos disponibles para cualquier tarea que se realice

en el centro de servicios de transfusión. Estos manuales de procedimientos deben proveer a los empleados una guía

detallada del desempeño de una tarea asignada.

♣ El propósito principal de un equipo de garantía de calidad puede ser identificar y monitorear los indicadores de calidad. Los

indicadores de calidad pueden utilizarse para analizar las tareas del trabajo que puedan medirse o monitorearse de alguna

manera. Obteniendo y mejorando las mediciones de las tareas que se realizan en el trabajo, se mejora también el servicio.

Por ejemplo, uno de los indicadores de calidad para el banco de sangre puede ser monitorear el tiempo que toma sangrar

para una unidad de sangre de 450 ml. La Asociación Americana de Bancos de Sangre especifica una meta de tiempo de 4 a

10 minutos para una flebotomía de 450 ml. El equipo de garantía de calidad puede incluir esta especificación de tiempo en el

procedimiento de flebotomía. El equipo de trabajo que realiza las flebotomías caninas puede utilizar esto como una marca

base para un tiempo óptimo de sangrado.

♣ Otros indicadores de calidad pueden incluir una o más de los siguientes puntos:

Revisar a los donadores para detectar hematomas en el sitio de flebotomía. Un hematoma excesivo puede indicar que es

necesario variar la técnica de flebotomía.

Realice encuestas a los propietarios de los donadores con respecto a su satisfacción con respecto al programa de donación

de sangre. Los propietarios que están satisfechos con los cuidados brindados a sus animales es más probable que continúen

dentro del programa de donación de sangre y lo recomienden a sus amistades.

♣ Revisión periódica de etiquetas de los productos por tipo de componente, fecha de flebotomía, fecha de caducidad, e

identificación del donador.

♣ Revisión periódica del inventario de productos y su uso.

♣ Control de calidad de los componentes sanguíneos. Los productos con fecha cercana o posterior a la caducidad pueden

ser usadas para monitorear las técnicas de preparación.

Por ejemplo; el hematocrito de paquete de eritrocitos caduco puede examinarse para verificar si el volumen de paquete

celular final designado se ha alcanzado. Una variación puede indicar un problema en la preparación del componente.

♣ Realizar cultivos sanguíneos de un paquete de eritrocitos caduco puede verificar la asepsia en la flebotomía y en la

preparación del componente.

♣ El crioprecipitado puede ser analizado periódicamente para ver la actividad del factor VIII y el fibrinógeno y asegurar que la

preparación del componente es la óptima.

♣ Revisión de todas la reacciones a la transfusión. ¿Existe algún evento común con las transfusiones que resulten en

reacciones adversas?

♣ Revisión de accidentes relacionados a productos tales como bolsas de sangre rotas o puertos contaminados.

♣ Revisión de chequeo de equipo y chequeo de temperatura en refrigeradores, congeladores, baños de agua y calentadores

de sangre.

♣ Otros indicadores de calidad deben de formularse conforme se necesiten.

Registros ♣ Los registros proveen un método de comunicación con otros en relación a la documentación de la información incluyendo

las observaciones y opiniones. Este capítulo discutirá varios tipos diferentes de registros que pueden ser usados en un banco

de sangre veterinario o centro de servicio de transfusiones. Se discutirán las guías para documentación, mantenimiento y

almacenamiento de estos registros. Adicionalmente, se deben consultar y seguir disposiciones federales, estatales y locales.

¿Qué atributos se necesitan para producir un regist ro de buena calidad? ♣ Un registro debe ser legible y preciso.

♣ Debe incluir la fecha de transcripción y la identidad del autor.

♣ El registro debe tener sentido, ser completo y ya que se detalla según se necesite debe llevar un significado.

♣ El registro debe también ser indeleble.

Para un banco de sangre o un centro de servicio de transfusión, los registros son típicamente escritos en papel o en

computadora. Mientras los atributos enlistados arriba pertenecen tanto a registros en papel como en computadora, existen

pocos artículos adicionales enlistados relacionados con los registros en computadora que merezcan ser mencionados.

♣ Los registros en computadora deben ser validados para precisión.

♣ El sistema y datos deben ser respaldados regularmente.

♣ Los datos deben ser protegidos de accesos no autorizados o cambios inadvertidos.

Registros específicos relacionados con el banco de sangre ♣ Un banco de sangre o centro de servicios de transfusión debe mantener ciertos registros relacionados con los donadores

de sangre y los receptores.

♥ Una falla en el mantenimiento de estos registros sobre los donadores de sangre puede poner en peligro el suministro de

sangre, ya que se puede perder u olvidar información valiosa en relación al estado de salud del donador en el momento de la

donación.

♣ Las guías para el mantenimiento de estos registros son las siguientes.

Registros de donadores

Los registros de donadores deben comprender lo siguiente:

♣ Una investigación inicial que incluya hallazgos del examen físico, resultados de laboratorio, estado de vacunación,

tratamiento preventivo contra dirofilariasis.

♣ Forma de consentimiento firmada por el propietario

♣ Examen físico previo a cada donación de sangre

♣ Revisiones anuales incluyendo los hallazgos del examen físico, resultados de laboratorio, estado de vacunación,

tratamiento preventivo contra dirofilariasis.

♣ Documentación de cualquier seguimiento, si es necesario.

Registros relacionados con el laboratorio del banco de sangre

El banco de sangre puede realizar pruebas de laboratorio adicionales a las pruebas que se realizan para la donación. Los

artículos pertinentes que el laboratorio del banco de sangre debe retener son:

♣ Cartas de registro de temperaturas del refrigerador y el congelador de almacenamiento de sangre.

♣ Registros del mantenimiento del equipo

♣ Vendedores de reactivos

♣ Control de calidad de los reactivos

♣ Control de calidad de las unidades de donación

♣ Resultados de tipificación sanguínea y pruebas cruzadas

♣ Registros de las transfusiones

♣ En relación con la sangre y sus componentes, se debe mantener una bitácora del donador compuesta por la fecha en que

la unidad de sangre fue colectada, la identificación de la unidad, volumen final, fecha de caducidad, identificación de quien lo

preparó y la disposición final de la unidad de sangre.

♣ Si los productos de sangre son adquiridos de una fuente externa, la bitácora debe incluir estas unidades.

La información pertinente incluye a quien se le compraron los productos, la fecha en que se recibieron, el nombre e

identificación del componente y fecha de caducidad.

Almacenamiento de registros: ¿Cuánto tiempo? ♣ Recuerde: los registros son almacenados por un periodo de tiempo para propósitos legales y de investigación. Se deben

consultar y seguir las disposiciones federales, estatales y locales. Si no existen estas disposiciones, sería de utilidad

almacenar los registros del laboratorio por al menos 2 años y los registros médicos por tiempo indefinido.

Manejo del Inventario ♣ El manejo del inventario de los productos sanguíneos es difícil ya que el uso de productos sanguíneos puede ser

impredecible y errático. Los productos sanguíneos son una mercancía valiosa y cada esfuerzo debe ser hecho para utilizar

estos productos de manera eficiente. Resulta beneficioso trazar un plan para el manejo de los productos sanguíneos para que

este recurso tan valioso sea usado de una manera puntual y eficiente.

♣ Primero, el número óptimo de unidades de componentes sanguíneos almacenados debe establecerse. Cada producto

almacenado debe ser analizado para determinar el nivel de inventario deseado para ese producto. Si se necesitan grupos de

sangre específicos de un producto en particular, cada grupo debe ser analizado de manera separada.

Por un período de 6 meses, recolectar datos del uso del producto.

Hacer caso omiso de cualquier valor de uso altamente inusual.

Totalizar el número de unidades.

Dividir entre el total del número de semanas en que se recolectaron los datos.

El valor generado de este análisis es el nivel de producto almacenado por semana óptimo.

♣ También deben ser considerados otros factores cuando se determinen los niveles óptimos de almacén de productos

sanguíneos.

El número de pacientes que se les ha dado servicio por medio de clínicas veterinarias. Muchos pacientes pueden necesitar

un alto número de productos. Las enfermedades endémicas y los porcentajes de accidentes deben ser considerados.

El tamaño del área donde se dará servicio de hospital. Un área de servicio grande puede resultar en un mayor número de

pacientes que puedan necesitar de una transfusión.

El peso promedio de los receptores. ¿Qué tamaño de perros es más popular dentro del área de servicio? Los perros grandes

pueden usar más producto que los perros pequeños.

La fecha de caducidad del producto. ¿Qué sistema de anticoagulante-conservador-aditivo ha sido usado? Si el producto se

recibe de un distribuidor, ¿Cuál es la fecha de caducidad promedio?

Los servicios que se ofrecen en la clínica veterinaria. Una clínica que recibe emergencias usará más productos sanguíneos

que una clínica que ofrece sólo servicios de rutina.

♣ También puede ser útil instituir políticas internas en relación a los productos sanguíneos para asistir al manejo del

inventario. Estas políticas deben ser comunicadas a todos los empleados que puedan transfundir productos sanguíneos.

♣ Usar la unidad más vieja primero. Acomodar el refrigerador de tal manera que la unidad más vieja sea sacada primero.

Esto hace que sea más cómodo usar la unidad más vieja.

♣ Instituir guías de orden. Asegúrese de que todos los clínicos sepan que una vez que se da la orden de transfundir, la

unidad se pondrá a templar y el producto debe ser usado.

♣ Instituir guías para la distribución de productos sanguíneos. Especifique cuantas unidades pueden ser preparadas para un

paciente en un momento dado. Puede ser apropiado templar sólo una unidad para un paciente a la vez, dependiendo de la

situación clínica

¿Qué pasa si los productos no son almacenados, como en el caso de sangre entera felina?

♣ El número de donadores necesarios debe ser calculado.

♣ Usar la fórmula para el cálculo del nivel óptimo almacenado que se mencionó anteriormente.

Adicionalmente a la lista de "Otros Factores", considerar la frecuencia con que se puede obtener sangre de un donador de

sangre en particular.

El valor resultante va a proveer un estimado del número aproximado de donadores felinos necesarios para el programa de

donadores de sangre.

Métodos B.F. Feldman1 and C.A. Sink2 1Dept of Biomedical Sciences & Pathobiology, VA-MD - Regional College of Veterinary Medicine, Blacksburg, VA, USA

(Deceased).2Laboratory Diagnostic Services, VA-MD - Regional College of Veterinary Medicine, Blacksburg, VA, USA.

Traducido por: L. Delgadillo Keenan, Clínica Veterinaria Sr. Dog's, Guadalajara, Jalisco, México. (25-Jan-2010).

Consejos útiles:

A lo largo de este texto encontrará los siguientes símbolos para ayudarle a enfocarse en lo que realmente es

importante.

♣ Esta es una característica de rutina del sujeto en discusión. Hemos tratado de resumirlo.

♠ Esta es una característica importante. Usted debe recordar esto.

♥ Algo serio pasará si usted no recuerda esto.

Preparación de sangre entera fresca Caninos ♣ Una vez que se ha colectado una unidad de sangre entera, debe ser almacenada a 1-6° C hasta que sea posible

procesarla.

♣ Una unidad de sangre entera es considerada Sangre entera fresca durante un período de 24 horas posteriores a la

flebotomía.

♣ La sangre entera fresca contiene todos los elementos de la sangre.

Preparación de sangre entera fresca

1. Para iniciar el procesamiento de la unidad de sangre, repasar presionando la línea en la cual estaba anteriormente unida la

aguja. Esto asegurará que el contenido de esta línea esté adecuadamente anticoagulado. Este paso es importante porque

esta línea será ahora sellada en segmentos que serán luego usados como muestras de sangre del donador para pruebas de

compatibilidad.

Cada bolsa de sangre tiene un grupo de números de identificación en la línea de recolección. Coloque el primer sello

después del número de identificación que está localizado en la parte superior de la bolsa, a un lado de los puertos, (ver

Figura 2-4). De esta manera, si los segmentos son separados de manera inadvertida de la bolsa de sangre durante el

almacenamiento, los segmentos pueden ser comparados con la bolsa de sangre para confirmar la identificación.

2. Doble los segmentos orilla con orilla y coloque una liga para mantenerlos unidos (ver Figura 2-5).

3. Si no se va a hacer absolutamente ningún componente de esta unidad de sangre entera fresca, selle y separe las bolsa

satélite y deséchelas.

♣ Si se va a recuperar Plasma a más de 6 horas de la flebotomía, deje las bolsas satélite adheridas.

♥ Nota: Si se va a realizar Plasma fresco congelado , el plasma debe ser separado de los eritrocitos y congelado

completamente dentro de las 8 horas de la recolección si el anticoagulante-conservador es CPD, CP2D o CPDA-1. Si el

anticoagulante-conservador es ACD, la separación y congelamiento debe ocurrir dentro de las 6 horas de la flebotomía

El Plasma puede ser recuperado en cualquier momento durante la vida de almacén de la unidad.

4. Etiquete el producto con el nombre del producto, volumen y fecha de caducidad.

5. La sangre entera fresca debe refrigerarse entre 1 - 6°C.

♣ La sangre entera designada a la preparación de plaquetas debe permanecer a temperatura ambiente hasta que se

remuevan las plaquetas.

Felinos ♣ Cuando se recolecta una jeringa de sangre entera, debe ser transfundida lo más pronto posible.

♣ Si es inminente una demora significativa, almacene el producto entre 1-6°C hasta que sea posible la t ransfusión.

♣ Cuando se utilice el equipo de jeringa de recolección doble para pequeños animales, por favor consulte las instrucciones

proporcionadas por el Banco de Sangre Animal.

Preparación de eritrocitos y plasma fresco congelad o Caninos ♣ Una vez que se ha recolectado una unidad de sangre entera, debe ser refrigerada a 1 - 6°C hasta que sea posible la

preparación de los componentes.

♣ Si se va a realizar Plasma fresco congelado, el plasma debe ser separado de los eritrocitos y congelado por completo

dentro de 8 horas de la recolección si el anticoagulante-conservador es CPD, CP2D o CPDA-1. Si el anticoagulante-

conservador es ACD, la separación y congelamiento deben ocurrir dentro de las 6 horas de la flebotomía.

♣ La sangre entera fresca usada para la preparación de los componentes plaquetarios debe permanecer a temperatura

ambiente hasta que sean removidas las plaquetas.

Separación de los eritrocitos y el plasma

Preparación para la centrifugación

1. Para iniciar el proceso de la preparación de los componentes, repasar presionando la línea en la cual estaba adherida la

aguja. Esto asegurará que la línea esté adecuadamente anticoagulada. Este paso es importante porque esta línea será ahora

sellada en segmentos que serán luego usados como muestras de sangre del donador para pruebas de compatibilidad.

Cada bolsa de sangre tiene un grupo de números de identificación en la línea de recolección. Coloque el primer sello después

del número de identificación que está localizado en la parte superior de la bolsa, a un lado de los puertos, (ver Figura 2-4). De

esta manera, si los segmentos son separados de manera inadvertida de la bolsa de sangre durante el almacenamiento, los

segmentos pueden ser comparados con la bolsa de sangre para confirmar la identificación.

2. Doble los segmentos orilla con orilla y coloque una liga para mantenerlos unidos (ver Figura 2-5). Esto puede ayudar a

prevenir que los segmentos se atoren en la cabeza de la centrífuga durante el procesamiento de la sangre.

3. 3. La bolsa que contiene la sangre entera debe ser etiquetada con el número del donador. Este es un buen momento para

anotar la fecha de la recolección y la de caducidad a la bolsa de sangre entera.

♥ Las fechas de caducidad son determinadas por el tipo de anticoagulante y conservador utilizados. La Tabla 2-1 contiene

las guías para fechas de caducidad.

Las bolsas satélite deben también ser etiquetadas con el nombre del componente, la fecha de recolección, el número del

donador y la fecha de caducidad.

♥ Se deben utilizar marcadores permanentes para que los números no se laven y borren durante el almacenamiento,

calentamiento o descongelamiento.

4. La unidad entera de sangre y bolsas satélite adheridas deben pesarse. Este peso es usado exclusivamente para balancear

la centrífuga.

El balance apropiado de la centrífuga es importante para el desgaste del rotor de la centrífuga, el peso total en vasos de lados

opuestos deben ser iguales.

Cuando se procesa un número impar de unidades de sangre entera, el balance de la centrífuga puede lograrse usando

bolsas de recolección de sangre llenas con un peso igual de glicerina al 10%.

Las ligas y los discos de plástico ya pesados pueden usarse para variar los incrementos en peso.

Centrifugación

5. Las bolsas de sangre deben colocarse en los vasos de la centrífuga con la etiqueta vista hacia afuera. Los vasos de

centrifugación deben colocarse en la centrífuga con la etiqueta de la bolsa hacia afuera. Esto reduce la fuerza centrífuga en

los márgenes sellados.

♣ Las centrífugas con vasos que columpian proveen una mejor separación entre el plasma y los eritrocitos.

6. La unidad de sangre entera debe centrifugarse usando altas revoluciones en una centrífuga refrigerada entre 1 y 6°C. Las

revoluciones altas se definen como 5000 g por 5 minutos (ver "Calibración de la centrífuga" en esta sección para mayor

información relacionada con la velocidad y tiempo de centrifugación).

♥ Una vez que ha cesado la centrifugación, es importante permitir que la centrífuga deje de girar sin la intervención del

operador; cualquier paro brusco del rotor, incluyendo el uso de un freno, puede alterar la línea de eritrocitos/plasma y por lo

tanto contaminación del plasma con eritrocitos.

Separación de los componentes

7. La unidad de sangre entera debe ser removida de la centrífuga sin agitación, para no alterar a los eritrocitos y el plasma y

colocarse en un extractor de plasma (Fenwal; Plasma Separation Stand, Terumo®.)

♣ El extractor de plasma provee una base rígida en la cual se puedan colocar unidades de sangre entera. Se sujeta un plato

con bisagras a la base y puede ser soltado para aplicar presión a la unidad de la sangre entera de manera que hace pasar el

plasma dentro de una bolsa satélite (ver Figura 2-8).

8. Se debe colocar una bolsa satélite vacía en una báscula. El peso debe tararse a cero. El plasma será forzado hacia dentro

de la bolsa satélite vacía.

♠ El número de bolsas satélite adheridas depende del sistema de recolección de sangre que se esté utilizando. Para este

tema en discusión, se usa una bolsa triple: hay dos bolsas satélite, una contiene Adsol®, y una está vacía.

9. Abrir el puerto plástico en la parte superior de la bolsa de recolección de sangre. Remover 230 - 256 gramos de plasma

soltando el plato con bisagras del extractor de plasma y aplicando presión a la bolsa que contiene la sangre entera

centrifugada. El plasma será forzado hacia la bolsa satélite vacía.

♣ La gravedad específica del plasma es 1.023. Por lo tanto, el remover 230 - 256 gramos de plasma dejará la unidad de

eritrocitos con un hematocrito final de 70 - 80%.

♠ Los eritrocitos pueden ser preparados en volúmenes de paquete celular variados, ver la Tabla 2-3 para una guía.

10. Una vez que se logra el peso deseado de plasma, use pinzas hemostáticas para hacer un clamp en la línea de la bolsa

que contiene el plasma cosechado. Luego, rompa el sello de la bolsa con Adsol® y permítale fluir dentro de la bolsa que

contiene los eritrocitos. Selle y desprenda la bolsa que contiene los eritrocitos con Adsol® de las bolsas con el plasma.

Suavemente mezcle los eritrocitos con el Adsol®.

Separación del plasma

11. Quedan dos bolsas satélite; una contiene 230 - 256 gramos de plasma con un volumen de 225 - 250 ml. El plasma puede

dejarse en una bolsa o bien dividirse de manera equitativa entre las dos bolsas.

♠ El volumen de plasma final en la bolsa debe basarse en la talla de receptores más común y en la disponibilidad de plasma.

Sellar la(s) bolsa(s) de plasma.

Determinación del volumen

12. El volumen final del producto sanguíneo se determina de la siguiente manera:

Tarar el peso de la báscula a cero. Pesar cada una de las bolsas de sangre llenas.

El peso de la bolsa vacía se resta del peso final del producto sanguíneo. El peso final del producto dividido entre su gravedad

específica iguala el volumen del producto en mililitros.

La gravedad específica de los eritrocitos es de 1.080 - 1.090; la gravedad específica del plasma es de 1.023.

13. El producto sanguíneo debe etiquetarse con el nombre del producto y el volumen en mililitros.

♠ Si se le ha añadido Adsol® a los eritrocitos, debe anotarse en la bolsa./li>

Almacenamiento

14. Los eritrocitos deben refrigerarse entre 1 - 6°C. El plasma fresco congelado debe almacenarse a -18°C o menos.

Felinos ♣ Para la preparación de componentes de sangre felina, el Animal Blood Bank (enlistado en el Apéndice 1) provee técnicas

de preparación de componentes sanguíneos con la compra del Paquete de Recolección de Doble Jeringa para Pequeños

Animales.

Preparación de crioprecipitado y plasma pobre en cr ioprecipitado Caninos ♣ El Factor Antihemofílico Crioprecipitado (AHF, también conocido como Crioprecipitado o Crio), se hace de una unidad

(225 - 250 ml) de Plasma Fresco Congelado.

♣ El Crio es la porción insoluble del plasma que precipita cuando una unidad de plasma fresco congelado es descongelada

entre 1 - 6°C. El exceso de plasma se remueve del p recipitado, creando el plasma pobre en crioprecipitado (plasma pobre en

crio)

♣ Para hacer el crioprecipitado, se necesita una unidad completa de (225 - 250ml) de plasma fresco congelado con al

menos una bolsa satélite adherida .

Cuando se cosecha el plasma fresco congelado de la unidad de sangre entera, permitir que el plasma fluya dentro de la bolsa

satélite. Sellar y retirar las dos bolsas, pero mantener la línea entre ambas bolsas abierta.

Congelar la unidad de plasma como se especifica en el procedimiento para plasma fresco congelado.

El plasma debe estar completamente congelado y sólido antes de realizar los pasos subsecuentes para obtener

crioprecipitado.

Separación de crioprecipitado y plasma pobre en crioprecipitado.

♣ Permitir que el plasma fresco congelado se descongele a 1-6°C. Este proceso toma aproximadamente 8 hor as.

1. Cosechar el crioprecipitado usando unos de estos dos procedimientos siguientes:

♣ Cuando el plasma se torne blando o como aguanieve, colocar el plasma descongelado en un extractor de plasma. Forzar

el plasma líquido dentro de la bolsa satélite adherida integralmente. La bolsa satélite que contiene el plasma líquido debe

contener 90% del volumen original del plasma fresco congelado

O

♣ Permitir que el plasma fresco congelado se descongele por completo. Centrifugar el Plasma fresco congelado usando altas

revoluciones. El crioprecipitado se precipitará y adherirá a las paredes de la bolsa (ver la Figura 2-11) Forzar el 90% del

sobrenadante dentro de la bolsa satélite adherida.

Cualquier método que se utilice, el plasma pobre en crioprecipitado se forzará dentro de la bolsa satélite y el crioprecipitado

permanece dentro de la bolsa donde originalmente estaba el plasma fresco congelado.

2. Sellar ambas bolsas.

3. Determinar el volumen final. Etiquetar el producto con el nombre del producto, volumen final y fecha de caducidad.

♥ La fecha de caducidad es de un año desde la fecha de la flebotomía (no del día de la preparación)

Almacenamiento

4. Congelar el crioprecipitado y el plasma pobre en crioprecipitado dentro de 1 hora de la preparación. Ambos productos

deben almacenarse a -18°C o menor.

NOTA:

Como una alternativa, el crioprecitado puede ser preparado de Plasma fresco congelado almacenado, al permitir que se

descongele (como se explicó antes) y removiendo el plasma pobre en crio usando una jeringa. Como esto crea un ambiente

"abierto", el producto debe ser usado dentro de las siguientes 24 horas de su preparación.

Preparación de plasma rico en plaquetas ♣ El Plasma Rico en Plaquetas se obtiene de una unidad de sangre entera fresca.

♣ Para preparar el plasma rico en plaquetas, se necesita una unidad de sangre entera fresca con al menos una bolsa

satélite integralmente adherida . La unidad de sangre entera fresca debe mantenerse a 22 - 25°C y ser procesada

inmediatamente para poder obtener plaquetas viables.

Separación de eritrocitos y plasma rico en plaqueta s

Preparación para la centrifugación

1. Para iniciar el proceso de preparación del componente, repasar presionando la línea en la cual estaba la aguja adherida.

Esto asegurará que la línea está adecuadamente anticoagulada. Este paso es importante porque esta línea debe ahora ser

dividida en segmentos que posteriormente serán usados como muestras de sangre del donador para la pruebas de

compatibilidad.

Cada bolsa de sangre tiene números de identificación en la línea de recolección. Colocar el primer sello después del primer

número de identificación que está localizado en la parte superior de la bolsa, junto a los puertos (ver la Figura 2-4). De esta

manera, si los segmentos son separados de la bolsa de sangre inadvertidamente durante el almacenamiento, los segmentos

podrán ser comparados con la bolsa de sangre para confirmar la identificación.

2. Doblar los segmentos orilla con orilla y colocar una liga alrededor para mantenerlos juntos (ver Figura 2-5). Esto ayudará a

prevenir que los segmentos no se enreden en la cabeza de la centrífuga durante el procesamiento de la sangre.

3. La bolsa que contiene la sangre entera debe etiquetarse con el número del donador. Es también el momento de agregar

las fechas de recolección y de caducidad a la bolsa de sangre entera.

♥ Las fechas de caducidad se deben determinar de acuerdo al tipo de anticoagulante y conservador utilizados. La Tabla 2-1

contiene las guías para la fecha de caducidad.

La(s) bolsa(s) satélite también debe ser etiquetada con el nombre del componente, fecha de recolección, número de donador

y fecha de caducidad.

♥ Se deben utilizar marcadores permanentes para que los números no se laven y borren durante el almacenamiento,

calentamiento o descongelamiento.

4. Se deben pesar la unidad entera de sangre y bolsas satélite adheridas. Este peso se usa exclusivamente para balancear la

centrífuga.

♣ El balance apropiado de la centrífuga es importante para el desgaste del rotor de la centrífuga; el peso total de los vasos

opuestos debe ser igual.

♣ Cuando se procesan cantidades impares de unidades de sangre entera, el balance de la centrífuga debe lograrse usando

bolsas de recolección de sangre llenas con un peso igual de glicerina al 10%.

♣ Se deben utilizar ligas y discos de plásticos ya pesados para variar los incrementos de peso.

Centrifugación

5. Las bolsas de sangre deben colocarse en los vasos de la centrífuga con la etiqueta hacia afuera. Los vasos de la

centrífuga deben ser colocados en la centrífuga con la etiqueta de la bolsa hacia afuera. Esto reduce la fuerza centrífuga en

los márgenes sellados.

♣ Las centrífugas con vasos que columpian proveen una más fácil separación del plasma de los eritrocitos.

6. La unidad de sangre entera debe ser centrifugada utilizando pocas revoluciones en una centrífuga entre 22 - 25°C. Pocas

revoluciones se definen como 2000 g por 3 minutos. (Ver "Calibración de la centrífuga" en esta sección, para mayor

información relacionada con la velocidad y tiempo de centrifugación).

♥ Una vez que ha cesado la centrifugación, es importante permitir que la centrífuga se detenga sin la intervención del

operador, ya que cualquier parada brusca del rotor, incluyendo el uso del freno, alterará la línea eritrocitos/plasma, por lo

tanto contamina el plasma con eritrocitos.

Separación de los componentes

7. 7. La unidad de sangre entera debe removerse de la centrífuga sin agitación para no alterar a los eritrocitos y el plasma y

colocarse en le extractor de plasma (Fenwal; Plasma Separation stand. Terumo®.)

♣ El extractor de plasma provee una plataforma rígida en la cual se colocan las unidades de sangre entera. Un plato con

bisagras se sujeta a la base y puede soltarse para aplicarle presión a la unidad de sangre entera para forzar el plasma dentro

de una bolsa satélite (ver Figura 2-8).

8. Debe colocarse una bolsa satélite en una báscula. El peso debe tararse a cero. El plasma rico en plaquetas será forzado

hacia dentro de la bolsa satélite vacía.

♠ El número de bolsas satélite integralmente adheridas dependerá del sistema de recolección que se usó. Para este tema, se

usa una bolsa triple: tiene dos bolsas satélite, una contiene Adsol®, la otra está vacía.

9. Abrir el puerto plástico en la parte superior de la bolsa de recolección de sangre. Remover el plasma soltando el plato con

bisagras del extractor de plasma y aplicando presión a la bolsa que contiene la sangre entera centrifugada. El plasma rico en

plaquetas será forzado hacia la bolsa satélite vacía.

♥ La tarea de separar las plaquetas de la sangre entera centrifugada puede ser un reto, ya que los eritrocitos se encuentran

justo debajo de la capa de plaquetas (ver Figura 2-12). El plasma rico en plaquetas debe tener un color amarillo claro y no

debe contener contaminación visible con eritrocitos.

10. Utilizando pinzas hemostáticas, pinzar y separar la línea de la bolsa que contiene el plasma recolectado y sellar. Procesar

los eritrocitos como se describe en la página 77.

Determinar el volumen

11. Calcular el volumen del plasma rico en plaquetas. Tarar el peso de la báscula en cero y pesar el plasma rico en plaquetas.

Se debe restar el peso de la bolsa vacía del peso final de la bolsa. Al dividir el peso final del producto entre la gravedad

específica apropiada, se puede calcular el volumen en mililitros.

♣ La gravedad específica del plasma es de 1.023, así que 1 gramo de plasma es aproximadamente igual a 1 mililitro de

plasma.

12. El producto final debe ser etiquetado con el nombre del producto y el volumen en mililitros.

Almacenamiento

13. 13. Para poder preservar la viabilidad de las plaquetas, el plasma rico en plaquetas debe dejarse reposar a temperatura

ambiente, con el lado de la etiqueta hacia abajo, por 1 - 2 horas y ser transfundida lo más pronto posible después de esto.

Procedimiento de las pruebas cruzadas Principio ♣ Las pruebas cruzadas mayor y menor se realizan para asistir en la provisión de productos de eritrocitos compatibles y la

posibilidad de aminorar las reacciones adversas a la transfusión.

♣ La prueba cruzada mayor se realiza para detectar anticuerpos en el suero del receptor que puedan aglutinar o lisar los

eritrocitos del donador.

♣ Inversamente, la prueba cruzada menor detecta anticuerpos en el plasma del donador dirigidos contra los eritrocitos del

receptor.

♣ La prueba control puede detectar auto-anticuerpos.

Equipo Solución salina normal

Tubos para pruebas de 12 X 75 mm

Centrífuga (Figura 5-1)

Microscopio

Observador de aglutinación (Figura 5-2) o área bien iluminada

Bloque calentador de 37°C ( Figura 5-3)

Figura 5-1. Immufuge.

Figura 5-2. Observador de aglutinación. (Imagen suministrada por y utilizada bajo permiso de Fisher Scientific).

Figura 5-3. Bloque calentador de 37°C. Procedimiento 1. Preparar las muestras de sangre del donador y el receptor

Eritrocitos y plasma o suero del donador:

Para sangre entera o eritrocitos almacenados:

Las muestras de los donadores pueden obtenerse utilizando un segmento de la bolsa de sangre. Este segmento es separado

de la bolsa y cortado para abrirlo. Después de dejar que esta muestra drene dentro de un tubo de prueba etiquetado de 12 x

75 mm, la muestra de sangre del donador debe centrifugarse y el plasma sobrenadante debe ser separado de los eritrocitos

(Figura 5-4).

Para muestras de sangre obtenidas directamente del donador:

Para las pruebas de compatibilidad es suficiente con un tubo Vacutainertm de 5 ml con tapón rojo y un tubo de 5 ml con EDTA.

El de tapón rojo se centrifuga y el suero es separado de los eritrocitos. Los eritrocitos pueden ser extraídos de la porción

coagulada del tubo de tapón rojo o de la muestra con EDTA.

Eritrocitos y suero del receptor:

La muestra de sangre se obtiene directamente del receptor: un tubo Vacutainertm de 5 ml con tapón rojo y un tubo de 5 ml con

EDTA son suficientes para las pruebas de compatibilidad. El tubo de tapón rojo se centrifuga y el suero se separa de los

eritrocitos. Los eritrocitos pueden obtenerse de la porción coagulada del tubo de tapón rojo o de la muestra con EDTA.

Figura 5-4. Fuentes de eritrocitos del donador. 2. Preparar suspensiones celulares de donador y receptor al 3 - 5% (Ver "Suspensión de células lavadas".

3. Prueba cruzada mayor:

Por cada donador, etiquetar un tubo de prueba de 12 x 75 mm con el número del donador y la palabra "mayor". Agregar dos

gotas del suero del paciente y una gota de la suspensión de células del donador apropiado.

4. Prueba cruzada menor:

Por cada donador, etiquetar un tubo de prueba con el número del donador y la palabra "menor". Agregar dos gotas de suero

del donador apropiado y una gota de la suspensión de células del paciente.

5. Autocontrol:

Para el paciente y cada donador, etiquetar un tubo de prueba con las letras "AC" y el nombre del paciente o el número del

donador. Agregar dos gotas de suero y una gota de gota de la suspensión de células correspondiente para cada muestra.

En resumen:

PRUEBA SUERO/PLASMA CELULAS

Cruzada Mayor Paciente Donador

Cruzada Menor Donador Paciente

Autocontrol paciente Paciente Paciente

PRUEBA SUERO/PLASMA CELULAS

Autocontrol donador Donador Donador

6. Mezclar todos los tubos e incubar a 37°C ( o la temperatura corporal "normal" especie específica) por un mínimo de 15

minutos.

7. Centrifugar a revoluciones para centrifugación salina (Ver Calibración de Centrífuga

8. Leer macroscópicamente. Calificar las reacciones utilizando las guías de "calificación de reacción". Confirmar todas las

reacciones negativas con lectura microscópica.

9. Anotar los resultados.

Interpretación ♥ Las reacciones negativas en las pruebas cruzadas mayor y menor indican compatibilidad.

♥ Una reacción positiva indica incompatibilidad.

♥ Los positivos en el autocontrol deben ser investigados. Los donadores que presentan una prueba de autocontrol positiva

deben ser excluidos.

Suspensión de células lavadas Principio Las muestras de eritrocitos usadas para las pruebas de compatibilidad deben ser lavadas de sustancias potencialmente

contaminantes que puedan interferir con el proceso de la prueba.

Reactivos Solución salina normal

Equipo Tubos para pruebas de 12 x 75 mm

Pipetas de transferencia de plástico

Centrífuga

Procedimiento Etiquetar un tubo de 12 x 75 mm con la identificación apropiada.

2. Con una pipeta, colocar aproximadamente 250 microlitros de eritrocitos en el tubo etiquetado.

Los eritrocitos pueden obtenerse de:

Una muestra de sangre con EDTA recolectada del donador de sangre

La porción coagulada de un tubo Vacutainertm de tapón rojo recolectado del donador, o

Un segmento de la bolsa de sangre.

Llenar el tubo con aproximadamente 4 ml de solución salina normal y mezclar bien, para preparar una suspensión

homogénea de las células en la solución salina.

4. Centrifugar a revoluciones para lavado.

5. Decantar o aspirar el sobrenadante de solución salina.

6. Repetir pasos 3 - 5 de una a tres veces. La meta es lograr un sobrenadante claro e incoloro. (Figura 5-5)

7. Reconstituir las células lavadas con aproximadamente 3 ml de solución salina normal. Esto aproximará a obtener una

suspensión de células al 3 - 5%.

Figura 5-5. El sobrenadante de lavado con solución salina debe ser incoloro y claro (a la derecha).

Calificando la reacción Principio El grado de aglutinación de los eritrocitos y/o hemólisis observado en cualquier procedimiento de pruebas en bancos de

sangre es significativo. El siguiente procedimiento marca un sistema para calificar las reacciones observadas.

Materiales Especímenes para pruebas a ser evaluados ya centrifugados

Observador de aglutinación o área bien iluminada

Procedimiento Remover la muestra de la cabeza de la centrífuga muy suavemente. No alterar el botón de células.

2. Evaluar la muestra para ver hemólisis observando el sobrenadante para detectar presencia de hemoglobina libre.

3. Manteniendo sostenido el tubo bajo el observador de aglutinación (o el área bien iluminada con un fondo blanco), agitar

suavemente el tubo para alterar el botón de eritrocitos. Este movimiento debe mover suavemente el sobrenadante una y otra

vez sobre el botón de las células usando un movimiento de agitación o inclinación.

4. Observar la forma en que los eritrocitos dejan el botón de células rojas.

5. Anotar la reactividad:

4+ Un solo agregado sólido de células

3+ Muchos agregados grandes

2+ Aglutinaciones grandes y coágulos pequeños

1+ Muchas aglutinaciones pequeñas y un fondo de eritrocitos libres

+/- Aglutinaciones Macro Débiles vistas macroscópicamente. Muchas aglutinaciones microscópicamente.

+/- Ninguna Aglutinación Micro vista macroscópicamente. Algunas aglutinaciones microscópicamente.

H Hemólisis

0 Negativo. No se observa ninguna aglutinación ni macroscópica ni microscópicamente.

Favor de consultar la Figura 5-6.

Interpretación Cualquier aglutinación y/o hemólisis observada indica una reacción positiva. La presencia de rouleaux debe ser confirmada

usando el "Procedimiento de Reemplazo Salino".

Figura 5-6. Guías para calificación de la reacción.

Figura 5-6 Guías para calificación de la reacción. Procedimiento de reemplazo salino Principio Los eritrocitos que presentan rouleaux aparentan ser "monedas apiladas" cuando se observan microscópicamente. Las

formaciones de rouleaux se dispersan con la adición de solución salina normal, mientras que la aglutinación verdadera

permanece. Para las pruebas de compatibilidad, rouleaux es considerada una reacción negativa. El siguiente procedimiento

es usado para distinguir rouleaux de una aglutinación verdadera.

Materiales Solución salina normal

Microscopio

Pipeta

Portaobjetos

Procedimiento 1. Si se sospecha de rouleaux, volver a centrifugar la muestra usando revoluciones para salina. Decantar el suero o plasma

(Figura 5-7).

2. Agregar 2 gotas de solución salina al botón de células. Mezclar con una agitación suave hasta que el botón de células esté

disperso.

3. Volver a centrifugar la muestra usando revoluciones para salina.

4. Agitar el tubo y alterar el botón de células dentro del tubo. Calificar la reacción de acuerdo a la guía. Si no se observa

aglutinación macroscópica, hacer la lectura microscópica.

5. Anotar los resultados.

Interpretación ♥ El rouleaux verdadero se dispersará con la adición de solución salina y NO se considera aglutinación.

♣ El rouleaux es comúnmente exhibido en gatos y pacientes con hiperproteinemia.

Figura 5-7. Decantando suero/plasma para procedimiento de reemplazo salino. Calentando la sangre entera, eritrocitos o desconge lando plasma fresco congelado, crio o plasma pobre en crio ♣ La infusión rápida de productos sanguíneos fríos puede causar reacciones adversas en el receptor. Por lo tanto, la sangre

entera y eritrocitos deben calentarse previo a la transfusión y los productos congelados deben descongelarse y calentarse

antes de la transfusión.

♣ Para calentar los productos sanguíneos se pueden utilizar artículos de calor seco, unidades de intercambio de calor a

contracorriente o circulación en baños de agua.

♥ Estos artículos no deben incrementar la temperatura de los eritrocitos al grado de causar hemólisis o incrementar la

temperatura de los productos de plasma que inactive las proteínas plasmáticas viables.

♣ Para vigilar la temperatura de los artículos es útil un termómetro visible o una alarma audible que suene si la temperatura

de calentamiento especificada es excedida.

♣ Existen hornos de microondas especialmente diseñados para descongelar plasma, disponibles comercialmente. Estos

artículos no están diseñados para usarse con eritrocitos.

♣ Los baños de agua son comúnmente utilizados para calentar sangre y descongelar plasma. Es importante usar un baño de

agua en circulación para que la temperatura del agua sea distribuida equitativamente a través del baño.

♣ La temperatura del agua no debe exceder los 37°C (o la temperatura "normal" específica de la especie)

♣ Puede ser de beneficio tener la temperatura del agua algunos grados más fría que la temperatura óptima para compensar

por si ocurre cualquier fluctuación de temperatura.

♣ El agua para el baño debe ser limpia y libre de contaminación bacteriana.

♣ Los productos de sangre deben colocarse en una bolsa de plástico con cerradura de cierre o zipper para mantener los

puertos de la bolsa de sangre libres de posibles contaminaciones bacterianas por el agua del baño.

♣ Si no se usan bolsas de plástico, los puertos de la bolsa de sangre deben mantenerse por arriba de la superficie del agua

para prevenir una posible contaminación. Esto puede lograrse utilizando una aguja para tejer o utensilio para brochetas

limpias ensartadas a través de las aberturas de la parte superior sellada de la bolsa de sangre (Figura 5-8).

♣ Asegurarse que el producto sanguíneo está físicamente separado del circulador mecánico para que el producto sanguíneo

no se pueda atorar con él y pueda resultar potencialmente dañado.

♣ No coloque ningún producto sanguíneo a calentar o descongelar a temperatura ambiente.

♥ Recuerde que los productos sanguíneos son un ambiente rico para el crecimiento de bacterias. El proceso de

calentamiento o descongelamiento y la subsiguiente transfusión deben ocurrir lo más rápido posible.

♣ Los eritrocitos deben ser transfundidos inmediatamente después de haberlos calentado durante 15-20 minutos. Los

volúmenes de plasma de 100 - 250 ml deben descongelarse dentro de 30 - 45 minutos y también deben ser transfundidos

inmediatamente después del descongelamiento. El crio no debe exponerse a temperaturas de 30 - 37°C por más de 15

minutos (esto minimiza la degradación del Factor VIII) y debe transfundirse inmediatamente después del descongelamiento.

♣ Se debe realizar un chequeo visual a todo producto sanguíneo antes de ser transfundido. Para productos de eritrocitos, la

coagulación, cambios de color a morado oscuro o negro o hemólisis son indicativos de contaminación bacteriana.

Figura 5-8. Calentando una unidad de sangre: los puertos deben mantenerse libres de contaminación bacteriana. Esto se logra mejor con una bolsa de plástico con cerradura de zipper o manteniendo los puertos fuera del borde de la superficie del

agua.

Calibración de la centrífuga En los Bancos de sangre, las centrífugas son usadas para la preparación de los componentes y pruebas de compatibilidad; la

velocidad y revoluciones de la centrífuga son dos consideraciones importantes cuando se realizan estos procedimientos.

♣ La velocidad de la centrífuga es usualmente especificada en los procedimientos de preparación de los componentes

usando el valor conocido como fuerza centrífuga relativa o fcr.

♣ La velocidad de la centrífuga varía según el modelo y el fabricante.

♣ La Immunofuge® es una centrífuga ampliamente utilizada para las pruebas de compatibilidad; los tiempos de

centrifugación en las pruebas de compatibilidad se especifican generalmente para el uso de este equipo.

♣ Antes de usarse, las centrífugas usadas para la preparación de componentes o pruebas de compatibilidad deben ser

evaluadas para asegurar su calidad.

♣ El siguiente procedimiento resaltará el proceso de la calibración de la centrífuga para la preparación de componentes y

pruebas serológicas. Una vez que los tiempos de centrifugación son establecidos, deben confirmarse anualmente y después

de reparaciones o ajustes a la centrífuga.

Calibración de las centrífugas para preparación de componentes ♣ Los componentes sanguíneos son preparados por separación de sangre entera; este proceso puede acelerarse por el uso

de una centrífuga.

♣ El tiempo de centrifugación y la velocidad dependen de los tipos de componentes sanguíneos que se van a realizar.

Se requieren 5 minutos de muchas revoluciones (5000 g) para la preparación de eritrocitos

Se utilizan 3 minutos de pocas revoluciones (2000 g) en la preparación de plasma rico en plaquetas.

♠ Los tiempos de centrifugación que se dan incluyen el tiempo de aceleración, pero no incluyen el tiempo de desaceleración.

♣ La fuerza centrífuga relativa (en g) se calcula utilizando la siguiente fórmula:

FCR (en g)= 28.38 X radio del rotor de la centrífuga en pulgadas X (rpm/1000)2

♣ La evaluación del tiempo a altas revoluciones se obtiene realizando un control de calidad de los componentes que se

hicieron.

♣ Los eritrocitos deben ser evaluados confirmando el hematocrito final de la unidad.

♣ El crioprecipitado debe ser evaluado confirmando la actividad del fibrinógeno y el Factor VIII

♣ La cantidad de revoluciones debe incrementarse o disminuirse de acuerdo al resultado de estas pruebas.

♣ Las revoluciones por minuto (rpm) pueden confirmarse usando un tacómetro.

Calibración de la centrífuga para pruebas de compat ibilidad ♣ La calibración de las centrífugas usadas para pruebas serológicas se realiza para asegurar que las revoluciones no causen

resultados ya sean falsos positivos o falsos negativos. Los siguientes procedimientos deben usarse para confirmar la

calibración en centrífugas nuevas, anualmente o después de cualquier ajuste o reparación.

♥ Por favor note que se evalúa el comportamiento de lo s eritrocitos, NO la fuerza de reacción.

Centrifugación salina

En las pruebas de compatibilidad, los eritrocitos que están suspendidos en solución salina requieren un tiempo de

centrifugación basado en la reactividad de los eritrocitos en este medio. El siguiente procedimiento establece el tiempo de

centrifugación salina.

Materiales necesarios

Suero que producirá una reacción 1+

Dos muestras de eritrocitos al 3 - 5%:

"Positivo" - Eritrocitos que reaccionarán con la muestra de suero antes mencionada

"Negativo" - Eritrocitos que no reaccionarán con la muestra de suero antes mencionada.

Tubos para la prueba de 12 x 75 mm

Pipetas

Observador de aglutinación o área bien iluminada

Centrífuga

Procedimiento

1. Colocar diez tubos para la prueba de 12 x 75 mm en una rejilla. Colocar dos gotas de suero en cada tubo.

2. En 5 de estos tubos, agregar una gota de eritrocitos "Negativos".

3. En los otros 5 tubos, agregar una gota de eritrocitos "Positivos".

4. Existen ahora 5 pares de tubos, cada uno conteniendo una muestra positiva y una negativa.

Centrifugar un par por 10 segundos, un par por 15 segundos, un par por 20 segundos, un par por 30 segundos y un par por

40 segundos. Registrar los resultados en una hoja de trabajo similar a la que se muestra en la Tabla 5-1.

Tabla 5-1. Hoja de trabajo de calibración de centrí fuga serológica

Para tiempo de revoluciones salina:

TIEMPO EN

SEGUNDOS

¿SOBRENADANTE

CLARO?

¿BOTÓN DE

CÉLULAS

CLARAMENTE

DELINEADO?

¿CÉLULAS

FÁCILMENTE

RESUSPENDIDAS?

¿EL

POSITIVO

ES

POSITIVO?

¿EL

NEGATIVO

ES

NEGATIVO?

10

Tabla 5-1. Hoja de trabajo de calibración de centrí fuga serológica

Para tiempo de revoluciones salina:

TIEMPO EN

SEGUNDOS

¿SOBRENADANTE

CLARO?

¿BOTÓN DE

CÉLULAS

CLARAMENTE

DELINEADO?

¿CÉLULAS

FÁCILMENTE

RESUSPENDIDAS?

¿EL

POSITIVO

ES

POSITIVO?

¿EL

NEGATIVO

ES

NEGATIVO?

15

20

30

40

Para tiempo de revoluciones en lavado:

TIEMPO EN SEGUNDOS ¿SOBRENADANTE CLARO?

¿BOTÓN DE CÉLULAS

CLARAMENTE

DELINEADO?

30

45

60

90

120

Interpretación

El tiempo de centrifugación que debe usarse para centrifugación salina es el tiempo de centrifugación más corto que llene los

siguientes criterios (tal y como se especifica por el American Association of Blood Banks):

1. El tubo positivo es 1+ positivo.

2. El tubo negativo es negativo.

3. El botón de células está claramente delineado.

4. El sobrenadante es claro.

5. El botón de células puede resuspenderse fácilmente.

NOTA: Si se utilizan aditivos (tales como albúmina o solución salina de baja fuerza iónica—o hipotónica) en las pruebas

cruzadas, este procedimiento debe ser modificado para establecer los tiempos de revoluciones. Esto debe realizarse en un

procedimiento separado del que se usa para establecer las revoluciones salinas. Se debe preparar un juego de 5 muestras en

pares como se explicó en el procedimiento anterior. El aditivo apropiado debe incubarse con cada par de tubos para el tiempo

apropiado de incubación y luego evaluado para el tiempo de las revoluciones.

Revoluciones para lavado

Los eritrocitos usados para las pruebas de compatibilidad deben ser lavados para remover las sustancias potencialmente

contaminantes, las cuales pueden interferir con los procedimientos de las pruebas. El siguiente procedimiento establece el

tiempo de centrifugación para las revoluciones de lavado.

Materiales necesarios:

Espécimen de sangre con EDTA con un hematocrito normal

Solución salina normal

Tubos para pruebas de 12 x 75 mm

Pipetas

Observador de aglutinación o área bien iluminada

Centrífuga

Procedimiento

1. Colocar cinco tubos para pruebas de 12 x75 mm en una rejilla.

2. Agregar al menos 250 microlitros del espécimen de sangre con EDTA a cada tubo.

3. Agregar aproximadamente 4 ml de solución salina normal a cada tubo. Mezclar bien para homogenizar.

4. Centrifugar un tubo por 30 segundos (recordar balancear!), un tubo por 45 segundos, un tubo por 60 segundos, un tubo por

90 segundos y un tubo por 120 segundos. Registrar los resultados en una hoja de trabajo similar a la Tabla 5-1.

Interpretación

El tiempo de centrifugación que debe usarse en las revoluciones para lavado es el tiempo de centrifugación más corto que

llene los siguientes criterios:

1. El sobrenadante es claro.

2. El botón de células está claramente delineado.

3. Los eritrocitos están en un botón compacto.

Resultados

Los tiempos de revoluciones deben ser publicados y/o incluidos en los procedimientos para asegurar la uniformidad en la

prueba.

Appendices B.F. Feldman1 and C.A. Sink2 1Dept of Biomedical Sciences & Pathobiology, VA-MD - Regional College of Veterinary Medicine, Blacksburg, VA, USA

(Deceased).2Laboratory Diagnostic Services, VA-MD - Regional College of Veterinary Medicine, Blacksburg, VA, USA. Appendix 1: Manufacturers of Blood Collection Bags

For Dogs: Baxter Fenwal

1627 Lake Cook Road

Deerfield, IL 60015

Telephone: (800) 766-1077

http://www.baxterfenwal.com

Terumo Medical Corporation

2101 Cottontail Lane

Somerset, NJ 08873

Telephone: (800) 283-7866

http://www.terumomedical.com

Haemonetics Corporation

400 Wood Road

Braintree, MA 02184-9114

Telephone: (781) 848-7100

http://www.haemonetics.com

For Cats: Animal Blood Bank

P.O.Box 118

Dixon, CA 65620

Telephone: (800) 243-5759

http://www.animalbloodbank.com

Appendix 2: Organizations with Veterinary Blood Ban k Interests

Animal Blood Bank

P.O.Box 118

Dixon, CA 65620

Telephone: (800) 243-5759

http://www.animalbloodbank.com

Eastern Veterinary Blood Bank

808 Bestgate Road

Suite 111

Annapolis, MD 21401

Telephone: 800-949-EVBB

http://www.evbb.com

Hemopet Blood Bank

11330 Markon Drive

Garden Grove, CA 92841 USA

Phone: 714-891-2022

http://www.hemopet.com