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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE ODONTOLOGÍA
UNIDAD DE INVESTIGACIÓN, TITULACIÓN Y GRADUACIÓN
TEMA:
“ACCION ANTIBACTERIANA DE LA PROCAÍNA AL 2% MAS
CAFEÍNA AL 0.25% Y DEL PROPÓLEO SOBRE CEPAS DE
ENTEROCOCCUS FAECALIS, COMO COADYUVANTE EN LA
IRRIGACION EN EL TRATAMIENTO DE CONDUCTO”.
TRABAJO DE TITULACIÓN PREVIO A LA OBTENCIÓN DEL GRADO
ACADÉMICO DE ODONTÓLOGO
AUTOR:
TATIANA GALUTH BARRAGAN CHAGUARO
TUTOR:
DR. ROBERTO JAVIER ROMERO CAZAREZ
QUITO
Enero, 2015
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DEDICATORIA
A Dios quien me ha dado la fe, fortaleza, y salud, permitiéndome luchar para seguir
adelante.
A mis padres que con su amor, su apoyo incondicional, esfuerzo y sacrificio me han
impulsado día a día y que gracias a ustedes he llegado a ser lo que soy, son los pilares
fundamentales de mi vida, es un privilegio ser su hija.
A mis maestros, compañeros y amigos que día a día compartieron sus conocimientos,
momentos de alegrías y tristezas y a todos quienes estuvieron a mi lado para apoyarme y
ayudarme a llegar a culminar una meta más.
Para todos ellos esta dedicatoria.
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AGRADECIMIENTO
Primero y antes que nada, doy a gracias a Dios, por estar conmigo en cada paso que
doy, por haber puesto en mi camino a personas que han sido guía, soporte y compañía
durante todo el periodo de estudios.
De igual manera mi más sincero agradecimiento al honorable maestro y tutor de mi tesis
Dr. Roberto Romero, que con su sabiduría me guio para sacar adelante esta tesis,
igualmente a la querida Lcda. Yolanda Andrade y a mis amigos, que con sus
conocimientos y consejos fueron un pilar fundamental en el desarrollo experimental de este
trabajo.
Quiero agradecer también a todos mis ilustres maestros que durante estos años de
estudio compartieron sus conocimientos, consejos, experiencia, y por su gran calidad
humana.
Gracias a todos.
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AUTORIZACIÓN DE LA AUTORÍA INTELECTUAL
Yo, Tatiana Galuth Barragán Chaguaro, en calidad de autor de la tesis: “ACCION
ANTIBACTERIANA DE LA PROCAÍNA AL 2% MAS CAFEÍNA AL 0.25% Y DEL
PROPÓLEO SOBRE CEPAS DE ENTEROCOCCUS FAECALIS, COMO
COADYUVANTE EN LA IRRIGACION EN EL TRATAMIENTO DE CONDUCTO”.
por la presente autorizo a la UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR, hacer uso de
todos los contenidos que me pertenecen o de parte de los que contienen esta obra, con fines
estrictamente académicos o de investigación.
Los derechos que como autor me corresponden, con excepción de la presente
autorización, seguirán vigentes a mi favor, de conformidad con lo establecido en los
artículos 5, 6, 8, 19 y además pertinentes de la Ley de Prioridad Intelectual y su
Reglamento.
Quito, a los 19 días del mes de Enero del año 2016
---------------------------------------------------
Tatiana Galuth Barragán Chaguaro
C.I. 0202095600
Correo electrónico: [email protected]
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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE ODONTOLOGÍA
INSTITUTO SUPERIOR DE INVESTIGACIÓN Y POSGRADO
UNIDAD DE INVESTIGACIÓN, GRADUACIÓN Y TITULACIÓN
Yo, Dr. Roberto Xavier Romero Cazares con C.I. 1714332382 en mi carácter de Tutor
del trabajo de Grado, presentado por la señorita Tatiana Galuth Barragán Chaguaro, para
optar el Título de Odontólogo, cuyo título es “ACCION BACTERIANA DE LA
PROCAÍNA AL 2% MÀS CAFEÍNA AL 0.25% Y DEL PROPÓLEO SOBRE CEPAS
DE ENTEROCOCCUS FAECALIS, COMO COADYUVANTE EN LA IRRIGACIÒN EN
EL TRATAMIENTO DE CONDUCTO”.
Considero que dicho Trabajo reúne los requisitos y méritos suficientes para ser
sometido a la presentación pública y evaluación por parte del jurado examinador que se
designe.
En la ciudad de Quito, a los 04 días del mes de Diciembre del 2015.
………………………………………
Dr. Roberto Xavier Romero Cazares
C.I. 1714332382
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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE ODONTOLOGÍA
INSTITUTO SUPERIOR DE INVESTIGACIÓN Y POSGRADO
UNIDAD DE INVESTIGACIÓN, GRADUACIÓN Y TITULACIÓN
CERTIFICACION DE APROBACION DEL JURADO
TEMA: “ACCIÓN ANTIBACTERIANA DE LA PROCAÍNA MÁS CAFEÍNA Y
DEL PROPÓLEO SOBRE CEPAS DE ENTEROCOCCUS FAECALIS COMO
COADYUVANTE EN LA IRRIGACIÓN EN EL TRATAMIENTO DE CONDUCTO”
Autor: Srita. Tatiana Galuth Barragán Chaguaro
El presente trabajo de investigación, luego de cumplir con todos los requerimientos
normativos, en nombre de la UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR,
FACULTAD DE ODONTOLOGÍA es aprobado; por lo tanto el jurado que se detalla a
continuación, autoriza a la postulante la presentación a efectos de la sustentación pública.
Quito, 19 de Enero del 2016.
-------------------------------
Dra. Erika Elizabeth Espinosa Torres
PRESIDENTE DE TRIBUNAL
----------------------------------- --------------------------------------
Dra. Silvana Beatriz Terán Ayala Dra. Alexie Elizabeth Izquierdo Bucheli
MIEMBRO DE TRIBUNAL MIEMBRO DE TRIBUNAL
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ÍNDICE DE CONTENIDOS
DEDICATORIA .................................................................................................................... ii
AGRADECIMIENTO .......................................................................................................... iii
AUTORIZACIÓN DE LA AUTORÍA INTELECTUAL .................................................... iv
UNIDAD DE INVESTIGACIÓN, GRADUACIÓN Y TITULACIÓN ............................... v
ÍNDICE DE CONTENIDOS ............................................................................................... vii
ÍNDICE DE ANEXOS .......................................................................................................... x
INDICE DE FIGURAS ........................................................................................................ xi
ÍNDICE DE TABLA ........................................................................................................... xii
ÍNDICE DE CUADROS .................................................................................................... xiii
RESUMEN ......................................................................................................................... xiv
ABSTRACT ........................................................................................................................ xv
INTRODUCCIÓN ................................................................................................................. 1
CAPÍTULO I ......................................................................................................................... 4
1 EL PROBLEMA ................................................................................................... 4
1.1 Planteamiento del problema .................................................................................. 4
1.2 Objetivos de la investigación ................................................................................ 6
1.2.1 Objetivo General ................................................................................................... 6
1.2.2 Objetivos Específicos ............................................................................................ 6
1.3 Justificación .......................................................................................................... 7
1.4 Hipótesis ............................................................................................................... 8
CAPITULO II ........................................................................................................................ 9
2 MARCO TEÓRICO .............................................................................................. 9
2.1 Endodoncia ........................................................................................................... 9
2.1.1 Objetivos de la Endodoncia .................................................................................. 9
2.2 Biofilm .................................................................................................................. 9
2.2.1 Microbiología en Endodoncia ............................................................................. 10
2.2.2 Microflora endodóntica ....................................................................................... 11
2.2.3 Microflora en los tipos de infecciones endodónticas .......................................... 11
2.2.3.1 La infección primaria: ......................................................................................... 12
2.2.3.2 La infección secundaria ...................................................................................... 13
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viii
2.2.3.2.1 Género Enterococcus .......................................................................................... 14
2.3 Irrigación en Endodoncia .................................................................................... 18
2.3.1 Objetivos de la irrigación .................................................................................... 18
2.3.2 Momentos de la irrigación .................................................................................. 19
2.3.2.1 Antes de la instrumentación ................................................................................ 19
2.3.2.2 Durante la instrumentación: ................................................................................ 19
2.3.2.3 Después de la instrumentación:........................................................................... 19
2.3.3 Requisitos de un irrigante ................................................................................... 20
2.3.4 Soluciones irrigadoras ......................................................................................... 20
2.3.4.1 Solución salina .................................................................................................... 21
2.3.4.2 Hipoclorito de Sodio ........................................................................................... 21
2.3.4.3 Peróxido de Hidrógeno ....................................................................................... 22
2.3.4.4 Gly oxide ............................................................................................................. 23
2.3.4.5 Gluconato de Clorhexidina ................................................................................. 23
2.3.4.6 Agentes Quelantes .............................................................................................. 24
2.3.4.7 Descalcificadores ................................................................................................ 25
2.3.4.8 Dióxido de Clorina .............................................................................................. 25
2.3.4.9 Yodo yoduro de Potasio ...................................................................................... 26
2.3.5 Parámetros para evaluar la eficacia de un irrigante ............................................ 26
2.3.6 Irrigantes alternativos .......................................................................................... 27
2.3.7 Propóleo .............................................................................................................. 27
2.3.7.1 Composición del Propóleo .................................................................................. 27
2.3.7.2 Propiedades biológicas del Propóleo: ................................................................. 29
2.3.7.3 Implicaciones del Propóleo: ................................................................................ 29
2.4 Terapia Neural..................................................................................................... 30
2.4.1.1 Generalidades ...................................................................................................... 30
2.4.1.2 Procaína ............................................................................................................... 31
2.4.1.2.1 Estructura de la molécula de Procaína. ............................................................... 32
2.4.1.2.2 Se compone de 3 porciones fundamentales: ....................................................... 32
2.4.1.2.3 Farmacocinética .................................................................................................. 32
2.4.1.2.4 Metabolismo y distribución ................................................................................ 33
2.4.1.2.5 Mecanismos de acción y efectos de la Procaína ................................................. 33
2.4.1.3 Cafeína ................................................................................................................ 34
2.4.1.3.1 Efectos farmacológicos ....................................................................................... 34
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ix
2.4.1.3.2 Farmacocinética .................................................................................................. 35
2.4.1.3.3 Interacciones farmacológicas .............................................................................. 35
2.4.1.3.4 Reacciones adversas ............................................................................................ 36
2.4.1.3.5 Utilización terapéutica de la cafeína ................................................................... 36
2.4.1.3.6 Características físico-químicas ........................................................................... 37
CAPÍTULO III .................................................................................................................... 38
3 METODOLOGÍA ............................................................................................... 38
3.1 Tipo de investigación .......................................................................................... 38
3.2 Muestra ............................................................................................................... 39
3.3 Criterios de inclusión y exclusión ....................................................................... 40
3.3.1 Criterios de inclusión .......................................................................................... 40
3.3.2 Criterios de exclusión ......................................................................................... 40
3.4 Variables ............................................................................................................. 40
3.5 Procedimiento ..................................................................................................... 42
3.5.1 Activación de la cepa de Enterococcus Faecalis ATCC 29212 ......................... 42
3.5.1.1 Descripción de la activación: .............................................................................. 42
3.5.2 Estandarización de la cepa de Enterococcus Faecalis ........................................ 43
3.5.3 Prueba de acción antibacteriana de las sustancias. ............................................. 44
3.5.4 Eliminación de los desechos utilizados en el laboratorio ................................... 47
3.6 Aspectos éticos: .................................................................................................. 48
CAPITULO IV .................................................................................................................... 49
4 Resultados ........................................................................................................... 49
4.1 Análisis de Resultados ........................................................................................ 49
4.2 Discusión de Resultados ..................................................................................... 56
CAPITULO V ..................................................................................................................... 59
5.1 CONCLUSIONES: ............................................................................................. 59
5.2 RECOMENDACIONES ..................................................................................... 60
BIBLIOGRAFÍA ................................................................................................................. 61
ANEXOS ............................................................................................................................. 64
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x
ÍNDICE DE ANEXOS
Anexo 1: Certificado Microbiológico de la Cepa Enterococcus Faecalis ATCC 29212 ... 64
Anexo 2 Información de la casa distribuidora del método a utilizar de acuerdo a la cepa. ..
............................................................................................................................. 65
Anexo 3: Información de la casa distribuidora del método a utilizar de acuerdo a la cepa. ..
............................................................................................................................. 66
Anexo 4: Método para activación de la cepa. ..................................................................... 67
Anexo 5: Solicitud para Comité de Ética ........................................................................... 68
Anexo 6: Asignación de tutor para Comité de Ética .......................................................... 69
Anexo 7: Aprobación de Comité de Ética. ......................................................................... 70
Anexo 8: Solicitud para ingreso al Laboratorio de Microbiología de la Facultad de
Odontología ......................................................................................................... 71
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xi
ÍNDICE DE FIGURAS
Figura 1: a) Cepa de Enterococcus Faecalis ATCC 29212. B) Activación de la Cepa
Enterococcus Faecalis.......................................................................................................... 42
Figura 2: Presencia de crecimiento bacteriano (turbidez). ................................................. 43
Figura 3: Escala de Mac Farland ........................................................................................ 43
Figura 4: Siembra de la bacteria en agar sangre de cordero. .............................................. 44
Figura 5: a) pipeta de 10ul b) extracto de Propóleo c) Suero Fisiológico d) Impletol e)
Hipoclorito de Sodio. ........................................................................................................... 45
Figura 6: Colocación de sustancias a estudiar. ................................................................... 45
Figura 7: Colocación de discos blanco embebidas en las sustancias a tratar. .................... 46
Figura 8: a) Colocación en Jarra de Anaerobiosis, b) Colocación en incubadora. ............. 46
Figura 9::a) Observación de halos de inhibición, b) Medición de halos. ........................... 47
Figura 10; a) Cepas cultivadas. b) Autoclavado previo a eliminación ............................... 48
Figura 11: Colocación en funda roja. b) Rotulación de desechos infecciosos ................... 48
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xii
ÍNDICE DE TABLA
Tabla 1 Medición de los halos de inhibición de las Sustancias ........................................... 49
Tabla 2 Resultados de la prueba de Normalidad ................................................................. 50
Tabla 3 Resultados de la prueba de Kruskal – Wallis ......................................................... 51
Tabla 4 Resultados de la prueba dos a dos. ......................................................................... 52
Tabla 5 Resultados de la prueba U de Mann-Whitney ........................................................ 53
Tabla 6 Comparación de Medias ......................................................................................... 54
Tabla 7 Comparación de medias entre sustancias a investigar. ........................................... 55
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xiii
ÍNDICE DE CUADROS
Cuadro 1: Composición del Propóleo .................................................................................. 28
Cuadro 2: Variables dependientes e independientes .......................................................... 41
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xiv
ACCION ANTIBACTERIANA DE LA PROCAÍNA AL 2% MAS CAFEÍNA AL
0.25% Y DEL PROPÓLEO SOBRE CEPAS DE ENTEROCOCCUS FAECALIS,
COMO COADYUVANTE EN LA IRRIGACION EN EL TRATAMIENTO DE
CONDUCTO
RESUMEN
El objetivo de este estudio fue comprobar la acción bacteriana de dos sustancias, tanto
del Propóleo como de la Procaína más Cafeína, para lo cual, se efectuaron pruebas de
difusión en discos sobre cepas de Enterococcus Faecalis ATCC 29212, principal bacteria
relacionada con un 90% de infecciones secundarias.
Se realizó un total de 28 muestras de cepas de Enterococcus Faecalis las cuales fueron
sembradas en un medio de agar sangre de cordero, se colocaron 4 discos en cada caja Petri,
el primer disco contiene Hipoclorito de Sodio al 5%, sustancia que nos va a ayudar para el
control positivo, la segunda sustancia que se colocó es, la tintura Propóleo al 40%, la
tercera sustancia en colocar fue la Procaína al 2% más Cafeína al 0.25% sustancia que se
presenta con el nombre comercial Impletol, la última sustancia colocada fue el suero
fisiológico utilizada como control negativo, posteriormente las llevamos a un ambiente de
anaerobiosis y se las llevó a la incubadora a 35°C por 48. A las 48 horas se procedió a
medir los halos de cada sustancia en las 28 cajas Petri, estos datos obtenidos fueron
analizados con el Test de Kolmogorov - Smirnov complementando con Shapiro – Wilk,
Kruskal Wallis y Mann Whitney, arrojando como resultados que la sustancia que tuvo
mejor inhibición fue el Hipoclorito de Sodio al 5%, seguido por la tintura de Propóleo al
40% y finalmente el Impletol al no presentar dicha acción sobre cepas de Enterococcus
Faecalis.
Pudiendo concluir que el Hipoclorito de Sodio al 5% y el Propóleo son sustancias aptas
para utilizarlas como irrigante de conductos, descartando así la acción antibacteriana del
Impletol, el cual le atribuyen para su comercialización.
PALABRAS CLAVE: ENTEROCOCCUS FAECALIS, HIPOCLORITO DE SODIO,
PROPÓLEO, PROCAÍNA, CAFEÍNA.
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xv
ANTIBACTERIAL ACTION OF PROCAINE 2% MORE CAFFEINE 0.25%
AND PROPOLIS ON STRAINS OF ENTEROCOCCUS FAECALIS, AS AN
ADJUNCT IN IRRIGATION CANAL TREATMENT
ABSTRACT
The goal of this study was to verify the antibacterial effects of two substances, Propolis
and Procaine whit Caffeine, for which this study executed dice diffusion test son ATCC
29212 Enterococcus Faecalis strains, the bacteria that causes 90% of secondary infections.
There werw a total of 28 Enterococcus Faecalis samples, whisch were cultivated in a
lamb blood agar médium, placing four discs in each Petri disch. The first disc contained
5% sodium hypoclorite, the third substance was 2% Procaine with 0.25% Caffeine
(commercially know as Impletol), and the final substance was physiological saline
solution, used as the negative control; the samples werw then subjected to anaerobiosis and
incubated al 35ºC for 48 hours. After incubation, we proceeded to measure the inhibition
halos for each substance in all 28 Petri dishes; this data was analyzed with the
Kolmogorov-Smirnov test, complemented with the Shapiro-Wilk, Kruskal- Wallis and
Mann – Whitney tests, observing the largest inhibition halos around the 5% Sodium
Hypoclorite salution, followed by the 40% Propolis dye, and finally by Impletol, which did
not inhibit bacterial growth.
Under this premise, this study concludes that 5% Sodium Hypoclorite and Propolis are
apt for use as antibacterial agents, discarding the antibacterial effects that are commercially
attributed to Impletol.
Keywords: ENTEROCOCCUS FAECALIS, SODIUM HYPOCLORITE, PROPOLIS,
PROCAINE, CAFFEINE.
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1
INTRODUCCIÓN
Simultáneamente al desarrollo de la industria farmacéutica se ha desplegado un gran
interés por parte de los investigadores en estudiar diferentes sustancias de origen natural
que poseen actividad farmacológica con un efecto eficaz contra microorganismos
patógenos. Por lo que desde hace años viene creciendo la corriente que propone la
utilización de la terapia alternativa o de productos naturales como solución a los
problemas médicos y odontológicos. (Pérez, 2009).
La medicina natural, a partir de plantas y sus propiedades antimicrobianas, últimamente
ha recibido mucha atención de los científicos, comprobando una serie de propiedades de
estos compuestos que van confirmando que permiten combatir a los agentes patógenos, “el
Propóleo es la única sustancia de la colmena que impide el desarrollo de los hongos
aunque hasta el momento no existe aplicación”. (Jean-Prost, Medori, & Le Conte, 2007).
Hoy en día se está investigando nuevas alternativas de tratamientos antimicrobianos,
dado el continuo aumento de la resistencia bacteriana a los antibióticos convencionales, y
por las reacciones adversas que estos producen en algunos pacientes. El Propóleo es un
producto natural con variadas propiedades medicinales, “las propiedades asépticas y
cicatrizantes son conocidas desde hace tiempo” Jean-Prost et al. (2007). Mientras que por
otro lado la Procaína más Cafeína es la sustancia más popular en el mercado de Terapia
Neural ya que brinda excelentes resultados en diversas enfermedades tratadas, la Terapia
Neural es un método terapéutico que consiste en la utilización de la Procaína a diferentes
concentraciones y actúa a nivel del Sistema Nervioso para el tratamiento de enfermedades
agudas o crónicas. Desde el año 1890 se comenzó a utilizar por médicos Alemanes esta
terapia y hasta la actualidad es muy valorada. (León, 2006).
En 1920 el doctor Leriche inició la aplicación de Procaína para tratar las enfermedades
inflamatorias y traumas, “La Procaína en la actualidad se utiliza mucho en medicina
alternativa, aunque las investigaciones se remontan a 1925 (León, 2006). “En el instituto
Eichholz se comprobó que la cafeína al realizar sinergismo con la Procaína disminuye la
toxicidad de la Procaína y aumenta su efecto especialmente el anestésico”. (Pardo,
Alvarez, Barral, & Farré, 2007).
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2
Actualmente se están realizando muchos estudios a estas sustancias que cada vez se
están haciendo más populares debido a los beneficios obtenidos, siendo así, utilizada en
diferentes tipos de tratamientos, dándole a la Procaína y al Propóleo “propiedades
anestésicas, antisépticas, antiinflamatorias, antibacterianas, fungicidas y cicatrizantes”
(Philippe, 1988). “Uno de los principales usos en Odontología de la Procaína es el bloqueo
de los puntos dolorosos en el Síndrome de Disfunción Miofacial (músculos
masticatorios)”. (León, 2006).
Dado que el factor etiológico principal de las enfermedades pulpares es de origen
microbiológico, la microflora bacteriana va a variar de acuerdo al tipo de lesiones,
predominando así las bacterias anaerobias facultativas o estrictas, destacándose los
anaerobios Gram negativos. (Bergenholtz, Horsted, & Reit, 2011).
La erradicación de microorganismos persistentes en los conductos radiculares se realiza
a través de una técnica mecánico- química, pero se ha comprobado que este procedimiento,
si bien es cierto, elimina la mayoría de microorganismos pero, por la amplia anatomía que
ciertos conductos presentan (conductos accesorios, túbulos dentinarios), esta
instrumentación no es suficiente para eliminarlos completamente, por lo que se recurre a la
utilización adicional de sustancias capaces de eliminar microorganismos persistentes, para
lo que se utiliza una medicación intraconducto y sustancias irrigadoras que tienen como
objeto la disminución o eliminación de la flora microbiana del conducto, reducción de la
inflamación de la zona y la estimulación de la reparación apical. (Leonardo, 2005).
Debido a que hasta la actualidad no existe una sustancia idónea como irrigante, existen
sustancias con buenas propiedades bacterianas como el Hipoclorito de Sodio al 2.5% y al
5% pero que presentan cierto grado de toxicidad lo que pone en controversia su utilización,
y otras, con baja toxicidad, que no tienen un efecto antibacteriana y que son utilizadas
eficazmente para la remoción del barrillo dentinario como en el caso del Suero Fisiológico.
(Leonardo, 2005).
Debido a los estudios realizados recientemente en Odontología, como es en el
tratamiento de la neuralgia herpética en el que “el tratamiento más frecuente utilizado fue
la Terapia Neural” (Yera, Squire, & Rodríguez, 2005). Actualmente han logrado tratar un
absceso periapical agudo en primera fase con este tipo de medicina utilizando Impletol y
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3
Propóleo como una medicación intraconducto, por lo cual vamos a implementar a estas
sustancias en el tratamiento odontológico y así explotar sus beneficios antibacterianos y
observar la susceptibilidad de la bacteria Enterococcus Faecalis, principal microrganismo
encontrado con mayor frecuencia en casos de recontaminación en conductos radiculares
obturados. (Nageswar, 2011).
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4
CAPÍTULO I
1 EL PROBLEMA
Planteamiento del problema 1.1
El uso y búsqueda de suplementos dietarios derivados de sustancias naturales ha sido
acelerado en los últimos años. En Estados Unidos se calcula que entre un cuarto y la mitad
de todos los productos farmacéuticos que se venden, tienen un origen natural o han sido
obtenidos a partir de sustancias naturales, pero una escasa o nula cantidad son usadas como
antimicrobianos, desde la aparición de los antibióticos convencionales en la década de
1950.
La literatura refiere a la Procaína como una sustancia con propiedades principalmente
anestésicas, pero no refieren propiedades víricas, fúngicas o bacterianas, aunque en la
actualidad se han realizado estudios en los cuales le otorgan dichas propiedades. El
Propóleo por otra parte ha mostrado propiedades medicinales interesantes aplicadas a la
Odontología.
Esta investigación se va a realizar debido a que actualmente es muy común utilizar la
Terapia Neural como tratamiento de toda índole, la sustancia más utilizada en nuestro país
para realizar esta terapia es la Procaína al 2% más Cafeína al 0.25% llamado también como
una “sustancia milagrosa” capaz de curar diversas enfermedades como artritis, dolor
agudos y crónicos, e incluso lo han utilizado en el tratamiento de Herpes Zoster, llegando
así a atribuirle no solo propiedades analgésicas sino también propiedades antivirales,
antibacterianas e incluso antifúngicas. Por otra parte nuevos estudios han puesto especial
atención a las investigaciones médicas de un producto natural, denominado Própolis o
Propóleo, el que ha mostrado interesantes propiedades medicinales, este fue usado por la
medicina antigua durante cientos de años, es un compuesto natural elaborado por abejas
productoras de miel (Apis mellifera) a partir de la resina y exudados de varias plantas, que
además presenta otras numerosas propiedades biológicas, entre las que se destaca su
actividad antimicrobiana y por ello se ha incrementado su uso en Odontología. (Laguardo,
Díaz, Romero, Villareal, & Anajulia, 2010)
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5
De esta manera esta investigación busca determinar las propiedades antibacterianas
tanto de la Procaína más Cafeína (Impletol) y del Propóleo sobre cepas de Enterococcus
Faecalis, ya que estas bacterias se las encuentra con mayor frecuencia en piezas con
infecciones secundarias, logrando de esta manera utilizar y aprovechar estas sustancias
como coadyuvante en la irrigación, cuando se esté realizando un retratamiento de
conducto, evitando así la utilización de ciertas sustancias toxicas que causan malestar al
paciente.
Planteamos así como preguntas directrices:
¿La Procaína más Cafeína presenta propiedades antibacterianas sobre
Enterococcus Faecalis?
¿El Propóleo actúa sobre cepas de Enterococcus Faecalis como sustancia
antibacteriana?.
¿El Propóleo y la Procaína más Cafeína sirve como coadyuvante en la irrigación
del tratamiento de conductos?
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6
Objetivos de la investigación 1.2
Objetivo General 1.2.1
Determinar la acción antibacteriana de la Procaína 2% más Cafeína 0.25% y del
extracto de Propóleo en cepas de Enterococcus Faecalis para utilizarlo como
coadyuvante en la irrigación en el tratamiento de conducto.
Objetivos Específicos 1.2.2
Analizar in vitro la sensibilidad al aplicar Procaína más Cafeína sobre cepas de
Enterococcus Faecalis.
Evaluar in vitro la sensibilidad al aplicar un extracto de Propóleo sobre cepas de
Enterococcus Faecalis.
Identificar cuál de estas sustancias tiene mayor efecto como sustancia de
irrigación al comparar a la Procaína más Cafeína y al Propóleo con Hipoclorito
de Sodio al 5% y Suero Fisiológico.
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7
Justificación 1.3
Actualmente el tratamiento de Endodoncia se hace cada vez más común en la clínica
odontológica, no obstante, la Procaína más Cafeína siendo una sustancia nueva con
múltiples beneficios, y el Propóleo, el cual, presenta múltiples hallazgos científicos,
aplicados en tratamientos en cavidad oral, atribuyéndolo una acción antibacteriana frente a
una amplia variedad de microorganismos y dado que la Endodoncia es un tratamiento
odontológico, en el que, encontramos mucha contaminación, se va a utilizar a estas
sustancias como coadyuvante en la irrigación para este tipo de tratamiento.
La importancia de la búsqueda de una nueva sustancia para la utilización de irrigante en
Endodoncia es, debido a que, estas sustancias desempeñan un papel muy importante en la
remoción de microorganismos, toxinas, dendritos y de la capa de desecho dentinario de los
conductos radiculares durante la preparación biomecánica, y dado que el Enterococcus
Faecalis es una bacteria anaerobia facultativa Gram positiva tiene mucha importancia en el
área de Endodoncia, ya que se presenta con más frecuencia en los casos de retratamiento,
esta es una cepa resistente, que no se puede remover con las soluciones de irrigación
rutinarias, por lo que, diversas soluciones de irrigación y sus combinaciones han sido
probadas en la erradicación de esta bacteria. (Nageswar, 2011).
Por lo cual, en este estudio queremos comprobar si la Procaína más Cafeína y el
extracto de Propóleo tienen eficacia antibacteriana sobre dicha bacteria y compararlas con
las sustancias comúnmente utilizadas en la irrigación. Dada los múltiples usos que, en la
actualidad se están dando a esta sustancia (Procaína más Cafeína) y a los estudios
realizados recientemente en Odontología con el Propóleo, vamos a implementar a estas
sustancias en el tratamiento de conducto y así explotar sus beneficios antibacterianos y
observar que tan sensible es la bacteria Enterococcus Faecalis, utilizándolos como
coadyuvante en la irrigación.
La importancia del estudio se enfoca en determinar la evaluación de eficiencia
antibacteriana en la utilización de la Procaína más Cafeína y del Propóleo, generando un
conocimiento actualizado y pertinente que permita al odontólogo identificar las sustancias
que mejor resultados le proveerá, y por ende lograr la satisfacción de sus pacientes y un
mejor pronóstico para este tipo de tratamiento.
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8
Hipótesis 1.4
Hipótesis afirmativa
El Impletol (Procaína más Cafeína) tiene mayor efecto antibacteriano que el
extracto de Propóleo sobre cepas de Enterococcus Faecalis utilizándolos como
coadyuvante en la irrigación en el tratamiento de conducto.
Hipótesis alterna
El extracto de Propóleo tiene mayor efecto antibacteriano que el Impletol
(Procaína más Cafeína) sobre cepas de Enterococcus Faecalis utilizándolos
como coadyuvante en la irrigación en el tratamiento de conducto.
Hipótesis nula
El Impletol (Procaína más Cafeína) y el extracto de Propóleo no tienen efecto
antibacteriano sobre cepas de Enterococcus Faecalis.
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9
CAPITULO II
2 MARCO TEÓRICO
Endodoncia 2.1
Leonardo (2005) menciona: “Es una ciencia y un arte que comprende la etiología,
prevención, diagnóstico y tratamiento de las alteraciones patológicas de la pulpa dentaria y
sus repercusiones a nivel del tejido periapical y por consiguiente en el organismo.”
Comprendiendo así no solo un pensamiento teórico sino también las habilidades
prácticas y el pensamiento práctico necesario para un juicio clínico y moral. (Bergenholtz
et al., 2011).
Objetivos de la Endodoncia 2.1.1
El papel principal del tratamiento endodóntico ha sido curar el dolor dental causado por
lesiones inflamatorias de la pulpa (pulpitis) y del tejido periapical (periodontitis apical)
para preservar así el órgano dentario. (Bergenholtz et al., 2011).
Biofilm 2.2
Un biofilm es una comunidad de bacterias inmersas en un medio liquido caracterizada
por bacterias que se encuentran unidas a un sustrato, superficie o unas a otras,
encontrándose embebidas en la matriz extra celular protectora y adhesiva producida por
ellas mismas. (Rojas & Fuentemayor, 2009).
La biopelícula es la forma en la cual las bacterias viven en comunidad, esta va a actuar
como un entorno para proteger a los microorganismos, este ecosistema hace que el
complejo microbiano sea unas 500 veces más resistente al agente antimicrobiano, que
aquellas bacterias que se encuentran flotantes libres. Esta va a actuar también como un
reservorio de nutrientes requeridos para la supervivencia de dicha comunidad de
microorganismos. (Rojas & Fuentemayor, 2009).
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10
Las bacterias en la cavidad bucal suelen estar organizadas de dos diferentes maneras: las
que se encuentran suspendidas en fase líquida en la saliva, adoptando una forma platónica
(crecimiento de bacterias cuando flotan en un medio liquido) y otras bacterias localizadas
sobre superficies duras (como es en dientes, prótesis e implantes) formando de esta
manera una película gelatinosa adherente denominada comúnmente como placa dental,
siendo esta la principal causante de caries y enfermedad periodontal. (Rojas &
Fuentemayor, 2009).
Microbiología en Endodoncia 2.2.1
Un conducto radicular con pulpa necrótica constituye un espacio que favorece la
colonización bacteriana y proporciona a las bacterias un entorno húmedo, caliente,
nutritivo y anaerobio en el que están protegidas en general de las defensas del huésped,
debido a la ausencia de una circulación sanguínea activa en el tejido de una pulpa
necrótica. (Cohen & Hargreaves, 2008).
Los principales factores ecológicos que determinan la composición de la microflora del
conducto radicular son la tensión de oxígeno, el tipo y la cantidad de los nutrientes
disponibles y las interacciones bacterianas. También pueden estar implicados otros factores
como la temperatura, el pH, y los receptores de las adhesinas. (Cohen & Hargreaves,
2008).
Con el paso del tiempo se pronuncian más las condiciones anaerobias, particularmente
en el tercio apical del conducto radicular, superando así numéricamente las bacterias
anaerobias a las bacterias facultativas. (Cohen & Hargreaves, 2008).
Cohen & Hargreaves (2008) menciona las principales fuentes de nutrientes de las
bacterias que colonizan el sistema del conducto radicular:
a) La pulpa necrótica
b) Las proteínas y glucoproteínas de los líquidos tisulares y el exudado que se embebe
en el sistema del conducto radicular a través de los forámenes apical y lateral
c) Componentes de la saliva que pueden penetrar coronalmente en el conducto
radicular
d) Productos del metabolismo de otras bacterias como endotoxinas, exotoxinas, etc
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11
Microflora endodóntica 2.2.2
Se debe recordar que la vía de acceso de los microorganismos para infectar la pulpa va a
determinar la composición microbiana de esta. (Liébana, 2002).
Si se produce una comunicación de la pulpa con la cavidad oral por causa de una caries
profunda o de un traumatismo, dado que la pulpa se va a encontrar expuesta a la flora oral,
las bacterias aisladas con más frecuencia son: Neisseria spp., Haemophilus Parainfluenzae,
Coryne Bacterium spp. y S. Epidermidis. A medida que la necrosis de la pulpa va
avanzando apicalmente, las bacterias anaerobias estrictas serán las que van a predominar,
cocos grampositivos y bacilos gramnegativos. Si la afectación de la pulpa es a través de
túbulos dentinarios como causa de una caries profunda, las bacterias que predominaran
serán los Streptococos del grupo Viridans, Lactobacillus spp. y Actinomyces spp., también
se ha podido aislar Propionibacterium spp. y ciertas bacterias Gram negativas anaerobias
estrictas como las Porphyromonas y Gram positivas anaerobias facultativas como el E.
Faecalis. (Liébana, 2002).
Si la causa de la infección de la pulpa es por bolsa periodontales, por el agujero apical o
por conductos auxiliares las bacterias más prevalentes encontradas son Gram positivas,
entre las que podemos observar Peptostreptococcus spp., Streptococcus spp. y
Propionibacterium spp., aislándose también bacilos gramnegativos como ciertas especies
de Porphyromonas y de Campylobacter. (Liébana, 2002).
Microflora en los tipos de infecciones endodónticas 2.2.3
Las infecciones endodóntica se pueden clasificar de acuerdo a su localización anatómica
(infección intrarradicular) que se debe a microorganismos que colonizan el sistema de
conducto y se pueden subdividir en tres categorías según el momento en el que los
microorganismos entran en el sistema del conducto radicular (Cohen & Hargreaves, 2008)
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12
La infección primaria: 2.2.3.1
Esta infección está causada por microorganismos que invaden y colonizan el tejido
necrótico de la pulpa en un primer momento (infección iniciativa o virgen) (Cohen &
Hargreaves, 2008)
Los microorganismos pueden haber estado presentes en las primeras fases de invasión
de la pulpa, como a través de caries que culminó en inflamación y una posterior necrosis, o
pueden haber sido los últimos en llegar, aprovechándose de las condiciones ambientales en
las que se encuentra en el conducto radicular después de que se produzca la necrosis de la
pulpa. (Cohen & Hargreaves, 2008)
Estas infecciones primarias se caracterizan por la presencia de una comunidad muy
variada dominada por bacterias anaerobias, el número de bacterias presentes por conducto
radicular esta entre 103 y 10
8. Las especies bacterianas que se detectan en esta infección
con mayor frecuencia pertenecen a diversos géneros de bacterias Gram negativas como
(Fusobacterium, Dialister, Porphyromonas, Prevotella, Tannerella, Treponema,
Campylobacter y Veillonella) y Grampositivas como (Parvimonas, Filifactor,
Pseudoramibacter, Olsenella, Actinomices, Peptostreptococcus, Streptococcus,
Propoinibacterium y Eubacterium). (Cohen & Hargreaves, 2008).
La periodontitis apical aguda y los abscesos apicales agudos son ejemplos típicos de las
infecciones endodónticas sintomáticas. Los abscesos apicales agudos son causados por
bacterias que salen del conducto radicular infectado e invaden los tejidos perriradiculares
para establecer una infección extrarradicular y provocar una inflamación purulenta. (Cohen
& Hargreaves, 2008).
Para establecer los tratamientos antimicrobianos más eficaces es importante conocer la
localización de los microbios dentro del sistema del conducto y su organización. Las
bacterias del conducto radicular suelen crecer en biopelículas sésiles adheridas a las
paredes de la dentina, también formando agregados mixtos (de distintas morfologías que
pueden estar obstruyendo principalmente los conductos laterales y los Itsmos que conectan
a estos conductos) o simples (de una misma morfología), y como células suspendidas en la
fase liquida del conducto principal. (Cohen & Hargreaves, 2008)
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13
Se ha descrito que la infección de los túbulos de dentina se produce en el 70-80% de los
dientes que presentan lesiones de periodontitis apical, de los cuales los posibles patógenos
endodónticos que pueden penetrar en los túbulos dentinarios in vitro, son Porphyromonas
Endodontalis, Porphyromonas Gingivalis, Fusobacterium Nucleatum, Actinomices Israelii,
Propionobacterium Acnés, Enterococcus Faecalis, Candida Albicans y Estreptococcus.
(Cohen & Hargreaves, 2008).
Si bien es fácil acceder y eliminar bacterias presentes como células flotantes en el
conducto principal de la raíz durante la instrumentación, y con sustancias que se usan
durante el tratamiento, las bacterias que se encuentran organizadas en biopelículas unidas a
las paredes del conducto o en los Itsmos, conductos laterales o túbulos de dentina son más
difíciles de erradicarlas ya que se requerirá otros métodos terapéuticos especiales. (Cohen
& Hargreaves, 2008).
La infección secundaria 2.2.3.2
Esta infección está causada por los microorganismos que no se encuentran presentes en
la infección primaria pero que son introducidos en el conducto radicular en el momento o
después de la intervención profesional (secundaria a la intervención). (Cohen &
Hargreaves, 2008).
Estos microorganismos son aquellos que han resistido y sobrevivido a los
procedimientos realizados dentro del conducto, si estos microorganismos intentan
adaptarse al nuevo entorno, sobrevivir y proliferar, se va a establecer una infección
secundaria. (Cohen & Hargreaves, 2008).
El tratamiento antimicrobiano puede ser insuficiente para eliminar por competo a este
tipo de bacterias persistentes ya que pueden ser existentes o inaccesibles a los diversos
procedimientos terapéuticos. (Cohen & Hargreaves, 2008).
Por lo general, las bacterias Gram negativas, presentes en las infecciones primarias, se
han eliminado, a excepción de algunos bacilos anaerobios como F. Nucleatum., Prevotella,
y Campylobacter Rectus, que son especies encontradas en muestras obtenidas después de
la instrumentación o después de administrar una medicación, la mayoría de los estudios
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14
han demostrado que las bacterias Gram positivas son más frecuentes. Los géneros Gram
positivos facultativos o anaerobios que podemos detectar a menudo en estas muestras son
Streptococos, P. Micra, Actinomyces, Propionibacterium, P. alactolyticus, lactobacilus, E.
Faecalis y Olsenella ya que tienen la capacidad de adaptarse a las condiciones ambientales
en los conductos radiculares previamente instrumentalizados y medicados. (Cohen &
Hargreaves, 2008).
El momento de la contaminación podrá ser durante el tratamiento, entre las citas o
incluso después de llenar el conducto radicular. En cualquier caso, si los microorganismos
que penetran intentan adaptarse al nuevo entorno, sobrevivir y proliferar, se establecerá
una infección secundaria. Las especies involucradas pueden ser microorganismos orales o
no orales, dependiendo del origen de la infección secundaria. (Cohen & Hargreaves, 2008).
La infección persistente está causada por microorganismos que estuvieron presentes en
la infección primaria y secundaria, que fueron capaces de resistir a los procedimientos
antimicrobianos, que tienen lugar dentro del conducto y persistieron a la privación de
nutrientes en los conductos tratados. (Cohen & Hargreaves, 2008).
En varios estudios de cultivos y biología molecular se ha demostrado que el E. Faecalis
es una de las especies más frecuentes en el conducto radicular y en piezas tratadas, con
prevalencias que ascienden hasta los 90% de los casos. (Cohen & Hargreaves, 2008).
Por lo que el conducto radicular y los dientes previamente tratados tienen unas nueve
veces más probabilidades de contener E. Faecalis que los casos de infecciones primarias.
(Cohen & Hargreaves, 2008).
2.2.3.2.1 Género Enterococcus
Son cocos esféricos, se asocian en parejas y cadenas cortas, Gram positivos, catalasa
negativos, pertenecen al sero grupo D, fueron separadas en de los Streptococos por
caracteres quimio genéticos. (Liébana, 2002).
Los Enterococcus existen como comensal humano normal en la cavidad bucal y el
aparato gastrointestinal, las más aisladas en clínica son E. Faecalis en un (80-90%) y E.
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15
Faecium en un (5-10%). Causan infecciones diversas y poseen una resistencia, por lo que
son seleccionados fácilmente por los antibióticos de amplio espectro. (Liébana, 2002).
Producen una gran variedad de procesos infecciosos extra orales que plantean un
problema particular de tratamiento antibiótico. Por su metabolismo anaerobio son
intrínsecamente resistentes a los aminoglucósidos que, sin embargo, pueden penetrar si se
unen a otros compuestos que inhiban la síntesis del peptidoglucano al aumentar su ingreso
en el interior de las bacterias, pero no serán útiles si las cepas muestran alta resistencia por
la producción de enzimas inactivantes, por otra parte, las cefalosporinas no son eficaces
por la baja afinidad de sus proteínas fijadoras de penicilinas (PBP) a las mismas. (Liébana,
2002).
Se aísla a veces como microbiota normal en la mucosa, en el dorso de la lengua y en
placas, especialmente en individuos inmunodeprimidos, se han descrito también
aislamientos de estas bacterias en infecciones pulpo-periapicales y en bolsas periodontales.
Su incremento en la placa de superficies lisas está relacionado con la presencia de
gingivitis. (Liébana, 2002).
Enterococcus Faecalis
Rocas y cols. (citado por Canalda, 2014) observaron que E. Faecalis es más prevalente en
periodontitis apicales asintomáticas que en las que producen sintomatología y a su vez son más
frecuentes en infecciones persistentes o secundarias que en las infecciones primarias de origen
endodóntico. Una de las peculiaridades de esta bacteria es que toleran bien pH cercanos a 12, lo
que hace especialmente resistentes a la utilización de medicación intraconducto con Hidróxido
de Calcio. Sin embargo Evans y Cols (citado por Canalda, 2014) han determinado la barrera de
tolerancia en 11.1 hallando que un pH superior a 11.5 en el cual el E. Faecalis no sobrevivía. Se
cree que es debido a que es capaz sintetizar diversos tipos de proteínas cuando es sometido a
condiciones adversas de supervivencia, como puede ser la exposición a Hipoclorito de Sodio o
al contacto con Hidróxido de Calcio a pesar de que los resultados de su estudio son muy
concluyentes en relación a que el retratamiento de E. Faecalis con Hipoclorito de Sodio o
Hidróxido de Calcio, incluso a concentraciones subletales, no induce una mayor tolerancia.
(Canalda, 2014).
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16
Las bacterias anaerobias facultativas son más predominantes que los anaerobios estrictos y
menos susceptibles a la terapéutica antimicrobiana que estos últimos, por lo que, se debe esperar
su mayor persistencia después de procedimientos terapéuticos inadecuados. (Canalda, 2014).
Factores de Virulencia
El Enterococcus Faecalis es una bacteria que posee un gran número de factores de virulencia
que le van a permitir la colonización del hospedero y de la matriz extracelular, la competencia
con otros microorganismos, resistencia a los mecanismos de defensa del huésped, y la
producción de cambios patológicos generados por las enzimas tóxicas producidas, o a través de
la inflamación. (Pardi, Guilarte, Cardozo, & Briceño, 2009)
Germán Pardi (2009) menciona que:
“Entre los factores de virulencia más importantes se encuentran: Sustancia de
agregación (adhesina bacteriana que convierte la superficie de la bacteria donadora en una
superficie adherente potencial para las células receptoras, causando agregación), adhesinas
o proteínas de superficie (Esp y Ace, ambas relacionadas con la formación de biopelículas
y con la adherencia del microorganismo a las proteínas de la matriz extracelular y al
colágeno tipo I y IV), feromonas sexuales (péptidos que promueven la transferencia
conjugativa de plásmidos de ADN entre las cepas), ácido lipoteicoico (polímeros asociados
a la pared celular que estimulan a los leucocitos a liberar mediadores de la respuesta
inflamatoria), superóxido extracelular (radicales de oxígeno altamente reactivos
relacionados con el daño tisular y celular), gelatinasa (metaloproteinasa extracelular que
hidroliza gelatina, colágeno, fibrinógeno, caseína, hemoglobina e inulina), hialuronidasa
(enzima que degrada el ácido hialurónico) y hemolisina (codificada por plásmidos, la cual
es producida por cepas β-hemolíticas de E. Faecalis y produce lisis total de los eritrocitos,
además de destruir polimorfonucleares neutrófilos y macrófagos). Gracias a la presencia de
estos factores, E. Faecalis es capaz de sobrevivir en medios con pocos o escasos
nutrientes, así como de invadir espacios o aberraciones anatómicas donde acciones como la
preparación biomecánica, la colocación de medicación intraconducto o el uso de irritantes
no son capaces de actuar y eliminarlo”.(Pardi et al., 2009).
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17
La resistencia del E. Faecalis se debe a factores como:
Pueden soportar condiciones ambientales inhóspitas y sobrevivir 30 minutos a
60 grados.
Estudios han demostrado que el E. Faecalis invade la profundidad de los túbulos
dentinarios pudiendo sobrevivir así a la instrumentación química, mecánica y a
medicamentos intraconducto, pudiendo así recolonizar los túbulos y reinfectar
los conductos radiculares ya obturados.
El E. Faecalis muestra resistencia a una amplia gama de antibióticos que si son
utilizados pueden modificar la flora microbiana a favor de este microorganismo.
Aparecen junto a otros organismos Gram positivos en la biopelícula lo que los
hacen más resistentes a los antibióticos debido a una penetración lenta del
medicamento a través del biofilm o puede presentar cambios en el entorno
químico de la biopelícula y debido a que algunos antibióticos requieren una
condición aerobia para realizar efecto.
Los ácidos de los productos pueden alterar el pH y en consecuencia producir un
efecto antagónico sobre los antibióticos dado que pueden sobrevivir en un medio
alcalino con pH alto de hasta 11.5. (Nageswar, 2011)
Los Enterococcus se adhieren a la fibronectina y a las fibras colágenas en la
dentina mineralizada por medio de adhesinas como la proteína Ace y la
sustancia de agregación. (Nageswar, 2011).
Estos microorganismos muestran una respuesta de estrés, en ausencia de
nutrición, van a desarrollar un fenotipo resistente en donde disminuye la tasa de
síntesis de proteínas pero va a continuar la síntesis de “proteínas inducidas por la
inanición” la cual es muy importante para la protección de la célula contra el
calor, el peróxido de hidrogeno, la acidez, sal, Hipoclorito de Sodio, sales
biliares y dodecil sulfato de sodio (SDS). Con un tiempo prolongado a la
inanición, la célula disminuirá de tamaño, en periodos largos de inanición, el
número de células cultivables disminuirá, mientras que el número de bacterias
seguirá siendo igual.
Suprime la acción de los linfocitos alterando así la respuesta inmunológica del
huésped. (Nageswar, 2011).
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18
Nageswar (2011) menciona que el E. Faecalis es susceptible a los siguientes irrigantes:
MTAD con NaOCI por 5 minutos
Clorhexidina liquida al 0.2% por 30 segundos
CA (OH)2 + CMCP
IKI al 2-4% (Nageswar, 2011)
Irrigación en Endodoncia 2.3
La irrigación intra-conducto acompañada por la aspiración es un auxiliar muy valioso en
la preparación del conducto radicular. Aunque se define como un procedimiento auxiliar su
uso es indispensable en el acompañamiento de la instrumentación endodóntica. (Leonardo,
2005)
La sola instrumentación no es suficiente debido a las variaciones en la anatomía de los
conductos que es muy diversa, no son evidentes a simple vista alojándose ahí residuos
pulpares, restos de dentina como el barrillo dentinario y bacterias para lo cual es necesario
el uso de soluciones irrigadoras antes, durante y después del tratamiento (preparación
biomecánica) (Villena, 2012).
La elección correcta de una solución irrigante está relacionada con cada caso en
particular, con la finalidad de obtener un mejor resultado tanto en la limpieza, como en la
desinfección del conducto, para lo cual es importante conocer las propiedades químicas de
estas soluciones irrigantes. (Villena, 2012).
Objetivos de la irrigación 2.3.1
Leonardo (2005) menciona que la irrigación tiene como finalidad:
Eliminar restos pulpares, sangre, virutas de dentina y restos necróticos que
pueden actuar como verdaderos nichos de bacterias y que posteriormente pueden
producir alteraciones periapicales agudas. (Leonardo, 2005)
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19
Disminuir la flora bacteriana, aun transitoriamente, por lo que es necesario
complementar la desinfección por medio de agentes antimicrobianos, que se
usan como curación temporaria en casos de necro-pulpectomía. (Leonardo,
2005)
Humedecer o lubricar las paredes de conductos dentinarios, facilitando así la
acción de los instrumentos. (Leonardo, 2005)
Eliminar la capa residual o barrillo dentinario presente durante la
instrumentación mecánica. (Leonardo, 2005)
Disminuir la tensión superficial de las paredes del conducto por medio de
detergentes aniónicos y soluciones de EDTA, favoreciendo el contacto de los
medicamentos utilizados, ayudando así, a la retención mecánica de los cementos
utilizados durante la obturación. (Leonardo, 2005)
Momentos de la irrigación 2.3.2
Antes de la instrumentación 2.3.2.1
En el caso de dientes despulpados o infectados, en que la solución irrigadora se va a
utilizar antes de la instrumentación mecánica con el objetivo de neutralizar los productos
tóxicos y restos orgánicos antes de su eliminación mecánica. (Leonardo, 2005).
En el caso de dientes que presentan vitalidad pulpar, luego de la eliminación de la pulpa
cameral, se procederá a la irrigación con soluciones antibacterianas para ayudar a poseer
una instrumentación mecánica de tipo aséptico. (Leonardo, 2005).
Durante la instrumentación: 2.3.2.2
Se va a irrigar con la finalidad de mantener la humedad de las paredes del conducto
radicular favoreciendo así su instrumentación. (Leonardo, 2005)
Después de la instrumentación: 2.3.2.3
La irrigación se realizara con el objetivo de eliminar detritos orgánicos producidos por
la instrumentación mecánica, evitando así la acumulación sobre el muñón pulpar o tejidos
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20
vivos periapicales, lo que impedirá la acción del Hidróxido de Calcio durante la obturación
del conducto radicular. (Leonardo, 2005).
Requisitos de un irrigante 2.3.3
La solución ideal por consiguiente debe tener ciertas propiedades que le permitan
cumplir con la mayoría de objetivos como:
Debe ser disolvente de tejidos orgánicos e inorgánicos, ya que se ha comprobado
que al no utilizarse soluciones de irrigación durante la instrumentación el 70%
de dendritus y remanente dentinario permanecen en el conducto en comparación
con los que se ha utilizado irrigación. (Villena, 2012)
Debe tener un amplio espectro antimicrobiano y alta efectividad contra
microorganismos tanto anaerobios como facultativos organizados en
comunidades (biofilms). (Villena, 2012)
También deberá inactivar endotoxinas que son sustancias producidas por
bacterias que va a producir una reacción inflamatoria pulpar o periapical.
(Villena, 2012) (Canalda, 2014)
No debe ser tóxico, ni caustico a los tejidos periapicales o intrabucales, es decir
debe ser totalmente biocompatible. (Villena, 2012) (Nageswar, 2011)
Promover la humectación de las paredes del conducto radicular, para lo cual el
irrigante deberá tener baja tensión superficial para dispersarse tanto por el
conducto principal, como por los conductos laterales, accesorios y túbulos
dentinarios. (Nageswar, 2011) (Villena, 2012)
Durante la instrumentación deberá prevenir la formación del barrillo dentinario,
o si esta ya está formado, deberá eliminarlo. (Villena, 2012).
Este deberá ser de una fácil manipulación. (Villena, 2012).
Soluciones irrigadoras 2.3.4
Nageswar (2011) menciona como principales soluciones de irrigación a los siguientes:
Solución Salina
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Hipoclorito de Sodio al 5%
Peróxido de Hidrógeno al 3%
Gly Oxide
Gluconato de Clorhexidina al 2%
Agentes Quelantes ( ácido atilendinaminotetraacetico, RC-prep)
Descalcificadores
MTAD
Dióxido de Clorina
Yodo yoduro de Potasio
Solución salina 2.3.4.1
Es una solución estéril ha sido recomendada por algunos autores como irrigante
endodóntico ya que tiene la propiedad de arrastrar el dentrito del conducto que se produce
durante la instrumentación, además de esta propiedad, éste irrigante no posee ninguna otra
propiedad especial de disolución o destrucción de bacterias dentro del conducto. La ventaja
principal es la biocompatibilidad. (Nageswar, 2011).
Hipoclorito de Sodio 2.3.4.2
El Hipoclorito de Sodio es un agente reductor claro, pajizo, proteolítico que tiene 5% de
Clorina disponible. Está preparado fácilmente con blanqueador de uso doméstico. Es
altamente alcalino con un pH de 11.0 – 11.5%. (Nageswar, 2011)
Según la mayoría de los estudios, una concentración de 1.5% - 3% va a lograr en buen
equilibrio entre la disolución del tejido y la eficacia antibacteriana
Entre los irrigantes químicamente activos no existe otra solución tan popular como ésta
solución que fue introducida por un médico llamado Dakin, esta solución posee las
siguientes ventajas:
Disolución tisular
Lubricación
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Acción antibacteriana y de blanqueamiento
Es también económico y fácilmente disponible. (Nageswar, 2011)
Su acción antimicrobiana ocurre por dos modos:
El Ion de Clorina: Al entrar en contacto el NaOCl con el dentritus orgánico o
tejido pulpar, se forma el ácido hipocloroso, el cual posee una capacidad de
penetrar en la célula bacteriana, oxida el grupo sulfidrilo de las enzimas
bacterianas e interrumpe el metabolismo conduciendo así a su muerte.
Su alcalinidad: El NaOCl tiene un pH básico de 11 -11.5 que tiene una eficacia
en la eliminación de anaerobios, los cuales necesitan para su desarrollo un
ambiente ácido. (Nageswar, 2011)
Desventajas
Causa daño celular leve a severo y toxicidad al traspasar el ápice. La severidad
va a depender de la concentración y el volumen.
Tiene alta tensión superficial lo que disminuirá su capacidad de humectación a la
dentina.
Es cáustico y puede causar inflamación de tejido gingival.
Tiene olor y gusto desagradable y sus vapores pueden irritar los ojos tanto del
paciente como del operador
Corroe el instrumental
Puede causar edema faríngeo y quemaduras esofágicas al ser ingerido.
(Nageswar, 2011).
Peróxido de Hidrógeno 2.3.4.3
Es un agente oxidante que se lo utiliza al 3%, se utiliza casi siempre con el Hipoclorito de
Sodio, que, al actuar en interacción entre las dos sustancias producen:
Efervescencia transitoria pero enérgica, que va a forzar al dendrito fuera del
conducto.
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La producción de oxígeno resultante como subproducto de su interacción va a ser
tóxica para los microorganismos anaerobios.
Un efecto secundario es que va a producir aclaramiento de las piezas.
Escuelas condenan dicha interacción afirmando que, las burbujas producidas van a
impedir el contacto que debe existir entre el irrigante y el dentrito, otros reportes critican su
uso combinado, pues se ha visto que la eficacia de NaOCl disminuye en esta interacción, la
desventaja en su utilización es que si esta sustancia se deja sin neutralizar, va a producir
burbujas de gas, causando así un dolor continuo. (Nageswar, 2011).
A pesar de todas sus desventajas, Weine (citado por Nageswar, 2011) recomienda su
uso debido a que posee baja toxicidad. Es útil en conductos que han sido dejados abiertos
con la intensión de drenaje, puesto que, la efervescencia que produce puede ayudar a
desalojar el dendritos y restos de alimentos que pueden acumularse en los conductos.
(Nageswar, 2011).
Gly oxide 2.3.4.4
Es una combinación del Peróxido de Carbamida con el Glicerol, su acción germicida es
mayor que el HO2 y constituye un excelente lubricante. Según Walton existen pocas
posibilidades de perforación durante la instrumentación de conductos curvos. (Nageswar,
2011).
Gluconato de Clorhexidina 2.3.4.5
La Clorhexidina al 2% es un agente antimicrobiano de amplio espectro que actúa sobre
las bacterias Gram negativas y Gram positivas, no es una sustancia tóxica, tiene un
componente catiónico que va a unirse a las membranas celulares que se encuentran
cargadas negativamente, produciendo así, una lisis celular. (Nageswar, 2011).
La efectividad de esta sustancia es reconocida como un agente antimicrobiano oral
eficaz, se lo utiliza en la terapia periodontal y para la prevención de caries. La
Clorhexidina en forma de sal, ha sido utilizada desde los años 1950 como un antiséptico
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oral en enjuagues bucales, en cremas dentales y en la goma de mascar. Gracias a dichas
propiedades esta sustancia es utilizada como irrigante en Endodoncia. (Nageswar, 2011).
Mecanismo de acción
La clorhexidina actúa generalmente en la reabsorción en la pared celular de los
microorganismos produciendo la salida de los componentes intracelulares. A
concentraciones bajas las sustancias de bajo peso molecular como el Potasio y el Fósforo
saldrán, produciendo así un efecto bacteriostático. En concentraciones más altas esta
sustancia tiene un efecto antibacteriano por la precipitación y /o coagulación del
citoplasma, causada por la reticulación de las proteínas. (Fardal & Turnbull, 1986).
Su uso como irrigante endodóntico se basa en su acción antimicrobiana de amplio
espectro y de larga duración debido a su unión con la hidroxiapatita, la sustantividad y una
ausencia relativa de toxicidad. Sin embargo esta sustancia no posee propiedades
disolventes de tejido conocidas. Algunos investigadores han encontrado que tiene efectos
antibacterianos significativamente mejores que el Hidróxido de Calcio en cultivos. Las
combinaciones eficaces de CHX e Hidróxido de Calcio están disponibles actualmente para
contrarrestar los anaerobios estrictos haciéndolo un irrigante endodóntico eficaz.
(Nageswar, 2011).
Agentes Quelantes 2.3.4.6
El agente quelante más comúnmente usado es el Ácido Etilendiaminotetraacetico.
Descubierto por Nygaard Ostby en 1957, el EDTA al 7% tiene las siguientes propiedades:
Reblandece la dentina eficazmente, Patterson reportó que el EDTA reduce
drásticamente el KHN de la dentina de 42 en el orificio y 70 a 1/3 de distancia
desde la UDE hasta un mínimo de 7.
Elimina la capa de desecho dentinario cuando se utiliza alternamente con
NaOCL.
Desmineralización de 20-30 micrones (hasta 50u) de dentina cuando se usa por
5 minutos.
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25
Acción antimicrobiana contra ciertos microorganismos.
Ausencia relativa de toxicidad que produce solamente un grado moderado de
irritación, el EDTA tiene un pH casi neutro de 7.3.
Los agentes quelantes están disponibles como una solución líquida o una suspensión
viscosa. Nageswar (2011) indica que las ventajas de la preparación viscosa van a permitir:
Aumentar la profundidad de penetración
Mejora el desbridamiento causado por la acción de las espumas
Promueve la emulsificación del tejido orgánico, el colágeno en la pulpa es
absolutamente elástico y es bastante reacio a la remoción. Resiste a los intentos
repetidos en la remoción ya que se estira y se contrae a su posición original
como una goma. El RC – prep previene este fenómeno mediante la
emulsificación del tejido pulpar ayudando así a su fácil eliminación.
Mantiene el dentrito en suspensión ya que fomenta la flotación del remanente
pulpar que puede removerse eficazmente por una irrigación subsecuente de
NaOCl
El peróxido en la formulación produce efervescencia y liberación de Oxígeno al
reaccionar con el Hipoclorito de Sodio contribuyendo nuevamente a la
eliminación de las bacterias. (Nageswar, 2011).
Descalcificadores 2.3.4.7
Son otro sistema de irrigación pero han perdido popularidad debido a su alto grado de
toxicidad y acción descalcificante incontrolable. Actúan removiendo las sales minerales de
la dentina para ayudar a la preparación del conducto ejemplo: ácido cítrico al 30-50%, HCl
al 30-50%, H2SO4 al 50%, ácido poliacrílico al 40%. (Nageswar, 2011).
Dióxido de Clorina 2.3.4.8
El Dióxido de Clorina se utiliza para eliminar los contaminantes del agua potable, sus
propiedades desinfectantes han sido reconocidas desde principios de los años 1900 y fue
registrado en la EPA en una forma líquida para el uso como desinfectante y antiséptico en
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26
1967. Las aplicaciones actuales son en la desinfección superficial y para el tratamiento de
las mangueras dentales. Sus propiedades oxidantes potentes le permiten destruir las
bacterias por la disrupción del transporte de nutrientes, a través de la pared celular. Esta
actividad antibacteriana fuerte le convierte en un irrigante endodóntico potencialmente útil.
(Nageswar, 2011).
El dióxido de clorina puede erradicar el E. Faecalis en 30 minutos. En una
concentración más alta, estas soluciones pueden eliminar totalmente el E. Faecalis de los
túbulos infectados. Se necesitan de estudios adicionales para establecer la toxicidad del
dióxido de clorina, sus efectos sobre la dentina y la concentración inhibitoria mínima.
(Nageswar, 2011).
Yodo yoduro de Potasio 2.3.4.9
Es un irrigante antimicrobiano muy eficaz con baja toxicidad al tejido. Los estudios in
vitro demostraron que esta sustancia penetra a profundidad mayor de 1000 micrómetros de
dentina en 5 minutos, ésta sustancia es un desinfectante eficaz para la dentina contaminada
ya que puede destruir bacterias en 5 minutos, ya que libera vapores con fuerte efecto
antimicrobiano. (Nageswar, 2011).
La solución se puede preparar mezclando 2gr de yoduro en 4 gr de yoduro de potasio.
Esta mezcla se disuelve en 94 ml de agua destilada. Constituye un irrigante eficaz para
remover en Enterococcus Faecalis del conducto radicular. (Nageswar, 2011).
Parámetros para evaluar la eficacia de un irrigante 2.3.5
Volumen
Anatomía del conducto
Tiempo de acción
Temperatura de la solución
Profundidad de penetración
Método de dispensado de la solución. (Nageswar, 2011).
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27
Irrigantes alternativos 2.3.6
A través de los años se han venido estudiando diferentes soluciones, no encontrando así
hasta el momento una solución ideal, que sea capaz de desempeñar todas las propiedades
fisicoquímicas aisladas durante la preparación del tratamiento de conductos. (De Lima,
2009)
Hasta la actualidad no se ha podido encontrar dicha solución, por lo cual, día a día se
van implementando diferentes tipos de sustancias en su utilización para así encontrar a una
sustancia capaz de poseer propiedades desinfectantes y que presente biocompatibilidad.
(Laguardo et al., 2010).
La irrigación con una solución anestésica podría ser ideal debido a su acción
vasocontrictora pudiendo así obtener buenos resultados. (Soares & Goldberg, 2002)
Propóleo 2.3.7
El Propóleo es una sustancia compleja, de origen vegetal que es preparado por las
abejas a partir de la recolección de resinas producidas en algunas plantas, principalmente
en árboles, una de las propiedades más importantes de este es la actividad antimicrobiana
que posee, la cual es atribuida por los flavonoides, siendo este un compuesto bioactivo para
tratamientos antisépticos, herpes, amigdalitis, posee propiedades como cicatrizante,
antinflamatorio, anticariógeno, y se lo ha implementado en diversos tratamientos
odontológicos como es en el caso de Cirugía Oral, Periodoncia, Endodoncia y Patología
Oral entre otras. (Laguardo et al., 2010).
Composición del Propóleo 2.3.7.1
La composición química dependerá de la región donde fue recolectada, ya que distintas
partes de la colmena van a tener diferente composición del Propóleo, siendo así, muy
difícil encontrar un Propóleo idéntico en dos colmenas diferentes, aun siendo de la misma
región, ya que éste es elaborado de acuerdo a su fuente de materia prima disponible y a las
necesidades. En esta sustancia han sido identificados más de 160 compuestos, siendo el
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50% fenólicos, a los que se les atribuye las propiedades farmacológicas. (Laguardo et al.,
2010).
Cuadro 1: Composición del Propóleo
ELEMENTOS PORCENTAJE
Resinas y bálsamos 50-55%
Cera 30-40%
Aceites volátiles aromáticos 5-10%
Polen 5%
Sustancias orgánicas y minerales 5%
Fuente: (Laguardo et al., 2010).
La cera y las mezclas mecánicas presentes en el Propóleo no tiene actividad terapéutica
aprobada constituyendo de 40 a 50% de la masa total, el resto corresponde a la parte
biológica activa, los prolifenoles de ácidos aromáticos a los que se atribuyen 2/3 de esta
cantidad atribuyéndolos a estos componentes la actividad farmacológica. (Laguardo et al.,
2010).
Los flavonoides y ácidos fenólicos, junto con sus ésteres, son considerados compuestos
principales bioactivos del Propóleo, estos se van a encontrar distribuidos ampliamente en
el reino vegetal. (Philippe, 1988).
Los flavonoides poseen funciones antioxidantes responsables de minimizar la
peroxidación lipídica y el efecto de los radicales libres, contribuyendo de esta manera a
reducir el riesgo de afecciones cardiovasculares por su acción directa en los capilares
sanguíneos y el envejecimiento.
Según el instituto de Química Orgánica de Moscú, el análisis químico demuestra la
presencia de varias sustancias minerales y oligoelementos, especialmente en forma de
radicales libres o también asociados a formas proteicas, entre los que se distinguen:
el aluminio, el bario, el boro, el bismuto, el calcio, el cobalto, el cobre, el cromo, el estaño,
el estroncio, el fósforo, el hierro, el litio, el manganeso, el molibdeno, el níquel, la plata,
el plomo, el potasio, el selenio, el silicio, el titanio, el vanadio, el yodo y el zinc. Varias de
estas sustancias desempeñan un importante papel a nivel de las vías metabólicas celulares.
(Laguardo et al., 2010).
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29
Otro grupo importante de compuestos en la actividad biológica del Propóleo y en
su metabolismo celular que se destaca es el ácido nicotínico y pantoténico; además de
lactosa, polisacáridos y aminoácidos que tienen un papel importante en las reacciones
celulares, en los estudios de esta sustancia se ha encontrado también la presencia
de vitaminas como la vit C, E, A, B2, B6, B1 Y PP, especialmente B3 o nicotinamida,
sustancias de naturaleza proteica, ácidos grasos no saturados y ésteres de ácidos
aromáticos, justificando así su actividad biológica. (Laguardo et al., 2010).
Propiedades biológicas del Propóleo: 2.3.7.2
Desde la década de los 60 se han efectuado investigaciones científicas las cuales
revelaron la compleja estructura del Propóleo poniendo de manifiesto variedad de
aplicaciones farmacológicas, varios estudios científicos se han realizado sobre el Propóleo
despejando interrogantes sobre su mecanismo de acción y explicando así las propiedades
que le tribuyen como antimicrobianas, antioxidantes, cicatrizantes, y estimulantes del
sistema inmunológico. (Laguardo et al., 2010).
El Propóleo es una sustancia que se transporta indistintamente por la sangre y por la
linfa a todos los órganos, en donde es metabolizado, su sitio de acción se considera que son
los núcleos hipotalámicos de autorregulación, su acción es estabilizar el sistema
homeostático, homeotáxico, mejorando así la defensa, el funcionamiento y la adaptación
del organismo.
Al estudiar la actividad antibacteriana y antiviral del Propóleo independientemente de
su origen se comprueba que todos tienen actividad frente a hongos y cepas de
bacterias Gram (+) incluso muchas de ellas actúan sobre el virus de la influenza. (Laguardo
et al., 2010).
Implicaciones del Propóleo: 2.3.7.3
El Propóleo ha demostrado una actividad anticariogénica a través de varios
estudios, los cuales, han revelado la reducción en la incidencia de acumulación
de placa dental y caries tanto in vitro como in vivo. (Laguardo et al., 2010).
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30
Una actividad anestésica donde la solución de Propóleo al 0,01%, es hasta
cuatro veces tan efectiva como la Procaína al 5%, y de 3 a 5 veces más eficaz
que la cocaína. (Laguardo et al., 2010).
“Estudios realizados sobre microorganismos Gram negativos anaerobios como
la Prevotella Intermedia, Prevotella Nigrescens y Porphyromonas Gingivalis
que son bacterias asociadas a enfermedades periodontales, han confirmado la
acción antibacteriana de este compuesto.” (Laguardo et al., 2010, p.7).
Uso en Endodoncia
Hasta la actualidad se utilizan una diversa cantidad de medicamentos tanto para la
irrigación como en la limpieza del conducto radicular, siendo el de mayor elección el
Hidróxido de Calcio, sin embargo Tellería y cols (citado por Laeguardo et al., 2010)
emplearon un extracto de Propóleo acuoso al 22% como tratamiento pulpo-radicular
comparándolo con el Ca(OH)2 observando que el 82,2% de los pacientes tratados con el
Propóleo acuoso u etílico en diferentes porcentajes, presentaron sus conductos en
condiciones de ser obturados, diversos estudios in vitro se han realizado sobre bacterias
como S. Aureus, Porphyromonas, Bacilos, y otras bacterias presentes en conductos
radiculares, ya sea con infecciones primarias o secundarias, encontrando así un efecto
beneficioso sobre el crecimiento de estos diferentes tipos de bacterias. (Laguardo et al.,
2010).
Terapia Neural 2.4
Generalidades 2.4.1.1
Antes de la mitad del siglo XX, los hermanos Ferdinand y Walter Huneke descubren y
describen los principios de la terapia neural, uno de los pilares de las prácticas energéticas
en ese siglo. (Carvajal, 2012).
Las investigaciones de los hermanos Huneke, que parten de un hallazgo accidental de
efectos a distancia al colocar microdosis de anestésicos locales, descubren un efecto
especial que lo denominaron “fenómeno en segundos” que consiste en la desaparición total
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de los síntomas luego de infiltrar Procaína en el campo perturbador o cortocircuito que es
el responsable de la enfermedad. (Carvajal, 2012).
“Puede ser un virus, una vibración electromagnética, una toxina, una cicatriz, etc.
afectando los sistemas de conducción de señales al interior de los mismos”. (Carvajal,
2012). Cualquier parte del organismo puede afectar la regulación del sistema biológico.
Así, una cicatriz, una irritación neural en la cavidad oral o una simple amalgama, pueden
dar lugar a una patología que comprometa un sistema distante. (Carvajal, 2012).
Procaína 2.4.1.2
La síntesis de la Procaína sólo se logró hasta 1905, es el prototipo de los anestésicos
locales aunque carece de propiedades anestésicas tópicas. Como muchos otros anestésicos
del grupo de los ésteres se hidroliza a ácido paraaminobenzoico (que inhibe la acción de
las sulfamidas) y a dimetilaminoetanol. (León, 2006).
La biotransformación es controlada por la enzima pseudocolinesterasa, su metabolismo
es realizado en la sangre. Se lo utiliza en concentraciones de 0.25% a 0.5% para una
anestesia infiltrativa, de 0.5% a 2% en bloqueos y al 10% en anestesia epidural. Se lo
emplea de forma combinada con otro tipo de medicamentos como la penicilina (penicilina
G procaínica) con el fin de prolongar su efecto farmacológico, permitiendo una absorción
más lenta y hace que haya concentraciones presentes de penicilina en la sangre y en la
orina durante períodos más prolongados. (León, 2006).
La Procaína en la actualidad, se utiliza mucho en medicina alternativa, aunque las
investigaciones se remontan a 1925, uno de los usos más comunes en Odontología es el
bloqueo de los puntos dolorosos, en el síndrome de disfunción miofacial (músculos
masticatorios). (León, 2006).
“La terapia neural de Huneke, es un sistema terapéutico que actúa a través del sistema
vegetativo con la aplicación de ciertos anestésicos locales ya sea inyectados en el terreno
segmentario de la enfermedad, como es el caso de la terapia segmentaria, o bien al
desconectar los campos de interferencia de la enfermedad” (León, 2006). La duración de la
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32
acción de la lidocaína es aproximadamente 2 horas siendo 4 veces más potente que la
Procaína. (León, 2006).
La Procaína ejerce actividad anestésica local al ser aplicada en la proximidad de las
fibras nerviosas y actúa como complemento de la anestesia general al ser administrada en
infusión intravenosa. Desde la Segunda Guerra Mundial los anestesiólogos incursionaron
en desarrollar técnicas anestésicas utilizando Procaína IV, práctica que gradualmente fue
perdiendo utilización, fundamentalmente por la falta de promoción comercial y científica
de este fármaco. (Aldrete & Paladino, 2006).
Estudios experimentales muestran que la Procaína posee acciones neuroprotectoras,
bloqueando receptores al N-metil-Daspartato (NMDA) y también son responsables de la
liberación intracelular de Calcio, desarrollando acciones específicas sobre el sistema
límbico y sobre la recaptación de aminas biógenas. (Aldrete & Paladino, 2006).
Sus ventajas incluyen un metabolismo rápido y predecible, acciones analgésicas,
anticonvulsivantes, anti arrítmicas y potenciación de los agentes anestésicos, cualidades
altamente deseables en un agente anestésico. (Aldrete & Paladino, 2006).
2.4.1.2.1 Estructura de la molécula de Procaína.
2.4.1.2.2 Se compone de 3 porciones fundamentales:
El grupo amino terciario: se comporta como una base (aceptor de protones)
favoreciendo así la hidrosolubilidad de la molécula (porción hidrofílica).
(Aldrete & Paladino, 2006).
El grupo aromático: le confiere características lipofílicas a la molécula.
La unión intermedia (grupo éster) constituye el sitio de hidrólisis, favorecida
por la acción de las esterasas.
2.4.1.2.3 Farmacocinética
La Procaína es un aminoéster, de un peso molecular de 263,30. En una solución acuosa
existe equilibrio entre la forma básica no cargada (Procaína) y la cargada (protonada)
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33
(Procaína H +). El pH es de 8.9. El pH del medio que rodea al fármaco influencia su
actividad, modifica la proporción de la droga básica/cargada. La mayor proporción de
droga no cargada favorece la unión a proteínas, y su capacidad para atravesar las
membranas biológicas. (Aldrete & Paladino, 2006).
2.4.1.2.4 Metabolismo y distribución
La Procaína es metabolizada rápidamente, principalmente por la pseudocolinesterasa
con una vida media de entre 4 a 8 minutos. Son sinónimos de pseudocolinesterasa:
butirilcolinesterasa, colinesterasa no específica, colinesterasa plasmática, encontrándose
principalmente esta enzima en el plasma y en menores concentraciones en el hígado,
sistema nervioso y otros tejidos. La inyección en bolo provoca una disminución rápida del
fármaco en los primeros 5 minutos, seguida de una fase más lenta, con desaparición de
toda traza de la droga a los 10-15 minutos. (Aldrete & Paladino, 2006).
2.4.1.2.5 Mecanismos de acción y efectos de la Procaína
Efectos anestésicos y sobre el sistema nervioso central
La Procaína actúa como depresor del Sistema Nervioso Central, probablemente por
bloqueo de los canales de sodio, provocando así analgesia, sedación, efectos
anticonvulsivantes a dosis bajas, suprimiendo las convulsiones provocadas por
electroshock. (Aldrete & Paladino, 2006)
La Procaína también ejerce acción inhibitoria no competitiva sobre el sitio modulador
de fijación a la glicina, que facilita la apertura del canal. Acciones como estas podrían
contribuir a los efectos reductores en los requerimientos de anestésicos inhalatorios, en la
prevención de la sensibilización central al dolor y también en los efectos neuroprotectores.
Estos resultados concuerdan con los resultados de Edmonds y col los cuales observaron
una mejoría en el dolor post operatorio de 2 a 24; su acción preferencial sobre los
receptores al NMDA explica su bajo efecto en el dolor agudo, pero algunas posibilidades
de bloquear el establecimiento de la sensibilización central. (Aldrete & Paladino, 2006).
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34
La Procaína constituye el anestésico local que posee mejores posibilidades
neuroprotectoras ya que a más del bloqueo de los canales de sodio y de los receptores al
NMDA va a producir la inhibición de la liberación intracelular de calcio desde el retículo
endoplásmico, por inhibición del receptor a la rianodina. (Aldrete & Paladino, 2006).
El DEAE al igual que la Procaína posee actividad analgésica, antiarrítmica y anestésica
local manifestando 1/10 la potencia anestésica local de ésta. Su mayor pKa va a favorecer
el atrapamiento intracelular y prolongara sus efectos, pudiendo así ser responsable de las
acciones farmacológicas observadas tiempo después de la desaparición de la Procaína del
plasma. (Aldrete & Paladino, 2006).
Cafeína 2.4.1.3
La Cafeína, denominada también como teína, guaranina o mateína, es un constituyente
natural que se encuentra presente en más de 60 especies de plantas, se podría considerar la
sustancia estimulante de mayor consumo y la socialmente más aceptada a nivel mundial, se
la encuentra en la dieta diaria en bebidas como el café o el té, el chocolate y algunos
refrescos. (Pardo et al., 2009).
La Cafeína farmacológicamente corresponde al grupo de las xantinas, de los cuales los
representantes naturales además de la cafeína son la teofilina y la teobromina. Estas
sustancias existen en estado natural de plantas originarias en distintas regiones del mundo:
café, té, cacao, mate, kola, etc. (Aguilar, 2006).
El café es una semilla madura desecada de la Coifea araticú o cafeto, se la cultiva en
varios países de Sudamérica como Brasil, Colombia, Ecuador etc. en Centroamérica, y en
Indonesia. (Aguilar, 2006).
2.4.1.3.1 Efectos farmacológicos
Las metilxantinas tienen efectos comunes pero de variable intensidad, potencialmente
van es este orden: la teofilina, la cafeína y última la teobromina. Van a producir efectos
psico-estimulantes a nivel del sistema nervioso central ya que la cafeína produce una
activación generalizada del Sistema Nervioso Central al aumentar la liberación de
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35
noradrenalina, aumenta el estado de alerta, aumenta la capacidad de mantener un esfuerzo
intelectual y mantiene el estado de vigilia. Además, mediante la inhibición de los
receptores A2, la cafeína tiene una acción reforzante mediante la liberación de dopamina
en el circuito cerebral de recompensa, efectos analgésicos dosis-dependiente potenciado
por los inhibidores de la serotonina y un efecto adyuvante en la analgesia. Las
metilxantinas estimulan el centro respiratorio y son broncodilatadoras. La cafeína mejora la
función respiratoria al aumentando la contractilidad del diafragma. (Pardo et al., 2009).
La administración de cafeína provoca un aumento de la presión arterial y aumenta la
frecuencia cardiaca, va a producir vasodilatación a nivel muscular, aumentando así la
respuesta contráctil al estímulo nervioso por lo que disminuye el cansancio y la fatiga. La
cafeína y el chocolate podrían disminuir la agregabilidad plaquetaria. (Pardo et al., 2009).
2.4.1.3.2 Farmacocinética
La cafeína se absorbe rápidamente y de forma completa por el tracto intestinal,
presentando una biodisponibilidad del 100%.de 30 a 45 minutos se alcanza la máxima
concentración plasmática en ayunas mientras que con la ingesta de alimentos esta se
prolonga. (Pardo et al., 2009).
Su volumen de distribución es de 0.6-0.7 L/kg, esta va a atravesar la barrera
hematoencefálica y placentaria, pasa a la leche materna, a la saliva, a la bilis y al semen.
La determinación de la concentración plasmática de cafeína se realiza en saliva, por lo que
la fracción varía entre el 10-35%, y podría disminuir en ancianos. (Pardo et al., 2009).
2.4.1.3.3 Interacciones farmacológicas
Farmacocinéticas
Las concentraciones de cafeína pueden aumentar si se inhibe su metabolismo. Destacan
en este aspecto algunos procesos fisiológico/patológicos (última etapa de gestación,
enfermedades hepáticas, obesidad), alcohol y fármacos como: antimicóticos (fluconazol,
ketoconazol), antiarrítmicos (diltiazem, verapamil), antidepresivos (paroxetina, fluoxetina,
fluvoxamina), antipsicóticos (clozapina, olanzapina), metilxantinas (teofilina),
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36
anticonceptivos orales, cimetidina, fenilpropanolamina, psoralenos, quinolonas y
alopurinol. (Pardo et al., 2009).
La cafeína aumenta la absorción y biodisponibilidad de paracetamol, ácido
acetilsalicílico y ergotamina conjuntamente con su efecto analgésico. Contrariamente, va a
inhibir el metabolismo de la clozapina pudiendo así aumentar sus concentraciones
produciendo efectos adversos. (Pardo et al., 2009).
Farmacodinámicas
La cafeína produce efectos analgésicos aditivos cuando es administrada con otros
analgésicos, especialmente los AINES, y va a producir también una disminución de los
efectos sedantes administrados en dosis bajas tanto de barbitúricos y benzodiazepinas.
(Pardo et al., 2009).
Potencia los efectos de la nicotina de reforzamiento y estimulantes, pero no altera el
éxito de abstinencia de nicotina. Puede potenciar los efectos teratogénicos del alcohol,
nicotina y vasoconstrictores. (Pardo et al., 2009).
2.4.1.3.4 Reacciones adversas
Debido a la gran variabilidad interindividual, una misma dosis de cafeína puede
provocar reacciones adversas en una persona y presentar buena tolerabilidad en otra. Los
efectos adversos más frecuentes de la cafeína son palpitaciones, taquicardia, molestias
gástricas, temblor, nerviosismo e insomnio. Dosis elevadas pueden provocar intensa
ansiedad, miedo y crisis de angustia. (Pardo et al., 2009).
2.4.1.3.5 Utilización terapéutica de la cafeína
La teofilina se utiliza en adultos con asma como broncodilatador de tercera elección, en
Pediatría se emplea como broncodilatador y estimulante del Sistema Nervioso Central. La
cafeína se utiliza junto a analgésicos para potenciar la eficacia. (Pardo et al., 2009).
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37
En la enfermedad de Parkinson, y en otras enfermedades neurodegenerativas como
Alzheimer y la enfermedad de Huntington. (Pardo et al., 2009).
Pardo et al. (2007) menciona que: “La cafeína presenta efectos supresores sobre células
tumorales en metástasis experimentales. Esto sugiere que las metilxantinas podrían mejorar
la clínica de la enfermedad metastásica reduciendo la morbimortalidad asociada”. (Pardo et
al., 2009).
2.4.1.3.6 Características físico-químicas
La cafeína es un derivado trimetilado de la xantina, es decir, es la trimetilxantina. La
xantina se deriva, a su vez, de la purina (unión de los heterociclos pirimidina e imidazol)
siendo l a 2,6-dioxipurina, esta sustancia con un peso Molecular de 194.2, su punto de
fusión es de 234 a 239 B y su fórmula empírica es: C~H 10N4O2, se presenta como un
polvo cristalino blanco o como cristales sedosos blancos, que son fácilmente sublimables,
muy solubles en agua a ebullición y cloroformo, y poco solubles en etanol y éter. Se va a
disolver en disoluciones concentradas de benzoatoso o salicilatos alcalinos. (Farmacopea
Europea, II Edición 1988). (Aguilar, 2006).
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38
CAPÍTULO III
3 METODOLOGÍA
Tipo de investigación 3.1
La realización de la presente investigación se sustentó en un proceso experimental, in
vitro, descriptivo, comparativo, transversal, cuantitativo y cualitativo que apoyado en la
utilización de herramientas de campo y bibliográficas permitió disponer de una
información confiable, actualizada y pertinente que permitirá identificar la eficacia de la
susceptibilidad de las cepas de Enterococcus Faecalis con la utilización de las sustancias
(Procaína al 2% más cafeína 0.25%) y extracto de Propóleo.
Experimental: Ya que va a demostrar los efectos producidos por las diferentes
sustancias a utilizar.
In vitro: Porque se va a realizar en cepas de bacterias Enterococcus Faecalis.
Analítico: Porque vamos a analizar las características, la magnitud, el comportamiento
y la forma en la que sucede y presenta los resultados de susceptibilidad de una bacteria a
una sustancia.
Comparativo: Evaluamos en diferentes tipos de sustancias irrigadoras sobre las
mismas cepas de bacterias.
Longitudinal: Porque la recolección de datos fue en un tiempo determinado y las
variables se examinaran en diferentes tiempos observándolas tanto a las 24 como a las
48 horas.
Cuantitativo: Porque lo vamos a realizar en un número determinado de muestras.
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39
Muestra 3.2
El tipo de muestra es probabilístico.
La población que se tomo es de 30 cepas a partir de un estudio previamente realizado, por lo
que en este estudio se va a utilizar una muestra de 28 cepas de Enterococcus Faecalis.
Para la cual se utilizó esta fórmula:
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40
Criterios de inclusión y exclusión 3.3
Criterios de inclusión 3.3.1
Cepas puras de Enterococcus Faecalis ATCC 29212
Procaína al 2% más cafeína al 0.25%
Solución de Propóleo
Suero fisiológico
Hipoclorito de Sodio al 5%.
Criterios de exclusión 3.3.2
Se excluirán del estudio los especímenes que hayan estado previamente en contacto con
otro tipo de sustancias.
Cajas Petri que presenten contaminación previa o estén presentando un crecimiento que
no corresponde a este tipo de bacterias a tratar.
Frascos de sustancias irrigantes alterados o que presenten alguna contaminación,
envases abiertos, o que hayan expedido.
Variables 3.4
Acorde a las variables definidas, se establece la siguiente operacionalización:
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41
Cuadro 2: Variables dependientes e independientes
Variables Tipo Definición conceptual Determinantes Indicadores Escala
Tipos de sustancias
(irrigadoras)
Independiente Se usan para desinfectar,
eliminar residuos,
dendritus y restos
pulpares.
-Procaína al 2% más
Cafeína al 0.25%.
-Extracto de Propóleo
-Hipoclorito de Sodio
al 5%
-Suero Fisiológico
Se medirán las escalas
(halos) en milímetros.
Cuantitativa de
intervalos
Acción
antibacteriana
sobre Enterococcus
Faecalis
Dependiente
Se va a medir los halos
de inhibición con una
regla y determinar así la
susceptibilidad de la
bacteria.
Enterococcus Faecalis
ATCC 29212
1 Ausencia de halo de
inhibición a las 48
horas.
2 Presencia de halo de
inhibición a las 48
horas.
Cualitativa
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42
Procedimiento 3.5
Activación de la cepa de Enterococcus Faecalis ATCC 29212 3.5.1
Se emplearon cepas de Enterococcus Faecalis (Figura 1a) procedentes del laboratorio
MEDIBAC localizado en la ciudad de Quito. Para activar la cepa bacteriana ATCC 29212
Enterococcus Faecalis, se siguió el método uno (Anexo 3) que reúne los requerimientos
para el microrganismo según indicaciones de la casa productora. (Figura 1b).
Figura 1: a) Cepa de Enterococcus Faecalis ATCC 29212. B) Activación de la Cepa Enterococcus
Faecalis.
Fuente: Elaboración propia.
Descripción de la activación: 3.5.1.1
La activación de la cepa se realizó en el laboratorio de la Facultad de Bioquímica de La
Universidad Central Del Ecuador, en donde se colocó la cepa en un caldo de cultivo,
posteriormente se colocó en un medio de anaerobiosis y se procedió a la colocación en la
incubadora por 48 horas.
A las 48 horas se pudo observar el crecimiento de la bacteria por la presencia de
turbidez en el tubo que fue cultivada dicha cepa. (Figura 2).
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Figura 2: Presencia de crecimiento bacteriano (turbidez).
Fuente: Elaboración propia.
Estandarización de la cepa de Enterococcus Faecalis 3.5.2
La estandarización de la cepa se realizó en el Laboratorio de Microbiología de la
Facultad de Odontologia de la Universidad Central, según la escala de Mc Farland 0.5 para
lo cual se utilizó un inoculo de colonias aisladas de Enterococcus Faecalis, esto sirvió
para medir el número de bacterias por milímetro y sembrar el mismo porcentaje de
bacterias en las placas de agar sangre de cordero, es decir un estándar de bacterias. (Figura
3).
Figura 3: Escala de Mac Farland
Fuente: Elaboración propia.
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Prueba de acción antibacteriana de las sustancias. 3.5.3
Bajo condiciones estériles se procedió a cultivar la cepa de Enterococcus Faecalis en 28
placas Petri con agar sangre de cordero (Figura 4).
Figura 4: Siembra de la bacteria en agar sangre de cordero.
Fuente: Elaboración propia.
Posteriormente se colocó en una pipeta electrónica de 10ul (Figura 5a) las sustancias a
estudiarse como el Propóleo (Figura 5b), el Suero Fisiológico (Figura 5c) que es nuestro
control negativo, el Impletol (Procaína más Cafeína) (Figura 5d), y el Hipoclorito de Sodio
(Figura 5e) que es nuestro control positivo, y posteriormente se las colocó en los discos
blanco (Figura 6).
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Figura 5: a) pipeta de 10ul b) extracto de Propóleo c) Suero Fisiológico d) Impletol e) Hipoclorito de
Sodio.
Fuente: Elaboración propia.
Figura 6: Colocación de sustancias a estudiar.
Fuente: Elaboración propia
Una vez colocadas las sustancias en los discos blanco se esperó de 2 a 3 minutos para la
absorción adecuada de la sustancia, como lo menciona la literatura, posteriormente estos
discos embebidos con las sustancias se colocaron en las cajas Petri (Figura 7).
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Figura 7: Colocación de discos blanco embebidas en las sustancias a tratar.
Fuente: Elaboración propia.
Posteriormente las cajas Petri fueron colocadas en una jarra que nos provee un ambiente
anaerobio adecuado para el crecimiento de la bacteria, (Figura 8a) se las llevó a la
incubadora a 35°C por un periodo de 48 horas (Figura 8b).
Figura 8: a) Colocación en Jarra de Anaerobiosis, b) Colocación en incubadora.
Fuente: Elaboración propia.
Una vez transcurrido el tiempo estipulado se pudo observar el crecimiento de las
bacterias en el agar y los halos de inhibición formados (Figura 9a), y se procedió a medir
cada uno de los halos formados con la ayuda de una regla adecuada para esta medición.
(Figura 9b).
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Figura 9::a) Observación de halos de inhibición, b) Medición de halos.
Fuente: Elaboración propia.
Los resultados obtenidos se evaluaron según los criterios de sensibilidad y resistencia,
tomando como criterios de sensibilidad cuando los halos medían 11 mm o más, y se
registran resistente si los datos obtenidos eran menores de 10 mm de diámetro. (Laguardo
et al., 2010).
Eliminación de los desechos utilizados en el laboratorio 3.5.4
Se procedió a reunir todas las cajas Petri utilizadas (Figura 10a) y posteriormente
autoclavarlas por 30 minutos a 121 °C, (Figura 10b).
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48
Figura 10; a) Cepas cultivadas. b) Autoclavado previo a eliminación
Fuente: Elaboración propia.
Posteriormente se procedió a la eliminación de dichos desechos clasificándolos como
infecciosos ya que contienen muestras biológicas contaminadas, (Figura 11a) y su debida
rotulación. (Figura 11b).
Figura 11: Colocación en funda roja. b) Rotulación de desechos infecciosos
Fuente: Elaboración propia.
Aspectos éticos: 3.6
Debido al tipo de estudio que será realizado invitro con la utilización de muestras
biológicas para lo cual se compró cepas puras de la bacteria Enterococcus Faecalis al
laboratorio Medibac, (Anexo 1) y, debido a que es una muestra de tipo biológica no
requiere ningún tipo de consentimiento informado.
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CAPITULO IV
4 Resultados
Análisis de Resultados 4.1
Tabla 1 Medición de los halos de inhibición de las Sustancias
Elaboración: Ing. Jaime Molina
Inicialmente vamos a verificar si de las muestras tomadas provienen de una población
con distribución Normal, o no, es decir que tanto porciento de confiabilidad vamos a tener,
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para lo cual, vamos a realizar las pruebas de Kolmogorov - Smirnov o con la prueba de
Shapiro - Wilk (menor a 20 datos) “(Véase la tabla N° 2)”.
Para demostrar si:
Ho: La muestra proviene de una población con distribución Normal
Ha: La muestra NO proviene de una población con distribución Normal
Pruebas no paramétricas: Pruebas de Normalidad
Tabla 2 Resultados de la prueba de Normalidad
Pruebas de Normalidadb,c
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Estadístico gl Sig. Estadístico Gl Sig.
PROPÓLEO 0,216 28 0,002 0,915 28 0,025
HIPOCLORITO DE
SODIO 5%
0,180 28 0,020 0,873 28 0,003
Sig: nivel crítico de significación
gl: grados de libertad Elaboración: Ing. Jaime Molina
De la prueba de normalidad, la mayor cantidad de muestras tiene valores del nivel de
significación (sig) menores que 0,05 (95% de confiabilidad) lo que quiere decir que las
muestras no provienen de una población con distribución normal pero que tiene el 95% de
confiabilidad ya que tiene una significación menor que 0.05 lo cual es bueno. De acuerdo a
estos resultados se procede a realizar una prueba no paramétricas de Kruskal Wallis y
Mann Whitney. “(Véase la tabla N° 3)”
Prueba no paramétrica: Kruskal Wallis
Esta prueba nos va a ayudar a determinar si las medidas obtenidas en este estudio son
similares o no dándonos dos hipótesis:
Ho: Las medias de las dos muestras son similares
Ha: Las medias de las dos muestras NO son similares.
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Tabla 3 Resultados de la prueba de Kruskal – Wallis
Elaboración: Ing. Jaime Molina
De la prueba de Kruskal Wallis Sig. Asintótica = 0,00 por lo tanto es menor que 0,05 es
decir que tiene el 95% del nivel de significación, arrojando resultados de diferencias en las
medidas obtenidas en el estudio rechazando así la Ho, ya que las medias no son similares
para lo cual se va a proceder a comparar entre las sustancias dos a dos y así poder
determinar la similitud entre ellas. “(Véase la tabla N° 4)”
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Tabla 4 Resultados de la prueba dos a dos.
Elaboración: Ing. Jaime Molina
De la prueba dos a dos se puede observar que existe una similitud entre Procaína más
Cafeína con el Suero Fisiológico, ya que obtuvimos en los dos resultados de cero, con una
significancia de 1.000 mientras que los demás emparejamientos son diferentes obteniendo
significancias de menos de 0.05. “(Véase la tabla N° 4)”
Con estos resultados se procede a la eliminación de las dos sustancias tanto de la
Procaína más Cafeína y del Suero Fisiológico que no tuvieron efecto y por ende son
similares. Una vez eliminadas estas sustancias se procede a realizar una comparación entre
las dos sustancias que sí tuvieron efecto y mostraron diferentes resultados, para lo cual se
procede realizar la prueba de Mann Whitney. “(Véase la tabla N° 5)”
Prueba no paramétrica de Mann Whitney: Esta prueba nos va a determinar si las
medidas obtenidas en el estudio son similares o no, teniendo así las siguientes hipótesis:
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53
Ho: Las medias de las dos muestras son similares
Ha: Las medias de las dos muestras NO son similares
Tabla 5 Resultados de la prueba U de Mann-Whitney
Elaboración: Ing. Jaime Molina
De la prueba de Mann Whitney que mostro una Sig. Asintótica = 0,00 ya que es menor
que 0,05 (95% del nivel de significación) nos arroja como resultado que las medidas del
Hipoclorito de Sodio al 5% son estadísticamente mayores a las obtenidas por el Propóleo.
Para lo cual vamos a comparar en barras las medias obtenidas entre las dos sustancias
obteniendo una media de 10.18 para el Propóleo y una media de 21.37 para el Hipoclorito
de Sodio verificando así, una vez más, la mayor actividad antimicrobiana del Hipoclorito
de Sodio sobre el Enterococcus Faecalis al compararlo con el Propóleo, de acuerdo a los
resultados obtenidos es este estudio. “(Véase la tabla N° 6)”.
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Tabla 6 Comparación de Medias
Elaboración: Ing. Jaime Molina
Para concluir con los resultados vamos a comparar las medias obtenidas del Propóleo
con las obtenidas con el Impletol (Procaína más Cafeína ) concluyendo así que el Impletol
no tuvo acción antibacteriana sobre la cepa a tratar a comparación con el Propóleo que si la
presentó rechazando así la Hipótesis de trabajo y aceptando nuestra hipótesis alterna.
“(Véase la tabla N° 7)”.
propoleo hipo
Series1 10,18 21,37
10,18
21,37
0,00
5,00
10,00
15,00
20,00
25,00
Comparación de medias
Hipoclorito de Sodio al Propóleo
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55
Tabla 7 Comparación de medias entre sustancias a investigar.
Elaboración: Ing. Jaime Molina
Propóleo Impletol
Series1 10,18 0,00
10,18
0,00 0,00
2,00
4,00
6,00
8,00
10,00
12,00M
M
SUSTANCIAS
Comparación de medias
Propóleo Impletol
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56
Discusión de Resultados 4.2
Existe una amplia variedad de bacterias causantes de una reinfección en un tratamiento
de conducto, una de las bacterias más frecuentemente encontradas en estos casos es el
Enterococcus Faecalis con un 90%, es una bacteria anaerobia facultativa capaz de
sobrevivir en ambientes muy inhóspitos, adaptándose así al medio en el que se encuentre.
(Cohen & Hargreaves, 2008).
Debido a que hasta la actualidad no existe una sustancia irrigadora idónea para el
tratamiento de conducto, y por la necesidad de encontrarla, se realizan muchos estudios de
sustancias, tanto de origen natural (Propóleo) o sustancias alternativas (Impletol), para su
eficaz utilización.
En lo que concierne a la actividad antibacteriana del Propóleo sobre cepas de E.
Faecalis in vitro, en este estudio hemos podido observar la presencia de un halo de
inhibición, observando así que esta bacteria si es susceptible a esta sustancia, atribuyéndole
efecto antibacteriano concordando así con los resultados obtenidos por (Koo, Rosalen,
Cury, Park, & Bowen, 2002) que mencionan la evidencia de actividad antimicrobiana del
Propóleo.
(Gutiérrez, Romero, Hidalgo, Olga, & Benita, 1999) realizaron estudios que revelaron la
sensibilidad a la solución hidroalcohólica del Propóleo al 4% en un 62% de los
Streptococos del grupo Viridans, un 85% de S. Aureus y un 85% de Lactobacillus sp.
mostrando una acción antibacteriana sobre estas cepas, concordando con este estudio, en el
cual observamos eficacia antibacteriana del 61%.
(Ferreira, y otros, 2007) Observaron que “el extracto etanólico de Propóleo es tan
efectivo como las otras sustancias utilizadas como antibacterianos en los conductos
radiculares. Frente a Prevotella Nigrescens, Fusobacterium Nucleatum, Actinomyces
Israelii, Clostridium Perfringes”, atribuyéndolo así una vez más el efecto antibacteriana a
esta sustancia, concordando también con los resultados obtenidos en este estudio.
Gonzalón (2015) al realizar su estudio en la Facultad de Odontología de la Universidad
Central evidenció que el extracto de Propóleo tuvo mayor actividad antimicrobiana, sobre
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57
cepas de Enterococcus Faecalis al compararlo con el Hidróxido de Calcio, los cuales
estadísticamente mostraron medias de 14.8 mm para el extracto de Propóleo al 10%, 12.4
mm el extracto de Propóleo al 20% y para el hidróxido de calcio de 8.7 mm. Mostrando así
una eficaz acción antibacteriana del Propóleo sobre esta cepa en concordancia con este
estudio que mostro una media de 10. 8 para el propóleo y de 21.37 para el Hipoclorito de
Sodio al 5%.
Drago et al. (2000) Serra & Ventura (2000), sugieren que especialmente la actividad
antibacteriana del Propóleo especialmente sobre bacterias Gram positivas y levaduras,
dado que el Enterococcus Faecalis pertenece a las bacterias Gram positivas corrobora con
este estudio expuesto que la tintura de Propóleo tiene una acción antibacteriana efectiva
sobre E. Faecalis.
Soon (2013) en su estudio realizado en el Postgrado de Endodoncia de la Facultad de
Odontología de la Universidad Central, pudo comprobar la eficacia del Propóleo al
compararlo con el Hipoclorito de Sodio al 2.25% sobre cepas de Enterococcus Faecalis,
observando resultados más favorables para el Propóleo en comparación con el Hipoclorito
de Sodio, no concordando así con la presente investigación ya que los resultados fueron
más favorables para el Hipoclorito de Sodio al 5%, esto se debe a que la concentración de
la sustancia a utilizarse en este estudio fue mayor (5%) para el Hipoclorito de Sodio.
Maia, Castro, Sampaio, & Gaspar (2008) demostró que el extracto de Propóleo presentó
una buena actividad antimicrobiana, siendo mayor que el Hipoclorito de Sodio al 5%, sin
embargo, gel de clorhexidina fue el más eficaz contra E. Faecalis no concordando así con
este estudio que mostró una mejor actividad el Hipoclorito de Sodio al 5% que el Propóleo,
esto puede deberse a que la composición del Propóleo va a variar de acuerdo a la zona de
donde fue recolectada.
(Arslan, Ozbilge, Kaya, & Er, 2011) Demostraron en su estudio que el Propóleo posee
actividad antimicrobiana contra E. Faecalis y C. Albicans demostrando así una vez más su
acción antibacteriana sobre E. Faecalis corroborando con este estudio.
Moncla et al. (2012) Evaluaron el efecto del extracto de Propóleo sobre cepas de
Enteroccocus, arrojando como resultados una inhibición en el crecimiento de cepas de E.
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58
Faecium y E. Faecalis corroborando con este estudio con respecto a la inhibición en el
crecimiento de E. Faecalis.
Por otro lado la actividad antibacteriana de la Procaína mas Cafeína sobre cepas de
Enterococcus Faecalis in vitro no se ha podido observar halos de inhibición, por lo que no
concuerdan con Machiavelli, R. menciona que: “En cuanto a la capacidad antibacteriana de
la Procaína, es la conclusión preliminar de un estudio que hemos impulsado, y que si bien
no se ha terminado todo indica que, dicha actividad realmente se produce in Vitro. Este
estudio se lleva adelante en la Cátedra de Bioquímica del Hospital de Clínicas dependiente
de la Facultad de Medicina de la Universidad de Buenos Aires” dado que son
investigaciones que se están haciendo actualmente y están en proceso, se puede contribuir
diciendo que, sobre cepas de Enterococcus Faecalis no existe dicha acción al realizarse in
vitro.
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59
CAPITULO V
CONCLUSIONES: 5.1
El estudio comparativo invitro de la actividad antimicrobiana determinó que, al utilizar
tintura de Propóleo, si existe una inhibición en el crecimiento de la bacteria Enterococcus
Faecalis.
Se pudo determinar que la Procaína más Cafeína no tuvo acción antibacteriana sobre el
crecimiento de la bacteria Enterococcus Faecalis, rechazando así, dicha acción que
menciona la literatura y con la cual se comercializa en el mercado.
Se determinó que, al comparar el efecto antibacteriano de las dos sustancias Hipoclorito
de Sodio al 5% y el Propóleo, sobre cepas de Enterococccus Faecalis existe una diferencia
significativa, observando halos de inhibición de mayor tamaño en el Hipoclorito de Sodio.
El estudio bibliográfico que hemos realizado con respecto a la utilización de irrigantes
se pudo determinar que el Propóleo es una sustancia apta para la utilización como
coadyuvante a la utilización del Hipoclorito de Sodio.
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60
RECOMENDACIONES 5.2
En base a los resultados de los estudios realizados se recomienda el uso del Propóleo
como coadyuvante para la irrigación del tratamiento de conducto en los casos de
infecciones secundarias donde se encuentra con más frecuencia la presencia del
Enterococcus Faecalis ya que tiene una acción antibacteriana eficaz sobre estas cepas.
Se recomienda la utilización de la Procaína más Cafeína (Impletol) como coadyuvante
en la irrigación, ya que, pese a no poseer propiedades antibacterianas posee propiedades
beneficiosas como analgésico, anestésico, cicatrizante, antiinflamatorio, y estimulador de
las fibras nerviosas terminales en donde se ha producido una despolarización, ayudando así
a un mejor postoperatorio para el paciente.
Se recomienda a los profesionales odontólogos y estudiantes la utilización de productos
naturales en todas las áreas de la salud incluyendo la Odontología ya que estas sustancias
no van a presentar ningún tipo de reacción adversa a diferencia de los medicamentos que
en la actualidad se utiliza que de uno u otra manera causan efectos adversos al paciente.
Se recomienda a los catedráticos y profesores guías en el área de clínica integral motivar
a los estudiantes con el uso de productos naturales a sus pacientes para así evitar presencia
de resistencias a medicamentos cuando en verdad se requiera su utilización.
A las personas relacionadas con el campo de investigación se recomienda la ampliación
de esta experiencia debido a que en este trabajo se tomó de referencia solo a un grupo
limitado de bacterias presentes en el conducto radicular infectado, existiendo una amplia
diversidad de géneros bacterianos que pueden o no ser sensibles a esta sustancia.
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61
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ANEXOS
Anexo 1: Certificado Microbiológico de la Cepa Enterococcus Faecalis ATCC 29212
Page 80
65
Anexo 2 Información de la casa distribuidora del método a utilizar de acuerdo a la cepa.
Page 81
66
Anexo 3: Información de la casa distribuidora del método a utilizar de acuerdo a la cepa.
Page 82
67
Anexo 4: Método para activación de la cepa.
Page 83
68
Anexo 5: Solicitud para Comité de Ética
Page 84
69
Anexo 6: Asignación de tutor para Comité de Ética
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70
Anexo 7: Aprobación de Comité de Ética.
Page 86
71
Anexo 8: Solicitud para ingreso al Laboratorio de Microbiología de la Facultad de Odontología
