Aula3

Anticorpos no laboratório

Anticorpos

Antigénio-Anticorpo

Antigénio-Anticorpo

ELISA assays

Immunobloting

Immunobloting

RIA

Immunoprecipitation

Immunofluorescence

Granulócitos

Monocitos

Linfocitos

Immunohistochemistry

Practical uses of Ab

• Functional and molecular evaluation of lymphocytes

– Evaluation of B cell function• Quantitative immunoglobulins• Specific antibodies• Enumeration and characterization

– Evaluation of T cell function• Screening• Enumeration and characterization

– NK cells– Identification of Known gene defects

Practical uses of Ab• Avaliação de funcionalidade B• -recorre-se na generalidade se há historial de infecções recorrentes com

bactérias capsuladas- imunidade humoral deficiente– A) quantificar Imunoglobulinas

• Niveis« -imunodef. Primária ou imunoterapia supressora• Perda excessiva-patologia de perda proteica• Catabolismo elevado- ex distrofia

– B) anticorpos especificos• Funcionalidade B in vivo em resposta a imunização, ex:vacinas

meningococicas

• Avaliação de funcionalidade T• - recorre-se se há historial de imunodeficiencias T recorrentes e/ou

imunodeficiências na produção de citoquinas– A) screening

• Reacções DTH– B) Enumeração e caracterização T

• CD3 – indução mitogénica• Citoquinas- RT-PCR• diversidade TCR

Practical uses of Ab

• Células NK• Defesa inata particular de vírus e tumores

– Citometria de fluxo (CD3-, CD56,CD16)– Actividade : libertação de Cromium 51– Citotoxicidade

• Identificação de defeitos genéticos– Deficiências na produção de Ab– Deficiências combinadas– outras

Ab as Therapeutics

• Uso de Imunoglobulinas como agentes terapêuticos

• Doenças crónicas inflamatórias• Cancro

• Doenças auto-imunes• Transplantes (agentes

imunossupressores)• Imunodeficiências