El colesterol es el principal esterol del organismo humano y precursor de todos los demás esteroides corporales. Se encuentra formando parte de membranas celulares, lipoproteínas, ácidos biliares y hormonas esteroideas. El colesterol es un importante constituyente de los cálculos biliares, pero su principal función patológica, lo constituye la producción de aterosclerosis de arterias vitales, causando enfermedad coronaria, cerebro vascular y vascular periférica. El origen del colesterol en el organismo tiene dos fuentes, la externa y el que produce el propio organismo. Debido a que el organismo puede producir su propio colesterol, existe la posibilidad que personas que no consuman colesterol, tengan niveles sanguíneos elevados por tener algún desorden genético-metabólico que conlleva a dicha elevación. Estos desordenes son más común de lo que se cree y son la principal causa de ateroma y de enfermedades vasculares, entre ellas el infarto agudo al miocardio. Por esto la importancia de determinar en forma precoz los niveles elevados de colesterol en los pacientes. Los alimentos derivados de animales son ricos en colesterol especialmente huevos, lácteos y las carnes. La mayoría de este está en forma esterificada. El organismo absorbe aproximadamente la mitad del colesterol contenido en la dieta. Los esteroles vegetales son escasamente absorbidos por el organismo. El hígado es el principal órgano productor (10 % del total), siendo otros órganos importantes en la producción el intestino, corteza suprarrenal, testes y ovario. La síntesis del colesterol se halla regulada sobre todo por la ingesta de colesterol en la dieta.El aumento del LDL-colesterol a nivel sanguíneo lleva a un conjunto de proceso que desembocan en la formación de placas inestables en las paredes de los vasos sanguíneos, conocidos como ateromas. Estas placas reducen la luz de las arterias y venas, y si una de estas placas se desprende puede producir ya sea un infarto agudo al miocardio o en el cerebro un derrame
II. Determinación del HDL Las lipoproteínas son macromoléculas que estructuralmente están formadas por una parte lipídica y una proteica, cuya función es empaquetar los lípidos insolubles en el plasma proveniente de los alimentos (exógeno) y los sintetizados por nuestro organismo (endógenos), que son transportarlos desde el intestino y el hígado a los tejidos periféricos y viceversa; devolviendo el colesterol al hígado para su eliminación del organismo en forma de ácidos biliares. En la actualidad, las lipoproteínas se clasifican según su densidad en:
Quilomicrones
VLDL, lipoproteínas de muy baja densidad
IDL; lipoproteínas de densidad intermedia
LDL; lipoproteínas de baja densidad
HDL, lipoproteínas de alta densidad.
Características: Las lipoproteínas son partículas esféricas, de un tamaño menor que los hematíes y solo son visibles al microscopio electrónico. Están formadas por una parte lipídica, y una proteica. Dentro de la lipídica encontramos colesterol esterificado y no esterificado, triglicéridos y fosfolipidos y en la parte proteica a las apolipoproteinas. El colesterol en su forma esterificada se va a encontrar en el centro o core de la lipoproteina, y el colesterol no esterificado lo vamos a encontrar en una capa más superficial junto a los fosfolípidos .El colesterol es una molécula derivada de los esteroides, y es esencial para nuestro organismo, esta presente en todas las células formando parte de las membranas celulares, en pequeña cantidad en el sistema nervioso central, recubriendo las vainas de mielina. Es precursor de hormonas esteroides (progesterona, estrógeno, testosterona y cortico esteroides. En la piel y
por acción de los rayos solares se transforma en vitamina D. El ser humano dispone de colesterol gracias a dos vías: la exógena directamente a través de los alimentos y la endógena que sintetiza el hígado (la mayor parte).La determinación de colesterol total incluye la medición de las formas libres y esterificadas del esteroide. En el suero o en el plasma 2/3 del colesterol total se encuentran como éster y el resto en forma libre. Esto tiene cierta importancia analítica ya que en algunas reacciones químicas, el éster del colesterol desarrolla un color más intenso que el colesterol libre, lo cual puede provocar un sesgo positivo. Por esta razón es de suma importancia el conocimiento de la química de los diversos métodos para colesterol y el reconocimiento de sus limitaciones en la elección del método que se empleara en el laboratorio.
III. Determinación de triglicéridos
Los triglicéridos son ésteres de glicerol y ácidos grasos que provienen de la dieta o son sintetizados principalmente en el hígado. Los triglicéridos se transportan en el plasma en las lipoproteínas y son utilizados por el tejido adiposo, músculo y otros. Su principal función es suministrar energía a la célula. El mayor contenido de los triglicéridos se encuentra en quilomicrones y VLDL. Las concentraciones elevadas de triglicéridos en suero pueden ser debidas a alteraciones hepatobiliares, diabetes mellitus, nefrosis, hipotiroidismo, alcoholismo, hiperlipoproteinemia familiar tipo IV (elevación de VLDL) y tipo V (elevación de VLDL y quilomicrones), rara vez son tipo I (elevación exclusiva de quilomicrones). El diagnóstico clínico no debe realizarse teniendo en cuenta el resultado de un único ensayo, sino que debe integrar los datos clínicos y de laboratorio. No es tan clara la relación entre la enfermedad cardiaca coronaria (CHD) y la hipertrigliceridemia como con los niveles de colesterol LDL. Sin embargo, por estudios de metanálisis se consideran los triglicéridos un predictor independiente al colesterol de CHD. Para las pruebas de perfil lipídico el paciente debe estar en ayuno total excepto agua, durante un lapso de 12 a 24 horas antes de la prueba. No debe haber realizado ejercicio vigoroso y bajo la dieta corriente el día anterior de la prueba.
RESULTADOS:
EXPERIMENTO 1: Determinación de colesterol
Al leer las muestras a 505 nm se obtuvieron los siguientes resultados:Blanco (B) 0
Estándar (S) 0.690
Desconocido (D) 0.669
calculo de resultados:
Formula: Colesterol = D x Fc
Dónde:Colesterol (g/L)D = desconocido o muestra problemaF.c = 2g/L S
Reemplazando los datos:
Colesterol = 0.669 x 2 = 1.93914 g/L 0.690
Interpretación de resultados:Debido a que el resultado está dentro del rango esperado (menor de 2.00 g/L) su nivel de colesterol es normal.
EXPERIMENTO 2: HLD
Al leer las muestras a 505 nm se obtuvieron los siguientes resultados:Blanco (B) 0
Estándar (S) 0.255
Desconocido (D) 0.187
calculo de resultados:
Formula: HDL = D x Fc
Dónde:D = desconocido o muestra problemaF.c = 0.457g/L S
Reemplazando los datos:
Colesterol = 0.187 x 0.457 = 0.33514 g/L 0.255
Interpretación de resultados:Debido a que el resultado está en el límite de lo esperado (para varones debe ser mayor de 0.40 g/L), su HDL está ligeramente bajo.
EXPERIMENTO 3: Determinación de triglicéridos
Al leer las muestras a 505 nm se obtuvieron los siguientes resultados, se debe llevar a cero con el agua destilada y correguir las muestra con el blanco:
Estándar (S) 0.367
Desconocido (D) 0.478
calculo de resultados:
Formula: TG = D x Fc
Dónde:D = desconocido o muestra problemaF.c = 2.00 g/L S
Reemplazando los datos:
TG = 0.478 x 2.00 = 2.6049 g/L 0.367
Interpretación de resultados:Debido a que el resultado no está dentro del rango esperado (menor de 1.50 g/L) su nivel de trigliceridos es anormal.
Para obtener estos resultados se realizaron en esta práctica se realizaron 3 procedimientos, donde se determinó el Colesterol total, HDL y la cantidad de Triglicéridos. Como podemos ver para determinar la LDL es necesario conformar
un perfil lipídico con los valores de colesterol total, colesterol de HDL y triglicéridos.
En la experiencia de la determinación del colesterol el resultado fue 1.79 g/l que se encuentra dentro del rango normal (<2.00 g/l). Un aumento del colesterol puede causar enfermedades cardiovasculares.
Cuando se determino el HDL; el resultado fue 0.40 g/l, siendo lo normal en el hombre >0,40 g/l. Debido a que las HDL son lipoproteínas que transportan el colesterol desde las arterias hasta el hígado, su baja concentración suponen un riesgo a presentarse enfermedades cardiovasculares.
En el tercer experimento la cantidad de triglicéridos fue o.53 g/l que está dentro de lo deseable. La determinación de los niveles de triglicéridos nos ayuda a conocer el riesgo aterogénico.
Es importante la correcta realización de estos parámetros ya que ayuda en el diagnóstico oportuno de la formación de ateromas, también nos da una idea de la progresión de la arterioesclerosis.
Cuestionario
1. ¿Cuál es la importancia de la medición de la concentración de lípidos en la sangre?Porque teniendo los niveles de concentración de los lípidos podemos relacionarlos con enfermedades y patologías. Es decir es importante porque podemos hacer un diagnóstico y seguimiento de enfermedades metabólicas, primarias o secundarias. Por ejemplo. Es conocida la relación existente entre elevados niveles de triacilglicéridos y colesterol en sangre y el desarrollo de arteriosclerosis y enfermedades coronarias. La importancia de dicha relación ha hecho prudente la recomendación de que se reduzca la ingesta de grasas.
2. ¿cuáles son los fundamentos para la determinación de los lípidos (colesterol, LDL, HDL, TG) en la sangre?
DETERMINACIÓN DE COLESTEROL TOTAL Para la determinación de colesterol total se utilizan reactivos comerciales que incluyen las enzimas y sustratos necesarios para la cuantificación de todas las formas de colesterol presentes en el suero .Las reacciones que tienen lugar son: CHE Esteres de colesterol + h2O Colesterol + Ac. Grasos
CHODColesterol + O2 + h2O Colestenona + H2O2
PODh2O2 + Fenol + 4-AP Quinona + H2O.
1. Una colesterol estearasa (CHE) hidroliza los ésteres de colesterol a colesterol mas ácidos grasos libre. (Hidrólisis de los ésteres de colesterol mediante la colesterol esterasa (CE).
2. A continuación una colesterol oxidasa (CHOD) oxida todo el colesterol a colestenona y peróxido de hidrógeno. 3. El peróxido de hidrógeno es sustrato de una peroxidasa (POD) que junto con 4-amino fenazona (4-AP) da lugar a la formación de una Quinona roja. La quinona formada es proporcional a la concentración de colesterol en la muestra. Con respecto a las enzimas que actúan en estas reacciones, se puede decir que:La colesterol esterasa (CE) se encuentra presente en el jugo pancreático y en el intestino, transforma los esteres del colesterol en colesterol y ácido graso libre, y es precisamente en esta forma libre como es absorbido el colesterol por el intestino.La colesterol oxidasa (CO) se encuentra en la vesícula biliar y el intestino y produce la oxidación del colesterol libre debido a que el organismo es incapaz de oxidar colesterol hasta dióxido de carbono por lo que solo puede excretarlo en la bilis donde parte del colesterol libre se convierte en ácidos biliares.
DETERMINACIÓN DE HDL-COLESTEROL
Para la determinación del colesterol presente en las principales lipoproteínas que lo contienen como HDL (lipoproteínas de alta densidad) y LDL (lipoproteínas de baja densidad), es necesario: Primero, la separación selectiva de la lipoproteína correspondiente con agentes precipitantes. Segundo, la cuantificación del colesterol presente en dicha lipoproteína como se indicó anteriormente. Entre estos reactivos precipitantes están el ácido fosfotungstico y magnesio que precipitan a las LDL y VLDL (lipoproteínas de muy baja densidad) mientras que las HDL permanecen en solución.
DETERMINACIÓN DE TRIGLICÉRIDOS
Para la determinación de triglicéridos en suero se utilizan reactivos comerciales que incluyen las enzimas y sustratos necesarios para la cuantificación por espectrofotometría visible. Las reacciones que tienen lugar son:
Lipasa Triglicéridos + H2O Glicerol + Ac. Grasos
GK Glicerol + ATP Glicerol-3-P + ADP
GPOD Glicerol-3-P + O2 Dihidroxiacetona + H2O2
POD H2O2 + p-clorofenol + 4-AP Quinona + H2O
Una lipasa hidroliza los triglicéridos dando glicerol más ácidos grasos libre. El glicerol formado es sustrato de una glicerol quinasa que en presencia de ATP lo
fosforila a glicerol 3P. El glicerol 3P es oxidado a dihidroxiacetona por una glicerol fosfato oxidasa dando
también peróxido de hidrógeno. El peróxido de hidrógeno junto con los cromógenos p-clorofenol y 4-AP son
sustrato de una peroxidasa para formar una quinona roja cuantificable a 505 nm. La quinona formada es proporcional a la concentración de triglicéridos presente en la muestra.
3. Explique que son las dislipidemias y su relación con las enfermedades cardiovasculares.Dislipidemias:
LAS DISLIPIDEMIAS
son un conjunto de enfermedades asintomáticas que tienen la característica común de tener concentraciones anormales de las lipoproteínas sanguíneas El término dislipidemia se considera hoy más exacto, porque significa algo más que altos niveles de lípidos en la sangre. Dislipidemia quiere decir una anomalía en el equilibrio de lípidos en la sangre o sea una falta de equilibrio entre los lípidos y las substancias qué los transportan a las diferentes partes del cuerpo, a través de la circulación sanguínea.Pueden ser causadas por defectos genéticos (dislipidemias primarias), o ser consecuencia de patologías o de factores ambientales (dislipidemias secundarias). En muchas ocasiones, los defectos genéticos requieren de la presencia de factores secundarios para expresarse clínicamente (dislipidemias de etiología mixta).
1) Defectos genéticos: Las principales dislipidemias de causa genética son laHipercolesterolemia Familiar, la Dislipidemia Familiar Combinada, Hipercolesterolemia Poligénica, la Disbetalipoproteinemia, las Hipertrigliceridemias Familiares y el déficit de HDL. Su prevalencia a nivel poblacional es alrededor del 4 %, lo que sube a 30-40% en población portadora de cardiopatía coronaria.2) Patologías causantes de dislipidemias: Las principales son la obesidad, la Diabetes Mellitus, el hipotiroidismo, la colestasia, la insuficiencia renal y el síndrome nefrósico.3) Factores ambientales.
CLASIFICACION DE LAS DISLIPIDEMIASSe utiliza una clasificación clínica de estas patologías metabólicas:1) Hipercolesterolemia aislada2) Hipertrigliceridemia aislada3) Hiperlipidemia mixta4) Déficit de HDL aislado
Dislipidemias y su relación con las enfermedades cardiovasculares
Estudios epidemiológicos han mostrado que niveles elevados de Colesterol, particularmente los de LDL Continúan siendo el factor de riesgo mejor establecido para el desarrollo de la enfermedad cardiovascular.Las fracciones de colesterol unidas a lipoproteínas cumplen funciones distintas, en un caso generando los procesos que dan origen a la ateroesclerosis en los endotelios (LDL) y, en otro, removiendo partículas aterogénicas desde esos tejidos (HDL).WEBGRAFÍA
