MÉTODO EXPERIMENTAL

Materiales y equipos:

Estufa con recirculación de aire

Beaker x 50, 100 mL

Desecador Papel filtro

Pipetas x 5, 10 mL Bagueta

Probeta x 100 Ml

Balanza analítica

Papel filtro

Baño maría

Matraz Erlenmeyer x 200 mL

Agitador magnético

Embudo simple

Frascos color ámbar de 50, 100, 250 y 1 000 mL

Pesar la muestra

Lavar, desinfectar con cloro

Dejar macerar la muestra por 2 horas ,agitar cada 10 minutos Filtrar

• Llevar a baño maria a 70°

• Hasta que la muestra evapore y quede una pequeña cantidad.

• llevar a un desecador hasta peso constante y determinar el peso del extracto obtenido.

Tamizaje fotoquímico

HCl

Para reconocer alcaloides

Dragendorff 2 gotas

Pesar 10 gramos de a muestra

Agregar 7 ml de agua +5ml de HCL 5% y agitar + 2 gotas de cada reactivo a cada tubo.

2 gotas

+ Alcaloides

pp. amarillo claro

2 gotas

Mayer

Wagner

2 gotasvalser

Sonnenshein2 gotas

+ precipitado blanco

Prueba a la gota

Pesamos la muestra seca, agregamos el solvente que fue ácido clorhídrico 10 mL aprox ,se puso en un matraz el cual se llevo a reflujar a una temperatura de 60ºC durante 10 minutos aproximado , se dejó enfriar y filtramos

Para compuestos básicos como alcaloides

CROMATOGRAFIA DE CAPA DELGADA PREPARATIVA (CCDP)

Preparación de la fase móvil

Tolueno 18,6

Acetato 1.4

Tiempo de recorrido de 40-50 minutos

Se extrajo 10 mg del extracto, que fue re disuelto en cloroformo, se sembró en una cromatoplaca de sílice

Antes del sembrado el sílice se mide 1 cm en la base en la parte superior y los extremos

Lectura

Utilizamos un revelador (vainillina) y 2 gotas de ácido sulfúrico concentrado

Después de terminar el sembrado ponerlo en la cubeta donde está la fase móvil con mucho cuidado, y observar y Retiramos la placa 1 cm antes de ver que la fase móvil llegará al termino de está

Dejar secar.

ENSAYO METABOLITO HCl CH MeOH H2O

Secamos en la cocinilla

Aproximado de 4 minutos

Resultado

Observemos la foto

Diferentes colores

5% Cl3

MAYER ALCALOIDES -

WAGNER ALCALOIDES - -

VALSER ALCALOIDES -

SONNESCHEIN ALCALOIDES + +

LIBERMANN-BUCHARD TRITERPENOS Y/O ESTEROIDES

- -

BORNTRAGER QUINONAS - N.R

SHINODA FLAVONOIDES + +

FeCl3 TANINOS - -

GELATINA TANINOS - -

GELATINA – SAL TANINOS - -

BALGET SESQUITERPENLACTONAS - -

LEGAL SESQUITERPENLACTONAS - -

ESPUMA SAPONINAS -

MOLISH AZUCARES -

FEHLING AZUCARES REDUCTORES -

BENEDICT AZUCARES REDUCTORES -

Tamizaje fotoquímico

Resultados

Prueba a la gota

ENSAYO METABOLITO HCl ROH H2O CH2Cl

DRAGENDORFF ALCALOIDES - -

MAYER ALCALOIDES + +

WAGNER ALCALOIDES - -

VALSER ALCALOIDES - -

SONNESCHEIN ALCALOIDES + +

LIBERMANN-BUCHARD TRITERPENOS Y/O ESTEROIDES

-

SHINODA FLAVONOIDES + +

FeCl3 TANINOS - -

GELATINA TANINOS - -

GELATINA – SAL TANINOS - -

R. ROSENHEIM + +

ESPUMA SAPONINAS -

R. BORNTRAYER QUINONAS -

R. KEDDE N.R