Proiect Sectorial ADER 2.2.1:

Optimizarea și modernizarea sistemului de producere a cartofului pentru sămânță din categorii biologice superioare prin eliminarea riscului de infestare cu organisme dăunătoare de carantină și identificarea de soiuri / linii noi de cartof rezistente la nematozii cu chiști ai cartofului Globodera spp. (populații europene)”

STAŢIUNEA DE CERCETARE – DEZVOLTARE PENTRU CARTOF TÂRGU SECUIESC

Contract de finanţare Nr. 2.2.1. / 22.10.2015

- Elaborarea strategiei naţionale de producere, multiplicare şi prelucrare a cartofului pentru sămânţă în condiţii de siguranţă fitosanitară

- Elaborarea şi implementarea normelor tehnico-organizatorice privind producerea, multiplicarea, prelucrarea şi depozitarea cartofului pentru sămânţă.

1. OBIECTIVELE PROIECTULUI:

2. REZULTATE PRECONIZATE PENTRU ATINGEREA OBIECTIVELOR:

- Identificarea factorilor de risc pe fluxul de producere, multiplicare, condiționare, ambalare și păstrare a materialului de plantat;

- Stabilirea unor norme metodologice care să asigure producerea, multiplicarea, ambalarea și păstrarea cartofului pentru sămânță din categorii biologice superioare în condiții de igienă fitosanitară;

- Comportarea unor linii si soiuri de cartof la diferite tulpini virale responsabile de pătarea inelară necrotică a tuberculilor;

- Eficientizarea şi modernizarea capacităţilor tehnice a spaţiilor de sortare, condiţionare, ambalare şi depozitare a materialului pentru plantat certificate;

REZULTATE PRECONIZATE PENTRU ATINGEREA OBIECTIVELOR:

- Stabilirea unui flux tehnologic eficient pentru sortare, condiționare ambalare și depozitare, a materialului pentru plantat prin reducerea cheltuielilor cu forța de muncă și energie;

- Elaborarea unor norme tehnologice pentru gestionarea tuberculilor neconformi, corpuri străine și a ambalajelor distruse rezultate în urma sortării, calibrării și ambalării;

- Metodă de identificare a soiurilor / liniilor noi de cartof rezistente la nematozii cu chiști ai cartofului din genul Globodera.

3. OBIECTIVUL FAZEI:

- Lista soiurilor / liniilor selectate;

- Strategie pentru testarea soiurilor / liniilor tolerante la nematozii cu chiști și stabilirea laboratorului pentru testare;

- Fișe de testare pentru viroze, raport de cercetare

- Documente achiziții;

4. REZULTATE PRECONIZATE PENTRU ATINGEREA OBIECTIVULUI FAZEI

- Testare imunologică;

Identificarea verigilor sensibile pe fluxul de producere, multiplicare, ambalare și păstrare cartofului pentru sămânță din categorii biologice superioare în condiții de igienă fitosanitară

ACTIVITĂŢI PROPUSE PENTRU ATINGEREA OBIECTIVULUI FAZEI

CP – Stațiunea de Cercetare – Dezvoltare pentru Cartof Târgu SecuiescP1 – Institutul Național de Cercetare – Dezvoltare pentru Cartof și Sfeclă de Zahăr BrașovP2 – Stațiunea de Cercetare – Dezvoltare pentru Cartof Miercurea Ciuc

Nr. crt.

Parteneri / acronim

Activităţi (cf. Planului de realizare al proiectului)

Rezultate preconizate (cf. Planului de realizare al proiectului)

1 CP,P2

Activitatea 2.1.Stabilirea soiurilor / liniilor de cartof care vor fi testate în loturi demonstrative și înființarea acestora

2 loturi experimentale

2 P1

Activitatea 2.2. Iniţierea culturilor de meristeme in vitro la soiurile / liniile selecţionate în vederea devirozării

100 meristeme / soi / linie

3 CP

Activitatea 2.3.Identificarea laboratoarelor autorizate pentru testarea soiurilor / liniilor rezistente / tolerante la nematozii cu chiști și inițierea testărilor

Încheierea Protocolului de colaborare și inițierea testărilor

4 CPP1,P2

Activitatea 2.4.Achiziția de materiale și echipamente necesare realizării fazei

Raport de achiziție

5.CPP1,P2

Activitatea 2.5.Analiza imunologică a soiurilor / liniilor selecţionate

Raport de testare

Activitatea 1.1.Stabilirea soiurilor / liniilor de cartof care vor fi testate în loturi demonstrative și înființarea acestoraPentru buna desfășurare a lucrărilor prevăzute în Planul de realizare a proiectului Stațiunea de Cercetare - Dezvoltare pentru Cartof Târgu Secuiesc - CP a asigurat partenerilor materialul pentru plantat / multiplicat in vitro din soiurile / liniile selectate. Au fost înființate două loturi demonstrative de către CP și unul de către P2.Au fost elaborate:- lista soiurilor propuse pentru înființarea culturilor semincere pentru certificare, - lista soiurilor propuse pentru înființarea loturilor demonstrative,- lista soiurilor propuse pentru perfecţionarea tehnologiei de cultivare a cartofului pentru sămânță.Au fost înființate culturi semincere pentru certificare cu 4 soiuri de cartof pe o suprafață de 10 ha din categoria biologică Elită, cu material biologic de la Institutul Național de Cercetare - Dezvoltarepentru Cartof și Sfeclă de Zahăr Brașov și import.

A fost înființată o experiență pentru perfecționareatehnologiei de cultivare a cartofului pentru sămânță cu diferiterapoarte de fertilizare și distanțe de plantare / rând.

Variante de fertilizare:V1 - martor - 130:70:130 s.a. N:P:K administrat înainte de plantare și la rebilonareV2 - 130:90:100 s.a. N:P:K administrat înainte de plantare și la rebilonareV3 - 150:110:150 s.a. N:P:K administrat înainte de plantare și la rebilonareV4 - 150:130:170 s.a. N:P:K administrat înainte de plantare și la rebilonare

Activitatea 1.1.Stabilirea soiurilor / liniilor de cartof care vor fi testate în loturi demonstrative și înființarea acestora

Densitate: 21 cm - V1 - martor - 130:70:130 s.a. N:P:K administrat înainte de plantare și la rebilonare

-V2 - 130:90:100 s.a. N:P:K administrat înainte de plantare și la rebilonare- V3 - 130:110:150 s.a. N:P:K administrat înainte de plantare și la rebilonare- V4 - 150:130:170 s.a. N:P:K administrat înainte de plantare și la rebilonare

25 cm - V1 - martor - 130:70:130 s.a. N:P:K administrat înainte de plantare și la rebilonare

- V2 - 130:90:100 s.a. N:P:K administrat înainte de plantare și la rebilonare- V3 - 130:110:150 s.a. N:P:K administrat înainte de plantare și la rebilonare -- V4 - 150:130:170 s.a. N:P:K administrat înainte de plantare și la rebilonare

30 cm - martor - 130:70:130 s.a. N:P:K administrat înainte de plantare și la rebilonare

- V2 - 130:90:100 s.a. N:P:K administrat înainte de plantare și la rebilonare- V3 - 130:110:150 s.a. N:P:K administrat înainte de plantare și la rebilonare- V4 - 150:130:170 s.a. N:P:K administrat înainte de plantare și la rebilonare

Activitatea 1.1.Stabilirea soiurilor / liniilor de cartof care vor fi testate în loturi demonstrative și înființarea acestora

I. LISTA SOIURILOR PROPUSE PENTRU ÎNFIINȚAREA CULTURILOR SEMINCERE PENTRU CERTIFICARE1. Roclas - elită - 3 ha2. Bellarosa - elită - 2 ha3. Arizona - elită - 2 ha4. Gared - clone C - 3 ha

Activitatea 1.1.Stabilirea soiurilor / liniilor de cartof care vor fi testate în loturi demonstrative și înființarea acestora

II. LISTA SOIURILOR PROPUSE PENTRU ÎNFIINȚAREA LOTURILOR DEMONSTRATIVELot demonstrativ I Lot demonstrativ II1. Constance 1. Opal2. Manitou 2. Lanorma3. Arnova 3. Ultra4. Evolution 4. Endeavour5. Riviera 5. Labella6. Ambition 6. Red Lady7. Faluka 7. Masai8. Artemis 8. Queen Anne9. Esmée 9. Laperla10. Arizona 10. YP 07-29611. Lusa 11. YP 05-13012. Madeleine 12. Panam13. Rudolph 13. 15-1677/3114. Volare 14. 14-1574/4

III. LISTA SOIURILOR PROPUSE PENTRU PERFECŢIONAREA TEHNOLOGIEI DE CULTIVARE A CARTOFULUI PENTRU SĂMÂNȚĂ1. Roclas - elită2. Bellarosa - elită3. Arizona - elită4. Gared - clone C

Activitatea 2.2. Iniţierea culturilor de meristeme in vitro la soiurile / liniile selecţionate în vederea devirozării

Iniţial colţii tuberculilor celor 14 linii au fost testaţi în data de 9.02.2016, prin tehnica ELISA, pentru principalele grupe de virus:

X-S, Y, M, L-A.Pentru grupa de virus XS procentul de infecţie a fost foarte

ridicat, pentru majoritatea liniilor, mai puţin linia TS 12-1489-1574. Referitor la virusul Y, s-a determinat pentru linia TS 11-1467-

1633 o infecţie ridicată 64,71%, liniile TS 11-1468-1633 şi TS 12-1501-1582 au prezentat acelaşi procent de infecţie 38,46%, urmate de linia TS 11-1472-1633 (15,38%) şi linia TS 12-1489-1574 (6,67%).

Virusul PVM a fost identificat la 4 linii, după cum urmează: TS 96-1207-169 (cu o infecţie de 20%), TS 12-1488-1574, TS 12-1497-1573, TS 09-1442-1525 (cu acelaşi procent de infecţie de 6,67%).

Activitatea 2.2. Iniţierea culturilor de meristeme in vitro la soiurile / liniile selecţionate în vederea devirozării

Pentru grupa de virusuri LA linia TS 12-1497-1573 a prezentat un atac cu acest virus în procent de 13,33%, iar pentru linia TS 11-1486-1642 s-a înregistrat o infecţie de 7,14%.

Au fost efectuate 16 inoculări meristematice, urmate apoi la 4 săptămâni de pasări ale meristemelor. Au existat 5 linii (TS 12-1488-1574; TS 12-1489-1574; TS 11-1468-1633; TS 96-1207-169; TS 11-1467-1633) care la cea de doua pasare aveau din meristeme plantule dezvoltate, acestea fiind multiplicate, la nivelul fiecărui internod. La cea de a treia pasare pe lângă linii de mai sus, alte 4 linii (TS 12-1497-1573, TS 12-1502-1675, TS 11-1472-1633 şi TS 09-1442-1525 au format plantule.

Activitatea 2.3.Identificarea laboratoarelor autorizate pentru testarea soiurilor / liniilor rezistente / tolerante la nematozii cu chiști și inițierea testărilor

Pentru realizarea acestei activităţii colectivul de cercetătoriimplicaţi au pornit de la analiza Programului de monitorizare aorganismelor de carantină dăunătoare cartofului, elaborat deagenţia Naţională Fitosanitară, şi au acţionat pentru: identificarea respectării măsurilor obligatorii privindorganismele de carantină în unităţile de cercetare, specializate încultura cartofului conform pct.16.3; 16.4; din Anexa IV, Partea A,Secţiunea II din HG 563/2007. stabilirea suprafeţelor contaminate de nematozi cu chişti dingenul Globodera spp. la nivel naţional. identificarea laboratoarelor acreditate conform normei ISO17025/2005 pentru depistarea şi identificarea morfologicăGlobodera pallida şi Globodera rostochiensis (nematologie).

Activitatea 2.3.Identificarea laboratoarelor autorizate pentru testarea soiurilor / liniilor rezistente / tolerante la nematozii cu chiști și inițierea testărilor

La nivel naţional există 4 laboratoare specializate în depistarea prezenţei nematozilor cu chişti Globodera spp. în probele de sol astfel:Laboratorul Central Fitosanitar Bucureşti, la care este arondat judeţul Covasna;Laboratorul Regional de nematologier Braşov la care sunt arondate judeţele: Alba, Arad, Bihor, Caraş-Severin, Cluj, Harghita, Mureş, Satu-Mare, Sălaj, Suceava.Laboratorul Regional de Nematologie Bucureşti la care sunt arondate judeţele: Buzău, Călăraşi, Constanţa, Dolj, Giurgiu, Gorj, Ialomiţa, Ilfov, Mehedinţi, Olt, Prahova, Teleorman, Tulcea, Vâlcea, Timiş, Hunedoara, Dâmboviţa, Argeş, Sibiu, Brăila.Laboratorul Regional de Nematologie Suceava, la care sunt arondate judeţele: Bacău, Bistriţa-Năsăud, Botoşani, Braşov, Galaţi, Iaşi, Maramureş, Neamţ, Vaslui, Vrancea.

Activitatea 2.3.Identificarea laboratoarelor autorizate pentru testarea soiurilor / liniilor rezistente / tolerante la nematozii cu chiști și inițierea testărilor

Laboratoarele regionale comunică rezultatele analizelorcătre unităţile fitosanitare numai după primirea buletinului deconfirmare a speciei de către Laboratorul Central fitosanitar.

În prezent Autoritatea Naţională Fitosanitară monitoriza osuprafaţă de 325,90 ha infestate cu Globodera spp. înurmătoarele locaţii: Bistriţa-Năsăud 0,3 ha; Braşov 3 ha,Covasna 12,6 ha, Dâmboviţa 0,5 ha, Harghita 309,50 ha.

Se observă că în judeţul Harghita se află cea mai maresuprafaţă infestată, de aceea laboratorul de Nematologie dela Joseni trebuie activat sub controlul Laboratorului CentralFitosanitar pentru testarea liniilor/soiurilor de cartof noucreate şi testarea unor nematocide în vederea omologării.

Activitatea 2.4.Identificarea laboratoarelor autorizate pentru testarea soiurilor / liniilor rezistente / tolerante la nematozii cu chiști și inițierea testărilor

Pentru determinarea gradului de infecţie cu virusuri s-autilizat testul ELISA (enzime-linkeed immunosorbent assay).Testul Elisa este un test imunologic foarte sensibil al căruiprincipiu se bazează pe interacţiunea antigen anticorp.Sensibilitatea acestui test este de 1000 de ori mai mare decât atestului de aglutinare. Aceasta permite evidenţierea sigură aunor concentraţii scăzute de virus.

Din primele teste efectuate în 7-8.06.2016 din primeleplantulele dezvoltate din meristeme au rezultate 7 liniisănătoase.

Se va continua pasare şi multiplicarea in vitro a plantulelorpentru viitoare teste. Este necesară o perioadă de 8 luni dedezvoltare a plantulelor din meristemor de mici dimensiuni, iarprima inoculare s-a efectuat după formarea colţilor la tuberculi(după ce aceştia au ieşit din perioada de conservare), lasfârşitul lunii decembrie, anul 2015.

Activitatea 2.5.Analiza imunologică a soiurilor / liniilor selecţionate

Concluzii şi propuneri pentru continuarea proiectului: Prin obţinerea materialului pentru plantat din verigi

superioare prin utilizarea culturii in vitro se elimină risculul de contaminare cu organisme dăunătoare de carantină.

Se măreşte eficienţa procesului de producere a cartofului pentru sămânţă, atât sub aspect economic, cât şi ca durată. Prin utilizarea tehnologiei culturii de ţesuturi în multiplicarea rapidă a materialului de plantat liber de boli se facilitează producerea cartofului pentru sămânţă, aceasta este larg folosită în multe ţări, este foarte flexibilă şi oferă o rată ridicată de multiplicare.

Identificarea de soiuri / linii noi de cartof rezistente la nematozii cu chiști ai cartofului Globodera spp. (populații europene) trebuie să se facă numai în cele patru laboratoare autorizate la nivel național cu avizul Laboratorului Central Fitosanitar.

Tuberculii mamă utilizați în prelevarea de colți pentru multiplicare in vitro trebuie să fie certificați oficial ca liberi de organisme de carantină.