of 15
8/18/2019 Total Bakteri Laprak Fix
1/15
Laporan Pratikum Mikrobiologi
Total Bakteri
Dosen Pengampu
- Putu Ari Sandhi Wipradnyadewi, S.TP.MP
- Ni Nyoman Puspawati, S.TP.Msi
- Ir. I Gusti Ngurah Agung, SU
- Ir. I Gusti Ayu !awati, MS
Kelompok 6
Sandra Sekarsari (1411105035
! "ede #rie Ma$endra Putra (1411105036
#lmadea Sela "ra%ia "inting (141110503&
'ida )l*ira (141110503+
'i Made !nten Kusuma ,e-i (141110503.
/erdinandus tniesl Sa$ilatua (1411105040
,e-a "ede )ka Praoga (1411105041
urusan !lmu dan Teknologi Pangan
/akultas Teknologi Pertanian
2ni*ersitas 2daana
015
I. PNDA"U#UAN
8/18/2019 Total Bakteri Laprak Fix
2/15
!1 Latar Belakang
Mi!roorganisme atau mi!ro$a ada%ah organisme yang $eru!uran sangat
!e&i% sehingga untu! mengamatinya diper%u!an a%at $antuan. Mi!roorganisme
dise$ut 'uga organisme mi!ros!opi!. Mi!roorganisme sering !a%i $erse%
tungga% (unise%u%er) maupun $erse% $anya! (mu%tise%u%er). Sa%ah satu 'enis
mi!roorganisme ada%ah $a!teri. *a!teri ada%ah !e%ompo! organisme yang
tida! memi%i!i mem$ran inti se%. *e$erapa !e%ompo! $a!teri di!ena% se$agai
agen penye$a$ in+e!si dan penya!it, sedang!an !e%ompo! %ainnya dapat
mem$eri!an man+aat di$idang pangan, pengo$atan, dan industri. Stru!tur se%
$a!teri re%ati+ sederhana tanpa nu!%eusinti se%, !erang!a se%, dan organe%-
organe% %ain seperti mito!ondria dan !%orop%as.*a!teri merupa!an organisme unise%u%ar yang tum$uh dengan &ara
pem$e%ahan $iner yaitu satu se% mem$e%ah se&ara simetris. Pertum$uhan
mi!roorganisme yang mem$entu! !o%oni dapat dianggap $ahwa setiap !o%oni
yang tum$uh $erasa% dari satu se%, ma!a dengan menghitung 'um%ah !o%oni
dapat di!etahui penye$aran $a!teri yang ada pada $ahan. um%ah mi!ro$a
pada suatu $ahan dapat dihitung dengan $er$agai ma&am &ara, tergantung
pada $ahan dan 'enis mi!ro$anya. Setiap produ! yang dihasi%!an o%eh
mi!ro$ia tergantung 'um%ah mi!ro$ia yang ter!andung da%am suatu $ahan atau
%ing!ungan. Perhitungan mi!ro$io%ogi pada $ahan pangan penting di%a!u!an
untu! mengetahui mutu $ahan pangan, dan proses yang a!an diterap!an pada
$ahan pangan terse$ut.
Penghitungan 'um%ah $a!teri dapat di%a!u!an dengan $e$erapa &ara
diantaranya metode hitungan &awan (Tota% P%ate /ount). um%ah !o%oni yang
mun&u% men'adi inde!s $agi 'um%ah oganisme yang ter!andung di da%am
sampe%. Te!ni! pengitungan ini mem$utuh!an !emampuan me%a!u!an
pengen&eran dan men&awan!an hasi% pengen&eran. /awan-&awan terse$ut
!emudian diin!u$asi dan !emudian dihitung 'um%ah !o%oni yang ter$entu!.
/awan yang dipi%ih untu! penghitungan !o%oni, sesuai dengan !aidah statisti!
ada%ah &awan yang $erisi 01-012 !o%oni.
! Tuuan
Mengana%isa dan menghitung tota% $a!teri yang terdapat pada $ahan ma!anan
8/18/2019 Total Bakteri Laprak Fix
3/15
!3 Manaat
Mengetahui ana%isa dan perhitungan tota% $a!teri yang terdapat pada $ahan
ma!anan
II. TINAUAN PUSTA3Aa. *a!teri
*a!teri merupa!an mi!roorganisme unise%u%ar yang
tum$uh dengan &ara pem$e%ahan $iner yaitu satu se% mem$e%ah
se&ara simetris Umumnya mempunyai u!uran se% 2.1-4.2 Um 5
0.2-1.2Um, $a!teri yang $eru!uran re%ati+ $esar dengan diameter
se!itar 1 Um $a!teri $eru!uran sedang se!itar 2.1-4 Um 5 0-6
Um, misa%nya penye$a$ disentri dan ti+us $a!teri $eru!uran sangat
!e&i% seperti mi!op%asma, dengan u!uran diameter 2.4-2.6 Um.
*entu! dari $a!teri ada%ah &o&&us,$asi% dan spira%.
*a!teri $entu! $u%at umumnya %e$ih tahan terhadap proses
pengo%ahan, misa%nya pemanasan, pendinginan, dan pengeringan,
di$anding!an dengan $a!teri $entu! %ainnya. $a!teri $ergerom$o%
(stapi%o!o!i) %e$ih tahan terhadap proses pengo%ahan di$anding!an
dengan $a!teri yang se%nya terpisah-pisah atau $er$entu! rantai.
Semua $a!teri tum$uh pada ma!anan $ersi+at heterotropi!, yaitu
mem$utuh!an 7at organi! untu! pertum$uhannya. Da%am
meta$o%ismenya $a!teri mengguna!an !omponen 8 !omponen
protein, !ar$ohidrat dan %ema! dan meme&ahnya men'adi senyawa
yang %e$ih sederhana, *a!teri 'uga mem$utuh!an 9itamin untu!
proses meta$o%ismenya, tetapi ada $e$erapa $a!teri mampu
mensintesa 9itamin,*a!teri tum$uh pada ma!anan dapat
menye$a$!an peru$ahan pada penampa!anya, !omposisi !imianya
dan &itarasa $ahan pangan terse$ut.
:a!tor-+a!tor yang mempengaruhi pertum$uhan $a!teri
antara %ain 7at ma!anan, p", air, o!sigen, dan senyawa
pengham$at pertum$uhan. Pertum$uhan $a!teri 'uga dipengaruhi
o%eh wa!tu, potensia% redu!si o!sidiasi (redo!s), stru!tur $io%ogi,
dan +a!tor pengo%ahan.
4. ;at Ma!anan
8/18/2019 Total Bakteri Laprak Fix
4/15
3omponen !imiawi dan $ahan ma!anan dapat i!ut
menentu!an 'enis mi!roorganisme yang dominan di da%am $ahan
ma!anan terse$ut. 3omponen !imiawi terse$ut sangat menentu!an
'um%ah 7at-7at gi7i yang pa%ing penting untu! per!em$angan
mi!roorganisme (*u&!%e 4
8/18/2019 Total Bakteri Laprak Fix
5/15
se&ara i%miah ada dida%am $ahan ma!anan terse$ut maupun yang
senga'a ditam$ah!an seperti asam $en7oate dan asam sor$et .
@. Wa!tu
Umumnya, sema!in !omp%e! da%am si+at-si+at se% suatu
organisme, ma!a wa!tu yang di$utuh!an o%eh se% untu! mem$e%ah
sema!in %ama. *a!teri mem$e%ah %e$ih &epat dari pada !hamir,
sedang!an !hamir %e$ih &epat dari pada !apang. *a!teri mem$e%ah
se&ara &epat dan tum$uh ma!siima% da%am wa!tu ?1 menit, !hamir
$aru mem$e%ah dengan &epat da%am wa!tu
8/18/2019 Total Bakteri Laprak Fix
6/15
mengandung semua 7at hara yang mudah diguna!an o%eh mi!ro$a,
harus mempunyai te!anan osmosis, tegangan permu!aan dan p"
yang sesuai dengan !e$utuhan mi!ro$a yang a!an tum$uh, tida!
mengandung 7at-7at yang dapat mengham$at pertum$uhan
mi!ro$a, harus $erada da%am !eadaan steri% se$e%um diguna!an,
agar mi!ro$a yang ditum$uh!an dapat tum$uh dengan $ai!
(Suted'o, 4
8/18/2019 Total Bakteri Laprak Fix
7/15
mengguna!an mi!ros!op, dan hitungan tida! %angsung dengan
metode hitung &awan $ai! dengan metode &awan tuang maupun
metode &awan se$ar.(:erdias.022=)
Perhitungan $a!teri mengguna!!an metode hitungan &awan
mengguna!an anggapan $ahawa setiap se% a!an hidup $er!em$ang
men'adi satu !o%oni. um%ah !o%oni yang mun&u% men'adi inde!s
$agi 'um%ah oganisme yang ter!andung di da%am sampe%. Te!ni!
pengitungan ini mem$utuh!an !emampuan me%a!u!an
pengen&eran dan men&awan!an hasi% pengen&eran. /awan-&awan
Page 0 terse$ut !emudian diin!u$asi dan !emudian dihitung
'um%ah !o%oni yang ter$entu!. /awan yang dipi%ih untu!
penghitungan !o%oni, sesuai dengan !aidah statisti! ada%ah &awan
yang $erisi 62-622 !o%oni. um%ah organisme yang terdapat da%am
sampe% asa% dihitung dengan &ara menga%i!an 'um%ah !o%oni yang
ter$entu! dengan +a!tor pengen&eran pada &awan $ersang!utan
(Anonim, 0244).
Prinsip dari metode hitungan &awan ada%ah menum$uh!an se%
mi!ro$ia yang masih hidup pada metode agar, sehingga se%
mi!ro$ia terse$ut a!an $er!em$ang $ia! dan mem$entu! !o%oni
yang dapat di%ihat %angsung dengan mata tanpa mengguna!an
mi!ros!op (:ardia7, 4
8/18/2019 Total Bakteri Laprak Fix
8/15
terdapat di da%am samp%e, sema!in tinggi pengen&eran yang harus
di%a!u!an (:ardia7, 4
8/18/2019 Total Bakteri Laprak Fix
9/15
A. A#AT
- /awan petri > $uah
- Ta$ung rea!si = $uah
- *oto% sampe% 4 $uah
- Pipet tip 02 $uah- Forte
- Nera&a ana%iti!
- Sendo!
- Pisau
- Pipet mi!ro
- *unsen
- *atang *eng!o!
- In!u$ator
*. *A"AN
- Sampe% (pindang mentah)
- Pepton water (PW)- A%!oho%
- AHuadest
- Nutrient agar (NA)
- 3apas
- Tisu
!!! 7ara Kera
8/18/2019 Total Bakteri Laprak Fix
10/15
a. Penger'aan dengan Metode Se$ar
Dimasu!!an PW se$anya! ?1 m% !e da%am r%enmayer !emudian
disteri%isasi
3emudian PW yang te%ah disteri%isasi dimasu!!an !eda%am ? ta$ung
rea!si ( 10−2
, 10−3
,10−4
,hingga10−9
) masing-masing se$anya! <
m% !emudian di steri%isasi
Sampe% (Pindang mentah) diiris diha%us!an mengguna!an %umpang
!emudian dtim$ang $eratnya men&apai 1 gr
8/18/2019 Total Bakteri Laprak Fix
11/15
Sampe% (Pindang mentah) yang sudah diper!e&i% u!urannya dan sudah
ditim$ang dimasu!!an !e da%am r%enmayer yang te%ah di isi PW.
3emudian r%enmayer di$eri!an tanda dengan pengen&eran10
−1
3emudian r%enmayer di!o&o! agar PW dan sampe% yang te%ah
dimasu!!an ter&ur merata. #a%u dipipet 4 m% sampe% dan
dimasu!!an !eda%am ta$ung rea!si 10−
2
, !emudian di!o&o!
mengguna!an 9orte, !emudian dipipet %agi 4 m% dari ta$ung rea!si
10−2
dan dimasu!!an %agi !eda%am ta$ung rea!si 10−3
dan
di!o&o! dengan 9orte. (diu%angi hingga pengen&eran 10−9
#a%u dam$i% 2,4 m% dari ta$ung rea!si 10−7
dengan pipet mi!ro %a%u
dimasu!!an !eda%am media agar NA yang te%ah disteri%isasi.
U%angi %ang!ah diatas dengan mengguna!an pengen&eran 10−8
dan
10−9
Sampe% (pindang mentah) yang ada di&awan petri dirata!an dengan
$atang $ang!o! yang te%ah dipanas!an dengan $unsen
8/18/2019 Total Bakteri Laprak Fix
12/15
/awan petri di$a%i! %a%u dimasu!an !eda%am in!u$ator. Diin!u$asi
dengan suhu 6@J/ se%ama 0? am.
$. Perhitungan Mi!ro$a
*a!teri yang te%ah ditanam pada media NA yang sudah diin!u$asi
!emudian dihitung
/awan petri di$agi men'adi ? $agian, !emudian di%eta!!an diatas
/o%ony /ounter
Dihitung $a!teri yang terdapat pada &awan petri. Untu! mempermudah
penghitungan $a!teri yang te%ah di hitung di$eritanda mengguna!an
spido%.
i!a $agian pertama dari &awan petri !ira-!ira sudah ter%a%u $anya!
$a!teri yang te%ah dihitung pada $agian pertama di !a%i!an ?. Dan
apa$i%a tota% $a!teri pada 4 &awan petri me%e$ihi 622 &o%ony, &awan
petri terse$ut dinotasi!an dan di$eri tanda T*UD (Tida! *isa Untu!
Dihitung)
Penghitungan se%ain mengguna!an &o%ony &ounter dapat di%a!u!an
dengan manua%.
8/18/2019 Total Bakteri Laprak Fix
13/15
IF. "ASI# DAN PM*A"ASAN
!81 9asil
Ta$e% "asi% Pengamatan
No. Sampe% Pengen&eran
42-@ 42-= 42-<
4 Pendang mentah 4 ?1 62 40
0 Pindang mentah 0 ?6 1 2
3eterangan
tida! memenuhi standar p%ate &ount
memenuhi standar p%ate &ount
Perhitungan Tota% *a!teri
Totalbakteri={45+432 } 442-@
Tota% $a!teri K ?? 42@ /:Ug
Tota% $a!teri K ?,? 42= /:Ug
8! Pemba$asan
Pada pra!ti!!um !a%i ini dipa!ai sampe% $erupa pindang mentah yang
di$e%i pada pu!u% 2>.62 wita di daerah pasar Agung Penatih dengan !ondisi
pedagang $ersih. um%ah !o%oni yang memenuhi standar p%ate &ount dengan
range 01-012 pada pengen&eran 42-@ yang di%a!u!an se&ara dup%o
mendapat!an hasi% se'um%ah ?1 !o%oni dan ?6 !o%oni !arena da%am metode
ini di%a!u!an pengen&eran yang $erseri 4244242 agar popu%asi dapat
ter$a&a, pengen&eran yang menghasi%!an 01012 $a!teri sa'a yang dapat
di$a&a dan di!ata!an $erhasi% !arena $i%a !urang dari 01 untu! a%asan
statisti! tida! dapat diterima $i%a %e$ih dari 012 !emung!inan ada !o%oni
yang ter%a%u padat, ter%a%u de!at satu dengan yang %ainya. Sehinggadidapat!an rata-rata tota% $a!teri ?,? 42= /:Ug.
Pada dua pengen&eran tera!hir menun'u!an data yang tida! $eraturan
yaitu 62 !o%oni dan 1 !o%oni untu! pengen&eran 42 -=, 40 !o%oni serta 2
!o%oni untu! pengen&eran 42-
8/18/2019 Total Bakteri Laprak Fix
14/15
mi!ro$a. Proses pengha%usan $ahan 'uga men'adi sa%ah satu ha% yang
$erpengaruh pada !etida! teraturannya data se$a$ sampe% yang tida! ha%us
dapat mengindi!asi !etida!rataan se$aran $a!teri. Se%ain itu adanya
pengaruh !ontaminasi yang $erasa% dari a%at yang diguna!an pra!ti!an
ataupun udara. Serta !urangnya !e&ermatan dan !ete%itian pra!ti!an $ai!
da%am proses pra!ti!um ataupun perhitungan. /ontohnya ter%a%u de!atnya
'ara! &awan dengan api $unsen !eti!a proses penuangan sampe% sehingga
panas menye$a$!an matinya se$agian mi!ro$a yang a!an diamati.
F. 3SIMPU#AN
Dari pra!ti!um tota% $a!teri di!etahui $ahwa sampe% pindang mentah
ter$u!ti mengandung $a!teri. Dari sampe% terse$ut terdapat tota% $a!teri
ter$anya! ?,? 42= /:Ug.
8/18/2019 Total Bakteri Laprak Fix
15/15
Da+tar Pusta!a
Suted'o, d!!. 4