INFORME DE LABORATORIO 1 TCNICAS Y MTODOS DE INVESTIGACIN UTILIZADOS EN BIOLOGA.

ALFARO WISAQUILLO LUISA FERNANDA PORRAS GARCA LIUMAN HAISUAN SERRATO PATIO JOS LUIS

TUTORA: JORGE ARLEX VELASQUEZ BELTRAN CEAD: IBAGU CURSO: BIOLOGIA GRUPO 2 IBAGU - TOLIMA. 2012

RECOMENDACIONES GENERALES TCNICAS Y METODOS DE INVESTIGACION UTILIZADOS EN BIOLOGIA MICROSCOPIA

1. OBJETIVO GENERAL

Aplicar en el desarrollo de los laboratorios, los conocimientos adquiridos sobre las normas de seguridad del laboratorio, clasificacin y funciones de los principales implementados utilizados en el laboratorio de biologa, especificativamente el microscopio.

1.1. OBJETIVOS ESPECIFICOS: Identificar los principales implementos de laboratorio de biologa por su nombre, forma y clasificarlos segn el tipo de material. Diferenciar el uso que se le da a cada uno de los implementos de laboratorio y hacer un buen uso de l. Reconocer los principios pticos, manejo y cuidados del microscopio. Identificar en forma terica las principales tcnicas utilizadas en biologa celular.

2. MARCO REFERENCIAL RECOMENDACIONES GENERALES, TECNICAS INVESTIGACION UTILIZADOS EN BIOLOGIA.2.1.

Y

METODOS

DE

INSTRUCCIONES GENERALES Y NORMAS DE SEGURIDAD.

Para el desarrollo de toda prctica de laboratorio es conveniente tener en cuenta algunas normas elementales que deben ser observadas en toda disciplina.

Estar a tiempo en el laboratorio. Usar la bata blanca durante todo el laboratorio. No utilizar cachucha en el laboratorio. Mantener apagados los celulares durante el transcurso del laboratorio. Leer cuidadosamente las guas e instrucciones de cada prctica. Nunca llegar sin saberlo lo que va hacer. El material utilizado en las prcticas es de propiedad de la UNAD, por lo tanto debe manejarse con cuidado y una vez usado debe devolverse en buen estado. En caso de daos o prdidas, el elemento debe reponerse con uno de las mismas caractersticas. No comer, beber, fumar, o aplicar cosmticos en el laboratorio. Al indicar la sesin reportar al tutor de laboratorio cualquier anomala en el microscopio o material a ser utilizado. En el caso de los microscopios con fuente de elctrica, apagar el equipo tres minutos antes de guardarlo. Antes de realizar una prctica, lea cuidadosamente la gua de laboratorio para adquirir una idea clara de su objetivo, fundamento y metodologa. Los resultados deben ser anotados cuidadosamente apenas se conozcan El orden y la limpieza deben presidir todas las experiencias de laboratorio. En consecuencial terminar cada prctica, se proceder a limpiar cuidadosamente el material que se ha utilizado. Cada grupo de laboratorio se responsabilizara de su zona de trabajo y de su material. Antes de utilizar un compuesto, fijarse en la etiqueta para asegurarse de que es el que necesita y evitar riesgos en manipulacin.

Nunca devolver a los frascos de origen los sobrantes de los productos utilizados consultar con el tutor. No tocar con las manos y menos con la boca productos qumicos. Todo el material especialmente los aparatos delicados, como lupas y microscopios, deben manejarse con mucho cuidado evitando forzar los mecanismos. Los productos inflamables (gases, alcohol, ter, etc.) deben mantenerse alejados del fuego. Si hay que calentar tubos de ensayos con estos productos, se jara al bao mara nunca directamente a la llama. Cuando se manejen productos corrosivos (cidos, bases, etc.) debern hacerse con cuidado para evitar que salpiquen el cuerpo o los vestidos. Nunca se vertern en los tubos de ensayo, sino que se dejara resbalar suavemente por su pared. Cuando se quiera diluir un cido, nunca se debe adicionar agua sobre ellos, siempre al contrario: acido sobre el agua. No pipetear con la boca. Las pipetas se tomaran de forma que sea el dedo ndice el que tape su extremo superior para regular la cada del liquido Cualquier material de vidrio no debe enfriase bruscamente justo despus de haberlos calentado, esto puede ocasionar fisuras en el vidrio y posterior rotura del mismo. Lis cubre objetos y porta objetos deben toparse por los bordes para evitar que se engrasen. Siempre que manipule sangre, suero u otro material biolgico. Use guantes. Lavar las manos con agua y jabn una vez concluidas las labores del laboratorio. Atender las dems sugerencias dadas por el tutor.

2.2.

IMPLEMENTOS QUE USUALMENTE LABORATORIO DE BIOLOGA.

SE UTILIZAN EN EL

Los materiales utilizados en el laboratorio se pueden clasificar de acuerdo con si constitucin en materiales de vidrio, porcelana, madera, corcho, plstico y equipos especiales. Los implementos que son su mayor frecuencia se utilizan en las prcticas de laboratorio son:

Vasos de precipitado o beaker Erlenmeyer Tubos de ensayo Baln de fondo plano Baln de fondo redondo Baln de desprendimiento lateral Vidrio de reloj Probetas Pipetas graduadas y aforadas Embudos de decantacin Embudos de filtracin Termmetro Cajas Petri Crisoles Capsulas de porcelana Mortero y mango Triangulo de porcelana Esptulas metlicas, plsticas y de porcelana Soporte universal Aros metlicos Malla de asbesto Mecheros Pinzas metlicas para crisol Pinzas para tubo de ensayo Mangueras y tapones de caucho

Gradillas para tubos de ensayo Churruscos Papel filtro Balanza Microscopio Estereoscopio

2.3.

TCNICAS UTILIZADAS EN BIOLOGA CELULAR

Los conocimientos sobre la clula han progresado simultneamente con los avances tecnolgicos del instrumental de laboratorio, al igual que los descubrimientos de tinciones que facilitan la visualizacin de tejidos, clulas y organelos, y los avances tericos brindan al investigador elementos de anlisis para la interpretacin de los procesos. Con el de los microscopios de altos poderes de resolucin y amplificacin de las imgenes, se han perfeccionado los mtodos para el uso individual de rganelos celulares para observar la interrelacin entre los componentes celulares y describir la sealizacin de las molculas que participan en el metabolismo celular. De acuerdo con lo anterior, algunas de las principales tcnicas que se utilizan en biologa celular y la investigacin biomdica son: Observacin de microorganismos Cortes de tejidos Citoquimica Hibridacin in situ Inmunocitoquimica Autorradiografa Cromatografa Electroforesis Cultivos celulares Tcnicas de introduccin de molculas en las clulas Modelos biolgicos, animales y vegetales. Y ACTIVIDADES EXTRATUTORIALES

3. PROCEDIMIENTO PROPUESTAS.3.1.

IMPLEMENTOS DE LABORATORIO DE BIOLOGA.

En cada uno de los grupos de trabajo aparecen los principales implementos de laboratorio utilizados en las prcticas de biologa, obsrvelos, nmbrelos y clasifquelos, teniendo en cuenta las siguientes actividades extra tutoriales:a. Elabore el esquema de cada uno de los implementos

de laboratorio que aparecen en la tabla de materiales, nmbrelos y escriba sus principales caractersticas y funciones.

PROBETA GRADUADA: Probeta, instrumento de laboratorio que se utiliza, sobre todo en anlisis qumico, para contener o medir volmenes de lquidos de una forma aproximada. Es un recipiente cilndrico de vidrio con una base ancha, que generalmente lleva en la parte superior un pico para verter el lquido con mayor facilidad. Las probetas suelen ser graduadas, es decir, llevan grabada una escala (por la parte exterior) que permite medir un determinado volumen, aunque sin mucha exactitud. Cuando se requiere una mayor precisin se recurre a otros instrumentos, por ejemplo las pipetas. PIPETA VOLUMTRICA: Pipeta, instrumento de laboratorio que se utiliza para medir o transvasar pequeas cantidades de lquido. Es un tubo de vidrio abierto por ambos extremos y ms ancho en su parte central. Su extremo inferior, terminado en punta, se introduce en el lquido; al succionar por su extremo superior, el lquido asciende por la pipeta. Los dos tipos de pipeta que se utilizan en los laboratorios con ms frecuencia son la pipeta de Mohr o graduada y la pipeta de vertido. En la primera se pueden medir distintos volmenes de lquido, ya que lleva una escala graduada. La pipeta de vertido posee un nico enrase circular en su parte superior, por lo que slo puede medir un volumen. La capacidad de una pipeta oscila entre menos de 1 ml y 100 ml. En ocasiones se utilizan en sustitucin de las probetas, cuando se necesita medir volmenes de lquidos con ms precisin ERLENMEYER: Son matraces de paredes rectas, muy usados para las valoraciones. Se pueden calentar directamente sobre la rejilla

MORTEROS: Se utilizan para disgregar sustancias, mediante la presin ejercida, suelen ser de porcelana. La tcnica consiste presionar con la mano del mortero sobre una de las paredes del mismo una pequea cantidad del material a triturar. Frotar fuertemente desplazando el pistilo hacia el fondo del mortero. Reagrupar el material de nuevo sobre la pared y repetir la operacin tantas veces como sea necesario hasta obtener el tamao de partcula deseado SOPORTE UNIVERSAL: El soporte universal Suele ser de metal, constituido por una larga varilla enroscada en una base. A l se sujetan los recipientes que se necesitan para .realizar los montajes experimentales. BURETA: Bureta, instrumento de laboratorio que se utiliza en volumetra para medir con gran precisin el volumen de lquido vertido. Es un tubo largo de vidrio, abierto por su extremo superior y cuyo extremo inferior, terminado en punta, est provisto de una llave. Al cerrar o abrir la llave se impide o se permite, incluso gota a gota, el paso del lquido. El tubo est graduado, generalmente, en dcimas de centmetro cbico. Los dos tipos principales de buretas son las buretas de Geissler y las de Mohr. En estas ltimas la llave ha sido sustituida por un tubo de goma con una bola de vidrio en su interior, que acta como una vlvula. En las de Geissler, la llave es de vidrio esmerilado; se debe evitar que el lquido est mucho tiempo en contacto con la bureta, pues determinados lquidos llegan a obstruir, e incluso inmovilizar, este tipo de llaves. VASO LABORATORIO: Son frascos cerrados con un tapn atravesado por dos tubos. Por uno de ellos se sopla, saliendo el agua por el otro. Se utilizan para enjuagar el material de laboratorio. Tambin los hay de plstico, con un slo orificio de salida, por el que sale el agua al presionar el frasco.

BALN DE FONDO PLANO: Son recipientes de vidrio, esfricos, provistos de un cuello. Algunos tienen marcada una determinada capacidad (aforados). TRPODE: Se utiliza como soporte recipientes; sobre la plataforma una malla metlica para que la directamente sobre el vidrio y se Este trpode puede utilizarse por t puedes elaborar. para calentar distintos del trpode se coloca llama no d difunda mejor el calor. uno de alambre, que

MECHERO BUNSEN: Mechero Bunsen, dispositivo que se utiliza mucho en los laboratorios debido a que proporciona una llama caliente, constante y sin humo. Debe su nombre al qumico alemn Robert Wilhelm Bunsen, que adapt el concepto de William Faraday del quemador de gas en 1855 y populariz su uso. El quemador es un tubo de metal corto y vertical que se conecta a una fuente de gas y se perfora en la parte inferior para que entre aire. La corriente de aire se controla mediante un anillo situado en la parte superior del tubo. Cuando su temperatura es ms alta, la llama tiene un cono azul en el centro y puede alcanzar los 1.500 C. Los mecheros Bunsen se han 1 Can visto desplazados en muchos casos por camisas 2 Pie calentadoras elctricas. Al encender el mechero 3 Virola conviene abrir la lentamente la llave de entrada de gas, para evitar que salga de golpe y pueda 4 Chicl producirse una explosin. 5 Entrada de gas 6 Llave MALLA BESTUR: La malla bestur material de laboratorio de metal que puede estar o no, cubierto con un circulo de asbesto; se usa para proteger el fuego directo el material de vidrio que va a sufrir calentamiento. Se suelen colocar encima del mechero, apoyadas en un aro sujeto al soporte. Sobre ellas se coloca el matraz o recipiente que queremos calentar, evitando as que la llama le de directamente.

CONDENSADOR: Condensador, dispositivo que almacena carga elctrica. En su forma ms sencilla, un condensador est formado por dos placas metlicas (armaduras) separadas por una lmina no conductora o dielctrico. Al conectar una de las placas a un generador, sta se carga e induce una carga de signo opuesto en la otra placa. La botella de Leyden es un condensador simple en el que las dos placas conductoras son finos revestimientos metlicos dentro y fuera del cristal de la botella, que a su vez es el dielctrico. La magnitud que caracteriza a un condensador es su capacidad, cantidad de carga elctrica que puede almacenar a una diferencia de potencial determinado. Los condensadores tienen un lmite para la carga elctrica que pueden almacenar, pasado el cual se perforan. Pueden conducir corriente continua durante slo un instante, aunque funcionan bien como conductores en circuitos de corriente alterna. Esta propiedad los convierte en dispositivos muy tiles cuando debe impedirse que la corriente continua entre a determinada parte de un circuito elctrico. Los condensadores de capacidad fija y capacidad variable se utilizan junto con las bobinas, formando circuitos en resonancia, en las radios y otros equipos electrnicos. Adems, en los tendidos elctricos se utilizan grandes condensadores para producir resonancia elctrica en el cable y permitir la transmisin de ms potencia. Los condensadores se fabrican en gran variedad de formas. El aire, la mica, la cermica, el papel, el aceite y el vaco se usan como dielctricos, segn la utilidad que se pretenda dar al dispositivo. EMBUDO BUCHNER: Es un embudo con la base agujereada. Se acopla por su extremo inferior mediante un corcho taladrado al matraz kitasato. Encima de los orificios se coloca un papel de filtro. Se utiliza para filtrar sustancias pastosas TUBO TIEL: El tubo tiel es de vidrio se utiliza para la determinacin de puntos de fusin. Para ello se llenan de una sustancia de elevado punto de ebullicin, como la parafina. Por las prolongaciones laterales se introduce el/los capilares con la sustancia cuyo punto de ebullicin queremos determinar. Por la abertura superior, mediante un

corcho agujereado se acopla un termmetro, cuyo bulbo debe quedar junto a los extremos del capilar con la sustancia. Con el mechero, suavemente, vamos calentando por la parte inferior, observando cuando la sustancia empieza a fundirse, momento en el que anotamos la temperatura marcada por el termmetro. CAJA PETRI: Son utilizadas en bioqumica para llevar a cabo cultivos de microorganismos. CRISOL GUSH O CRISOL FILTRANTE: Suele ser de porcelana, de un metal inerte o de algn tipo de material refractario. Se utiliza para calcinar o fundir sustancias. Se calienta a fuego directo. Es similar a las cpsulas. VARILLA DE AGITACIN: La varilla de agitacin es de vidrio.se utiliza para agitar las disoluciones con varillas huecas, mediante su calentamiento con el mechero y posterior estiramiento, se consiguen capilares. Hay que tener cuidado con el vidrio caliente, ya que por su aspecto no se diferencia del fro y se pueden producir quemaduras. GRADILLA: Pueden ser de metal, madera o platico. Se utilizan para sostener los tubos de ensayo. BALANZA: Es un instrumento utilizado para medir las masas de los cuerpos. La balanza clasica se compone de una barra metlica llamada cruz, provista de tres prismas de acero llamados cuchillos. Sobre las aristas de los cuchillos de las extremidades se cuelgan los platillos. El central descansa sobre una columna vertical. Cuando la balanza es exacta, la masa de los cuerpos se puede determinar por simple pesada. En caso contrario, se utiliza el mtodo de doble pesada o de Borda. Las balanzas de precisin se colocan dentro de cajas de cristal para protegerlas del polvo y evitar pesadas incorrectas por corrientes de aire, es posible apreciar hasta 10-6 g. Actualmente son muy utilizadas las balanzas electrnicas. TUBOS DE ENSAYO: Son cilindros de vidrio cerrados por uno de sus extremos que se emplean para calentar,

disolver o hacer reaccionar pequeas cantidades de sustancias. Los hay de vidrio ordinario y de PIREX. Estos ltimos son los que se deben utilizar cuando se necesita calentar. VASOS DE PRECIPITADO: Tienen un campo de aplicacin muy extenso: se usan para preparar, disolver o calentar sustancias. Junto con el matraz, la probeta y los tubos de ensayo constituyen lo que se llama en el laboratorio Material de vidrio de uso general. Se fabrican en vidrio ordinario y en PIREX , y de distintos tamaos . Son cilndricos y en la boca llevan un pequeo apndice en forma de pico para facilitar el vertido de las sustancias cuando se transvasan. Puede ir aforados o graduados , si bien su exactitud es menor que la de un matraz aforado o una probeta. APARATO DE KIPP: Consta de dos piezas de cristal, la superior en forma de pera de largo cuello que entra a esmeril en la inferior. sta se compone de dos cavidades esfricas unidas por una garganta. La superior tiene una tubuladura que se cierra con un tapn y un tubo con llave o pinza para regular el desprendimiento de los gases. La inferior suele tener tambin otro tubo al pie para la limpieza del aparato.

MATRAZ KITASATO: Es un matraz de pared gruesa, con una tubuladura lateral. En la boca se acopla, mediante un corcho agujereado el butchner, y a la tubuladura, mediante una goma, la trompa de agua (o trompa de vaco). De esta forma se consigue filtrar sustancias pastosas. MATRAZ FONDO REDONDO: Tambin se conoce con el nombre de matraz de fondo esfrico y se utiliza en pocas experiencias. EMBUDOS: Se emplean para filtrar sustancias liquidas o simplemente para trasvasarlas de un recipiente a otro. En el laboratorio se utilizan embudos de diversos materiales: vidrio ordinario , PIREX , plstico o porcelana , segn el tipo aplicacin que se les vaya a dar. Los embudos de plstico presentan la ventaja de ser los ms econmicos y duraderos, pero no se

pueden utilizar siempre porque son muchos los lquidos que atacan al plstico. Hay embudos de cristal graduados; en este caso tienen una llave en el tubo que, al cerrarla, impide la salida del lquido. Es preferible que el extremo del embudo tenga un corte oblicuo para facilitar la cada del lquido. PINZAS PARA TUBOS DE ENSAYO: Son instrumentos en forma de tenacillas que para sujetar los tubos de ensayo; pueden madera o metlicas. CRISTALIZADOR: Son recipientes de plano y anchos. Permiten efectuar la cristalizacin de sustancias, es decir, la obtencin de cristales a partir de sus disoluciones. ESCOBILLA: Se utiliza para la limpieza del material de laboratorio. PICNOMETRO: Picnmetro, aparato que se utiliza para determinar las densidades de distintas sustancias. Tambin se conoce como frasco de densidades. Consiste en un pequeo frasco de vidrio de cuello estrecho, cerrado con un tapn esmerilado, hueco y que termina por su parte superior en un tubo capilar con graduaciones. Para llenar el picnmetro se quita el tapn esmerilado, que est hueco o perforado, se aade la muestra con una probeta pequea y se tapa. El lquido subir por el interior del tapn hasta el capilar. Puede ocurrir que incluso rebose, en cuyo caso se secara cuidadosamente por fuera procurando que el lquido llene totalmente el tapn o que el exceso se pueda medir con el capilar. As se determina el volumen de lquido contenido en el recipiente. Algunos picnmetros, menos precisos, no tienen tapn, sino un cuello largo aforado; en este caso, el picnmetro se llenara hasta el enrase marcado en el cuello y de esta forma se conocera el volumen del lquido. La masa del lquido se determina por diferencia entre la masa del picnmetro lleno y vaco, y la densidad del lquido ser el cociente entre su masa y el volumen que ocupa.b. Clasifique lo implementos de acuerdo con la constitucin del

sirven ser de fondo

material de vidrio, porcelana, metlicos, madera, corcho, plstico y equipos especiales. Dentro de los implementos de vidrio y de madera, especficamente cuales son refractarios y

cuales son no refractarios e indiquen en que consiste estos trminos(Refractario y no refractario) : MATERIAL DE VIDRIO VASO DE PRECIPITADO O BEAKER: Contenedor de lquidos cilndrico de fondo plano. Normalmente son de vidrio o plstico. Los hay de diversas capacidades y suelen estar graduados, pero no calibrados y por tanto no sirven para medir volmenes. Normalmente se utiliza para trasvasar lquidos a otros recipientes, disolver, calentar etc. ERLENMEYER: Recipiente de vidrio o de plstico de forma cnica de base ancha y cuello estrecho. Los hay de diversas capacidades y se utiliza para contener lquidos que deben agitarse constantemente, como en las valoraciones, sin riesgo de que se vierta su contenido. TUBO DE ENSAYO: Instrumento de vidrio que se utiliza para realizar ensayos o pruebas de laboratorio con volmenes pequeos. MATRAZ BALN DE FONDO PLANO: Es un recipiente que se utiliza para contener sustancias es un Erlenmeyer del matraz baln. MATRAZ AFORADO: Instrumento de vidrio de fondo plano y cuello largo y delgado que se utiliza para preparar disoluciones. Los hay de varias capacidades. Tienen una marca grabada alrededor del cuello que indica el volumen de lquido que contiene en su interior a una cierta temperatura (generalmente 20). El matraz mide de forma muy exacta el volumen de lquido que contiene pero no el que vierte cuando lo vaciamos. BALN DE FONDO REDONDO: Un baln redondo es un recipiente de vidrio de uso de laboratorio. Puede tener boca comn para colocarle tapones de corcho, plstico o goma. Tambin los hay con boca esmerilada para usarse con tapones de vidrio esmerilados. Estos balones se usan para destilacin. Ya que para destilaciones, por la temperatura, no se podran usar tapones de corcho, goma o plstico perforados para adosar refrigerantes etc. Ambas caras esmeriladas, tanto la de la boca del recipiente, como la del cuerpo cnico del tapn, deben lubricarse con vaselina o silicona, para evitar que el tapn se "clave" en la boca. BALN CON DESPRENDIMIENTO LATERAL: Esos balones se usan en destilacin cuando no se tiene cabeza de destilacin. En la boca del cuello del baln, generalmente se coloca un tapn perforado con un termmetro y el pico lateral se conecta el tubo refrigerante. KITASATO: Recipiente de vidrio, que conectado a un sistema de vaco, permite filtrar al vaco.

EL VIDRIO DE RELOJ: Es una lmina de vidrio en forma circular cncavaconvexa. Se llama as por su parecido con el vidrio de los antiguos relojes de bolsillo. Se utiliza en qumica para evaporar lquidos, pesar productos slidos o como cubierta de vasos de precipitados, y contener sustancias ms o menos corrosivas. Su utilidad ms frecuente es pesar muestras slidas; aunque tambin es utilizado para pesar muestras hmedas despus de hacer la filtracin, es decir, despus de haber filtrado el lquido y quedar solo la muestra slida. El vidrio reloj se utiliza tambin en ocasiones como tapa de un vaso de precipitados, fundamentalmente para evitar la entrada de polvo, ya que al no ser un cierre hermtico se permite el intercambio de gases LA PROBETA: Instrumento formado por un tubo generalmente transparente de unos centmetros de dimetro, y tiene una graduacin (una serie de marcas grabadas) desde 0 ml (hasta el mximo de la probeta) indicando distintos volmenes. En la parte inferior est cerrado y posee una base que sirve de apoyo, mientras que la superior est abierta (permite introducir el lquido a medir) y suele tener un pico (permite verter el lquido medido). Generalmente miden volmenes de 25 50 ml, pero existen probetas de distintos tamaos; incluso algunas que pueden medir un volumen hasta de 2000 ml. PIPETAS GRADUADAS Y AFORADAS: Son cilindros de vidrio de pequeo dimetro y con abertura en sus dos extremos; existen dos tipos, uno llamado pipeta graduada que puede ser terminal o subterminales, tienen graduacin a lo largo de todo su cuerpo, pueden tener la ltima graduacin en la punta y la llamaremos terminal, o antes de la punta llamndose subterminal; el otro tipo de pipetas tiene un ensanchamiento o ampolla en su parte media, en la cual viene indicado el volumen que pueden emitir no para contener, sirven para transvasar pequeas cantidades de lquidos. La forma correcta de tomar una pipeta es con los dedos pulgar y cordial y obturar con el ndice, introducir dentro del lquido que se va a pipetear, hasta cerca del fondo del recipiente que lo contienen, absorber lentamente observando como sube la columna permitiendo que le lquido llegue arriba del aforo deseado, obturar con el dedo ndice sacar la punta del lquido y aforar la presin, teniendo los ojos a la altura del aforo deseado, aforar, limpiando el exterior de la pipeta con un papel absorbente y llevarlo al recipiente donde se va a trabajar, iniciar el recipiente de tal manera que el lquido escurra por las paredes, lenta o rpidamente de acuerdo con las necesidades y caractersticas de los lquidos, quedara una pequea porcin en la punta, esta no debe introducirse por ningn motivo o caer dentro del recipiente (no soplar o escurrir).

EMBUDO DE DECANTACIN: Recipiente de vidrio de forma cnica. Presenta un colector inferior del que se puede regular el flujo mediante una vlvula. En la parte superior presenta una boca que se puede tapar por la que se procede a la carga de su interior. Est indicado para separar lquidos inmiscibles que se separan por diferencia de densidades mediante una interface bien diferenciada. Se suele usar para extraer un soluto de un disolvente mediante la disolucin de este soluto en otro disolvente diferente inmiscible con el primero trasvasar lquidos a otros recipientes, disolver, calor, etc. EMBUDO: Instrumento hueco en forma de cono y acabado en un tubo utilizado para canalizar los lquidos en recipientes con bocas estrechas. En general son de vidrio aunque tambin pueden ser de plstico. EMBUDO DE ADICIN: Aparato utilizado para adicionar un reactivo lquido a un baln TERMOMETRO: Instrumento que mide la temperatura. Los ms usados son los de mercurio y los de alcohol. Los hay de escala interna y de escala externa. Constan de un bulbo de vidrio, donde va un lquido que se dilata fcilmente (mercurio, etanol, tolueno, etc.), que contina con un tubo capilar cerrado en la parte superior. A lo largo del tubo capilar va una escala graduada comnmente en grados centgrados y dcimas de stos. Los termmetros de mercurio sirven para temperaturas comprendidas entre (-30 y +300C). CAPSULA DE PETRI: Cpsula de vidrio que se utiliza para cultivar y observar microorganismos en el laboratorio. CRISTALIZADOR: Consiste en un recipiente de vidrio de base ancha y poca estatura que habitualmente se utiliza para cristalizar un soluto. VARILLA DE VIDRIO: Cilindro de vidrio macizo que se utiliza para remover disoluciones. BURETA: Instrumento cilndrico de vidrio graduado y alargado. Acaba con una llave para poder controlar el flujo del lquido que se medir. Se utiliza en operaciones donde se necesita medir volmenes con gran exactitud, como en las valoraciones. BURETA CON DEPSITO INCORPORADO: Bureta con un depsito incorporado para llenarla.

LUPA: Una lupa es un instrumento ptico cuya parte principal es una lente convergente que se emplea para obtener una visin ampliada de un objeto. Montada en un soporte, generalmente circular, que dependiendo de su diseo y del uso especfico en cierta aplicacin, puede o no tener un mango para facilitar su manejo o estar montada en un soporte. Las aplicaciones ms comunes son para leer textos con letra muy pequea, o para ver en detalle alguna particularidad de un determinado objeto. GOTERO CUENTAGOTAS: Un cuentagotas o gotero es un tubo hueco terminado en su parte inferior en forma cnica y cerrada por la parte superior por una perilla o de goma. MATERIALES DE PORCELANA: El crisol de porcelana es un material de laboratorio utilizado principalmente para calentar, fundir, quemar, y calcinar sustancias. Si el crisol posee una determinada sustancia, la cual se est calentando. Nunca debe apuntar hacia nuestro rostro o cuerpo. CAPSULAS: Pueden ser de porcelana, de vidrio, de nquel, de plata, cobre, platino, etc. Son casquetes semiesfricos que sirven para evaporar lquidos a fuego directo. MORTERO: Utensilio de vidrio o de porcelana que se utiliza para moler o reducir el tamao de las sustancias. TRIANGULO: Soporte para calentar un crisol. MATERIAL METLICO GRADILLA: Utensilio de madera o de metal que sirve como soporte de los tubos de ensayo. SOPORTE UNIVERSAL: Utensilio metlico que se utiliza como base de apoyo para montaje de diversos aparatos. Por ejemplo para sostener buretas, refrigerantes etc. TRIPODE: Anillo circular metlico apoyado sobre tres patas equidistantes que se utiliza como soporte para calentar otros materiales. Generalmente se coloca encima una rejilla metlica para soportar el objeto a calentar y debajo el encendedor Bunsen. REJILLA: Tela metlica de forma cuadrada con la parte central recubierta para conseguir una mejor distribucin del calor. Se utiliza para sostener los utensilios que se sometern a un calentamiento. MECHERO sustancias BUNSEN: Instrumento metlico usado para calentar

PINZAS DE SOPORTE: Junto con una nuez, sirve para sujetar diferentes utensilios a un soporte. PINZAS DOBLES PARA BURETA: Se utilizan para sujetar dos buretas a la vez. Son muy tiles cuando se realizan titulaciones o valoraciones. PINZAS: Instrumento, generalmente de metal, que sirve para coger, sujetar o arrancar cosas pequeas. PINZAS PARA CRISOL: Pinzas que permiten sujetar crisoles. PINZAS PARA TUBOS: Pinzas de madera o de metal utilizadas para coger tubos de ensayo. ANILLO METLICO: Anillo circular metlico que se adapta al soporte universal y que sirve de apoyo de otros materiales como embudos, embudos de decantacin, etc. ESPTULAS: Se utilizan para tomar las sustancias slidas de los recipientes que las contienen. BISTUR: Es un instrumento con hoja de filo cortante, su mango puede ser de madera, plstico o metal. Se emplea para realizar cortes sobre la piel de los animales durante la diseccin. Viene a ser por sus dimensiones un instrumento en forma de cuchillo pequeo y que su uso se ha extendido para practicar incisiones en tejidos blandos. ESCOBILLN PARA MATRAZ AFORADO: Es un utensilio con dimetro pequeo y por esa razn Facilita la limpieza de los matraces aforados y los tubos. MATERIAL PLSTICO FRASCO LAVADOR: Recipiente de plstico que se utiliza para disponer de agua destilada. PAPEL TORNASOL: Se utiliza para conocer el pH; los colores de las tiras son azules, rojos, amarillos, neutros y yoduro de potasio. EQUIPOS ESPECIALES BALANZA DE DOS PLATILLOS: Es un instrumento muy importante de los que tienes que manejar en el laboratorio para hacer pesadas, es de acero inoxidable con una barra. La balanza que se utiliza en qumica se funda en los principios de la palanca. Las dos condiciones indispensables de una balanza son: exactitud y sensibilidad. Algunas de las precauciones

que debes tener para el buen manejo de la balanza son que debe colocarse sobre un soporte bien fijo, protegido de vibraciones mecnicas. Se debe evitar la luz directa del Sol sobre la balanza, porque produce irregularidades y errores en las pesas, la cruz debe estar sujeta durante las operaciones de poner o quitar pesas o sustancias, etc. MICROSCOPIO: Instrumento ptico destinado a observar de cerca objetos extremadamente diminutos. La combinacin de sus lentes produce el efecto de que lo que se mira aparezca con dimensiones extraordinariamente aumentadas, hacindose perceptible lo que no lo es a simple vista. ESTEREOSCOPIO:3.2.

TCNICAS UTILIZADAS EN BIOLOGIA CELULAR.

Como informacin general, es necesario para el trabajo que se realice en un laboratorio de biologa, microbiologa u otra ciencia similar, conocer en que consisten algunas de las principales tcnicas utilizadas en biologa celular. Por lo tanto responda el siguiente cuestionario terico. 3.2.1. En relacin a la observacin de microorganismos:

a. Como mediante que equipos se realiza. MICROSCOPIO: Es el instrumento ms necesario para un microbilogo, ya que permite la observacin de organismos que no pueden ser apreciados en detalle a simple vista, es decir de los microorganismos. Existe una gran variedad de microscopios que, segn la fuente de iluminacin utilizada. b. Que es una tcnica de tincin, cules son sus etapas y que tipos de tincin son los ms utilizados en el laboratorio. El tamao de la mayora de las clulas bacterianas es tal que resultan difciles de ver con el microscopio ptico. La principal dificultad es la falta de contraste entre la clula y el medio que la rodea, y el medio ms simple de aumentar el contraste es la utilizacin de colorantes. Estos pueden emplearse para distinguir entre tipos diferentes de clulas o para revelar la presencia de determinados constituyentes celulares, tales como flagelos, esporas, cpsulas, paredes celulares, centros de actividad respiratoria. La tincin facilita la visualizacin de la bacteria. Con varios colorantes clasificamos la bacteria en distintos grupos. TIPOS DE TENCIONES:

Tincin simple. Con azul de metileno. Todas las bacterias aparecen teidas de azul. Tincin negativa. Con nigrosina o tinta china. El frotis se hace ya con la nigrosina; no hay que fijarla. Nos sirve para observar la cpsula de las bacterias, que es una estructura mucosa, indicadora de virulencia.

TINCIN DE GRAM: Es la ms importante en bacteriologa. Gracias a ella distinguimos dos tipos de bacterias: Gram +: Son aquellas que se tien con cristal violeta (colorante primario). Gram - : Son aquellas que se tien con safranina (colorante secundario. ETAPAS DEL PROCESO DE TINCIN: Extensin: Para obtener una pelcula fina de muestra, que puede observarse al microscopio. Desecacin: La muestra se deseca por el calor suave de la exposicin intermitente a las cercanas de una llama. Fijacin: Consigue la muerte del microorganismo por coagulacin de sus protenas y deja la preparacin adherida al portaobjetos. Se puede realizar bien por inmersin en una solucin fijadora bien por exposicin a vapores de un compuesto fijador. Tincin: El microorganismo se tie con los colorantes adecuados. Lavado: Para eliminar el exceso de colorante. Secado de la preparacin. 3.2.2. En que consiste las tcnicas de cortes de tejidos, Citoquimica, hibridacin in situ, Inmunocitoquimica, Autorradiografa, cromatografa, electroforesis, cultivos celulares y tcnicas de introduccin de molculas en las clulas. CORTE DE TEJIDOS La mayora de las muestras de tejidos son demasiado gruesas para que sus clulas sean examinadas directamente al microscopio. Por consiguiente, despus de la fijacin, los tejidos suelen ser cortados en finas rebanadas (secciones), con un micrtomo, una maquina dotada de una cuchilla de metal muy afilada. Las secciones que se utilizan para ser observadas al microscopio ptico, normalmente tienen entre 1 y 10 micras de grosor y son extendidas en la superficie del portaobjetos. Los

micrtomos son instrumentos de gran precisin que nos proporcionan cortes delgados parejos y de espesor graduable. Los cortes no deben excederse de 5 a 8 micrmetros de grosor. Los micrtomos son mquinas o instrumentos constituidos para obtener lminas muy delgadas (cortes) de tejido. LA CITOQUIMICA: Es una rama de la biologa celular enfocada en el estudio de la composicin qumica de las clulas y sus procesos biolgicos moleculares mediante anlisis qumicos y qumico-fsicos que permitan su observacin. Se considera como un nexo de unin entre la morfologa y la bioqumica. LA HIBRIDACIN: La hibridacin de cidos nucleicos (ADN o ARN) es un proceso por el cual se combinan dos cadenas de cidos nucleicos anti paralelas y con secuencia de bases complementarias, en una nica molcula de doble cadena, que toma la estructura de doble hlice, donde las bases nitrogenadas quedan ocultas en el interior. Esto hace que si irradiamos la muestra con la longitud de onda a la que absorben estas bases (260 nm), la absorcin de energa ser mucho menor si la cadena es doble que si se trata de la cadena sencilla, ya que en esta ltima los dobles enlaces de las bases nitrogenadas, que son las que captan la energa, estn totalmente expuestos a la fuente emisora de energa. LA INNUNOCITOQUIMICA: Las tcnicas de Inmunocitoquimica permiten la identificacin, sobre muestras citolgicas, de antignicos especficos de distintas lneas de diferenciacin y funcionalismo celular. Es una tcnica sencilla que tiene diferentes aplicaciones: se emplea para la diferenciacin de tumores, cuando es necesario localizar un tumor primario desconocido, para determinar la naturaleza de micrometstasis, para tipificar linfomas y leucemias, con el fin de precisar el tratamiento, para la deteccin de factores de valor predictivo como los receptores de estrgenos y de progesterona en casos de cncer de mama, y para contribuir a establecer tratamientos adecuados en cncer de mama. LA AUTORRADIOGRAFIA: Tcnica para la obtencin de imgenes radiogrficas en la que se administra al animal de experimentacin un compuesto radioactivo y se determinan las zonas donde se ha acumulado la radioactividad exponiendo un corte del animal sobre una placa fotogrfica. Esta tcnica se utiliza tambin en biologa molecular y bioqumica, aadiendo los productos marcados que se desean investigar y detectando fotogrficamente la localizacin de la radioactividad. LA CROMATOGRAFA: Es una tcnica de separacin de sustancias que se basa en las diferentes velocidades con que se mueve cada una de ellas

a travs de un medio poroso arrastradas por un disolvente en movimiento. Vamos a utilizar esta tcnica para separar los pigmentos utilizados en una tinta comercial. LA ELECTROFORESIS: La electroforesis es una tcnica para la separacin de molculas (protenas o cidos nucleicos) segn la movilidad de estas en un campo elctrico a travs de una matriz porosa, la cual finalmente las separa por tamaos moleculares y carga elctrica, dependiendo de la tcnica que se use. Al poner la mezcla de molculas y aplicar un campo elctrico, stas se movern y debern ir pasando por la malla, por la que las pequeas se movern mejor, ms rpidamente. As, las ms pequeas avanzarn ms y las ms grandes quedarn cerca del lugar de partida. CULTIVOS CELULARES: El cultivo celular es el proceso mediante el que clulas, ya sean clulas procariotas, eucariotas o vegetales, pueden cultivarse en condiciones controladas. En la prctica el trmino "cultivo celular" se usa normalmente en referencia al cultivo de clulas aisladas de eucariotas pluricelulares, especialmente clulas animales. El desarrollo histrico y metodolgico del cultivo celular est ntimamente ligado a los pptidos cultivares del cultivo de tejidos y el cultivo de rganos. 4. Observe el video NORMAS GENERALES DE USO DE LABORATORIO, direccin http//www.unad.edu.co/cursobiologia/videoseguridad.htm y realice una tabla en donde se registren las principales normas de seguridad. Las principales normas a tener en cuenta para el desarrollo de prcticas en el laboratorio de Biologa son las siguientes: En la zona de trabajo del laboratorio no se debe consumir alimentos ni

bebidas para evitar riesgos de contaminacin. est prohibido fumar en el rea del laboratorio o sus alrededores. Recordemos que se trabaja con gas y que algunos qumicos generan vapores inflamables. no se deben llevar a la boca lpices, etiquetas o cualquier otro material utilizado en el laboratorio. se debe mantener el laboratorio limpio y aseado. Por consiguiente al terminar la prctica se debe descontaminar la superficie de trabajo. las manos se deben lavar despus de manipular material infeccioso, as como ala abandonar el laboratorio. todo estudiante debe hacer uso de la bata blanca, esto le proteger la ropa de contacto con reactivos y colorantes empleados en el laboratorio.

slo se debe permitir el paso a la zona de trabajo del laboratorio a las personas autorizadas. Durante el trabajo se mantendrn cerradas las puertas del laboratorio. no se debe pipetear con la boca. debe utilizarse siempre un dispositivo de pipeteo todas las pipetas deben tener tapones de algodn para reducir la contaminacin de los dispositivos de pipeteo. todo el personal debe poner especial cuidado en evitar el contacto de la piel con materiales potencialmente infecciosos. Con este fin deben usarse guantes. Los guantes deben ser desechados antes de salir del rea de trabajo. Jams se debe salir de la misma con los guantes puestos, ni con ellos se debe coger el telfono. marque y rotule adecuadamente las lminas. Deben llevar claramente escrito en un lugar visible, el nombre o identificacin del grupo de trabajo, practica realizada y fecha. una vez concluida la prctica, proceda a organizar el sitio de trabajo, desinfectando el mesn con toallas de papel humedecidas con hipoclorito de sodio o alcohol y dejando tanto el material como el equipo utilizado limpio y en el lugar adecuado. es importante conocer los agentes, sustancias y productos peligrosos que existen en el laboratorio. Antes de utilizar un compuesto hay que fijarse en la etiqueta para asegurarse de que es el que se necesita y de los posibles riesgos de su manipulacin. es necesario conocer el manejo de cada uno de los equipos existentes en el laboratorio. Todo el material, especialmente los aparatos delicados, como lupas y microscopios, deben manejarse con cuidado evitando los golpes o el forzar sus mecanismos. Cualquier material de vidrio no debe enfriarse bruscamente justo despus de haberlos calentado con el fin de evitar roturas. en neveras que no posean un sistema de proteccin anti deflagracin no deben almacenarse reactivos que contengan compuestos voltiles inflamables como ter etlico. los productos inflamables como gases, alcohol, ter, entre otros deben mantenerse balejados de la llama del mechero. Si hay que calentar tubos de ensayo con estos productos, se har al bao Mara, nunca directamente a la llama. Si se manejan mecheros de gas se debe tener mucho cuidado de cerrar las llaves de paso al apagar la llama. se debe lavar muy bien la cristalera que se utilice. Preste atencin y cuidado al manipular cristalera mojada. en el laboratorio habr un recipiente plstico, para cristalera rota y para plsticos que hayan estado en contacto con cultivos de clulas o virus. Por favor, deseche cada cosa en el envase apropiado. mantenga despejadas las reas. Trate de traer la menor cantidad posible de pertenencias al laboratorio. Coloque sus pertenencias en un rea designada o donde no estorben.

4.1. NORMAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO a. Qu es la bioseguridad? Es el conjunto de normas o actitudes que tienen como objetivo prevenir los accidentes en el rea de trabajo, es decir, a disminuir el potencial riesgo ocupacional. Tambin se puede definir como el conjunto de medidas preventivas que deben tomar el personal que trabaja en reas de la salud para evitar el contagio de enfermedades de riesgo profesional. b. Cules seran para usted las normas bsicas de bioseguridad en el laboratorio de biologa? No comer, beber, masticar chicle, almacenar alimentos, fumar, aplicarse cosmticos y manipular lentes de contacto en el laboratorio. Las lentes de contacto estn permitidas solamente cuando no sea posible usar otro tipo de lentes. Siempre deben usar bata de manga larga, completamente abrochada. El pelo largo debe llevarse recogido y las uas cortas y limpias. El laboratorio debe mantenerse ordenado y limpio. En las superficies de trabajo debe minimizarse el material que no sea pertinente al mismo. No colocar sus pertenencias (bolsas, mochilas, etc.) sobre las mesas de trabajo. Lavarse las manos al inicio y al final del trabajo en el laboratorio, y cada vez que se sospeche contacto con material contaminado. Est terminantemente prohibido pipetear con la boca. En caso necesario, deben usar guantes. Usar protectores de cara, lentes de seguridad y/o mascarillas para proteger la cara o los ojos de salpicaduras, sustancias corrosivas, luz UV u otras radiaciones. Deben trabajar de manera tal de minimizar la creacin de aerosoles. Evitar agitaciones y pipeteos bruscos, as como la introduccin de asas de cultivo calientes dentro de medios de cultivo. Los punzocortantes y el material contaminado debern colocarse en los recipientes que para el efecto se proporcionan. Al finalizar la tarea, deben limpiar y descontaminar las superficies de trabajo. En caso de haber derramado material contaminado, debern proceder inmediatamente a descontaminar el rea afectada. Todos los accidentes o derrames de material que ocurran durante la prctica, deben ser comunicados al docente que la imparte. Est prohibido el uso de prendas de laboratorio en: biblioteca, comedores, aulas puras, salas de reuniones, oficinas administrativas y otras reas comunes ajenas al laboratorio. c. Cmo puede usted evitar en el laboratorio daos a su salud? Con el conocimiento y la aplicacin adecuada de estas normas como la utilizacin de bata, guantes, tapabocas, entre otros; As como la

importancia de estas normas antes, durante y despus de cada prctica es un deber de cada estudiante en el laboratorio donde se est desenvolviendo. Estas normas son la base de un buen control de calidad del producto o trabajo que se est llevando a cabo. d. Qu desechos se generan en el laboratorio de biologa y como se descartan adecuadamente? Los agentes qumicos parecen menos importantes que los residuos infecciosos desde el punto de vista de la exposicin de las personas que trabajan en el Laboratorio de Microbiologa, esta apreciacin no es del todo acertada. Constituyen la segunda fuente de riesgo y, cuantitativamente, sus efectos negativos deben ser tenidos muy en cuenta para adoptar medidas de prevencin, no slo para el operador sino tambin para los compaeros de su entorno. Adems, y a diferencia de los residuos infecciosos, s se ha demostrado que los residuos qumicos tienen un efecto negativo sobre la salud comunitaria. En Espaa sigue vigente el RD 833/88 sobre residuos txicos y peligrosos. La buena gestin de estos residuos se fundamenta en los mismos principios generales ya enunciados. Esta gestin es, probablemente, una asignatura pendiente en muchos centros sanitarios y, como cabe esperar, tambin en los Laboratorios de Microbiologa. Aunque algunas de las recomendaciones puedan parecer exageradas o difciles de poner en prctica, muchas veces ms por una falta de conciencia sobre el problema que por su dificultad intrnseca, no es menos cierto que la tendencia va en la direccin de tener que cumplir con normativas cada vez ms restrictivas. e. Defina. Riesgo biolgico: Es la presencia de un organismo, o la sustancia derivada de un organismo, que plantea, sobre todo, una amenaza a la salud humana. Esto puede incluir los residuos sanitarios, muestras de un microorganismo, virus o toxina de una fuente biolgica que puede resultar patgena. Puede tambin incluir las sustancias dainas a los animales. Barrera protectora: El sistema inmunolgico incluye barreras que no permiten la entrada de materiales nocivos al cuerpo, formando as la primera lnea de defensa de la respuesta inmune. Agente infeccioso: Microorganismo (virus, bacteria, hongo, rickettsia, protozoario o helminto). Capaz de producir una infeccin o enfermedad infecciosa. Hay factores que aumentan su capacidad para causar enfermedad y varan entre las categoras de los agentes, incluyendo: la

especificidad del husped, la capacidad de reproduccin o sobrevivencia fuera del husped y su virulencia. Nivel de bioseguridad 1: En este nivel se trabaja con agentes que presentan un peligro mnimo para el personal del laboratorio y para el ambiente. El acceso al laboratorio no es restringido y el trabajo se realiza por lo regular en mesas estndar de laboratorio. En este nivel no se requiere equipo especial ni tampoco un diseo especfico de las instalaciones. El personal de estos laboratorios es generalmente supervisado por un cientfico con entrenamiento en microbiologa. Nivel de bioseguridad 2: Es similar al nivel 1 y en l se manejan agentes de peligro moderado hacia el personal y el ambiente, pero difiere del nivel 1 en las siguientes caractersticas: El personal de laboratorio tiene entrenamiento especfico en el manejo de agentes patgenos El acceso al laboratorio es restringido cuando se est realizando algn trabajo Se toman precauciones extremas con instrumentos punzocortantes contaminados Ciertos procedimientos en los cuales pueden salpicar los agentes o aerosoles se llevan a cabo en gabinetes de trabajo biolgico. Nivel de bioseguridad 3: Este nivel es el que se encuentra en los laboratorios clnicos, de diagnstico, algunos laboratorios universitarios y tambin de investigacin, en el cual se realiza trabajo con agentes exticos o que pueden causar un dao serio y potencialmente mortal como resultado de la inhalacin o exposicin a los mismos (por ejemplo, el Carbunco). El laboratorio cuenta con un diseo y con caractersticas especiales y todos los materiales son manipulados utilizando vestimenta y equipo de proteccin. Sin embargo, se reconoce que no todos los laboratorios llegan a cumplir con las normas recomendadas para este nivel de bioseguridad. En estas circunstancias, es aceptable el realizar las siguientes prcticas para poder seguir operando de una manera segura: Ventilar el aire del laboratorio al exterior La ventilacin del laboratorio se tiene que hacer con un flujo de aire direccional controlado El acceso al laboratorio est restringido

Seguir el estndar de prcticas microbiolgicas y equipamiento de seguridad impuesto para el nivel de bioseguridad 2. f. Que procedimiento debe seguir si se produce un derrame de material biolgico contaminado. Cuando se produzca derrame de material infectado o potencialmente infectado, el operador deber ponerse guantes y luego cubrir el fluido derramado con el papel absorbente, derramar alrededor de este material, solucin de contaminante y finalmente verter solucin de contaminante sobre el papel y dejar actuar por lo menos 20 minutos. Usando materia absorbente, seco y limpio, levantar el material y arrojarlo al recipiente de desechos contaminados para su posterior eliminacin. La superficie deber ser enjuagada nuevamente con solucin de contaminante. Los guantes sern descartados despus del procedimiento. No se recomienda el uso del alcohol ya que evapora rpidamente y adems coagula los residuos orgnicos superficiales sin penetrar en ellos. g. Elaborar una tabla en la cual se registren los principales smbolos de peligrosidad de las sustancias qumicas. Frases con R Frases con S Riesgo de explosin en estado seco. Forma compuestos metlicos explosivos muy sensibles. Reacciona con el agua produciendo gases muy inflamables. Extremadamente inflamable. Riesgo de explosin en mezcla con Sustancias comburentes (oxidantes). Peligro de explosin al calentar cerrado Puede ser cancergena. Puede provocar a largo plazo efectos Negativos en el medio ambiente. Riesgo durante el embarazo de Efectos adversos para el feto. Nocivo. Si se ingiere puede causar Dao pulmonar. Posibilidad de efectos irreversibles. Mantngase el recipiente bien cerrado. Mantngase el recipiente en lugar seco. Conservar alejado del calor. Evtese el contacto con la piel. En caso de contacto con la piel, lvese Inmediata y abundantemente con (Productos a Especificar por el fabricante).

Elimnense los residuos del producto y sus Recipientes con todas las precauciones posibles. sense guantes adecuados y proteccin para los ojos/la cara. Consrvese nicamente en el recipiente de origen y a temperatura no superior C (a Especificar por el fabricante). 5. EL MICROSCOPIO. a. Realice una breve resea relacionada con el descubrimiento del microscopio. El microscopio es un instrumento que permite observar objetos que son demasiado pequeos para ser vistos a simple vista. El tipo ms comn y el primero que se invent es el microscopio ptico. Se trata de un instrumento ptico que contiene una o varias lentes que permiten obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona por refraccin. La ciencia que investiga los objetos pequeos utilizando este instrumento se llama microscopa. El microscopio fue inventado hacia los aos 1610, por Galileo Galilei, segn los italianos, o por Zacharias Janssen, en opinin de los holandeses. En 1665aparece en la obra de William Harvey sobre la circulacin sangunea al observar al microscopio los capilares sanguneos y Robert Hooke publica su obra Micrographia. En 1665 Hooke observ con un microscopio un delgado corte de corcho y not que el material era poroso, en su conjunto, formaban cavidades poco profundas a modo de celditas a las que llam clulas, Se trataba de la primera observacin de clulas muertas. Unos aos ms tarde, Malpighi, anatomista y bilogo italiano, observ clulas vivas. Fue el primero en estudiar tejidos vivos al microscopio. A mediados del siglo XVII un holands, Antn van Leeuwenhoek, utilizando microscopios simples de fabricacin propia, describi por primera vez protozoos, bacterias, espermatozoides y glbulos rojos. El micros copista Leeuwenhoek, sin ninguna preparacin cientfica, puede considerarse el fundador de la bacteriologa. Tallaba el mismo sus lupas sobre pequeas esferas de cristal, cuyos dimetros no alcanzaban el milmetro (su campo de visin era muy limitado, de decimas de milmetro). Con estas pequeas distancias focales alcanzaba los 275 aumentos. Observ los glbulos de la sangre, las bacterias y los protozoos; examino por primera vez los glbulos rojos y descubri que el semen contiene espermatozoides. Durante su vida no revel sus mtodos secretos y a su muerte, en 1723, 26 de sus aparatos fueron cedidos a la Royal Society de Londres.

Durante el siglo XVIII contino el progreso y se lograron objetivos acromticos por asociacin de vidrios Flint y Crown obtenidos en 1740 por H.M.Hall y mejorados por John Dollond. De esta poca son los estudios efectuados por Isaac Newton y Leonhard Euler. En el siglo XIX, al descubrirse que la dispersin y la refraccin se podan modificar con combinaciones adecuadas de dos o ms medios pticos, se lanzan al mercado objetivos acromticos excelentes. Durante el siglo XVIII el microscopio tuvo diversos adelantos mecnicos que aumentaron su estabilidad y su facilidad de uso, aunque no se desarrollaron por el momento mejoras pticas. Las mejoras ms importantes de la ptica surgieron en 1877, cuando Ernst Abbe pblico su teora del microscopio y, por encargo de Carl Zeiss, mejoro la microscopia de inmersin sustituyendo el agua por aceite de cedro, lo que permite obtener aumentos de 2000. A principios de los aos 1930 se habla alcanzando el imite terico para los microscopios pticos, no consiguiendo estos aumentos superiores a 500X o 1000X. Sin embargo, exista un deseo cientfico de observar los detalles de estructuras celulares (ncleo, mitocondria, etc.) El microscopio electrnico de transmisin (TEM) fue el primer tipo de microscopio electrnico desarrollado. Utiliza un haz de electrones en lugar de luz para enfocar la muestra consiguiendo aumentos de 100.000X. Fue desarrollada por Max knoll y Ernst Ruska en Alemania en 1931. Posteriormente, en 1942 se desarrolla el microscopio electrnico de barrido (SEM). Creador del famoso Microscopio seguido por sus ayudantes. ALGUNOS TIPOS DE MICROSCOPIO: Microscopio ptico. Microscopio simple. Microscopio compuesto. Microscopio de luz ultravioleta. Microscopio de fluorescencia. Microscopio petrogrfico. Microscopio en campo oscuro. Microscopio de contraste de fase. Microscopio de luz polarizada. Microscopio con focal. Microscopio electrnico. Microscopio electrnico de transmisin. Microscopio electrnico de barrido. Microscopio de iones en campo. Microscopio de sonda de barrido.

Microscopio de efecto tnel. Microscopio de fuerza atmica. b. Consulte cuales son las recomendaciones para el cuidado del microscopio. RECOMENDACIONES QUE DEBEN OBSERVARSE PARA EL BUEN USO Y CUIDADO DEL MICROSCOPIO El microscopio es un instrumento costoso y de precisin, con muchas

partes delicadas, por lo tanto, debemos darle el mejor cuido posible. Si su Microscopio presenta algn defecto, consulte con su profesor. No trate de arreglarlo Usted. Las lentes del microscopio cuestan casi tanto como todas las dems partes juntas. Mantenga las lentes limpias. No toque las lentes con los dedos, ya que el sudor las daa. Nunca limpie las lentes con otra cosa que no sea papel especial para lentes. No permita que lquidos, especialmente cidos o alcoholes, se pongan en contacto con su microscopio. Use siempre cubre-objetos cuando observe en agua u otros lquidos Localice siempre el objeto con el objetivo de menor aumento Los sedimentos de grasa, el aceite de inmersin y los residuos de estos productos deben eliminarse inmediatamente con un poco de disolvente como ter o xilol. Nunca se debe emplear alcohol, ya que disuelve el cemento utilizado en la fabricacin de los lentes. La limpieza final es ms efectiva usando un poco de agua destilada. Cuando no se est usando el microscopio, debe mantenerse siempre cubierto con una funda.

Al finalizar sus actividades de laboratorio, tenga en cuenta lo siguiente: Antes de apagar la fuente de luz, llevar el dispositivo que regula la intensidad luminosa hasta O (cero). Dejar el microscopio con el objetivo de menor aumento en la posicin de enfoque y la platina en su mxima posicin superior. Desenchufar el microscopio y colocarle la funda protectora.c. Elabore el esquema de un microscopio e identifique sus partes. Cuando

se realice el laboratorio verifique las partes con el que se va a utilizar.

Los oculares: Se denominan as porque estn muy cercanos al ojo. Su funcin es la de captar y ampliar la imagen formada en los objetivos. El poder de aumento del ocular se encuentra marcado en el ocular. Un ocular por 4 aumenta 4 veces la imagen que produce el objetivo. Un ocular por 6 la aumenta 6 veces. Un ocular por 10 la aumenta 10 veces Nunca se deben tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, se deben limpiar muy suavemente con un papel de ptica El tubo ptico: Es una cmara oscura unida mediante una cremallera. Tiene el revolver con los objetivos en su parte inferior y los oculares en el extremo superior. El Brazo: Es una columna perpendicular al pie. Puede ser arqueado o vertical y une al pie con el tubo. Platina: Es una plataforma horizontal con un orificio central, sobre el que se coloca la preparacin, que permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de iluminacin situada por debajo. Dos pinzas: Sirven para retener el portaobjetos sobre la platina y un carro con un sistema de cremallera guiado por dos tornillos de desplazamiento que permite mover la preparacin de delante hacia atrs o de izquierda a derecha y viceversa. Est dotado de una escala graduada para medir de forma precisa las observaciones. El condensador: Es un sistema de lentes convergentes situadas bajo la platina, su funcin es la de concentrar la luz generada por la fuente de iluminacin hacia la preparacin. Diafragma-iris: Es una cortinilla que regula la cantidad de luz que entra en el condensador, eliminando los rayos demasiado desviados. Se acciona mediante una perilla. Est situado debajo de la platina, inmediatamente debajo del condensador. La disminucin del diafragma permite visualizar partes de protozoos u hongos se utiliza en las preparaciones frescas La fuente de iluminacin: Se trata de una lmpara halgena de intensidad graduable. Est situada en el pie del microscopio. Se enciende y se apaga con un interruptor y en su superficie externa puede tener una especie de anillo para colocar filtros que facilitan la visualizacin. Tornillo Macromtrico: Se encuentra en la parte inferior del microscopio. Sirve para alejar o acercar el tubo a la platina movindola de arriba hacia abajo y viceversa. Permite un enfoque aproximado o grueso de la muestra

Tornillo micromtrico: Generalmente se encuentra incorporado al tornillo macromtrico. Sirve para dar claridad a la imagen al lograr un ajuste fino y preciso, mediante movimiento de la platina hacia arriba y hacia abajo de forma lenta. Ambos tornillos llevan incorporado un mando de bloqueo que fija la platina a una determinada altura. Pie o base: sirve como base del microscopio y tiene un peso suficiente para dar estabilidad al aparato. En l se integra la fuente luminosa. Los componentes del microscopio se pueden agrupar en cuatro sistemas: EL SISTEMA DE AUMENTO. EL OCULAR. Denominado as porque va cerca al ojo del observador, dispuesto en un tubo cilndrico de metal, con un diafragma intermedio, ambos lentes presentan las caras planas hacia el ojo del observador y las caras convexas hacia el objeto. La lente que va cerca al ojo del observador se denomina ocular propiamente dicho y la lente inferior como lente de campo; en la parte lateral y superior del tubo cilndrico lleva una numeracin que indica el nmero de aumento propio del ocular. AUMENTO. El poder de aumento se encuentra marcado en el ocular: Un ocular x 4, aumenta 4 veces la imagen que produce el objetivo. Un ocular x 6, aumenta la imagen 6 veces. Un ocular x 10, aumenta la imagen 10 veces. El poder de aumento de los microscopios utilizados en los laboratorios mdicos oscila entre 50 y 1000. OBJETIVOS: Llamado as porque va cerca del objeto a observar, constituye la parte ms importante del microscopio de los cuales depende su alcance. Est constituido por un tubo metlico cilndrico cnico, que lleva en su interior un sistema de lentes destinados a dar la imagen real e invertida del objeto. Objetivos Secos. Son aquellos en los que, entre el lente frontal y el preparado a observar, no existe sustancia alguna, excepto el aire. Se utiliza generalmente para observaciones de preparados en fresco. Por el nmero de aumentos son de tres clases: Pequeo aumento o panormico: mayor de 0 y menor de 10X. Mediano aumento: mayor de 10 y menor de 30X. Gran aumento: mayor de 30 y menor de 80X. Objetivos de Inmersin. Son aquellos en los que, entre el lente frontal y el preparado a observar, se interpone una sustancia lquida, comnmente el aceite de cedro, cuyo ndice de refraccin es de 1.5; se utilizan generalmente para observaciones de preparados en seco.

Caractersticas del Objetivo de Inmersin: Es el de mayor aumento: 80X, 100X, 120X, 150X. El lente frontal es ms pequeo. Lleva inscrito una fraccin: 1/12; o un decimal: 1.20; 1.30. De acuerdo a la procedencia lleva una franja o una raya negra para facilitar su identificacin. La Abertura Numrica (AN) La AN tambin se halla grabada en la manga de la lente, junto a la indicacin del poder de aumento; v. g. 0.30 en el objetivo de 10. 0.65 en el objetivo de 40 1.30 en el objetivo de 100 Distancia Focal: Es la distancia que media entre la parte inferior del lente frontal y del objeto a observar, cuando se tiene un enfoque perfecto. Estas distancias focales para los diferentes objetivos son: Pequeo aumento: entre 0.5 y 3 cm Mediano aumento: entre 3 mm y 0.5 cm Gran aumento: 1 mm y 3 mm entre 0.8 mm y 1.20 mm SISTEMA DE ILUMINACIN Se encuentra ubicado en la parte inferior de la platina y comprende: El espejo. De forma circular, presenta dos caras, una plana y otra cncava, sujeto por medio de un eje giratorio. Se utiliza para enviar los rayos luminosos hacia el preparado. Para trabajos con poco aumento puede utilizarse la superficie cncava; mientras que para trabajo con gran aumento es necesario utilizar la cara plana. El diafragma. Es un dispositivo constituido por un sistema de laminillas metlicas dispuestas concntricamente, de tal forma que permita cerrar y abrir, regulando de esta manera la entrada de luz emitida por el espejo. El condensador. Es un dispositivo constituido, por un sistema de dos o ms lentes montadas dentro de un cilindro cnico truncado de metal, est situado por debajo de la platina. Este sistema ptico sirve para concentrar o condensar los rayos luminosos emitidos por el espejo; funciona accionando un tornillo. Porta filtro. Es un dispositivo que permite colocar filtros de diferentes colores, los cuales facilitan la observacin. EL SISTEMA DE AJUSTE Y SOPORTE El sistema comprende: Tornillo macromtrico. Se utiliza primero para lograr la aproximacin del enfoque. Se encuentra situado en la parte superior o inferior de la columna, permite desplazamiento del tubo ptico y de la platina.

Tornillo micromtrico. Hace que el objetivo se desplace ms lentamente. Se encuentra situado en la parte superior o inferior de la columna por debajo del macromtrico. En los microscopios modernos, el micromtrico y el macromtrico se encuentran accionados por un solo tornillo. Tornillo de ajuste del condensador. Se utiliza para elevar el condensador y aumentar la iluminacin o descenderlo y reducir la iluminacin. Tornillos para centrar el condensador. Puede haber tres tornillos colocados alrededor del condensador: uno al frente, uno en la izquierda y otro a la derecha. Se usan para centrar el condensador exactamente en relacin con el objetivo. Elevador del diafragma iris. Este es un pequeo elevador que se encuentra fijo al condensador. Se puede mover para cerrar o abrir el diafragma, reduciendo o aumentando as el ngulo y la intensidad de la luz. Reguladores de la platina metalica. Se utilizan para desplazar el portaobjeto sobre la platina (presente en los microscopios mejorados). ILUMINACIN Y ENFOQUE: La iluminacin y enfoque son dos condiciones principales para realizar una observacin microscpica. La iluminacin se consigue utilizando fuentes luminosas adecuadas, que pueden ser: natural o artificial. Los rayos de luz son reflejados por el espejo o por la lmpara de iluminacin hacia el objeto o preparado. Cuando se examina con grandes aumentos, la luz debe ser intensa, en cambio cuando se hacen con menores aumentos, la luz debe ser menos intensa, lo que se consigue desplazando en forma vertical (arriba o abajo) al condensador, y graduando la abertura del diafragma. Obtenida la iluminacin conveniente, se efectuar el enfoque del preparado, utilizando primero el macromtrico hasta encontrar la imagen (enfoque aproximado), y por ltimo accionando el tornillo micromtrico que permite el enfoque perfecto. CONDICIONES NECESARIAS PARA LA ILUMINACIN Y ENFOQUE. Son las siguientes: Objetivo a menor aumento (panormico). Diafragma abierto. Espejo en posicin correcta, dirigido hacia la fuente de luz. Descienda el objetivo hasta que se encuentre inmediatamente por arriba de la preparacin que se encuentra en el porta objetos. Utilizando el tornillo macromtrico eleve el objetivo hasta que observe una imagen clara a travs del ocular. Nota: Al realizar el enfoque perfecto se debe tener en cuenta las distancias focales a las que trabajan los diferentes objetivos, a fin de

evitar las rupturas de los lentes frontales y destruccin del preparado a observar.

Elabore un cuadro sinptico en donde describa en que consiste cada una de las partes los microscopios y sus respetivas funciones. LAS PARTES DEL MICROSCOPIO OCULARES. OBJETIVOS REVOLVER. Y

PLATINA Y CARRO. DIAFRAGMA

CONDENSADOR TORNILLOS

BRAZO LA IMAGEN

FILTROS FILTROS POLARIZADORES

FILTROS MONOCROMTICOS

UBICACIN DE LOS FILTROS COLORES COMPLEMENTARIOS

TINCIN DE MUESTRAS

d. d. Consulte los

siguientes tipos de microscopios: pticos, patrogrfico, en el campo oscuro de fase, electrnico.

Microscopio ptico: Es un microscopio basado en lentes pticos. Tambin se le conoce como microscopio de luz, (que utiliza luz o "fotones") o microscopio de campo claro. El desarrollo de este aparato suele asociarse con los trabajos de Anton van Leeuwenhoek. Los microscopios de Leeuwenhoek constaban de una nica lente pequea y convexa, montada sobre una plancha, con un mecanismo para sujetar el material que se iba a examinar (la muestra o espcimen). Este uso de una nica lente convexa se conoce como [da], en el que se incluye la lupa, entre otros aparatos pticos. Microscopio petrogrfico: El microscopio petrogrfico utiliza luz polarizada (producida por una lmina polaroide llamada polarizador), a

este tipo de luz se le denomina PPL (luz polarizada plana). Para determinadas propiedades se emplea una segunda lamina polaroide (llamada analizador), se representa como XPL (luz polarizada cruzada). El tipo de iluminacin tambin vara dependiendo de las propiedades a analizar. Cuando el condensador no est incorporado los rayos recorren todos caminos paralelos y se habla de iluminacin ortoscpica, por el contrario cuando el condensador se encuentra incorporado la iluminacin es convergente y se la denomina conoscpica. El tamao lmite para que los cristales sean visibles en este microscopio es del orden de 10 micras. Por debajo de este lmite la identificacin de materiales se realiza por las tcnicas submicroscpicas, tales como los microscopios electrnicos. Microscopio electrnico: Este microscopio en lugar de una fuente de luz, utiliza un haz de electrones que se desplazan en el vaco y en lnea recta. Con el microscopio electrnico es posible observar objetos muy pequeos como los virus que no pueden ser resueltos con el microscopio ptico. En el microscopio ptico en lugar de lentes se emplean campos magnticos que enfocan los haces de electrones. Microscopio de campo oscuro: Utiliza un haz enfocado de luz muy intensa en forma de un cono hueco concentrado sobre el espcimen. El objeto iluminado dispersa la luz y se hace as visible contra el fondo oscuro que tiene detrs, como las partculas de polvo iluminadas por un rayo de sol que se cuela en una habitacin cerrada. Por ello las porciones transparentes del espcimen quedan oscuras, mientras que las superficies y partculas se ven brillantes, por la luz que reciben y dispersan en todas las direcciones, incluida la del eje ptico que conecta el espcimen con la pupila del observador. Esta forma de iluminacin se utiliza para analizar elementos biolgicos transparentes y sin pigmentar, invisibles con iluminacin normal, sin fijar la muestra, es decir, sin matarla. Tambin es bastante utilizado en la observacin de muestras metalogrficas para la observacin de detalles en superficies con alta reflectancia. e. Describa cuales son las principales pautas de manejo y uso del microscopio ptico. MANEJO Y USO DEL MICROSCOPIO PTICO Colocar el objetivo de menor aumento en posicin de empleo y bajar la platina completamente. Si el microscopio se recogi correctamente en el uso anterior, ya debera estar en esas condiciones. Colocar la preparacin sobre la platina sujetndola con las pinzas metlicas.

Comenzar la observacin con el objetivo de 4x (ya est en posicin) o colocar el de 10 aumentos (10x) si la preparacin es de bacterias. Para realizar el enfoque: Acercar al mximo la lente del objetivo a la preparacin, empleando el tornillo macromtrico. Esto debe hacerse mirando directamente y no a travs del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparacin pudindose daar alguno de ellos o ambos. Mirando, ahora s, a travs de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la preparacin con el macromtrico y, cuando se observe algo ntida la muestra, girar el micromtrico hasta obtener un enfoque fino. Pasar al siguiente objetivo. La imagen debera estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover un poco el micromtrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo se perdi por completo la imagen, es preferible volver a enfocar con el objetivo anterior y repetir la operacin desde el paso 3. El objetivo de 40x enfoca a muy poca distancia de la preparacin y por ello es fcil que ocurran dos tipos de percances: incrustarlo en la preparacin si se descuidan las precauciones anteriores y mancharlo con aceite de inmersin si se observa una preparacin que ya se enfoc con el objetivo de inmersin. Empleo del objetivo de inmersin: Bajar totalmente la platina. Subir totalmente el condensador para ver claramente el crculo de luz que nos indica la zona que se va a visualizar y donde habr que echar el aceite. Girar el revlver hacia el objetivo de inmersin dejndolo a medio camino entre ste y el de x40. Colocar una gota mnima de aceite de inmersin sobre el crculo de luz. Terminar de girar suavemente el revlver hasta la posicin del objetivo de inmersin. Mirando directamente al objetivo, subir la platina lentamente hasta que la lente toca la gota de aceite. En ese momento se nota como si la gota ascendiera y se adosara a la lente. Enfocar cuidadosamente con el micromtrico. La distancia de trabajo entre el objetivo de inmersin y la preparacin es mnima, aun menor que con el de 40x por lo que el riesgo de accidente es muy grande. Una vez se haya puesto aceite de inmersin sobre la preparacin, ya no se puede volver a usar el objetivo 40x sobre esa zona, pues se manchara de aceite. Por tanto, si desea enfocar otro campo, hay que bajar la platina y repetir la operacin desde el paso 3.

Una vez finalizada la observacin de la preparacin se baja la platina y se coloca el objetivo de menor aumento girando el revlver. En este momento ya se puede retirar la preparacin de la platina. Nunca se debe retirar con el objetivo de inmersin en posicin de observacin. Limpiar el objetivo de inmersin con cuidado empleando un papel especial para ptica. Comprobar tambin que el objetivo 40x est perfectamente limpio. MANTENIMIENTO Y PRECAUCIONES Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posicin de observacin, asegurarse de que la parte mecnica de la platina no sobresale del borde de la misma y dejarlo cubierto con su funda. Cuando no se est utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su funda para evitar que se ensucien y daen las lentes. Si no se va a usar de forma prolongada, se debe guardar en su caja dentro de un armario para protegerlo del polvo. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy suavemente con un papel de filtro o, mejor, con un papel de ptica. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se est utilizando el microscopio. Despus de utilizar el objetivo de inmersin, hay que limpiar el aceite que queda en el objetivo con pauelos especiales para ptica o con papel de filtro (menos recomendable). En cualquier caso se pasar el papel por la lente en un solo sentido y con suavidad. Si el aceite ha llegado a secarse y pegarse en el objetivo, hay que limpiarlo con una mezcla de alcohol-acetona (7:3) o xilol. No hay que abusar de este tipo de limpieza, porque si se aplican estos disolventes en exceso se pueden daar las lentes y su sujecin. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macromtrico, micromtrico, platina, revlver y condensador). El cambio de objetivo se hace girando el revlver y dirigiendo siempre la mirada a la preparacin para prevenir el roce de la lente con la muestra. No cambiar nunca de objetivo agarrndolo por el tubo del mismo ni hacerlo mientras se est observando a travs del ocular. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algn lquido, secarlo con un pao. Si se mancha de aceite, limpiarla con un pao humedecido en xilol. Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la sesin prctica y, al acabar el curso, encargar a un tcnico un ajuste y revisin general de los mismos.

NOTA: La temtica y experiencias de esta prctica corresponde a aspectos tericos, por eso es necesario que lo realice al terno con el laboratorio n 2.

BIBLIOGRAFA. Curtis, H, Y H.S, BARNES. 1987 Invitacin a la biologa Ed. Panamericana. VILLE, C.A 1985 Biologa, Editorial Interamericana. Colombia. www.unad.edu.co/cursobiologia/videoseguridad.htm